201血清总蛋白
- 格式:doc
- 大小:51.00 KB
- 文档页数:6
浙江丽水市中心医院 项目操作规程(SOP) 文件编号201 温州医学院附属五院
1 [所属专业] 生化
[项目名称] 血清总蛋白 [适用仪器] HITACHI系列自动生化分析仪 [文件编号] 201 [版本] 第五版 [总页数] 6页 [批准实施日期] 2009年06月09日 [文件有效期] 两年 [复审日期] 2010年06月09日 [复审人](签名) [文件编写] 陈奉晖 [文件审批者](签名) [批准日期] 2009年06月08日 [文件发放部门/个人] 1. 医务科(保管者签名) 2. 院长办公室(保管者签名) 3. 医院档案室(保管者签名) 4. 检验科(保管者签名) 5. 专业实验室(保管者签名) 浙江丽水市中心医院 项目操作规程(SOP) 文件编号201 温州医学院附属五院
2 1 检验申请 单独检验项目申请:血清总蛋白(缩写TP)测定;组合项目申请:肝功能测定项目组合。临床医生根据需要提出检验申请。 2标本采集与处理 2.1 标本采集和接收 2.1.1常规静脉采血约2ml,置于含分离胶黄色盖子真空采血管,颠倒混匀5次。 2.1.2真空管外贴条形码作为唯一的标识符。 2.1.3标本采集后及时运送至检验科。由专人负责标本的接收并记录标本的状态。对不合格标本予以拒收,并在“不合格标本拒收反馈记录单”上逐项填写,及时反馈给病区,若为门诊标本,则填写“重抽血复查通知”及时送到门诊服务台。 2.1.4 下列标本为不合格标本 △ 标本量不足。 △ 对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严重混浊的标本。 △ 无法读取标本信息(条形码不清晰、不完整或粘贴不规范等原因)。 △标本类型与条形码上信息不符 △ 标本容器上无条形码或标签 △ 真空管用错 △ 标本污染 △ 未按标本采集要求采集与送检 2.2 标本处理及保存 2.2.1 标本采集后静置10-20分钟(室温),然后离心5-8分钟(离心力1000G)要求血清与血块被分离胶完全隔离,血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。 2.2.2 不能当天检测的标本置2~80C冰箱保存待检测,已完成测试的标本保持完整的识别号,置2~80C冰箱内保存7天后,按污物处理规范作废弃处理。 2.3 标本采集的注意事项 2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛和空腹状态。 2.3.2 不建议采集抗凝血标本,如果必须使用血浆,推荐的抗凝剂是肝素。 3 方法原理 双缩脲法 碱性溶液中的铜离子和蛋白质或多肽分子中的肽键反应,生成紫红浙江丽水市中心医院 项目操作规程(SOP) 文件编号201 温州医学院附属五院
3 色络合物,络合物在波长540nm处的吸光度和蛋白质的浓度成正比 。 4 试剂及其他用品 4.1 试剂:双缩脲法测定总蛋白试剂盒,由上海复星长征医学科学有限公司出品,货号3400930、3400820、3401850、3401870。 4.2 试剂盒保存:保存于2~250C,不开盖情况下保存至标签的失效期。开盖后放于仪器的试剂仓库冰箱中至少稳定30天。 4.3 试剂盒准备:液态试剂型,即开即用,无特殊准备。 4.4 试剂盒主要成分:氢氧化钠600mmol/L, 酒石酸钾钠32 mmol/L,硫酸铜12 mmol/L,碘化钾30 mmol/L。含有保护剂。 5 校准品与校准模式 5.1 校准品:由罗氏公司提供的校准液(Cat.No.17006401),其总蛋白浓度可溯源至美国国家标准技术研究所(NIST)标准参考材料(SRM)927a。 5.2 校准类型和校准点数目:线性模式,4个校准点。 5.3 校准周期:校准间隔时间为Full,1d。但在:更换试剂批号或出现质控漂移时;仪器进行全面保养后;仪器的重要零件更换后;均需进行一次校准。
5.4 校准液重建方法:用3.00ml蒸馏水溶解,轻轻混匀,20min后即可使用。 6 质控品与室内质控规则 6.1 质控品采用有美国贝克曼公司提供的两个不同水平定值质控液。 6.2 质控液重建方法:用5.00ml蒸馏水溶解,轻轻混匀,20min后即可使用。 6.3 质控品测定:在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。 6.4 质控规则:采用Westgard多规则质控规则,由计算机程序进行检索判断。 QC数据→12S 不符合—————————————→ 在控,报告结果 符合↓ ↑
13S不符合→22S不符合→ R4S不符合→41S不符合→10X—不符合 符合↓ 符合↓ 符合↓ 符合↓ 符合↓
6.5 如出现失控情况,按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正,并在确认重新恢复到控制状态后开始标本检测。
失控,拒发报告 浙江丽水市中心医院 项目操作规程(SOP) 文件编号201 温州医学院附属五院
4 6.6 失控的处理: 6.6.1 发现失控应向科主任或专业主管(组长或负责人)报告,并协同一起分析控制图,确定误差类型,若符合13S,R4S,增大造成的失控,通常提示随机误差。如属于22S,
