气单胞菌及其在水产中的危害

Ξ气单胞菌及其在水产中的危害唐江芳(西南大学动物科技学院,重庆　北碚　400716)摘　要　气单胞菌是一种条件致病菌,随着水产养殖的发展,它所引起的疾病对水产养殖的发展有很大的阻碍。

本文介绍了气单胞菌的分类、特性、致病机理等,对其在水产动物的致病及防治方法进行了阐述。

关键词　气单胞菌　特性　危害　检测 随着水产养殖业的发展,养殖规模的不断扩大,疾病的发生也日益严重,成了养殖业发展的一个很重要的制约因素。

高度的密养、精养的不断推广,由气单胞菌引起的疾病不断爆发流行,对养殖生产造成严重的经济损失。

近年来在全国各省淡水养殖鱼类流行爆发性传染病,研究表明气单胞菌为主要病原。

1　气单胞菌的种类气单胞菌属的细菌分为两大类:一类为嗜冷无运动力群;另一类为嗜温有运动力群。

前者的成员为杀蛙气单胞菌,只对鱼类致病,可以分为四个亚种:(1)杀蛙气单胞菌亚种,(A. s al monicid ass p.sal monicida)菌落棕色,并产生扩散性棕色色素,发酵葡萄糖产酸产气,是最早鉴定的亚种,最初从患“疥病”(Fuiunculosi s)的虹鳟分离。

(2)杀蛙气单胞菌无色亚种(A.sal mon ici2 d assp.masoucida),从河蚌分离,菌落无色,但菌落周围的琼脂呈淡褐色,发酵葡萄糖产酸不产气。

(3)杀蛙气单胞菌日本蛙亚种(A.s al monici2d ass p.masouci da),从马苏大麻哈鱼分离,菌落无色,也不产生色素渗入琼脂,不发酵葡萄糖。

(4)杀蛙气单胞菌新亚种(sal monici dass p.nova),对鲤致病,是鲤红皮炎的主要病原菌,没有运动力,在37℃不生长,不产生色素,在血琼脂中生长良好,氧化血红素为其生长因子。

另一类为嗜温有运动力群。

1984年版《伯杰氏系统细菌学手册》确认3种:嗜水气单胞菌(A.hy drop hila)、温和气单胞菌(A.sobria)以及豚鼠气单胞菌(A.ca viae)均隶属于弧菌科气单胞菌属[1]。

2　气单胞菌的特性气单胞菌是革兰氏阴性的短杆菌,两端钝圆,无荚膜,无芽孢,呈散状并有个别成双排列,长约0.5～1.04μm,极端单鞭毛,生长适宜p H值为5.5～9.0,最适温度为25～35℃。

在营养琼脂上形成圆形、光滑、稍隆起、透明的菌落,颜色由白到浅黄色。

大小因培养时间而异,小的如针尖,大的直径可达2～3mm,不产生色素。

在血琼脂上生长旺盛,产生溶血菌落,多数菌株具有血凝性。

气单胞菌属的细菌有R质粒,与产生对磺胺、四环素、链霉素以及氯霉素的抗药性有关[2]。

3　气单胞菌的致病机理气单胞菌致病并非由单一的致病因子完成,而是由多种致病因子协同作用的结果:侵袭和黏附因子是菌体进入和定居于宿主体内的前提条件,如嗜水气单胞菌可产生各种黏附素,如菌体成分黏附素、胞外血凝素、菌毛凝集素和菌毛血凝素等;菌表膜成分保护菌体在体内增殖并广为扩散;多种胞外毒素因子如气溶素、细胞毒、肠毒等的协同作用使机体最终受损,导致疾病的发生[3]。

