自发性高血压大鼠血清蛋白质组学分析

地龙降压蛋白对血管紧张素Ⅱ、醛固酮、6-酮-前列腺素-F1a含量的影响李承德;毛淑梅;康白;王金红;唐胜建【期刊名称】《中医药临床杂志》【年(卷),期】2008(20)5【摘要】目的:初步探讨地龙降压蛋白对自发性高血压大鼠(SHR)的降压作用及机制。

方法:24只SHR随机分为模型组,地龙降压蛋白低、高剂量组各8只,另8只Wistar大鼠为正常对照组。

干预持续28d,观察SHR的血压变化;测定SHR血浆和肾脏局部血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(Ald)、6-酮-前列腺素-F1a(6-Keto-PGF1a)含量。

结果:地龙降压蛋白可明显降低SHR的血压、血浆AngⅡ的水平和血浆、肾脏Ald的水平;同时显著升高血浆、肾脏局部6-Keto-PGF1a的含量。

结论:地龙降压蛋白对SHR有降压作用,其降压机制可能与降低SHR体内AngⅡ、Ald的水平,升高6-Keto-PGF1a的含量有关。

【总页数】2页(P458-459)【关键词】地龙降压蛋白质;高血压;大鼠;血管紧张素Ⅱ;醛固酮;6-酮-前列腺素-F1a;降压;机制【作者】李承德;毛淑梅;康白;王金红;唐胜建【作者单位】潍坊医学院药理学教研室;潍坊医学院整形外科研究所【正文语种】中文【中图分类】R854;R544.1【相关文献】1.滋阴壮骨中药内服合双柏散外敷治疗慢性腰肌劳损疗效及对血栓素B2和6-酮前列腺素F1a的影响 [J], 岑毕文;吴亚鹏;王达义;杨棋2.舒经玫瑰胶囊对小鼠原发性痛经血浆血栓素B2、6-酮-前列腺素F1a的影响 [J], 王昕;姚凝;刘健鸿;裴培田3.碱性成纤维细胞生长因子对大鼠脑出血血肿周围脑组织和血浆中血栓素B2和6-酮-前列腺素F1a含量的影响 [J], 杨林杰;韦红巧;黄俊杰;黄巨恩;李倩茗4.加味阳和汤对心肌损伤大鼠血浆血栓素B2及6-酮-前列腺素F1a的影响 [J], 姜丽红;温琦;张伟5.槐榆汤对痔出血患者凝血功能、血栓素B_2和6-酮-前列腺素F1a的影响 [J], 石健;王建民;李晓博;武岳;唐昆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

