第十章 弧菌科及气单胞菌科的常规检查
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弧菌属常规鉴定:弧菌属分类上归弧菌科.生物学特性::革兰氏阴性菌,直或弯曲.月牙形大部分菌种为兼性厌氧.氧化酶实验为阳性.具有鞭毛.运动活泼如穿梭状.常规鉴定分两步:与相近的菌属鉴别.定属后在做种的鉴定一,与相似的菌属的区别:弧菌属的弧菌科,同科中有气单胞菌属,邻单胞菌属,均为氧化酶阳性,F,弧菌与其的区别,可依嗜血性,甘露醇,氧化酸盐O/129敏感性的区别见表:弧菌科3个菌属特性的鉴别特性气单胞菌属邻单胞菌属弧菌属甘露醇+ - +/-鸟氨酸- + +/-精氨酸+/- + +/-嗜血性- - +/-O/129敏感R R S弧菌属的鉴定:目前我院临床细菌室对霍乱弧菌的鉴定,一般的作初步鉴定,方法如下:1.直接涂片:2.悬滴检查:取患者粪便做悬滴标本(亦可用压滴法),检查细菌的动力,呈极活泼的穿梭性运动,O1型霍乱血清制动试验阳性,可做早期推测性报告.3.染色检查:取米泔样粪便的酶化物,黏液部分涂片,干燥后用乙醇固定,分别用革兰氏染液1/10稀释的石炭酸副虹染色,干后,油镜镜检,观察有无革兰氏阴性,呈鱼群排列的弧菌,涂片检查,只能做初步参考,不能作确诊依据.4.玻片凝集试验:自分离平板上挑取可疑菌落,与霍乱多价诊断血清(既O1群霍乱多价血清),做玻片凝集试验,所用血清效价应在1/80~1/160之间,如过浓,则稀释后再做凝集.将稀释的血清滴加在清洁的玻片上,挑取可疑菌落混匀于血清中,即刻(一般不超过10S),可见肉眼可见的明显凝集为阳性菌落应以出现销价对照,应不发生血凝为了提高阳性率应多挑取可疑菌落进行涂片凝集试验.做初步鉴定试验后将此疑似菌退卫生防疫站做最后鉴定.[编写者]:日期[科主任签字]:。
细菌的生物化学试验● 考点碳水化合物的代谢试验蛋白质和氨基酸的代谢试验碳源和氮源利用试验各种酶类试验抑菌试验复合生化试验【内容讲解】不同细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力各异,其代谢的产物也不相同。
这些代谢产物又各具有不同的生物化学特性,为此,可利用生物化学的方法测定这些代谢产物以鉴定细菌。
一、碳水化合物的代谢试验原理:由于细菌各自具有不同的酶系统,对糖的分解能力不同,有的能分解某些糖产生酸和气体,有的虽能分解糖产生酸,但不产生气体,有的则不分解糖。
据此可对分解产物进行检测从而鉴别细菌。
1.糖(醇、苷)类发酵试验原理:由于各种细菌含有发酵不同糖(醇、苷)类的酶,故分解糖类的能力不同,分解糖类后的终末产物亦不一致,有的产酸、产气,有的仅产酸,故可利用此特点以鉴别细菌。
培养基:在培养基中加入0.5%~1%的糖类(单糖、双糖或多糖)、醇类(甘露醇、肌醇等)、苷类(水杨苷等)。
方法:接种,培养。
结果:产酸:培养基中的指示剂呈酸性反应。
产气:可使液体培养基中倒管内或半固体培养基内出现气泡,固体培养基内有裂隙等现象。
不分解:培养基中除有细菌生长外,无任何其他变化。
应用:是鉴定细菌最主要和最基本的试验,特别对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。
2.氧化-发酵试验(0/F试验)原理:氧化型:仅在有氧环境中分解葡萄糖发酵型:在有氧或无氧环境中都能分解葡萄糖产碱型:在有氧或无氧环境中都不能分解葡萄糖培养基:HL(Hugh-Leifson)培养基方法:将待检菌同时穿刺接种两支HL培养基,其中一支培养基滴加无菌的液体石蜡(或其他矿物油),高度不少于1cm。
