尿素测定
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一、实验目的1. 了解熔点测定的原理和意义。
2. 掌握使用毛细管法测定熔点的操作方法。
3. 通过实验测定尿素的熔点,并分析实验结果。
二、实验原理熔点是指晶体化合物在一定的外界压力下,由固态转变为液态的温度。
纯晶体化合物在熔化过程中具有固定的熔点,熔化过程中温度保持不变。
测定熔点对于鉴定有机物和判断固体化合物的纯度具有重要意义。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:提勒管、酒精灯、温度计、毛细管、玻璃管、表面皿等。
2. 试剂:尿素。
四、实验步骤1. 将尿素晶体放入干燥的玻璃管中,用镊子轻轻压碎成粉末状。
2. 将粉末状尿素装入毛细管中,填充至距毛细管尖端约1cm处。
3. 将毛细管垂直固定在提勒管中,使样品位于温度计水银球高度的中心。
4. 用酒精灯加热提勒管,使浴油温度缓慢上升。
5. 观察样品的变化,记录样品开始熔化时的温度(初熔点)和完全熔化时的温度(全熔点)。
6. 重复实验两次,取平均值作为尿素的熔点。
五、实验结果1. 第一次实验:初熔点为132.5℃,全熔点为133.0℃。
2. 第二次实验:初熔点为132.6℃,全熔点为133.1℃。
3. 平均熔点:(132.5℃ + 132.6℃ + 133.0℃ + 133.1℃) / 4 = 132.9℃。
六、实验讨论1. 实验过程中,温度计水银球应位于提勒管上下侧口的中心,以确保准确测量样品的温度。
2. 加热过程中,浴油温度应缓慢上升,避免温度过高导致样品分解。
3. 为了保证实验结果的准确性,实验过程中应重复实验两次,取平均值作为尿素的熔点。
4. 本实验中测得的尿素熔点与文献值132.7℃相近,说明实验结果较为可靠。
七、结论通过本次实验,我们成功测定了尿素的熔点,并掌握了使用毛细管法测定熔点的操作方法。
实验结果表明,尿素的熔点为132.9℃,与文献值相近,实验结果可靠。
在实验过程中,我们注意了温度控制、样品填充等细节,保证了实验结果的准确性。
尿素水分测定真空干燥标准-概述说明以及解释1.引言1.1 概述尿素是一种常用的化学物质,广泛应用于农业、化工、医药等领域。
水分测定是分析尿素品质的重要指标之一,可以反映尿素的稳定性和纯度。
随着科技进步和质量要求的提高,尿素水分测定的精度和准确性变得越来越重要。
本篇文章主要介绍尿素水分测定中真空干燥的标准和方法。
真空干燥是一种常用的水分测定方法,通过将样品放置于真空环境中,利用负压作用,使样品中的水分蒸发并被移除,从而得到尿素的准确含水量。
在本篇文章中,我们将对尿素的含义和用途进行简要介绍,然后重点介绍水分测定的方法和原理。
同时,我们还将详细讨论尿素水分测定的重要性以及真空干燥在该过程中的应用。
通过阐述尿素水分测定的标准和技术要求,我们旨在提供给读者一个全面的了解,并为实际操作提供指导。
文章的后续部分将对尿素水分测定的实验步骤、数据处理和结果分析进行详细讨论,并总结出相关的结论。
通过本篇文章的阐述,相信读者能够更好地理解尿素水分测定的重要性以及真空干燥在该过程中的应用,为相关领域的科研人员和从业人员提供参考与借鉴。
1.2 文章结构文章结构是指文章的组织和安排方式,它对于读者能否清晰地理解文章的内容和逻辑关系起着重要的作用。
本文以尿素水分测定和真空干燥为主题,下面将详细介绍文章结构。
首先,文章包含引言、正文和结论三个主要部分。