《基于高通量测序技术分析两肾一夹高血压大鼠肠道菌群的结构特征》一、引言近年来，高血压疾病的发病率逐年上升，成为全球性的健康问题。

两肾一夹（2K1C）高血压大鼠模型被广泛用于高血压病的研究。

然而，高血压的发生除了与遗传、环境等因素有关外，肠道菌群也扮演着重要角色。

肠道菌群的结构和功能与宿主健康密切相关，因此，研究两肾一夹高血压大鼠肠道菌群的结构特征具有重要意义。

本文采用高通量测序技术，对两肾一夹高血压大鼠肠道菌群进行分析，以期为高血压病的发病机制及治疗提供新的思路。

二、材料与方法1. 实验动物选用两肾一夹高血压大鼠模型作为研究对象，同时设置正常对照组。

2. 样品采集对两组大鼠进行肠道内容物收集，分别取其结肠部位样品进行后续分析。

3. 高通量测序技术采用高通量测序技术对肠道菌群进行测序，分析各样本的菌群组成及多样性。

三、结果与分析1. 肠道菌群组成通过高通量测序，我们发现两肾一夹高血压大鼠肠道菌群与正常对照组存在显著差异。

在门水平上，两组大鼠肠道菌群主要以厚壁菌门、拟杆菌门为主，但两肾一夹高血压大鼠的菌群组成中，某些特定菌种的比例发生了明显变化。

2. 肠道菌群多样性分析结果显示，两肾一夹高血压大鼠肠道菌群多样性较正常对照组低，表明高血压大鼠肠道菌群结构发生了变化。

3. 关键菌种分析进一步分析发现，两肾一夹高血压大鼠肠道中某些与炎症、代谢等相关的关键菌种丰度发生了改变。

这些关键菌种的改变可能与高血压的发生、发展密切相关。

四、讨论本研究表明，两肾一夹高血压大鼠肠道菌群结构与正常对照组存在显著差异。

这表明肠道菌群可能在高血压的发病过程中发挥了重要作用。

关键菌种的改变可能影响了机体的代谢、免疫等过程，从而促进了高血压的发生。

此外，肠道菌群多样性的降低也可能导致机体对外部环境的适应能力下降，从而加剧了高血压的病情。

五、结论本文通过高通量测序技术分析了两肾一夹高血压大鼠肠道菌群的结构特征，发现高血压大鼠肠道菌群组成和多样性均发生了显著变化。

蟠桃丸化裁方对自发性高血压大鼠血压的影响及作用机制探讨郭曼萍1,2,梅俊2,陈瑶2,徐凤芹2摘要目的:探讨蟠桃丸化裁方对自发性高血压大鼠(SHRs)的降压作用及可能机制㊂方法:以SHRs为动物模型,将其随机分为模型组㊁蟠桃丸化裁方高剂量组和蟠桃丸化裁方低剂量组,Wistar-Kyoto(WKY)大鼠为正常血压对照组,每组12只,雌雄各半,灌胃给药11周㊂通过尾套法监测大鼠收缩压和舒张压;使用Masson和苏木素-伊红(HE)染色法观察主动脉的病理形态学变化;采用放射免疫法检测血清中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)㊁醛固酮水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测血清肾素水平;蛋白质印迹法(Western Blot)分析主动脉的转化生长因子β1(TGF-β1)㊁Smad3㊁细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)㊁磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)㊁蛋白激酶B(Akt)㊁p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)㊁磷酸化Smad3(p-Smad3)㊁磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)㊁磷酸化PI3K(p-PI3K)㊁磷酸化Akt(p-Akt)㊁磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达水平㊂结果:蟠桃丸化裁方对SHRs的血压可能有一定的调节作用,能够改善其主动脉结构,降低血清醛固酮水平(P<0.05);蟠桃丸化裁方可分别上调主动脉p-PI3K及p-Akt㊁下调主动脉p-ERK1/2及p-Smad3的蛋白表达水平(P<0.05或P<0.01)㊂结论:蟠桃丸化裁方可能通过调节TGF-β1/Smad3㊁ERK1/2㊁PI3K/Akt信号通路及肾素-血管紧张素-醛固酮(RAAS)系统,发挥调节SHRs血压㊁改善主动脉重构的作用㊂关键词高血压;蟠桃丸化裁方;自发性高血压大鼠;肾素-血管紧张素-醛固酮系统;实验研究d o i:10.12102/j.i s s n.1672-1349.2023.06.010Effects of Modified Peento Pills on Hypertension in SHRsGUO Manping,MEI Jun,CHEN Yao,XU FengqinCollege of Clinical Medicine,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing100091,China;Xiyuan Hospital of China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing100091,ChinaCorresponding Author XU Fengqin,E-mail:************************Abstract Objective:To