实验五、蛋黄中卵磷脂的提取、纯化与鉴定

摘要：采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。

结果表明，从蛋黄提取的卵磷脂粗品经柱层析纯化，精制卵磷脂的纯度达99.6。

用消化定磷法可以准确测定卵磷脂的含量，有较高的准确度。

关键词：卵磷脂；纯化；含量；测定1引言卵磷脂又称为磷脂酰胆碱，是磷脂酸的衍生物，由甘油与脂肪酸和磷酸胆碱结合而成。

卵磷脂广泛分布于动物、植物和酵母中。

卵磷脂是构成细胞等生物膜、脑组织和神经组织的重要组成成分[1]，对酶的活性也起重要的作用，而且也是乙酰胆碱的重要供给源[2]。

卵磷脂因为其乳化特性和安全性，可用于生产人工血浆、脂乳剂。

临床上可用于治疗动脉粥样硬化、脂肪肝、神经衰弱、营养不良、胆固醇结石的防治药物及静脉注射脂肪乳的乳化剂。

在食品、化妆品和医药领域有着广泛的用途。

目前，卵磷脂的来源主要是从鸡蛋黄、大豆和猪脑中提取。

传统提取卵磷脂的几种方法，如用二甲醚从生蛋黄中提取卵磷脂、用乙醇和酸类从生蛋黄中提取卵磷脂、用丙酮提取卵磷脂和冷冻蛋黄，用乙醇和己烷将卵磷脂与中性脂进行分离，提取卵磷脂等方法，这些方法提取的卵磷脂达不到食品和医用的高纯度[3]，因此，必须对粗产品或市售的卵磷脂进行纯化。

在本工作中，作者采用柱层析的方法对提取的卵磷脂进行纯（自提）；化，用消化定磷法测定卵磷脂的含量。

2实验部分2.1试剂和仪器蛋黄卵磷脂（卵PC）中性三氧化二铝（200-300目）；硅胶G；氯仿（AR）；甲醇（AR）；乙醚（AR）；浓硫酸（AR）；钼酸铵（AR）；30过氧化氢（AR）；磷酸二氢钾（AR）；层析柱（Ф15cm，L40cm）；紫外检测仪（自制）；台式平衡记录仪（上海大华仪表厂）；分光光度计（日本岛津）；EYELASB-20xx 旋转蒸发仪（上海EYELA有限公司）。

2.2实验方法和结果2.2.1蛋黄卵磷脂的提取取12克蛋黄置于150mL的锥型瓶中，加入35mL乙醚，搅拌10min，放置20min，过滤，于45oC的条件下，用旋转蒸发仪蒸干乙醚，再放入真空干燥器减压干燥20min，彻底除尽乙醚，粗提取物离心10min，取出下层的卵磷脂，约为2克。

一、实验目的1. 了解卵磷脂的化学组成和生物学功能。

2. 掌握卵磷脂的提取方法和实验步骤。

3. 学会使用各种实验仪器，如离心机、紫外分光光度计等。

4. 鉴定提取的卵磷脂纯度。

二、实验原理卵磷脂是一种甘油磷脂，由甘油、脂肪酸、磷酸和胆碱等组成。

卵磷脂具有多种生物学功能，如降低血液胆固醇、改善记忆力、增强大脑活力等。

本实验采用乙醇-乙醚混合溶剂提取蛋黄中的卵磷脂，通过离心分离、乙醇洗涤和丙酮沉淀等步骤，得到高纯度的卵磷脂。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜鸡蛋、95%乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液、紫外分光光度计、离心机、烧杯、漏斗、蒸发皿、试管等。