将培养基于35℃培养48h或更长。
结果:3.β-半乳糖苷酶试验(ONPG试验)原理:试剂:0.75M ONPG溶液方法:从克氏双糖铁培养基上取菌,于0.25ml无菌生理盐水中制成菌悬液,加入一滴甲苯并充分振摇,使酶释放。
将试管置37℃水浴5min,加入0.25ml ONPG试剂,水浴20min~3h观察结果。
第十章弧菌属检验、气单胞菌属检验一、名词解释1.神奈川现象2.霍乱红试验二、选择题【A1型题】1.用于霍乱弧菌分离培养的平板是A、SS平板B、麦康凯平板C、EMB平板D、TCBS平板E、中国蓝平板2.关于弧菌属细菌的生物学特征,错误的是A、氧化酶阳性B、不发酵葡萄糖C、O/129敏感D、具有一端单一鞭毛E、钠离子能刺激其生长3.关于霍乱弧菌的培养特性,错误的是A、初次分离常选用pH8.5的碱性蛋白胨水B、营养要求不高C、在TCBS平板上发酵蔗糖产酸,菌落呈红色D、含亚碲酸钾的选择平板上形成灰褐色菌落中心E、在血琼脂平板上El-Tor生物型可形成β溶血环4.关于霍乱弧菌的鉴别诊断,错误的是A、霍乱红试验是特异性试验B、氧化酶阳性C、赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶阳性D、精氨酸双水解酶阴性E、可以在无盐培养基上生长5.霍乱弧菌的主要致病物质是A、霍乱毒素B、内毒素C、鞭毛D、菌毛E、荚膜6.弧菌属与气单胞菌属的鉴别试验是A、氧化酶试验B、葡萄糖发酵试验C、O/129敏感性试验D、甘露醇发酵试验E、明胶液化试验7.弧菌属与邻单胞菌属的鉴别试验是A、氧化酶试验B、葡萄糖发酵试验C、O/129敏感性试验D、肌醇产酸试验E、动力试验8.弧菌科与肠杆菌科的鉴别试验是A、葡萄糖发酵试验B、氧化酶试验C、动力试验D、无盐培养基生长E、甘露醇产酸试验9.关于霍乱毒素,错误的是A、由A和B两个蛋白亚单位组成B、A1亚单位为毒素活性单位,激活腺苷酸环化酶受体结合C、A2亚单位与肠粘膜上皮细胞膜上的神经节苷脂GM1E、对热不稳定E、O1群和O139群是一样的10.关于霍乱弧菌的抵抗力错误的是A、可在河水存活20天左右B、怕酸而耐碱C、对常用消毒剂敏感D、耐干燥E、对庆大霉素耐药11.霍乱弧菌庆大霉素琼脂平板上形成灰褐色中心的菌落,是因为还原了下列哪种物质A、铁元素B、硫元素C、碲元素D、胆盐E、亚硝酸盐12.副溶血性弧菌生长的最佳盐浓度是A、0%B、3.5%C、7%D、10%E、>15%13.霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上的菌落呈A、红色B、黄色C、蓝绿色D、粉红色E、黑紫色14.弧菌属中最耐盐的细菌是A、霍乱弧菌B、拟态弧菌C、溶藻弧菌D、麦氏弧菌E、少女弧菌15.关于副溶血性弧菌的生化反应,错误的是A、氧化酶阳性B、O/129(1 50μg)敏感C、发酵蔗糖D、赖氨酸脱羧酶阳性E、吲哚试验阳性16.古典生物型和El-Tor生物型的抗原型别是A、O1B、O2C、O10D、O22E、非O1群霍乱弧菌17.关于霍乱弧菌的描述,下列正确的是A、是烈性传染病霍乱的病原菌,均可引起世界大流行B、O1群就是古典生物型C、O139群是El-Tor生物型D、小川型和稻叶型为常见流行型别E、在pH4.0时能很好生长18.关于古典生物型霍乱弧菌的生物学特征,错误的是A、不溶解羊红细胞B、鸡红细胞凝集试验阴性C、V-P 试验阳性D、对多粘菌素B敏感E、可被Ⅳ组噬菌体裂解19.关于副溶血弧菌的描述,错误的是A、主要引起食物中毒和急性腹泻B、也可引起伤口感染和败血症C、需在10%的蛋白胨水中生长D、发酵葡萄糖E、TCBS平板上呈绿色菌落20.副溶血弧菌的主要致病因素是A、肠毒素B、鞭毛C、溶血素D、荚膜E、内毒素【A2型题】21.青年患者,因生吃海鲜后,恶心、呕吐、腹痛、低热、寒战等。