investigate the antihypertensive effects and possible mechanisms of the Modified Peento Pills on spontaneously hypertensive rats(SHRs).Methods:The SHRs were randomly and equally divided into model group,high-dose group,and low-dose group of Modified Peento Pills,and Wistar Kyoto(WKY)rats were as normotensive controls,with twelve rats in each group,half male and half female.The Modified Peento Pills were intragastrically administered for11weeks.The blood pressure of rats were monitored by the tail cuff method.The pathomorphological changes of the aorta were observed using Masson and hematoxylin eosin(HE) staining.Serum levels of angiotensinⅡ(AngⅡ),aldosterone(ALD),and renin(REN)were measured by radioimmunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).The aortas transforming growth factor-β1(TGF-β1),Smad3,extracellular signal regulated kinase1/2 (ERK1/2),phosphoinositide3-kinase(PI3K),protein kinase B(Akt),p38mitogen activated protein kinase(p38MAPK),phospho-Smad3(p-Smad3), p-ERK1/2,p-PI3K,p-Akt,p-p38MAPK protein expression levels were analyzed by Western Blot.Results Modified Peento Pills could regulate the blood pressure of SHRs,improve the aortic structure,lower serum ALD level(P<0.05),upregulate aortic p-PI3K and p-Akt, and downregulate aortic p-ERK1/2and p-Smad3protein expression levels(P<0.05or P<0.01).Conclusion Modified Peento Pills may play a role in regulating SHRs blood pressure and improving aortic remodeling by regulating TGF-β1/Smad3,ERK1/2,PI3K/Akt signaling pathways and renin-angiotensin-aldosterone system(RAAS).Keywords hypertension;Modified Peento Pills;spontaneously hypertensive rats;renin-angiotensin-aldosterone system,RAAS; experiment research基金项目中医药传承与创新 百千万 人才(岐黄工程)岐黄学者(No.02045006)作者单位 1.北京中医药大学临床医学院(北京100091);2.中国中医科学院西苑医院(北京100091)通讯作者徐凤芹,E-mail:************************引用信息郭曼萍,梅俊,陈瑶,等.蟠桃丸化裁方对自发性高血压大鼠血压的影响及作用机制探讨[J].中西医结合心脑血管病杂志,2023,21(6): 1030-1036.高血压是全球发病率最高的非传染性疾病之一,是引起心血管疾病㊁慢性肾病和死亡的重要危险因素[1]㊂据报道,2012年高血压病人约占成年人口的29.1%,但只有83%的病人意识到自身罹患高血压,其中只有76%接受了药物治疗,然而约一半接受治疗者的血压仍未能得到良好控制[2]㊂更严重的是,据推测到2030年将有2700万人罹患高血压[3]㊂蟠桃丸化裁方源自清代宫廷医案所载的蟠桃丸,具有滋阴补肾㊁填精生髓的功效㊂陈可冀院士在20世纪90年代对该方进行化裁用于临床,治疗肾虚㊁高龄相关的老年高血压及认知障碍等疾病,取得较满意疗效㊂因此,本实验旨在探索蟠桃丸化裁方对自发性高血压大鼠(SHRs)的降压效果及其可能机制,以期为其临床应用和基础研究提供参考㊂1材料与方法1.1实验动物12周龄㊁无特定病原体(SPF)级SHRs36只,Wistar-Kyoto(WKY)大鼠12只,两种大鼠均雌雄各半,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,许可证号:SCXK(京):2016-0006,动物合格证号:11400700261047㊂饲养时大鼠可自由饮食㊁饮水,动物房提供规律光照(昼12h,夜12h),环境温度18~22ħ,湿度45%~70%㊂1.2药物蟠桃丸化裁方(组成:麦冬㊁枸杞子㊁分心木等),由中国中医科学院西苑医院制剂室熬成浸膏㊂1.3主要试剂及仪器光学显微镜,由日本Olympus 