2. 实验试剂：无水乙醇、乙醚、丙酮、氢氧化钠、钼酸铵、硫酸氢钾、溴的四氯化碳溶液等。

四、实验步骤1. 卵磷脂的提取（1）称取约10g新鲜鸡蛋蛋黄，加入30mL温热的95%乙醇，边加边搅拌均匀。

（2）将混合液冷却至室温，用漏斗过滤，收集滤液。

（3）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂粗制品。

2. 卵磷脂的纯化（1）将蒸干的卵磷脂加入适量乙醚，溶解后过滤。

（2）将滤液置于蒸发皿中，水浴加热蒸干，得到卵磷脂纯制品。

3. 卵磷脂的鉴定（1）三甲胺的检验：取少量卵磷脂，加入2～5mL氢氧化钠溶液，水浴加热15min，观察红色石蕊试纸是否变蓝，并嗅其气味。

（2）不饱和性检验：取少量卵磷脂，加入3%溴的四氯化碳溶液，振摇观察是否褪色。

（3）磷酸的检验：取少量卵磷脂，加入5～10滴95%乙醇溶液和5～10滴钼酸铵试剂，水浴加热5～10min，观察是否产生蓝色沉淀。

（4）甘油的检验：取少量卵磷脂，加入0.2g硫酸氢钾，小火加热，观察是否有水蒸气放出，嗅其气味。

五、实验结果与分析1. 卵磷脂的提取通过实验，成功从蛋黄中提取出卵磷脂，得到白色蜡状物质。

2. 卵磷脂的纯化经过乙醇洗涤和丙酮沉淀，得到高纯度的卵磷脂。

3. 卵磷脂的鉴定通过三甲胺、不饱和性、磷酸和甘油的检验，验证了提取的卵磷脂纯度较高。

实验申请实验项目：蛋黄中卵磷脂的提取与 TLC 检测实验原料：鲜鸡蛋、 纯化卵磷脂实验试剂： 200ml 丙酮、 150ml 乙醇 、50ml 石油醚、 氯仿、 乙酸乙酯、 甲醇，均为分析纯试剂.实验仪器： 旋转蒸发仪、 真空泵、 布氏漏斗、 抽滤瓶、 吹风机、 层析缸、 玻璃板、电子天平。

辅助器材：毛细管（两支）、玻璃棒、滤纸、100ml 量筒（2个）、烧杯、纱布、镊子、 胶头滴管圆底烧瓶等。

实验目的：1. 掌握从动物中提取有效成分的一般原理和方法。

2. 学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法。

3. 巩固抽滤等基本操作。

4. 了解薄层层析色谱法的原理及操作。

实验原理：卵磷脂存在于动物的各种组织细胞中，蛋黄中含量较高，约10％。

可根据它溶于乙醇、氯仿而不溶于丙酮的性质，从蛋黄中分离得到。

吸附薄层主要是利用吸附剂对样品中各成分吸附能力不同，及展开剂对它们的解吸附能力的不同，使各成分达到分离。

在硅胶薄层板上，样品中的两成分是两种结构近似的染料，在展开剂四氯化碳的作用下。

在展开剂和薄层板之间不断地产生吸附、解吸，再吸附，再解吸，由于极性不同从而分离，展开结束以后，会在薄层板上形成斑点，混合物中的成分得以分离。

参考文献： 刘宝全，所给实验资料.tpml-1实验操作实验操作步骤实验一卵磷脂的制备与提取1.取四个煮熟的鸡蛋，分别将其刨壳，把四个鸡蛋的总的蛋壳，蛋白和蛋黄分别称重并记录数据。

2.将所得蛋黄全部放入烧杯中，用筷子捣碎，取100ml丙酮倒入其中，搅拌30min成糊状后用6层厚纱布过滤，收集滤渣。

3.将滤渣再次放入烧杯，取100ml丙酮倒入杯中，重复上步操作，收集滤渣。

4.制备乙醇-石油醚混合溶剂。

用量筒分别量取50ml石油醚和150ml乙醇，放入烧杯中混合均匀。

5.取100ml混合液放入盛有滤渣的烧杯中，搅拌30min后用布氏漏斗抽滤，收集滤液。

6.将抽滤后的滤渣重新放入烧瓶中，再取100ml混合液浸泡搅拌30min，然后抽滤，将所有滤液收集，倒入圆底烧瓶中进行旋转蒸发，旋转蒸发仪温度设为40摄氏度。

【精品】实验五蛋黄中卵磷脂的提取及鉴定一、实验目的1.了解卵磷脂的结构与性质；2.熟练掌握蛋黄中卵磷脂的提取和鉴定方法；3.通过提取和鉴定，初步了解卵磷脂的含量。