引言部分主要是对文章的背景和目的进行概述,引导读者进入文章主题。
其中,1.1部分会从尿素的含义和用途方面做一简要介绍,帮助读者了解尿素的基本知识和广泛应用领域。
1.2部分则会详细介绍文章结构,即引言、正文和结论三个主要部分的内容和布局。
1.3部分会明确本文的目的,即通过对尿素水分测定和真空干燥的探讨,展示它们在相关领域的重要性和应用。
正文部分是文章的主体,具体分为2.1和2.2两个小节。
2.1部分会重点介绍尿素的含义和用途,包括尿素在农业、医药等领域的广泛应用,以及尿素的化学性质和特点。
尿素溶液浓度检测方法
尿素溶液浓度的检测方法有很多种。
首先,直接比色法是一种常见的测定方法,这种方法使用特殊试剂与尿素直接作用产生显色反应,然后使用分光光度计在特定波长下测定其吸光度,从而换算成尿素含量。
直接比色法中常用的有二乙酰一肟法、邻苯二甲醛法和对二甲氨基苯甲醛法等。
例如,二乙酰一肟法是在强酸加热条件下,尿素与二乙酰发生Fearon反应,生成红色的原二嗪(Diazine),其颜色深浅与尿素含量成正比。
其次,尿素含量也可以通过化学试剂滴定法、凯氏定氮法或折光法进行检测。
例如,一种改进的容量法是通过采用精密pH试纸,联合甲基红指示剂的应用,来测定尿素溶液中的尿素含量,这种方法操作简便、快速。
还有一种尿素浓度检测方法,包括制备标准溶液、配制显色剂和酸试剂、测量不同浓度尿素标准溶液的吸光度来制备标准曲线,然后将欲测量的尿素溶液与显色剂和酸试剂混合反应,测量产物的吸光度,最后代入标准曲线中计算尿素浓度。
此外,尿素还可以通过DMBA与尿素反应生成黄色的对二甲胺基甲醛脲来检测其浓度,此物质的颜色深度与溶液中尿素含量成正比。
总的来说,有多种方法可以测定尿素溶液的浓度,根据具体需求选择最适合的方法。
一、实验目的1. 掌握血清尿素测定的原理和方法。
2. 熟悉二乙酰-肟法测定血清尿素氮的实验操作。
3. 了解实验中可能出现的误差及其处理方法。
二、实验原理血清尿素氮(Blood Urea Nitrogen,BUN)是血液中尿素氮的浓度,是反映肾功能的重要指标。
尿素氮是蛋白质代谢的终产物,主要由肝脏产生,通过肾脏排泄。
二乙酰-肟法是一种常用的测定血清尿素氮的方法,其原理如下:在酸性反应环境中加热,尿素与二乙酰缩合,生成色素原二嗪,称为Feorin反应。
因为二乙酰不稳定,所以通常由反应系统中二乙酰-肟与强酸作用,产生二乙酰,二乙酰与尿素反应,综合生成红色的二嗪。
其颜色的深浅与血清中尿素含量成正比。
三、实验材料1. 试剂:- 碱性试剂:在三角烧瓶中加蒸馏水约100ml,然后加入浓硫酸44ml及85%H3PO466ml冷至室温,加入硫氨脲50mg及硫酸镉2g溶解后加蒸馏水稀释至1升,置棕色瓶放冰箱保存,可稳定半年。
- 二乙酰-肟溶液:称取二乙酰-肟20g,加蒸馏水约900ml溶解后,再用蒸馏水稀释至1升置棕色瓶中,贮存放于冰箱内可保存半年不变。
- 尿素标准贮存液(100mmol/L):称取干燥纯尿素(MW60.06)0.6g,溶解于水中并稀释至100毫升,加0.1g叠氮钠防腐,置冰箱内稳定六个月。
- 尿素标准应用液(5mmol/L):取5.0ml贮存液用去氨蒸馏水稀释至100ml。
2. 仪器:- 分光光度计- 离心机- 实验室试管四、实验步骤1. 标准曲线的绘制:- 取5支试管,分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0ml尿素标准应用液,用去氨蒸馏水稀释至5.0ml。
- 向每支试管中加入2.0ml碱性试剂,混匀。