公司提供,型号BX50;无创鼠尾压测量仪,由北京Softron公司提供,型号BP98AWU;碘[125I]血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)(批号20140320)㊁碘[125I]醛固酮(批号20140320)的放射免疫试剂盒,由北京北方生物技术研究所提供;Masson染色试剂盒㊁苏木素-伊红(HE)染液由北京优博奥生物科技提供;磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)抗体(批号4370S)㊁细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)抗体(批号4695S)㊁磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)抗体(批号4257S)㊁磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)抗体(批号4060S)㊁蛋白激酶B(Akt)抗体(批号4691S)㊁磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)抗体(批号4511S)㊁p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抗体(批号8690S)㊁磷酸化Smad3(p-Smad3)抗体(批号9520S)㊁Smad3抗体(批号9523S)㊁肾素酶联免疫吸附实验(ELISA)试剂盒(批号KE1439)均由美国CST公司提供;转化生长因子β1(TGF-β1)抗体(批号ab92486)由英国Abcam 公司提供;磷酸化PI3K(p-PI3K)抗体(批号YP0765)由美国Immuno Way公司提供㊂1.4分组及给药方法大鼠适应性饲养3d,再随机分为WKY对照组㊁SHRs模型组和蟠桃丸化裁方低剂量组㊁高剂量组,每组12只,雌雄各半㊂给药11周,WKY对照组㊁SHRs模型组予生理盐水灌胃,蟠桃丸化裁方低剂量组按3.07g/(kg㊃d)的药物浓度灌胃给药,蟠桃丸化裁方高剂量组按6.14g/(kg㊃d)的药物浓度灌胃给药㊂1.5观察指标及方法1.5.1血压测定选用尾动脉无创性测压法[4]测量大鼠血压,给药前测量初始血压值,给药后每周测量1次,记录大鼠尾动脉的收缩压㊁舒张压值㊂给药11周,但血压只测到第10周㊂因在第11周时进行为期5d的Morris水迷宫实验,未停止给药,但因进行水迷宫实验时大鼠已移出SPF饲养场所,测压仪器位于动物房且不可搬迁,为不破坏SPF屏障系统环境,故第11周结束后未再次进行尾动脉测压㊂固定大鼠,将大鼠尾巴塞进加压尾套中,将尾套放置在大鼠尾根处,打开尾动脉无创性测压仪,同时用加热器加热鼠尾,等待仪器界面出现平稳脉搏后,再点击加压按钮,使尾套中气囊充气加压,待其超过收缩压后,将逐渐减压,随后仪器界面显示出收缩压㊁舒张压值㊂每只大鼠每次间隔1min后再次测量,连续测量3次,取平均值㊂1.5.2ELISA法检测血清肾素给药11周后,所有大鼠用10%的水合氯醛(400mg/kg)腹腔注射麻醉,腹主动脉真空取血,将来自每组大鼠的外周血(5mL)收集于普通肝素涂覆的管中㊂4ħ,3000r/min,离心15min 获得血清㊂根据ELISA试剂盒说明书测量肾素浓度㊂根据肾素的标准曲线计算血清中肾素水平㊂1.5.3放射免疫法检测血清AngⅡ㊁醛固酮收集用于测定醛固酮㊁AngⅡ的血液样品,置入含有蛋白酶抑制剂和乙二胺四乙酸二钠(EDT A-2Na)的采集管中㊂4ħ, 3000r/min,离心10min,吸取上层血清,放入-20ħ冰箱暂时储存㊂送往中国中医科学院西苑医院检验科,按照放射免疫试剂盒要求,进行测量㊂1.5.4组织学分析腹主动脉取血后取材,将主动脉剥离,生理盐水清洗,固定于10%福尔马林中㊂①HE 染色:将主动脉进行石蜡切片,常规脱蜡至水,苏木素染色,清洗,1%盐酸分化,清洗,伊红染色液染色,常规梯度乙醇脱水,用二甲苯透明,中性胶固定,封片,用光学显微镜在200ˑ与400ˑ放大倍数下进行拍片,留图㊂②Masson染色:将切片置于复合Masson染色溶液中5min;用0.2%乙酸溶液洗涤1min;用5%磷钨酸溶液染色5min;浸入0.2%乙酸溶液中2min;用亮绿色染色液染色5min,浸入0.2%乙酸溶液中2次;用95%乙醇分离,在梯度乙醇中脱水,用二甲苯清洗,并用中性胶固定后再进行Masson 染色㊂1.5.5 Western Blot 检测脑组织中TGF -β1/Smad3㊁ERK1/2㊁PI3K/Akt ㊁p38MAPK 信号通路相关蛋白及磷酸化蛋白的表达 将适量的蛋白质样品与蛋白缓冲液混合,100ħ,煮沸5min ,变性后冷却,加载到十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS -PAGE )凝胶上进行电泳㊂转膜,洗涤,封闭,再用一抗(1ʒ400)浸渍㊂一抗孵育过夜,洗涤,二抗孵育2h ㊂化学发光液浸渍,直至清晰条带出现㊂收集图像,采用软件定量分析结果㊂1.6 统计学处理 采用SPSS 16.0统计软件进行数据分析㊂符合正态分布的定量资料用均数ʃ标准差(x ʃs )表示㊂采用协变量方差分析法分析大鼠治疗前后的血压值,其他数据采用单因素方差分析㊂以P <0.05为差异有统计学意义㊂2 结 果2.1 各组大鼠给药前后血压比较 与WKY 对照组相比,给药前后SHRs 模型组收缩压㊁舒张压明显升高(P <0.05)㊂与SHRs 模型组相比,给药10周后蟠桃丸化裁方高剂量组收缩压及舒张压均明显降低(P <0.05)㊂详见表1㊂表1 各组大鼠给药前后血压比较(x ʃs )单位:mmHg组别只数 收缩压 初始值给药10周后舒张压 初始值给药10周后WKY 对照组12104ʃ798ʃ972ʃ1064ʃ8SHRs 模型组12154ʃ16①151ʃ12①106ʃ21①107ʃ16①蟠桃丸化裁方低剂量组12135ʃ15137ʃ16103ʃ11102ʃ12蟠桃丸化裁方高剂量组12150ʃ17128ʃ23②110ʃ1788ʃ23② 注:1mmHg =0.133kPa ;①与WKY 对照组相比,P <0.05;与SHRs 模型组同期相比,②P <0.05㊂2.2 各组大鼠血清肾素㊁醛固酮㊁Ang Ⅱ水平比较 给药后,与SHRs 模型组相比,蟠桃丸化裁方低剂量组和高剂量组血清醛固酮水平明显降低(P <0.05),血清肾素㊁Ang Ⅱ水平有降低趋势,但差异无统计学意义(P >0.05)㊂详见表2㊂表2 各组大鼠给药后血清肾素㊁醛固酮㊁Ang Ⅱ水平比较(x ʃs )单位:pg/mL 组别只数肾素醛固酮Ang ⅡWKY 对照组1254.64ʃ11.55177.56ʃ20.04865.84ʃ20.97SHRs 模型组1249.72ʃ25.96152.25ʃ23.56858.91ʃ49.74蟠桃丸化裁方低剂量组1236.91ʃ14.41136.22ʃ11.18①807.00ʃ78.54蟠桃丸化裁方高剂量组1233.99ʃ12.26136.62ʃ12.35①828.95ʃ44.68与SHRs 模型组比较,①P <0.05㊂2.3 各组大鼠主动脉形态学变化2.3.1 HE 染色 镜下观察主动脉可见,与WKY 对照组比较,SHRs 模型组的主动脉中膜明显增厚,肌纤维排列紊乱,平滑肌细胞肥大㊁增生,内膜弯曲的现象更加明显;与SHRs 模型组比较,蟠桃丸化裁方低剂量组㊁中剂量组的主动脉中膜厚度明显减小,平滑肌细胞体积减小㊁数量减少,内膜仍有弯曲现象,但较SHRs 模型组明显改善㊂详见图1㊂2.3.2 Masson 染色 镜下观察主动脉可见,蓝色为胶原纤维,红色为血管平滑肌细胞㊂与对照组比较,SHRs 模型组主动脉中膜的蓝染更多,胶原沉积增多;与SHRs 模型组比较,蟠桃丸化裁方低剂量组㊁高剂量组的胶原纤维含量均明显减少㊂详见图2㊂图1 HE 染色观察各组大鼠主动脉病理结构(ˑ400)(A 为WKY 对照组;B 为SHRs 模型组;C 为蟠桃丸化裁方低剂量组;D 为蟠桃丸化裁方高剂量组)图2Masson染色观察各组大鼠主动脉病理结构(ˑ400) (A为WKY对照组;B为SHRs模型组;C为蟠桃丸化裁方低剂量组;D为蟠桃丸化裁方高剂量组)2.4各组大鼠主动脉PI3K/Akt㊁ERK1/2㊁p38MAPK㊁TGF-β1/Smad3信号通路相关蛋白表达水平比较与SHRs模型组相比,蟠桃丸化裁方高剂量组p-Akt㊁p-PI3K蛋白表达水平明显升高(P<0.05),p-ERK1/2㊁p-Smad3蛋白表达水平明显降低(P<0.01),TGF-β1㊁Smad3㊁PI3K㊁Akt㊁p-p38MAPK㊁p38MAPK蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)㊂详见图3~图8㊂与SHRs模型组比较,*P<0.05㊂图3各组大鼠主动脉PI3K㊁p-PI3K蛋白表达水平比较(A为PI3K㊁p-PI3K蛋白表达条带图;B为各组p-PI3K蛋白表达比较柱状图;C为各组PI3K蛋白表达比较柱状图)与SHRs模型组比较,*P<0.05㊂图4各组大鼠主动脉Akt㊁p-Akt蛋白表达水平比较(A为p-Akt㊁Akt蛋白表达条带图;B为各组p-Akt蛋白表达比较柱状图;C为各组Akt蛋白表达比较柱状图)与SHRs模型组比较,*P<0.01㊂图5各组大鼠主动脉ERK1/2㊁p-ERK1/2蛋白表达水平比较(A为p-ERK1/2㊁ERK1/2蛋白表达条带图;B为各组p-ERK1/2蛋白表达比较柱状图;C为各组ERK1/2蛋白表达比较柱状图)图6各组大鼠主动脉p38MAPK㊁p-p38MAPK蛋白表达水平比较(A为p-p38MAPK㊁p38MAPK蛋白表达条带图;B为各组p-p38MAPK 蛋白表达比较柱状图;C为各组p38MAPK蛋白表达比较柱状图)与SHRs模型组比较,*P<0.01㊂图7各组大鼠主动脉Smad3㊁p-Smad3蛋白表达水平比较(A为p-Smad3㊁Smad3蛋白表达条带图;B为各组p-Smad3蛋白表达比较柱状图;C为各组Smad3蛋白表达比较柱状图)图8各组大鼠主动脉TGF-β1蛋白表达水平比较(A为TGF-β1蛋白表达条带图;B为各组TGF-β1蛋白表达比较柱状图)3讨论高血压与中医学中的眩晕㊁头痛㊁健忘等对应㊂‘内经“中记载眩晕的病机在于 