第10章弧菌与气单胞菌弧菌属(Vibrio)是一大群氧化酶试验阳性,菌体短小,弯曲成弧形动力活泼的革兰阴性菌。
在自然界中分布广泛,以水中最多。
目前已知本菌属有56个种,至少有12个种与人类疾病有关,其中以霍乱弧菌、副溶血性弧菌最为重要。
气单胞菌属(Aeromonas)广泛分布于自然界中的淡水、海水、污水、淤泥、土壤和人类粪便中。
原隶属于弧菌属,后发现其与弧菌的基因并不紧密相关,1956年Collweil等将气单胞菌属从弧菌科分出,隶属于新建的气单胞菌。
分为四个种,即亲水气单胞菌、豚鼠气单胞菌、温和气单胞菌及杀鲑气单胞菌。
有致病性菌株和非致病性菌株之分,致病性菌株可引起人类腹泻等多种感染。
第一节霍乱弧菌霍乱弧菌(Vibrio cholerae)是烈性传染病霍乱的病原菌,霍乱已在全球发生七次世界性大流行,死亡率甚高,为国际检疫的重要传染病之一,为我国甲类法定传染病。
一、生物学性状(一)形态与染色革兰染色阴性,长0.8~3μm、宽0.5~1.5μm,弯曲呈弧型或逗点状菌,从病人新分离的细菌形态典型(图9-1),人工培养后常呈杆状而不易与其他肠道菌区别。
取病人米泔水样粪便直接涂片染色镜检,可见其相互排列如“鱼群”状。
无芽胞和荚膜,有菌毛,菌体一端有一根单鞭毛,运动非常活泼。
悬滴观察,可见其呈穿梭或流星样运动。
有的有荚膜(O139)。
图10-1霍乱弧菌(扫描电镜,单位长度=1μm)(箭头所指可见霍乱弧菌极端单鞭毛)(二)基因组特征霍乱弧菌基因组由2条环状染色体组成。
大染色体约2.91Mb,G+C占46.9%;小染色体约1.072Mb,G+C占47.7%。
总共有3885个ORF。
霍乱毒素基因位于大染色体上整合的温和丝状噬菌体CTXΦ基因组内。
(三)培养及生化反应兼性厌氧,生长繁殖温度范围广(18-37℃),营养要求不高,在普通蛋白胨水中即可生长,于pH8.0~9.0的碱性环境中生长更佳,因其他细菌在此环境中不易生长,故常用pH8.8-9.2的碱性蛋白胨作为选择培养基。
弧菌科及检验弧菌科共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。
弧菌科包括4个菌属,即弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。
前三属细菌均可引起人类感染,发光杆菌属对人无致病性。
一、弧菌属弧菌属的细菌分布广泛,以水中最多。
世界卫生组织腹泻病控制中心根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类:①O1群霍乱弧菌;②不典型01群霍乱弧菌;③非01群霍乱弧菌;④其他弧菌(副溶血性弧菌)。
对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌,分别引起霍乱和食物中毒。
(一)霍乱弧菌霍乱弧菌是霍乱的病原菌,该病为一种急性烈性肠道传染病,发病急,传染性强,死亡率高。
1.生物学特性(1)形态染色:本菌呈弧形或逗点状,无芽胞,有菌毛,有些菌株有荚膜。
一端有一根粗而长的鞭毛,运动活泼。