- 将试管置于沸水中加热5分钟,取出冷却至室温。
- 以540nm波长,1cm光程,测定各管吸光度。
- 以尿素浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
2. 样品测定:- 取2支试管,分别加入0.5ml血清和0.5ml尿素标准应用液,用去氨蒸馏水稀释至5.0ml。
二乙酰一肟法测尿素的原理二乙酰一肟法是一种常用于测定尿素含量的方法。
该方法基于尿素能与二乙酰一肟发生反应生成氨基脲的原理。
下面将详细介绍二乙酰一肟法测尿素的原理。
尿素是生物体代谢产物,也是一种重要的氮源。
测定尿素的含量对于了解生物体的氮代谢及肾功能等具有重要意义。
二乙酰一肟法是一种常用的尿素测定方法,其基本原理为将尿素与二乙酰一肟发生酰化反应,生成氨基脲。
具体的操作步骤如下:1. 取一定量的尿液样品,加入适量的三氯乙酸,使尿液中的尿素脱氢酶等酶失活。
2. 加入适量的二乙酰一肟试剂,与尿素发生反应生成氨基脲。
二乙酰一肟试剂的作用是使尿素与一肟酯发生酰化反应,生成稳定的酰尿素化合物。
3. 反应结束后,在碱性条件下,氨基脲水解,生成氨气。
可以利用此氨气的生成量来测定尿素的含量。
4. 使用比色法或者气相色谱法等进行测定,根据标准曲线计算出尿液中的尿素含量。
二乙酰一肟法测尿素的原理主要基于尿素与二乙酰一肟反应生成酰尿素的特性。
此反应是一个酯化反应,发生在酸性条件下。
二乙酰一肟试剂作为试剂,可反应生成具有稳定性和可检测性的酰尿素化合物。
此后,在碱性条件下,酰尿素水解生成氨气。
为了提高测定的准确性,二乙酰一肟法还可以结合其他方法进行测定。
例如,可以在水解反应结束后,用酚酞指示剂测定氨气生成量的酸度滴定法,或者使用离子选择电极进行电位测定。
这些方法可以更加准确地测定尿素的含量。
总结起来,二乙酰一肟法是通过尿素与二乙酰一肟试剂发生酰化反应生成氨基脲,再经过水解反应生成氨气来测定尿素含量的一种方法。
这种方法简单、灵敏且准确,因此被广泛应用于尿液中尿素含量的测定。
FNCPFL0001 尿素总氮含量的测定蒸馏后滴定法F_NCP_FL_ 0001尿素-总氮含量的测定-蒸馏后滴定法1 范围本方法适用于由氨和二氧化碳合成制得的尿素总氮含量的测定。
本方法为仲裁检验方法。
2 原理有硫酸铜存在下,在浓硫酸中加热使试料中酰胺态氮转化为氨态氮,蒸馏并吸收在过量的硫酸溶液中,在指示液存在下,用氢氧化钠标准滴定溶液滴定剩余的酸。
3 试剂3.1 五水硫酸铜(CuSO4·5H2O)3.2 硫酸,ρ约1.84g/mL3.3 硫酸溶液,c(1/2H2SO4)=0.5mol/L或c(1/2H2SO4)=1.0mol/L量取15.0mL或30.0mL硫酸慢慢注入盛有400 mL水的600mL烧杯内,混匀。
冷却后转移至1L容量瓶中,用水稀释至刻度,混匀。
前者硫酸溶液的浓度为c(1/2H2SO4)=0.5mol/L,后者硫酸溶液的浓度为c(1/2H2SO4)=1.0mol/L。
3.4 氢氧化钠溶液,450g/L3.5 甲基红-亚甲基蓝混合指示剂溶液3.5.1 配制甲基红溶液(2g/L):称取0.20g甲基红,溶于95%(体积分数)乙醇,用95%(体积分数)乙醇稀释至100mL。
3.5.2 配制亚甲基蓝溶液(1g/L):称取0.10g亚甲基蓝,溶于95%(体积分数)乙醇,用95%(体积分数)乙醇稀释至100mL。
3.5.3 将50mL甲基红溶液(2g/L)和50mL亚甲基蓝溶液(1g/L)混合。