邪中于项 髓海不足 ,同时指出头痛的外因在于风㊁热㊁湿㊁寒邪外感,内因在于五脏六腑气血功能失调[5],因此,高血压的病机应为邪气上扰清窍,或肝肾阴虚致脑失所养㊂蟠桃丸化裁方中枸杞为君药,补肾滋阴益精,分心木为臣药,固肾涩精,诸药合用可改善年老体虚㊁肾虚所致的诸多症状㊂本实验结果显示,蟠桃丸化裁方一定程度上有调节SHRs血压的作用㊂HE及Masson染色结果显示,蟠桃丸化裁方能改善长期高血压状态下主动脉平滑肌细胞排列紊乱及弹性膜弯曲的现象,减少主动脉胶原纤维生成,减轻SHRs主动脉肥厚㊂因此,长期高血压状态下,服用蟠桃丸化裁方可对主动脉有保护作用㊂肾素-血管紧张素-醛固酮(RAAS)系统通过直接作用于外周血管和调节自主神经系统来影响心血管稳态[6]㊂肾素将血管紧张素原转化为血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)后,血管紧张素转换酶催化AngⅠ转化为AngⅡ㊂AngⅡ引起血管收缩,刺激释放来自肾上腺的肾小球区的醛固酮,进而导致钠离子和水的重吸收并增加血容量,升高血压[7]㊂AngⅡ有两种主要的受体,分别为AngⅡ受体1型(AT1R)和AngⅡ受体2型(AT2R)㊂RAAS主要由AngⅡ与细胞表面AT1R结合介导发挥作用,产生收缩血管,促进肾上腺皮质释放醛固酮等作用㊂在血管平滑肌细胞中,这会导致三磷酸肌醇介导的血管收缩,从而导致血压升高[8]㊂结果显示,蟠桃丸化裁方可明显降低SHRs血清中醛固酮水平(P<0.05),且血清肾素㊁AngⅡ水平有降低趋势,提示其对RAAS系统具有调节作用㊂有研究提示,高血压的发病机制与PI3K/Akt㊁ERK1/2㊁p38MAPK㊁TGF-β1/Smad3等信号通路关系密切[9-13]㊂PI3K/Akt信号通路参与多种生物学功能,是调节细胞功能(包括存活㊁生长和代谢)的信号转导中心,并与心脏成纤维细胞和血管内皮细胞的调节直接或间接相关[14-15]㊂研究表明,在高血压病的病理生理过程中,PI3K/Akt信号通路功能紊乱起到了关键的作用[16],AngⅡ受体阻滞剂可通过激活PI3K/Akt途径降低SHRs的收缩压[17]㊂磷酸化激活状态的p-PI3K㊁p-Akt可作为衡量PI3K/Akt信号通路活化程度的效应指标[18]㊂本实验结果显示,蟠桃丸化裁方高剂量组大鼠主动脉p-Akt㊁p-PI3K蛋白表达水平明显升高,提示其可能通过上调PI3K/Akt信号通路发挥一定的降压作用㊂MAPK分为4个主要家族:ERK1/2㊁ERK5㊁p38MAPK 以及c-Jun N端激酶1和2(JNK1/2)[19]㊂该激酶家族的所有信号通路均参与调节肥大性重塑[20]㊂MAPK 的激活导致离心性肥大并促进心肌细胞延长[21-22],而ERK途径的抑制导致对压力超负荷的肥大反应减弱[23]㊂本实验结果显示,蟠桃丸化裁方高剂量组大鼠主动脉中p-ERK1/2蛋白表达水平明显降低,提示ERK1/2信号通路可能参与了蟠桃丸化裁方对SHRs 血压及主动脉重构的改善作用㊂TGF-β超家族包括TGF-β1㊁TGF-β2和TGF-β3亚型,每种都有其独特的生物学功能[24]㊂TGF-β1被认为是心脏㊁肾脏㊁肝脏和肺纤维化的关键增殖和纤维化因子,也参与心脏重塑[25]㊂Smad2和Smad3促进TGF-β1介导的组织纤维化,而Smad7是TGF-β1/Smad通路的反向反馈调节器,并抑制TGF-β1诱导的纤维化[26]㊂TGF-β1/Smad3信号通路是高血压血管重塑过程中导致纤维化的主要途径之一[27-29]㊂有证据表明,在成纤维细胞中,AngⅡ和TGF-β1/Smad3信号之间存在相互作用[30],下调TGF-β1/Smad3可以减轻高血压并改善血管结构[31]㊂本实验结果显示,蟠桃丸化裁方能够降低SHRs主动脉中p-Smad3蛋白水平,提示蟠桃丸化裁方可通过TGF-β1/Smad3信号通路改善SHRs高血压状态下的主动脉重构㊂综上所述,蟠桃丸化裁方对SHRs的血压可能有一定的调节作用,能够改善主动脉结构,并能降低血清醛固酮水平,同时可上调主动脉p-PI3K㊁p-Akt及下调主动脉p-ERK1/2㊁p-Smad3蛋白表达水平,提示蟠桃丸化裁方可能通过调节TGF-β1/Smad3㊁ERK1/2㊁PI3K/Akt 信号通路及RAAS系统发挥调节SHRs血压㊁改善主动脉重构的作用㊂蟠桃丸化裁方来源于清朝宫廷秘方蟠桃丸,属于古方新用,即全其古方之旨,合其古方之制,更新古方的功效及应用范围㊂在蟠桃丸滋阴补肾㊁填精生髓的功效基础上,探索蟠桃丸化裁方治疗高血压等肾虚疾病的可能性,为中医现代治疗高血压疾病提供了新路径㊂参考文献:[1]CHENG F,LI Q,WANG J L,et al.The effects of oral sodiumbicarbonate on renal function and cardiovascular risk in 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高血压的大鼠模型研究高血压是一种常见且严重的慢性疾病，与许多心血管疾病的发生有着密切的关联。