取患者米泔水样粪便作悬滴观察,可见该菌呈穿梭样或流星状运动。
液体培养物滴片染色镜检,可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。
(2)培养特性:需氧或兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好。
耐碱不耐酸。
可在无盐环境生长。
碱性蛋白胨水中,经35℃培养6~9h,在液体表面大量繁殖形成菌膜,可达快速增菌的目的。
碱性琼脂平板上,经培养18~24h,形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(TCBS)上,形成较大黄色菌落。
含亚碲酸钾琼脂平板上,因还原亚碲酸钾成金属碲,使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂上形成的菌落中心呈灰褐色。
(3)生化反应:能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖,产酸不产气。
迟缓发酵乳糖,不分解阿拉伯糖。
氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。
能产生靛基质,霍乱红反应(即亚硝基靛基质试验)阳性。
(4)抗原结构与分型:霍乱弧菌具有耐热的特异性0抗原和不耐热的非特异性H抗原。
H抗原为弧菌属所共有,特异性低。
O抗原特异性高,具有群特异性和型特异性,是分群和分型的基础。
弧菌科及检验弧菌科共同特点是一群氧化酶阳性、具有极端鞭毛、动力阳性、发酵葡萄糖的革兰阴性直或微弯的杆菌。
弧菌科包括4个菌属,即弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属。
前三属细菌均可引起人类感染,发光杆菌属对人无致病性。
一、弧菌属弧菌属的细菌分布广泛,以水中最多。
世界卫生组织腹泻病控制中心根据细菌的抗原性、生化特性、DNA同源性、致病性和耐盐性等将弧菌分为四类:①O1群霍乱弧菌;②不典型01群霍乱弧菌;③非01群霍乱弧菌;④其他弧菌(副溶血性弧菌)。
对人类致病的主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌,分别引起霍乱和食物中毒。
(一)霍乱弧菌霍乱弧菌是霍乱的病原菌,该病为一种急性烈性肠道传染病,发病急,传染性强,死亡率高。
1.生物学特性(1)形态染色:本菌呈弧形或逗点状,无芽胞,有菌毛,有些菌株有荚膜。
一端有一根粗而长的鞭毛,运动活泼。
取患者米泔水样粪便作悬滴观察,可见该菌呈穿梭样或流星状运动。
液体培养物滴片染色镜检,可见排列如“鱼群状”革兰阴性弧菌。
(2)培养特性:需氧或兼性厌氧菌,在普通培养基上生长良好。
耐碱不耐酸。
可在无盐环境生长。
碱性蛋白胨水中,经35℃培养6~9h,在液体表面大量繁殖形成菌膜,可达快速增菌的目的。
碱性琼脂平板上,经培养18~24h,形成较大、圆形、扁平、无色透明或半透明似水滴状菌落。
硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板(TCBS)上,形成较大黄色菌落。
含亚碲酸钾琼脂平板上,因还原亚碲酸钾成金属碲,使菌落中心呈灰褐色。
庆大霉素琼脂上形成的菌落中心呈灰褐色。
(3)生化反应:能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖,产酸不产气。
