冰水灌胃应激建立便秘表现肠功能紊乱大鼠模型

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・738 Chin J Gastroenterol,2010,Vo1.15,No.12 冰水灌胃应激建立便秘表现肠功能紊乱大鼠模型 朱 军 赵 克 李致富2王伟栋2丁健华 尹淑慧 赵 勇1 中国人民解放军第二炮兵总医院肛肠外科全军肛肠病专病中心’(100088) 辽宁医学院研究生学院2 

背景:应激是引起肠功能紊乱的重要原因之一。建立适当的动物模型对于研究肠功能紊乱性疾病的病因和发病 机制至关重要。目的:通过冰水灌胃应激建立便秘表现肠功能紊乱大鼠模型。方法:36只Sprague-Dawlev大鼠随机分 为6组,A1、A2组和Bl、B2组分别予冰水和常温水灌胃14 d.C1、C2组不予灌胃,作为正常对照 A2、B2、C2组于灌 胃结束后次日行小肠推进实验,A1、B1、C1组于灌胃期间和其后的14 d每日计数24 h粪便粒数,称量粪便质量,结 束后次日行小肠推进实验。结果:冰水灌胃组第2周末24 h粪便粒数、质量和小肠墨汁推进率显著低于常温水灌胃 组和正常对照组(P<0.05),并保持至第4周末,组内第2周末与第4周末问差异无统计学意义。结论:以冰水灌胃应 激建立的便秘表现肠功能紊乱大鼠模型能模拟人类肠功能紊乱且重复性、稳定性好,为相关疾病的研究提供了条件。 关键词肠功能紊乱;便秘;应激;模型,动物 

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Establishment of Rat Model with Constipation-predominant Bowel Dysfunction by Intragastric Perfusion of Ice Water ZHU血 ZHA0 Ke,LI Zh ,WANG Weidong,DING Jianhua,y,ⅣShuhui,ZHA0 Yong.Department of Colorectal Surgery,The SecondArtillery General Hospital ofPLA,Beijing(100088) Correspondence to:ZHAO Ke,Emaih plazhaokel 1 l@sina.eom Background:Stress is one of the major factors involved in the development of bowel dysfunction.It is important to construct an ideal animal model for studying the etiological factors and pathogenic mechanisms of bowel dysfunction.Aims: To construct a rat model with constipation—predominant bowel dysfunction by intragastric perfusion of ice water.Methods: Thirty・six Sprague—Dawley rats were randomly allocated into six groups,four groups were perfused intragastrically with ice water(group A1,A2)or room temperature water(group B1,B2)for 14 days,and two groups without any intervention were served as controls(group C1,c2).The 24-hour fecal granules number and stool weight in group A1,B1 and C1 were measured daily in the course of 14-day intragastric perfusion and the following 14 days.Small bowel propulsion test was performed in group A2,B2 and C2 on the 15th day,and in group A1,B1 and C1 on the 29th day,respectively.Results: The 24一hour fecal granules number and stool weight,as well as the small bowel ink propulsion rate at the end of the 2nd week were significantly decreased in rats perfused with ice water when compared with rats perfused with room temperature water and the controls fP<0.05).These changes were sustained till the end of the 4th week,and no significant differenees were found between these two time points.Conclusions:Rat model with constipation-predominant bowel dysfunction induced by intragastric perfusion of ice water can mimic the disease seen in human beings with reproducibility and stability. It may provide a favorable model for the study of bowel dysfunction. Key words Bowel Dysfunction;Constipation;Stress;Models,Animal 