研究高血压的病理生理机制以及开发新的治疗方法对于改善患者的健康状况至关重要。

为了更好地理解和研究高血压，科学家们常常选择大鼠作为研究对象并建立相应的高血压动物模型。

首先，我们需要了解高血压的定义和分类。

高血压是指血液在心脏收缩和舒张之间循环时对血管壁施加的压力过高。

根据压力的高低和持续的时间长短，高血压可以进一步分为原发性高血压和继发性高血压。

其中，原发性高血压是最常见的一种类型，其发病机制尚不明确，可能与遗传、环境和生活方式等多种因素有关。

建立高血压大鼠模型有多种方式，包括药物诱导和基因突变等。

在药物诱导方面，最常用的方法是给大鼠饮用含有高盐、高脂等成分的饮食或注射激素，如肾上腺素、肾素和血管紧张素等。

这些药物可以导致大鼠血压升高，并模拟人类高血压的病理生理过程。

此外，还可以通过基因改造技术，将与高血压相关的基因插入大鼠基因组中，从而导致高血压的发生。

大鼠血压的测量是高血压研究的关键步骤之一。

常用的方法是尾动脉测压法，在大鼠尾部基部通过缺损的尾动脉插入压力传感器，测量大鼠的收缩压、舒张压和平均动脉压等指标。

此外，还可以使用尾测法和颈动脉测压法进行血压的测量，这些方法具有操作简单、稳定可靠的特点。

研究者可以利用高血压大鼠模型开展许多研究。

首先，可以通过观察大鼠的生理指标和血压变化来研究高血压的发生机制。

例如，高盐饮食引起的高血压模型可以用来研究血压调节系统的功能和紊乱的机制。

其次，高血压大鼠模型可以用于评估不同治疗方法的疗效。

例如，研究人员可以观察给予大鼠降压药物、改变饮食结构等干预措施对血压的影响，进而判断其对高血压的治疗效果。

最后，需要注意的是，大鼠作为高血压研究的模型也存在一些局限性。

首先，大鼠与人类在遗传、生理和病理方面存在差异，因此研究结果不一定完全适用于人类。

其次，大鼠模型的建立和维护需要耗费较多的时间和资源，不太适合进行大规模的筛选实验。

实验性高血压病病理生理与动物模型以Goldblatt的报告为代表，实验性地制作出高血压动物模型对复杂多变的高血压病病因的研究有着重要的意义。

但各种高血病模型的升压机制并不是相同的，所以很少能像其他疾病模型那样进行纯培养。

单一地探索各种高血压病的血压升高机制，以至于所培育的高血压模型动物和动物模型的数量逐渐扩大，表2-2即是这些模型的分类之一。

在这些实验性高血压病动物中，Goldblatt型和DOCA型高血压动物被广泛的用于血压升高机制的研究和降压药物的鉴定。

表2-2实验性高血压病的分类肾性高血压食盐性高血压内分泌性高血压神经性高血压遗传性高血压a.肾血管性高血压单肾性Goldblatt型高血压双肾性Goldblatt型高血压腹部大动脉狭窄Goldblatt型高血压两侧肾动脉狭窄Goldblatt型高血压肾梗阻高血压Loomis型高血压肾周围炎高血压Page型高血压肾8字形结扎高血压Grollman型高血压b.肾摘除性高血压Grollman型高血压c.由肾实质病变引发的高血压a.食盐过多摄入引发的高血压b.DAHL的耐盐性高血压a.DOCA、食盐高血压（Selye）b.醛固酮引起的高血压（Gross）c.肾上腺再生性高血压（Skeltion）a.切除调牙神经所致的高血压b.破坏下丘脑所致的高血压a.自发性高血压病大鼠（SHR、OKAMOTOAOKI）b.脑卒中易发症系自发性高血压大鼠（SHRSP）一、Goldblatt型高血压Fahr认为人肾硬化性高血压可能是由肾供血不足引起的，Goldblatt在犬的身上证实了这一假说。

他在首次报告中就介绍了制备单肾性ColdblaU型高血压（1-KGH）和双肾性肾动脉狭窄型高血压的经过。

（一）Goldblatt型高血压的制作方法大鼠研究最多的是所谓的1-KGH型和2-KGH型（双肾性高血压）。

取150～180 g的大鼠，用乙醚将其麻醉，切开左侧腹部，露出肾脏，分离肾动脉，把宽1.5 mm厚0.1 mm 的银片弯曲成一个夹子，把其间隙调整到0.2～0.3 mm，安装在肾动脉上。