3.6 氢氧化钠标准滴定溶液,c(NaOH)=0.5mol/L3.6.1 无二氧化碳水的制备:将水注烧瓶入中(水量不超过烧瓶体积的2/3),煮沸10min,放置冷却,用装有碱石灰干燥管的橡皮塞塞紧。
制备10L~20L较大体积的不含二氧化碳的水,可插一玻璃管到容器底部,往水中通氮气1h~2h,以除去被水吸收的二氧化碳。
3.6.2 饱和氢氧化钠溶液的配制:溶解162g氢氧化钠于150mL无二氧化碳水中,冷却至室温。
测定血清尿素的方法
测定血清尿素的方法有很多种,以下是其中几种常见的方法:
1. 色谱法:使用气相色谱法或者液相色谱法,将血清中的尿素分离出来,并通过检测其峰值的面积或者浓度来确定尿素的含量。
2. 尿素酶法:利用尿素酶催化尿素水解产生氨和二氧化碳,并采用测定氨的方法来间接测定尿素的含量。
3. 尿素氮法:使用气体分析仪测定氨气,通过转化为尿素以后,测量尿素的氮含量来计算尿素的含量。
4. 尿素代谢率法:通过给予标记有碳14或者氢2的尿素,然后测定排出的二氧化碳或者水的放射性活性,从而测定尿素的代谢率。
这些方法各有优缺点,选择合适的方法取决于实验条件、设备以及研究需求。
在实际应用中,一般会根据实验目的和实验条件选择最适合的测定方法。
一、实验目的1. 了解饲料中尿素含量的测定原理和方法。
2. 掌握尿素滴定法的操作步骤。
3. 学会利用标准溶液滴定法测定饲料中尿素含量。
二、实验原理尿素是一种含氮化合物,广泛存在于饲料中。
本实验采用滴定法测定饲料中尿素含量,原理是利用酸碱滴定法,以盐酸标准溶液为滴定剂,与饲料中的尿素发生中和反应,根据消耗的盐酸标准溶液的体积计算出尿素含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:滴定管、锥形瓶、烧杯、玻璃棒、滤纸、漏斗等。
2. 试剂:盐酸标准溶液(0.1mol/L)、酚酞指示剂、蒸馏水、待测饲料样品等。
四、实验步骤1. 准备工作:称取约1.0g待测饲料样品,置于锥形瓶中,加入10mL蒸馏水,用玻璃棒搅拌,使样品充分溶解。
2. 滴定前准备:将锥形瓶置于滴定台上,加入2~3滴酚酞指示剂。
3. 滴定:用滴定管吸取10.00mL盐酸标准溶液,滴定至溶液颜色由粉红色变为无色,且半分钟内不褪色为止。
4. 记录数据:记录消耗的盐酸标准溶液体积,保留两位小数。
5. 重复实验:重复上述步骤,进行三次实验,取平均值。
五、数据处理1. 计算尿素的摩尔数:n(HCl) = C(HCl) × V(HCl),其中C(HCl)为盐酸标准溶液的浓度,V(HCl)为消耗的盐酸标准溶液体积。
2. 计算尿素的含量:m(Urea) = n(Urea) × M(Urea),其中n(Urea)为尿素的摩尔数,M(Urea)为尿素的摩尔质量。
3. 计算饲料中尿素含量:X(Urea) = m(Urea) / m(样品),其中m(Urea)为尿素的质量,m(样品)为待测饲料样品的质量。
六、结果与讨论1. 结果:根据实验数据,计算得出饲料中尿素含量为X(Urea)。
2. 讨论:(1)本实验采用滴定法测定饲料中尿素含量,操作简便,准确度高。
(2)实验过程中,注意控制滴定速度,避免产生误差。
(3)在实验过程中,注意避免空气中的氨气对实验结果的影响。
实验十七实验名称:尿素的测定实验目的与要求:掌握测定血清尿素的基本原理实验仪器、试剂:半自动生化分析仪、尿素测定试剂盒实验原理:尿素经脲酶水解生成NH3与CO2,在谷氨酸脱氢酶(GLDH)的作用下,氨与α-酮戊二酸及还原型辅酶Ⅰ(NADH)反应生成谷氨酸和NAD+,NADH在340nm 处的吸光度下降速率与待测样品中尿素的含量成正比。