二、实验原理1.卵磷脂介绍卵磷脂是一类含有疏水性脂肪酸、酯等亲脂性成分和疏水性羟基等亲水性成分的复合脂类，具有良好的亲水性和亲油性能。

卵磷脂是细胞膜的组成成分之一，并参与了许多生命过程的调节和控制。

由于分子结构中含有类似细胞膜的磷酸基和羟基，因此卵磷脂可以与水和油相溶液中间的界面上，形成磷双层结构和微乳液，从而可以作为乳化剂、增稠剂、抗氧化剂等在食品、化妆品、医药等领域应用。

2.实验步骤将去壳的新鲜鸡蛋取出蛋黄，用盐水洗净表面的蛋白质，然后压成泥，称取25g，加入160 ml乙醇和70 ml氯仿，振荡提取24h，滤去蛋黄泥，得到提取液。

用氮气吹干提取液，再用5 ml碘化铵溶液的Ninhydrin试剂涂抹于硅胶薄层板上，加热显色，可以看到卵磷脂的蓝色斑点。

通过比对标准卵磷脂反应斑点和实验过程得到的反应斑点，可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量。

三、实验操作3.1 实验仪器和药品仪器：薄层色谱仪、干燥箱、氮气吹口等。

药品：鸡蛋、碘化铵溶液、Ninhydrin试剂。

三、实验注意事项1.实验过程中要避免阳光直射和空气流通；2.对于采用氮气吹干的提取液，需要注意气压和吹干时间，以免造成温度过高或时间过长的现象；3.在硅胶薄层板上涂斑注意均匀和用量的控制，避免溢出或浓度过高导致显色结果出现异常；4.硅胶薄层板在干燥箱中加热时要控制温度和时间，尽量保证试验中硅胶薄层板上出现的斑点的颜色鲜艳而稳定；5.硅胶薄层板上的斑点大小和颜色的变化需要通过标准试验和实验操作的对比来确定实验结果。