41S,10X—规则的失控,往往提示系统误差问题。 6.6.2 造成系统误差的因素:包括使用不同批号的试剂、不同批号的校准品、校准品过期、加样器或加液器的核准或调试错误使样品或试剂体积变化、孵育箱或反应加热块的温度变化、检验人员的变动等。造成随机误差的因素:试剂瓶中有气泡、试剂没有充分混匀、电源电压不稳、检验人员操作不熟练以及重现性差等。 6.6.3 确认解决问题,做好记录,并填写失控整改记录。 7 适用仪器 适用Hitachi系列各种型号的全自动生化分析仪器。 8 标本检测步骤 装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告。 9 主要分析参数 (以Hitachi7170为例,其他Hitachi生化分析仪型号根据最少比色量修改标本量及试剂量,根据加样及比色时间修改Assay Point,校准品浓度建议使用20g/L~100g/L三个及以上浓度,S1ABS Limit与校准品第一个浓度有关) Assay Method [1 Point ] Reaction Time [ 10 min ] Assay Point [34] Wave (sub/main) [660/546] Sample Volume [ 4 ] R1 Volume [ 200 ] R2 Volume [ 0 ] R3 Volume [ 0 ] Inc/Dec [ Inc] Calibration Type [ Linear ] Calibration Point [ 2 ] Span Point [ 2 ] SD Limit [200 ] Duplicate Limit [ 300 ] Unit [ g/L ] STD (4) [* ] 浙江丽水市中心医院 项目操作规程(SOP) 文件编号201 温州医学院附属五院
5 10 结果计算
计算公式:总蛋白浓度(g/L)=样本吸光度 标准吸光度 ×标准液总蛋白浓度(g/L) 仪器根据此公式自动给出每个标本测定结果 11 检验结果的报告及范围 11.1 结果报告 11.1.1 结果经审核确认准确无误后发出报告。 11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、标本接收及报告日期、时间、操作者和审核者签名,并有与条形码相同的病人信息。 11.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。 11.2 报告范围:15~110g/L,超出此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明,并经上级主管技师审核后报告。 12 操作性能 12.1 精密度:批内CV0.6%~1.1%,总CV1.8%~2.3%。 12.2 线性范围:15~110 g/L。 12.3 方法的有限性及干扰因素:甘油三酯达11.3mmol/L时影响小于2%,血红蛋白达5g/L时影响小于9%,胆红素达547umol/L时影响小于10%。 13 参考范围 参考范围:63~86g/L。 14 临床意义 14.1 血浆总蛋白包括血浆中所有蛋白质,其中主要有清蛋白和球蛋白两大类。血浆蛋白主要的生理功能是维持血浆胶体渗透压和pH值、运送多种物质的载体、参与凝血和抗凝血、免疫作用和营养作用等。 14.2 球蛋白(Glob)=TP – ALB,清蛋白比值(A/G)=ALB/(TP – ALB)。 14.3 血清TP增高多反映高免疫球蛋白症,由于肝脏合成蛋白质增多所致,如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、冷沉淀球蛋白血症等。各种原因失水所致血液浓缩时TP也增高。 14.4 血清TP降低(<60g/L)多反映清蛋白合成减少或蛋白质丢失,主要见于各种慢性肝病、肾病综合征、急性肾炎和慢性肾炎伴有大量蛋白尿时、长期蛋白质摄入不足而致营养缺乏等情况。 浙江丽水市中心医院 项目操作规程(SOP) 文件编号201 温州医学院附属五院
6 15 结果审核以及分析与相关项目的联系 15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。 15.2 审核者认真审核每一个测定结果,对发出报告结果的可靠性负责,并在报告单的审核者处签名。 15.3 相关项目:审核与清蛋白、血清蛋白电泳等的关系,如出现与临床不符甚至相悖的情况,应分析与查找原因。 16 威胁生命的“紧急值”及报告规定 (此项不作规定) 17 有关引用程序与文件 17.1 Hitachi 7170A型、7600型自动生化分析仪仪器标准操作规程。 17.2 生化检验室内质控标准操作程序。 17.3 检验结果审核程序。 17.4 标本送检和接收程序。 18 参考文献 18.1 陆永绥,张伟民主编.《临床检验管理与技术规程》。杭州:浙江大学出版社,2004。 18.2 上海复星长征医学科学有限公司双缩脲法测定总蛋白试剂盒说明书。 18.3 陆永绥,张伟民主编,《临床检验自动化仪器分析标准操作规程》。杭州:浙江大学出版社,2006。