操作方法:1、将试剂R1:R2=4:1混合,即为工作液2、按下列顺序加入各试剂单位ml 空白标准样本蒸馏水0.01 ——样本--0.01标准液-0.01 -工作液 1.0 1.0 1.03、混匀各管,340nm,空白管调零,延时30秒,读取初始吸光度A1,60秒后读取A2,计算ΔA实验现象与数据:记录ΔA结果分析与结论:尿素=ΔA样/ΔA标×C标(8.32 mmol/l)参考范围:1.7-8.3mmol/l临床意义:实验十八实验名称:血清尿酸的测定实验目的与要求:掌握尿酸酶-过氧化物酶耦联法测定尿酸的基本原理实验仪器、试剂:尿酸测定试剂盒,722E/723分光光度计实验原理:尿酸酶氧化尿酸,生成尿囊素和过氧化氢,在过氧化物酶催化下,过氧化氢使ESBmT和4-氨基安替比林缩合成有色化合物,其在546nm吸光度与尿酸浓度成正比。
操作方法:按以下步骤操作单位ml 标准测定空白样本-0.025 -标准液0.025 --蒸馏水--0.025酶试剂 1.0 1.0 1.0混匀37℃温浴5min,以空白管调零。
546nm,0.5cm比色杯,测定各管的A 实验现象与数据:记录各管的A结果分析与结论:血清尿酸浓度=A样/A标×C标(357μmol/l)参考值:男202-416μmol/L,女142-339μmol/L临床意义:思考题:P223第2题。
实验一 尿素中含氮量的测定一、实验目的1.学会用甲醛法测定氮含量,掌握间接滴定的原理。
2.学会NH 4+的强化,掌握试样消化操作。
3.掌握容量瓶、移液管的正确操作。
4.进一步熟悉分析天平的使用。
二、实验原理常用的含氮化肥有NH 4Cl 、(NH 4)2SO 4、NH 4NO 3、NH 4HCO 3和尿素等,其中NH 4Cl 、(NH 4)2SO 4和NH 4NO 3是强酸弱碱盐。
由于NH 4+的酸性太弱(Ka=5.6×10-10),因此不能直接用NaOH 标准溶液滴定,但用甲醛法可以间接测定其含量。
尿素通过处理也可以用甲醛法测定其含氮量。
甲醛与NH 4+作用,生成质子化的六次甲基四胺(Ka=7.1×10-6)和H +,其反应如下:4NH 4+ + 6HCHO = (CH 2)6N 4H + + 3H + + 6H2 所生成的H +和(CH 2)6N 4H +可用NaOH 标准溶液滴定,采用酚酞作指示剂。
标定NaOH 标准溶液的基准物质为邻苯二甲酸氢钾,其反应为:化学计量点时,溶液呈弱碱性(pH=9.20),可选用酚酞作指示剂。
三、仪器与试剂 容量瓶(250mL)、移液管(25mL)、锥形瓶(250mL)、碱式滴定管(50mL)、洗耳球、分析天平氢氧化钠、邻苯二甲酸氢钾、硫酸铵、甲基红指示剂(0.2%水溶液)、酚酞(0.2%乙醇溶液)、甲醛溶液(1:1)四、实验步骤1.0.1mol·L -1NaOH 标准溶液的配制及标定COOH COOK +NaOH COOK COONa+H 2O用台秤迅速称取1g NaOH固体于100mL小烧杯中,加约30mL无CO2的去离子水溶解,然后转移至容量瓶中,用去离子水稀释至250mL,摇匀后,用橡皮塞塞紧。
洗净碱式滴定管,检查不漏水后,用所配制的NaOH溶液润洗2~3次,每次用量5~10mL,然后将碱液装入滴定管中至“0”刻度线上,排除管尖的气泡,调整液面至0.00刻度或零点稍下处,静置1min后,精确读取滴定管内液面位置,并记录在报告本上。
尿素中氯离子测定硝酸银滴定法下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。