迟缓发酵乳糖,不分解阿拉伯糖。
氧化酶、明胶酶试验和ONPG试验均阳性。
能产生靛基质,霍乱红反应(即亚硝基靛基质试验)阳性。
(4)抗原结构与分型:霍乱弧菌具有耐热的特异性0抗原和不耐热的非特异性H抗原。
H抗原为弧菌属所共有,特异性低。
O抗原特异性高,具有群特异性和型特异性,是分群和分型的基础。
第章弧菌属检验、气单胞菌属检验 (一)第章弧菌属检验、气单胞菌属检验弧菌属和气单胞菌属是常见的肠道细菌,其中一些菌株会导致人类疾病。
因此,在临床和研究实验室中,检测这些菌株的存在和数量就显得尤为重要。
以下将对弧菌属和气单胞菌属的检验方法进行介绍。
1. 弧菌属检验1.1 突变检测法突变检测法是一种成功检测弧菌属的一种快速方法。
在这种方法中,使用一种称为Vibriovidae突变株的弧菌菌株作为参照标准。
任何其他弧菌菌株若由于某种原因不能进行生存和生长表明出现异变。
这个方法是一种特异性高,优点在于它能够很快地确定弧菌菌株从而进行有针对性的治疗。
1.2 生化检测法生化检测法是发酵糖类、蛋白质、氧化性、酸性和硫代谢等特性进行测试,通过特定酶活性或亚砜还原活性定量检测,从而确定弧菌菌株。
在这种方法中,使用的典型生化试剂包括氧化注射物、VC 1%溶液、CYSTINE TELLURITE PIATES和麦芽糖加蓝菌营养培养基等。
2. 气单胞菌属检验2.1 簇光滑菌滴虫染色法这个方法的优点是对于气单胞菌属的检测应该比某些其他方法要更加准确。
该方法是BF(暗场)和DF(簇光滑菌滴虫染色法)结合的方法,直接观察细胞下达到观察气泡。
在这个过程中,由于气体的释放,细胞膜膨胀,这种方法通常表现出现透亮的胞质。
2.2 生化检测法气单胞菌属的生化检测法相对于弧菌属稍微有所不同。
在这种方法中,使用的典型生化试剂是卡波腾和SIM(硫代酸盐铁)。
通常在某些情况下,依靠试剂而不是生物学外观来判断这种菌株的类型更为准确。
总之,当鉴定弧菌属和气单胞菌属时,各种技术和方法都需要结合使用,以获得最准确的结果。
许多人可能还不熟悉这两种肠道细菌和相关检验技术,但对于临床和研究实验室来说,熟练掌握检测方法对于准确诊断和治疗细菌感染是至关重要的。
气单胞菌肺炎应该做哪些检查?
*导读:本文向您详细介气单胞菌肺炎应该做哪些检查,常用的气单胞菌肺炎检查项目有哪些。
以及气单胞菌肺炎如何诊断鉴别,气单胞菌肺炎易混淆疾病等方面内容。
*气单胞菌肺炎常见检查:
常见检查:胸透、直接涂片检查、真菌培养检查
*一、检查
1、直接涂片一般可以采取痰液、脓汁和粪便标本,经直接涂片,干燥固定用革兰染色后镜检。
气单胞菌呈革兰阴性短杆菌、两端钝圆、无芽孢。
2、细菌培养标本可用磷酸缓冲剂于4℃作低温冷增菌,每隔1、
3、7天移种于麦康凯平板,可直接分离接种于麦康凯平板,然后置35℃培养24h,本菌属呈乳糖不发酵菌落,菌落较混厚、灰白色、大小约1.5~2mm。
X线表现有大叶性肺实变或弥漫性斑片状阴影,少数呈支气管肺炎或两侧肺外周浸润。
*以上是对于气单胞菌肺炎应该做哪些检查方面内容的相关叙述,下面再来看看气单胞菌肺炎应该如何鉴别诊断,气单胞菌肺炎易混淆疾病。
*气单胞菌肺炎如何鉴别?:
*一、鉴别
本病须与急性干酪性肺炎、支气管扩张和其他细菌引起的肺炎相鉴别。
胃肠炎型需与其他病原引起的腹泻相鉴别。
*温馨提示:以上内容就是为您介绍的气单胞菌肺炎应该做哪些检查,气单胞菌肺炎如何鉴别等方面内容,更多更详细资料请关注疾病库,或者在站内搜索“气单胞菌肺炎”了解更多,希望以上内容可以帮助到大家!。