四、实验结果分析通过本实验，我们可以初步测定蛋黄中卵磷脂的含量，并通过对标准试剂和实验结果的对比，也可以得到质量较好的卵磷脂含量。

通过初步检测，我们可以确定卵磷脂含量的多少，并初步判断蛋黄的质量。

卵磷脂的提取和鉴定实验报告卵磷脂是一种重要的生物分子，广泛存在于动植物细胞膜中，对细胞膜的结构和功能起着重要的作用。

本实验旨在通过提取和鉴定卵磷脂，了解其提取方法和鉴定技术，为进一步研究和应用提供参考。

1. 提取卵磷脂的方法。

首先，我们需要准备卵黄，将卵黄破碎并加入氯仿-甲醇混合溶剂，使卵磷脂从卵黄中溶解出来。

然后，通过离心将上清液和沉淀分离，将上清液转移到锥形瓶中，加入等体积的0.9%氯化钠溶液，摇匀后放置于4℃冰箱中沉淀。

最后，将沉淀离心，得到卵磷脂。

2. 卵磷脂的鉴定。

为了鉴定卵磷脂的纯度和结构，我们可以利用薄层色谱和质谱技术。

首先，将提取得到的卵磷脂溶解在氯仿-甲醇混合溶剂中，然后在预涂有硅胶的玻璃板上涂抹样品，放入薄层色谱仪中进行分离。

通过比色试剂或者紫外灯照射，我们可以观察到卵磷脂的斑点，并计算Rf值来确定其纯度。

另外，质谱技术也是一种常用的鉴定方法，通过质谱仪的分析，我们可以得到卵磷脂分子的质谱图，进而确定其分子结构和质量。

3. 实验结果与讨论。

经过提取和鉴定，我们成功得到了卵磷脂，并通过薄层色谱和质谱技术进行了鉴定。

通过比色试剂和紫外灯照射，我们观察到了卵磷脂的斑点，并计算出了其Rf值，证明了其纯度。

同时，质谱图显示了卵磷脂分子的质谱峰，进一步确认了其结构和质量。

在实验过程中，我们也发现了一些问题，比如提取过程中可能会受到其他成分的干扰，导致提取得到的卵磷脂不够纯净。

因此，在今后的实验中，我们需要进一步优化提取方法，提高卵磷脂的纯度。

4. 结论。

通过本次实验，我们成功提取和鉴定了卵磷脂，了解了其提取方法和鉴定技术。

同时，我们也发现了一些问题，为今后的研究提供了一定的参考和借鉴。

希望通过我们的努力，能够更好地理解和应用卵磷脂这一重要的生物分子。

一、实验目的1. 理解卵磷脂的提取原理和方法。

2. 掌握实验室提取卵磷脂的实验步骤。

3. 学习鉴定卵磷脂纯度的方法。

二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，广泛存在于动植物细胞膜中。

它由甘油、磷酸、脂肪酸和胆碱等组成。

卵磷脂具有降低胆固醇、增强记忆力、促进神经传导等多种生理功能。

本实验采用乙醇作为溶剂，通过浸提、离心、沉淀等步骤提取卵磷脂，并对其进行鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：鸡蛋、乙醇、乙醚、硫酸铜、氯化钠、蒸馏水等。