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对二甲基苯甲醛法测尿素的原理测定尿素的二甲基苯甲醛法是一种常用的生化分析方法,它基于尿素在碱性条件下与二甲基苯甲醛反应生成有色化合物的原理。
这种方法的优点是灵敏度高、操作简便、反应快、成本低,因此被广泛应用于临床生化检验和环境监测等领域。
二甲基苯甲醛法测定尿素的原理是尿素分子中的尿素酶在碱性条件下能够将尿素分解成氨和二氧化碳,同时生成一种名为羟甲基糠醛的化合物。
这种化合物能够与二甲基苯甲醛发生反应,生成一种紫红色的化合物,该化合物在波长550nm处有最大吸收峰,因此可以通过测定反应液的吸光度来测定尿素的含量。
该方法的操作步骤如下:1.准备试剂和样品:准备好二甲基苯甲醛、尿素酶、缓冲液、标准溶液和待测样品。
2.配制工作液:将二甲基苯甲醛和缓冲液按照一定比例混合,摇匀备用。
3.加样:分别向标准溶液和待测样品中加入一定量的尿素酶,摇匀。
4.反应:将标准溶液和待测样品在一定温度下反应一定时间。
5.比色:将反应液在波长550nm处测定吸光度,并记录数据。
6.计算:根据标准曲线和待测样品的吸光度,计算尿素的含量。
需要注意的是,该方法的灵敏度较高,因此对于一些低浓度的样品可能需要采用稀释的方法来保证测定的准确性。
此外,由于该方法中涉及到的化学反应比较复杂,因此对于实验条件和操作步骤需要进行严格的控制和规范,以保证实验结果的准确性和可靠性。
原理:碱性条件:在碱性条件下,尿素会水解成氨气和碳酸氢根离子。
反应:二甲基苯甲醛(DMAB)是一种芳香醛,它在碱性条件下与氨气反应,生成一种称为庚二酮亚胺的有色产物。
颜色反应:庚二酮亚胺是有色的,其颜色的强度与尿素的浓度成正比。
因此,可以通过测定庚二酮亚胺的光吸收来确定尿素的浓度。
测定步骤:取尿样本并将其加入含有碱性试剂(通常是氢氧化钠或氢氧化钾)的试剂管中。
碱性条件是为了促使尿素水解产生氨气。
向试剂管中加入二甲基苯甲醛试剂(DMAB)。
DMAB会与产生的氨气反应生成庚二酮亚胺。
一、实验目的1. 掌握尿素快速测定方法的基本原理和操作步骤。
2. 学习使用尿素检测试剂盒进行尿液中尿素含量的快速测定。
3. 熟悉实验数据的处理和分析方法。
二、实验原理本实验采用尿素酶法进行尿液中尿素含量的快速测定。
尿素酶能够将尿素分解为氨和二氧化碳,氨在碱性条件下与水生成氢氧化铵,进而与纳氏试剂中的硫酸铜反应生成黄色的络合物,颜色深浅与尿素含量成正比。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 尿液样本- 尿素检测试剂盒(包括试剂A、试剂B、纳氏试剂、pH缓冲液等)- 试管、移液管、滴定管、量筒等2. 实验仪器:- 酶标仪- 移液器- 恒温水浴锅四、实验步骤1. 样本准备:取适量尿液样本,加入试剂A,混匀后静置5分钟。
2. 滴定:向上述溶液中加入适量的试剂B,混匀后用移液管吸取纳氏试剂,逐滴加入混合溶液中,直至溶液呈现稳定的黄色。
3. 测定:将混合溶液置于酶标仪中,在特定波长下测定吸光度值。
4. 数据处理:根据吸光度值和标准曲线,计算尿液样本中的尿素含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制:使用已知浓度的尿素标准溶液,按照上述实验步骤进行测定,绘制标准曲线。
2. 尿素含量测定:根据尿液样本的吸光度值,从标准曲线上查得对应的尿素浓度。
六、实验讨论1. 实验结果与理论值的一致性:本实验测定的尿素含量与理论值基本一致,说明实验方法可靠。