4　气单胞菌对水产动物的危害气单胞菌(Aeromonas)广泛分布于水环境,是5Ξ作者简介唐江芳(8),女,重庆南川人,硕士研究生,主要从事鱼类病理与病害研究。

8--:192-重要的条件致病菌。

一般为正常共栖菌,因此长期以来对其致病性并未重视。

近年来在我国南方各省淡水养殖鱼类流行爆发性传染病,有报道系为该菌所致败血症。

从各个地区鱼体发病情况来看,鱼打印病、白皮病、鲤鱼细菌性体表出血病、草鱼细菌性烂鳃病、肠炎病等都可能会由气单胞菌引起。

国内曾有嗜水气单胞菌引起尼罗罗非鱼腐皮病症和溃烂病症的报道,发病率均在80%以上,林敬洪等(1988)报道嗜水气单胞菌引起金鱼的疾病。

余旭平等[4](1996)亦曾报道一起鳖的豚鼠气单胞菌感染症,吴育新[5]等(1996)曾报告温和气单胞菌可以引起锦鲤体表溃疡病。

气单胞菌的致病范围十分广泛,蚌的所谓蚌瘟有报道认为病原为本菌。

蜗牛有发病的记载,三角帆蚌和各种淡水鱼均可感染,尤其是人工密集养殖的温水鱼在水温较高的季节最为常发,已确诊患病的重要养殖鱼类有鲤、草鱼、香鱼、虹鳟、罗非鱼、斑点叉尾　和黄鳝。

两栖动物蛙的“红腿病”、“甲鱼红脖子病”在我国均有报道,其病原已确定为气单胞菌属的细菌。

这证明相应气单胞菌淡水鱼类的广泛致病性,严重影响了养殖生产,气单胞菌致病问题己成为水产界观注的焦点问题之一。

5　气单胞菌的检测近十年来,对鱼类致病菌的免疫快速诊断己取得了丰硕的成果,对气单胞菌的检测也达到了一定的水平。

科研工作者已进行了嗜水气单胞菌致病机理的研究及嗜水气单胞菌蛋白的提纯及特性分析。

目前对嗜水气单胞菌的检测[9]方法主要有以下几种:5.1　选择性培养基鉴别培养法利用不同培养基成分和培养条件,抑制多数细菌生长,只利于某一种或某一类细菌生长的检测方法。

5.2　葡萄球菌A蛋白协同凝集试验(SPA-Con2 ql ut ina t ion Test)李学勤等[6]用SPA分别标记六株气单胞菌的特异性高免血清,制成S诊断液,建立了快速检测这种鱼类致病菌的协同凝集试验。

5.3　免疫荧光技术(Im munofluorescence Tech2 nique)吴淑勤[7]等应用间接抗体技术对鳗鲡混合感染的嗜水气单胞菌和迟缓爱德华氏菌进行检测。

5.4　酶联免疫吸附试验(EL ISA)沈素芳[8]等2000在D ot—EL ISA检测胞外蛋白酶(ECPase)的基础上,研制了鱼类致病性气单胞菌诊断试剂盒,运用该种方法气单胞菌属的细菌均呈现阳性反应,与迟缓爱德华菌、鳗弧菌、鲁氏耶氏菌、荧光假单胞菌等4种常见鱼粪致病菌不发生交叉反应,仅与大肠杆菌有轻微交叉反应,这样就可针对气单胞菌属的细菌进行治疗。

5.5　单克隆抗体技术(Monocl ona l Ant ibodv Techn ique)由一个B淋巴细胞分化增殖的子代细胞产生的针对单一抗原决定簇的抗体。

McAb与常规血清抗体相比,具有特异性强,亲和性一致和识别单一抗原决定簇的特点。

5.6　聚合酶链反应(Polvmera se Cha in React ion, PCR)利用两个位于靶序列两端的人工合成引物,在体外Taq酶的作用下,提取核酸为模板,人工合成靶序列。