2. 实验仪器：离心机、冰箱、烧杯、漏斗、玻璃棒、滤纸等。

四、实验步骤1. 取鸡蛋，去壳取蛋黄，用玻璃棒搅拌成糊状。

2. 将糊状蛋黄加入适量乙醇，搅拌均匀。

3. 将混合液倒入烧杯中，用玻璃棒搅拌，使卵磷脂充分溶解。

4. 将烧杯置于冰箱中，低温处理2小时，使卵磷脂沉淀。

5. 取出烧杯，用漏斗和滤纸过滤沉淀物，得到卵磷脂粗提液。

6. 将粗提液倒入离心管中，离心分离，取下层卵磷脂沉淀。

7. 将沉淀物用乙醚洗涤，去除杂质，得到纯净的卵磷脂。

8. 将纯净卵磷脂置于干燥器中，晾干至恒重。

五、实验结果与分析1. 提取结果：通过实验，成功提取了蛋黄中的卵磷脂，得到白色蜡状物质。

2. 鉴定结果：a. 硫酸铜试验：取少量卵磷脂，加入硫酸铜溶液，振荡，若出现蓝色絮状沉淀，则说明卵磷脂中含有磷酸基团。

b. 氯化钠试验：取少量卵磷脂，加入氯化钠溶液，振荡，若出现白色絮状沉淀，则说明卵磷脂中含有胆碱。

六、实验讨论1. 本实验采用乙醇作为溶剂，能够有效提取蛋黄中的卵磷脂，提取率较高。

2. 低温处理有助于卵磷脂的沉淀，提高提取纯度。

3. 通过硫酸铜和氯化钠试验，对提取的卵磷脂进行了鉴定，验证了其纯度。

七、实验结论通过本实验，成功提取了蛋黄中的卵磷脂，并对其进行了鉴定。

实验结果表明，本实验方法可行，提取的卵磷脂纯度较高，为后续研究卵磷脂的生理功能奠定了基础。

八、实验注意事项1. 实验过程中，注意操作规范，避免交叉污染。

卵磷脂的提取实验报告卵磷脂的提取实验报告引言：卵磷脂是一种常见的磷脂类化合物，存在于生物体细胞膜中，具有重要的生理功能。

本实验旨在通过提取卵磷脂，了解其提取方法和应用。

实验材料与方法：材料：鸡蛋、乙醇、氯仿、氯化钠仪器：搅拌器、离心机、玻璃瓶、滤纸、移液管等步骤：1. 取适量鸡蛋，将蛋黄与蛋清分离。

2. 将蛋黄放入搅拌器中，加入适量乙醇，搅拌均匀。

3. 将搅拌后的混合物倒入离心机离心，离心后分为两层，上层为乙醇层，下层为沉淀层。

4. 将上层乙醇层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。

5. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。

6. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。

7. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。

8. 加入适量水，摇匀后放置静置。

9. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。

10. 将上层水层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。

11. 加入适量氯仿，摇匀后放置静置。

12. 静置后，分为两层，上层为氯仿层，下层为水层。

13. 将上层氯仿层转移到另一个玻璃瓶中，加入适量氯化钠，摇匀。

14. 加入适量水，摇匀后放置静置。

15. 静置后，分为两层，上层为水层，下层为氯仿层。

结果与讨论：经过多次提取，我们成功地从鸡蛋中提取到了卵磷脂。

实验过程中，通过乙醇、氯化钠和氯仿的配合使用，能够有效地分离出卵磷脂。

乙醇的作用是溶解蛋黄中的卵磷脂，而氯化钠则用于调节溶液的渗透压，帮助分离。

氯仿则是用来提取卵磷脂的有机溶剂，能够与卵磷脂形成复合物，从而实现分离。

卵磷脂作为一种重要的生物大分子，具有多种生理功能。

首先，卵磷脂是细胞膜的主要组成成分之一，能够维持细胞膜的完整性和稳定性。

其次，卵磷脂还参与细胞信号传导，调节细胞功能。

此外，卵磷脂还具有良好的乳化和分散性能，常被用作食品添加剂和药物载体。

在实际应用中，卵磷脂的提取方法可以根据需要进行调整。

例如，可以根据不同来源的卵磷脂进行提取，以获得特定的卵磷脂种类。

第1篇一、实验目的1. 学习卵磷脂的提取方法。

2. 掌握卵磷脂的鉴定方法。

3. 了解卵磷脂的生理功能。

二、实验原理卵磷脂是一种重要的生物活性物质，广泛存在于动植物体内，尤其以蛋黄中含量最为丰富。

卵磷脂主要由甘油、胆碱、磷酸、饱和及不饱和脂肪酸组成，是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的基本成分。

研究发现，卵磷脂具有延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力、促进脂肪代谢、防止脂肪肝、降低血清胆固醇等作用。

本实验通过95%乙醇在蛋黄溶液中提取卵磷脂，再加入乙醚过滤，得到卵磷脂。

通过红外光谱、核磁共振等手段对提取的卵磷脂进行鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 鸡蛋- 95%乙醇- 乙醚- 红外光谱仪- 核磁共振仪- 玻璃棒- 烧杯- 滤纸- 滤器2. 实验仪器：- 红外光谱仪- 核磁共振仪- 电子天平- 磁力搅拌器四、实验步骤1. 将鸡蛋打破，取出蛋黄。

2. 将蛋黄加入烧杯中，加入95%乙醇，用玻璃棒搅拌至蛋黄完全溶解。

3. 将溶液过滤，收集滤液。

4. 将滤液加入烧杯中，加入乙醚，用磁力搅拌器搅拌，使卵磷脂析出。

5. 将乙醚蒸发，得到卵磷脂固体。

6. 对得到的卵磷脂进行红外光谱、核磁共振等鉴定。

五、实验结果与分析1. 提取的卵磷脂为白色固体，具有淡黄色至棕色的光泽。

2. 红外光谱分析表明，提取的卵磷脂具有典型的卵磷脂特征峰，如C-O伸缩振动峰、C-N伸缩振动峰等。

3. 核磁共振分析表明，提取的卵磷脂具有典型的卵磷脂结构特征，如胆碱的化学位移、脂肪酸的化学位移等。

根据实验结果，可以判断提取的样品为卵磷脂。

六、实验讨论1. 卵磷脂的提取方法：本实验采用95%乙醇在蛋黄溶液中提取卵磷脂，操作简便，效果良好。

2. 卵磷脂的鉴定方法：本实验采用红外光谱、核磁共振等手段对提取的卵磷脂进行鉴定，结果可靠。

3. 卵磷脂的生理功能：卵磷脂具有多种生理功能，如延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力、促进脂肪代谢、防止脂肪肝、降低血清胆固醇等。

实训卵磷脂的提取及其组成鉴定一、实验目的1、加深了解磷脂类物质的结构和性质2、学习从蛋黄中提取卵磷脂的实验方法2、掌握卵磷脂的组成鉴定的原理和方法二、实验原理磷脂是生物体组织细胞的重要成分，主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中，尤其在蛋黄中含量较多（10%左右）。

卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮，利用此性质可将其与中性脂肪分离开；此外，卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶，利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。

新提取的卵磷脂为白色，当与空气接触后，其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色。

卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、甘油、胆碱和磷酸盐。

通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。

卵磷脂分离提取的流程如下：三、仪器和试剂仪器研钵、布氏漏斗、蒸发皿、水浴锅（沸水）、玻璃漏斗、玻棒、小烧杯、试管、纱布、酒精灯。

试剂1、熟鸡蛋黄2、红色石蕊试纸3、95%乙醇4、20%氢氧化钠溶液5、钼酸铵试剂：将6g钼酸铵溶于15mL蒸馏水中，加入5mL浓氨水，另外将24mL浓硝酸溶于46mL的蒸馏水中，两者混合静置一天后使用。