2. 影响实验结果的因素:尿液样本的保存、试剂的浓度、操作步骤等均可能影响实验结果。
3. 改进措施:为提高实验结果的准确性,可以采取以下措施:- 严格控制尿液样本的保存条件,避免细菌污染。
- 精确配制试剂,确保试剂浓度准确。
- 严格按照实验步骤进行操作,避免人为误差。
七、实验结论本实验采用尿素酶法对尿液样本中的尿素含量进行了快速测定,结果表明该方法简便、快速、准确,可用于临床检测和健康评估。
八、实验报告(以下为实验报告的详细内容,可根据实际情况进行修改和补充)1. 实验目的:掌握尿素快速测定方法的基本原理和操作步骤,学习使用尿素检测试剂盒进行尿液中尿素含量的快速测定。
测定血清尿素时的注意事项测定血清尿素时,有几个注意事项需要牢记。
首先,要注意样本的采集和处理。
为了保证测定结果的准确性,需要使用无菌技术采集血清样本。
采集血清样本的最佳时间是晨起后,因为此时的胃肠道尚未摄取食物,血液中的尿素水平是相对稳定的。
采血前需要告知患者忌食过多蛋白质的食物,以免影响测定结果。
其次,应该关注样本的储存和运输。
采集完血清样本后,应尽快将其置于离心管中,通过离心将血细胞分离。
分离后的血清样本必须储存在- 20的温度下,以保持样本的稳定性。
运输样本时,需保持低温,避免样本的冻结或加热。
在进行测定前,需要仔细查看试剂的适用性和保质期。
试剂的适用性应满足对尿素的测定要求,同时试剂的保质期在有效期内。
如果试剂过期或不符合要求,可能会导致测定结果的不准确。
此外,还需要注意测定过程中的操作规范。
在测定血清尿素时,常用的方法有尿素酶法和尿素-甲酸法。
在使用这些方法进行测定时,应按照试剂盒说明书中的步骤进行操作。
同时,要严格控制试剂的使用量,避免因试剂误差引起的结果误差。
在测定过程中,还需要注意一些常见的干扰因素。
例如,尿素酶法测定血清尿素时,胆红素、尿胆原、药物、蛋白质等物质都可能对测定结果产生影响。
因此,如果患者服用了某些药物,或者存在其他干扰因素,需要在分析结果时进行修正或者选择合适的干扰消除方法。
最后,还需要根据实验室的要求进行质量控制。
质量控制是评估测定结果准确性和稳定性的重要手段。
可以使用商业质控品或自制的质控样品进行质量控制。
质量控制样品的运用有助于检测系统的准确度和一致性,并及时发现和解决测定过程中的问题。
总之,在测定血清尿素时,需要注意样本的采集和处理、样本的储存和运输、试剂的适用性和保质期、操作规范、干扰因素的考虑以及质量控制的实施。
只有在注重这些注意事项的前提下,才能获得准确可靠的测定结果。
检测方法尿素测定方法总氮含量的测定1 范围本标准规定了尿素中总氮含量的测定。
本标准适用于由氨和二氧化碳合成制得的尿素总氮含量的测定。
2 引用标准下列标准所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。
本标准出版时,所示版本均为有效。
所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB/T3595—2000 肥料中氨态氮含量的测定蒸馏后滴定法HG/T2843—1997 化肥产品化学分析中常用标准滴定溶液、标准溶液、试剂溶液和指示剂溶液3 总氮含量的测定3.1 蒸馏后滴定法(仲裁法)3.1.1 原理有硫酸铜存在下,在浓硫酸中加热使试料中酰胺态氮转化为氨态氮,蒸馏并吸收在过量的硫酸溶液中,在指示液存在下,用氢氧化钠标准滴定溶液滴定剩余的酸。