应激是指机体对各种内、外环境因素和心理、 社会因素刺激作出的全身性非特异性适应反应,是 对各种过强的不良刺激的心理、生理反应的总和, 为机体适应性保护机制的重要组成部分。机体遭受 应激刺激后可发生明显的胃肠功能紊乱.表现为胃 肠道运动、分泌和转运时间发生改变_】1。进而引起相 DOI:10.39690.issn.1008—7125.2010.12.010 本课题由全军“十一五”科技攻关项目资助(06G017) Email:99zhujun@163.COB 。本文通讯作者.Email:plazhaokel1l@sina.com 应不适症状 胃肠功能紊乱相关消化系统疾病临床 上非常多见【2 ,如功能性消化不良、消化性溃疡、肠 易激综合征(IBS)等。肠功能紊乱引发的消化道症 状主要包括腹痛、腹胀、排便习惯和粪便性状改变 等.IBS即以腹痛或不适伴排便习惯和(或)粪便性 状改变为特征.缺乏可以解释症状的形态学或生化 异常。流行病学调查显示,受凉、凉食等生理应激可 能是诱发IBS的危险因素I 5】 本研究予大鼠冰水灌 胃应激建立便秘表现肠功能紊乱模型。并通过观察 胃肠病学2010年第15卷第l2期 应激大鼠粪便粒数、质量和小肠推进功能的变化评 价造模是否成功[61,从而为深入研究提供条件。 材料与方法 一、实验动物、主要试剂和仪器设备 清洁级雄性Sprague。Dawley大鼠36只(北京 市海淀区兴隆实验动物养殖厂).体质量210~240 g, 全价颗粒饲料喂养,自由饮水;室温(22_+2)℃,相 对湿度2O% 35%.12 h一次明暗交替。IVC.II(智 能型)独立送风隔离笼具(苏州市冯氏实验动物设 备有限公司),ALC1100.2电子天平(Sartorius AG)。 灌胃墨汁配制:准确称取阿拉伯树胶100 g.加 水800 m1.煮沸至溶液透明.称取粉状活性炭50 g 加入上述溶液中煮沸3次.冷却后加水定容至 1000 ml,4 oC冰箱保存.使用前摇匀 二、方法 1.模型建立:36只大鼠分笼独立适应性饲养1 周后,按简单随机化原则分为6组.每组6只 冰水 灌胃组(Al、A2组)予冰水(0~4℃0.9%NaC1溶 液)2 ml/只灌胃,常温水灌胃组(B1、B2组)予常温 水(22~26℃0.9%NaC1溶液)2 ml/只灌胃.均为1 次/d,共14 d,正常饲食、饮水 正常对照组(C1、C2 组)不予灌胃,正常饲食、饮水 为消除生物节律的影 响,灌胃于每天上午08:30开始.按相同顺序进行 2.粪便观察:Al、Bl组大鼠自灌胃开始起每日 观察排便情况,停止灌胃后继续观察14 d(正常饲 食、饮水),同期观察C1组排便情况。收集24 h粪 便,计数粪便粒数.称量粪便质量 3.小肠推进实验:A2、B2组大鼠灌胃结束后次 日,C2组禁食、不禁水16 h后.以预先配制好的墨 汁灌胃,2 ml/只。20 min后以2O%乌拉坦O.5 ml/ 100 g腹腔注射麻醉大鼠,无菌开腹分离肠系膜.剪 取幽门至回盲部肠管,轻轻拉成直线.测量肠管长 度,即小肠总长度.幽门至墨汁前沿的距离为墨汁 推进长度。墨汁推进率=墨汁推进长度/小肠总长 度x100%。A1、B1、C1组大鼠为期28 d的粪便观察 结束后.于第29 d同法行小肠推进实验。 对墨汁推进率进行数据转换:y=sin一 、/ ,式 中 为墨汁推进率.以小数表示.对转换后的数据Y 行统计学分析161 三、统计学分析 应用SPSS 13.0统计软件.实验结果以 表 示.行方差齐性检验和单因素方差分析.P<0.05为 差异有统计学意义 

结 果 一、

24 h粪便粒数和质量 

实验第1 d.各组间24 h粪便粒数和质量无明 显差异;冰水灌胃组第14 d、第28 d时的粪便粒数 和质量均显著低于同时间点常温水灌胃组和正常 对照组.常温水灌胃组与正常对照组间差异无统计 学意义:冰水灌胃组第14 d与第28 d间差异无统 计学意义(见表1) 二、小肠推进实验 冰水灌胃组第15 d、第29 d时的小肠墨汁推 进率均显著低于同时间点常温水灌胃组和正常对 照组.常温水灌胃组与正常对照组间差异无统计学 意义:冰水灌胃组第15 d与第29 d间差异无统计 学意义(见表2)。 

表2各组大鼠小肠墨汁推进率比较(互豁) 

}与常温水灌胃组和正常对照组比较.P<O.05 讨 论 目前普遍认为胃肠道动力异常和内脏感觉异 常是胃肠功能紊乱性疾病的主要病理生理学基础【7J。 要进一步研究肠功能紊乱性疾病如[BS的病因和 发病机制,建立适当的动物模型至关重要。近年应