高血压病患者肝阳上亢、阴虚阳亢证候的血清蛋白质组学研究的开题报告一、研究背景高血压是一种常见的慢性病，其由于血管壁功能障碍或血管内血流动力学变化等原因，导致动脉血压持续升高。

高血压患者的肝脏与其他脏器一样，也容易出现不同程度的功能异常，包括肝功能失调、脂肪肝和肝硬化等。

肝阳上亢和阴虚阳亢是高血压病患者常见的证候类型，这些证候类型的具体表现与肝脏受累有关，但其分子机制目前尚未很好地被揭示。

基于血清蛋白质组学研究技术，可以快速、高灵敏地发现高血压病人血清中与疾病发生、发展相关联的蛋白质变化，从而帮助深入探索高血压肝阳上亢和阴虚阳亢的发病机制。

因此，本研究将通过血清蛋白质组学技术，探索高血压肝阳上亢、阴虚阳亢证候的相关蛋白质变化，为深入了解病理生理机制提供有力的实验数据和理论支持。

二、研究目的1. 运用血清蛋白质组学技术，探索高血压病患者肝阳上亢、阴虚阳亢证候的蛋白质组成变化。

2. 分析研究结果，筛选出与高血压肝阳上亢、阴虚阳亢证候相关的蛋白质标识物，并进行生物信息学分析。

3. 为进一步探究高血压病患者肝阳上亢、阴虚阳亢证候的分子机制提供参考和支持。

三、研究内容和方法1. 研究对象：共招募40例高血压患者，其中肝阳上亢和阴虚阳亢证候各20例，同时招募20例健康人作为对照组。

2. 采集血清样本：对每个被试者采集10ml静脉血，离心收集血浆用于蛋白质组学分析。

3. 蛋白质质谱分析：将采集的血浆进行拍片、钙离子流失和蛋白酶裂解等步骤处理，然后进行具有高分辨率、高灵敏度和高通量性的蛋白质质谱分析。

4. 数据分析：将蛋白质质谱图谱分析结果与数据库比对，确定不同家系群的特异性蛋白质，以此来识别高血压患者的肝阳上亢和阴虚阳亢证候的标志性蛋白质，并进行相关生物信息学分析。

四、预期结果通过血清蛋白质组学技术分析，预计可以快速、准确地检测出高血压病患者的肝阳上亢和阴虚阳亢证候的特异性蛋白质。

研究结果将为深入了解高血压病患者肝功能异常的分子机制、开发新的治疗方法提供理论依据和实验支持。

缬沙坦对自发性高血压大鼠血清PⅠCP、PⅢNP和MMP-1的影响房莉【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2009(029)022【摘要】目的探讨缬沙坦对自发性高血压大鼠(SHR)血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)、血清Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)和血清基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的影响及意义.方法 16只12周龄雄性SHR随机分为2组,每组各8只,分别予以缬沙坦和生理盐水灌胃;同时选取8只同周龄的雄性Wistar-Kyoto大鼠(WKY)作为对照.给药8 w后采用ELISA法测定血清PⅠCP、PⅢNP和MMP-1浓度.结果 SHR 对照组血清PⅠCP、PⅢNP浓度明显高于WKY组(P＜0.01);而SHR治疗组血清PⅠCP、PⅢNP浓度明显低于SHR对照组(P＜0.01);SHR治疗组血清PⅠCP、PⅢNP、MMP-1浓度与WKY组比较无显著性差异(P＞0.05).结论缬沙坦可调控血清PⅠCP、PⅢNP及MMP-1的含量,恢复细胞外基质合成和降解的动态平衡,抑制心肌细胞外基质的增生,防止心室重构的发生.【总页数】2页(P2915-2916)【作者】房莉【作者单位】长春中医药大学第一附属医院,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R544.1【相关文献】1.扶正解毒化瘀宣痹方剂对易损斑块模型大鼠血清MMP-1及TIMP-1的影响 [J], 艾颖娜;周杰2.针刺对单纯性肥胖大鼠血清NPY含量和下丘脑NPY表达的影响 [J], 杨春壮;郭艳芹;腾诚毅;刘长发;马英;徐永良;王羽;赵微3.夏膝颗粒对自发性高血压大鼠血清PⅠCP的影响 [J], 刘静秋;袁丁;黄永生4.缬沙坦对稳定型心绞痛伴高血压患者血清MMP-1、MMP-9及TIMP-1水平的影响 [J], 杨建江;邹升安;林映奇5.复方七芍降压片对自发性高血压大鼠血清炎症反应因子含量和血管组织学的影响[J], 王顺民;黄露;陈橙;杨晓丹;唐路军;姚福胜;陆朵梅;宋雪云因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。