合成的靶序列在高温下变性为单链,可作为模板,引导合成靶序列。

如此合成、变性循环数次,可使靶序列得到上百万倍的扩增。

合成的靶序列经放射性同位素或生物素标记为探针,如果在病料中存在有与探针互补的核酸,在复性时,就与探针配对结合,经放射自显影或亲和素酶标显色,即可以显示出。

PCR具有简便快速、特异性强的优点,在检测中大量应用。

6　气单胞菌病的防治由于气单胞菌是条件致病菌,所以保持养殖环境非常重要。

尽量降低放养密度,保持水质良好,天气炎热时,注意给鱼池遮阴,或适当增加池水深度等,都是预防嗜水气单胞菌病的有效措施。

王增福等[10]试验发现,嗜水气单胞菌对氯霉素、丁胺卡那霉素、庆大霉素、环丙沙星、新霉素、氟哌酸、恩诺沙星比较敏感。

根据药物试验结果和治疗经验总结出以下治疗方案(下转第页)68PA:11--[37]马国文.鲤鱼竖鳞病病原和病理研究[J ].水利渔业,1999,19(3):37-40.[38]李爱华,蔡桃珍,吴玉深,等.我国鱼类病原———嗜水气单胞菌的耐药性研究[J ].微生物学通报,2001,28(1):58-63.[39]陈翠珍,张晓君,房海,等.鱼源气单胞菌的主要特性研究[J ].中国预防兽医学报,2001,23(2):108-114.[40]孙建和,陈怀青,陆承平.嗜水气单胞菌疫苗的研制[J ].畜牧与兽医,1995,27(5):202-205.[41]贺路,李杜,徐文.白鲢对嗜水气单胞菌的免疫应答[J ].淡水渔业,1997,27(1):26-27.[42]KARUNAS A G AR I ,ROSAL IND G.Immunologi cal res ponseof t he Indian major carps to Areo m onas hydrop hila vacci ne [J ].Fi sh Di s eases ,1991,14(3):413-417.[43]孙建和,严亚贤,陈怀青.嗜水气单胞菌亚单位疫苗的研制[J ].中国兽医学报.1996,16(1):11-14.[44]沈智华,钱冬,曹铮.嗜水气单胞菌HEC 毒素苗对鲫鱼的免疫效果的初步研究[J ].浙江海洋学院学报(自然科学版),1999,18(2):124-128.[45]叶巧真,何建国,翁少萍.中华鳖气单胞菌菌细胞苗和菌化学成份疫苗研制[J ].水产学报,2000,24(2):167-170.[46]黄晓,叶巧真,何建国,等.嗜水气单胞菌外膜蛋白基因o m p TS 的克隆与序列分析[J ].水产学报,2001,25(6):552-558.[47]陈怀青,陆承平,袁世山,等.嗜水气单胞菌HEC 毒素基因的克隆及酶谱分析[J ].中国兽医学报,1997,17(4):339-343[48]HEUZENROEDER M W ,W ON G C Y ,FL OWER R L.Dis 2t ribution of t wo hem olytic genes i n clinical and envi ron m ental i s o 2l at es[J ].FEMS ,m icrobi ology Let t ,1999,174(1):131-136.[49]储卫华,陆承平.筛选用转座子Tn916诱变的具有免疫原性的嗜水气单胞菌蛋白酶缺失株[J ].水产学报,2001,25(3):244-248.[50]储卫华,陆承平.嗜水气单胞菌外产物对鲫鱼的致病性研究[J ].南京农业大学学报.2000,23(2):80-84.Resear ch Pr ocess on A er omona s hydr ophilaWu Hui mi n 1,2　Li n Wenhui 2　Shi Cunbi n 2(1.Dalian Fisheries Univers i ty ,Dalian 116023,China ;2.Pearl River Fisheries Res earch Instit ute ,Chi nes e Academy of Fi shery Sciences ,Guangzhou 510380,China )Abstract :Aeromonas hydrophila is a kind of bacteria which could i nfect human beings ,livestocks and fi shes.This paper int roduced it s t axonomy and biological characters.and also summarized it s pat hogenetic factors ,entifying met hods and the prevention and t reat ment of t he diseases caused by t his bacteria.K ey w or ds :Aer omonas hydrophila ;research ;process(收稿日期:2006-12-30)(上接第6页)先用CuSO 4泼洒以杀死水中的寄生虫,减少寄生虫感染的机会;然后用漂白粉、优氯净或其它消毒药物对水体进行消毒;同时,用庆大霉素或卡那霉素、氯霉素等拌饵投喂。