6、丙酮7、氯仿8、10%溴的四氯化碳溶液9、硝酸10、1%硫酸铜溶液11、10%醋酸铅溶液四、操作步骤（一）卵磷脂的提取1、取熟鸡蛋蛋黄一只，于研钵中研细，先加入10ml 95％乙醇研磨，再加入20ml 95％乙醇充分研磨，减压过滤(应盖满漏斗)，滤干后，如浑浊可再过滤一次，将澄清滤液移入蒸发皿内。

2、将蒸发皿置于沸水浴上蒸去乙醇至干，得到黄色油状物。

3、冷却后，加入5ml氯仿，搅拌使油状物完全溶解。

4、在搅拌下慢慢加入15ml丙酮，即有卵磷脂析出，搅动使其尽量析出，将氯仿丙酮溶液倒掉，取沉淀。

（二）卵磷脂的组成鉴定1、水解及三甲胺的检验取一支干燥大试管，加入提取的卵磷脂，并加入5ml 20％氢氧化钠溶液，放入沸水浴中加热10分钟，在管口放一片红色石蕊试纸，观察颜色有无变化，并嗅其气味。

蛋黄中卵磷脂的提取项目报告引言卵磷脂是一种重要的生物分子，广泛存在于生物体组织细胞膜中，在保护细胞、保持细胞健康和参与代谢过程等方面发挥着重要的作用。

蛋黄中富含卵磷脂，因此从蛋黄中提取卵磷脂具有重要的意义。

本报告旨在介绍卵磷脂提取的方法和操作过程，并探讨蛋黄中卵磷脂提取的优化条件。

材料和方法1. 实验材料鸡蛋黄，氯仿，乙醇，硫酸钠，硫酸铜，脱色活性炭。

2. 实验步骤(1) 蛋黄分离将鸡蛋清与蛋黄分开，将蛋黄逐个捞出并洗净。

(2) 蛋黄液的制备将洗净的蛋黄放入搅拌机中，加入适量的盐水，混合均匀，制成蛋黄液。

(3) 卵磷脂的提取取一定量的蛋黄液，按体积比例1:1加入氯仿，搅拌30秒，放置静置。

收取上层乳白色的液体，转移到新的容器中。

(4) 脱色处理加入少量的脱色活性炭，并摇晃混匀。

静置15分钟，然后用过滤器分离出脱色后的液体。

(5) 卵磷脂提取量的测定将卵磷脂溶解在正丁醇中，然后用硫酸钠和硫酸铜定量，计算出卵磷脂的提取量。

结果和讨论本实验通过以上步骤从蛋黄中成功提取卵磷脂，并计算出提取量。

但是，在实验过程中也发现了一些问题，如提取效率低、脱色效果不理想等，需要进一步优化。

提高提取效率的主要方法是改变溶剂体系、控制温度和加入乳化剂等。

比如，可以将氯仿与丙酮混合使用，或使用丙酮-水混合液代替氯仿。

此外，将温度控制在15-20℃范围内也有助于提高提取效率。

最后，加入乳化剂，如十六烷基三甲基溴化铵等也可以提高提取效率。

对于脱色效果不理想的问题，可以通过添加更多的脱色活性炭和增加脱色时间来解决。

同时，调整溶液的pH值也可能改善脱色效果。

结论本实验成功地从蛋黄中提取了卵磷脂，但提取效率和脱色效果需要进一步优化。

通过改变溶剂体系、温度控制和加入乳化剂等方法，可以提高提取效率。

此外，采用更多的脱色活性炭和延长脱色时间以及调整溶液pH值可以改善脱色效果。

卵磷脂的制备及鉴定卵磷脂的制备及鉴定一、实验目的要求1、熟悉鸡蛋黄制备卵磷脂的原理。

2、掌握卵磷脂的制备与减压蒸馏的基本操作方法。

二、实验重点和难点从蛋黄中制备卵磷脂的操作方法。

三、实验原理将卵黄中加乙醇，卵磷脂溶于乙醇溶液中，分离提取，蛋白质等某些杂质从沉淀物中除去。

但由于乙醇抽提时，其他脂质也一起被抽提，如甘油三酯、甾醇等。

利用卵磷脂不溶于丙酮的性质，用丙酮从粗卵磷脂溶液中沉淀磷脂，能使卵磷脂与其他脂质和胆固醇分离开来。

无机盐和卵磷脂可生成络合物沉淀，因此，可利用金属盐沉淀剂将卵磷脂从溶液中分离出来，由此除去蛋白质、脂肪等杂质，再用适当溶剂萃取出无机盐和其他磷脂杂质。

四、实验仪器、试剂与材料1、仪器：离心机、旋转薄膜蒸发仪、布氏漏斗、抽滤瓶、真空干燥箱、层析缸、紫外分光光度计。

溶液：取氯化锌10g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，2、试液：l0%的ZnCl2即得。

3、试剂与材料：氯化锌、95%乙醇、丙酮、氯仿、碘、甲醇、无水乙醇。

五、操作步骤1、粗提：取鸡蛋卵黄适量，用2倍于卵黄体积的95%乙醇混合搅拌、提取，离心分离（300Or/min，5min），将沉淀物重复提取3次，回收上清液。

然后减压蒸馏（45℃）至近干，用少量石油醚洗下粘壁的黄色油状物。

加入丙酮溶解，抽滤，分离出沉淀，真空干燥（40℃，3Omin），得到淡黄色的粗卵磷脂，称重。

2、精制：取一定量的卵磷脂粗品，加无水乙醇溶解，得到约10%的乙醇粗提溶液，室温搅拌0.5h。

分离沉淀物，液。

加入相当于卵磷脂质量的l0%的ZnCl2加适量冰丙酮（4℃）洗涤，搅拌lh，再用丙酮反复研洗，直到丙酮洗液为近无色止，得到白色蜡状的精制卵磷脂；干燥；称重。

3、鉴定：（1）薄层色谱分析：取卵磷脂样品与对照品分别制成2%氯仿溶液，用GF254硅胶板以氯仿：甲醇：水（65：25：4）为展开剂，展开，取出，干燥，碘蒸气显色。

（2）紫外吸收光谱测定：将一定量卵磷脂制成0.l%无水乙醇溶液，照紫外分光光法在190～40Onm处测定，卵磷脂的紫外最大吸波长在215nm。

实验项目：蛋黄中卵磷脂的提取与TLC检测
实验原料：鲜鸡蛋、纯化卵磷脂
实验试剂：
实验仪器：旋转蒸发仪、恒温水浴箱、真空泵、布氏漏斗、抽滤瓶、电子天平烘箱、固定厚度涂布器、方形层析缸、玻璃板、研钵
辅助器材：毛细管、玻璃棒、滤纸、漏斗、10ml量筒、50ml量筒、烧杯，圆底烧瓶等
操作步骤： 操作说明及结果纪录：
取10.0g 鸡蛋黄
蛋黄用30ml 丙酮（
pH8）搅拌1h
过滤
后，滤渣用丙酮洗2-3次 用30ml 乙醇-石油醚（3:1）混合试剂搅拌浸 提1h 抽滤 旋转蒸发（40℃） 收集产品，进行检测 TLC 检测 制板 称取 20 g 孔径为 6 nm 的硅胶 60, 用 45mL 1- 1mol ·L 的碳酸钠溶液稀释, 置于研钵中研磨, 调成均匀的糊状物, 用涂布器将糊状物均匀地铺在玻璃板上, 铺完后于室温下风干, 使用前在110 ℃烘箱中活化。

点样
用毛细管在层析板距下端2. 5 cm 处点两个样,自制卵磷脂样品和标准品, 样点的间距为3 cm。

展开
将展开剂置于层析缸中平衡30m in, 使溶剂的蒸汽压在层析缸中达到平衡, 然后放入层析板, 溶液自下而上在层析板上展开, 上升速度约 6 cm/h当展开到层析板高度的3/4 处即可取出, 置室温下干燥。

显色
将显色剂均匀地喷雾在层析板上, 可立即看到有蓝色斑点出现。