3.1.2 试剂和溶液本试验方法所用试剂、溶液和水除特殊注明外,均应符合 HG/T2843要求。
3.1.2.1 五水硫酸铜;3.1.2.2 硫酸;3.1.2.3 氢氧化钠溶液,约450g/L;3.1.2.4 甲基红 -亚甲基蓝混合指示液;3.1.2.5 硫酸溶液:[c(1/2H2SO4)=0.5mol/L]或[c(1/2H2SO4)=1.0mol/L];3.1.2.6 氢氧化钠标准滴定溶液:c(NaOH)=0.5mol/L;3.1.2.7 硅脂。
3.1.3 仪器一般实验室仪器和3.1.3.1 蒸馏仪器带标准磨口的成套仪器或能保证定量蒸馏和吸收的任何仪器。
蒸馏仪器的各部件用橡皮塞和橡皮管连接,或是采用球形磨砂玻璃接头,为保证系统密封,球形玻璃接头应用弹簧夹子夹紧。
本标准推荐使用的仪器包括以下各部分:3.1.3.1.1 蒸馏烧瓶,容积为 1L的圆底烧瓶;3.1.3.1.2 单球防溅球管和顶端开口、容积约 50mL与防溅球进出口平行的圆筒形滴液漏斗;3.1.3.1.3 直形冷凝管,有效长度约 400mm;3.1.3.1.4 接受器,容积约500mL的锥形瓶,瓶侧连接双连球;3.1.3.2 梨形玻璃漏斗;3.1.3.3 防溅棒,一根长约100mm,直径约5mm的玻璃棒,一端套一根长约25mm聚乙烯管。
血清尿素测定的临床意义
血清尿素测定是一种用于检测血液中尿素含量的常规检查。
它的临床意义包括:
1. 评估肾脏功能:尿素是肾脏排泄代谢产物,因此血液中的尿素含量可以用于评估肾脏功能。
肾脏功能受到损害时,尿素的排泄量会减少,导致血液中的尿素含量增加。
2. 诊断肝脏疾病:肝脏功能受损时,血液中的氨基酸无法由肝脏转化为尿素,并排出体外,致使血液中的尿素含量降低。
因此,血清尿素测定可以用于评估肝脏功能。
3. 评估蛋白质代谢:尿素是蛋白质代谢的产物之一,因此血液中的尿素含量可以用于评估患者的蛋白质代谢情况。
4. 监测营养支持治疗:血清尿素测定可以用于监测营养支持治疗的效果。
因为营养支持治疗对患者的蛋白质代谢有影响,所以可以通过测定血液中的尿素含量来监测治疗的效果。
5. 诊断其他疾病:尿素水平异常升高或下降可能与其他疾病有关,如肾小球肾炎、肝硬化、水中毒等。
总之,血清尿素测定对于评估肾脏和肝脏功能、评估蛋白质代谢、监测营养支持
治疗效果等方面具有重要的临床意义。
尿素液相色谱尿素是生物体正常消耗的氮元素,也是污染物,导致水质污染。
尿素添加在农业、污染控制和其他领域的应用中受到广泛重视,因此研究尿素的方法以及测量和监测尿素的方法受到越来越多的关注。
其中,液相色谱(HPLC)是测定尿素快速、准确、可靠的有效方法,可检测低活性范围内的尿素浓度,并适用于各种水样品和固体混合物。
HPLC是指将溶液或悬浊液样品通过定量装置(如柱状层析器)或者直接将固体样品进行液化后再进行分离的技术,通常利用液相色谱法检测尿素。
HPLC的一般原理是由高压气体负荷向液体负荷直接泵送溶液或悬浊液,其流动动力学可通过高压气体压和流量控制,在压力下分离混合物的组份,使其从柱口散射出来,根据每一组份的不同溶解度,各元素会以不同的速度在柱子中移动,并最终以不同的时间在柱口被测量。
HPLC技术可以检测尿素,而检测尿素的性质则取决于柱状层析器和检测系统的选择以及选择的溶剂,其选择也取决于所使用的尿素样品中除尿素之外的其他成分及其比例。
尿素与柱层析体系结合,检测器利用比色反应,根据尿素在指定温度下的比色反应特定的沉淀物,可以检测出尿素的浓度。
HPLC的检测结果可以以曲线的形式,从曲线上可以发现尿素浓度的变化,从而做出准确的浓度测量。
因此,尿素液相色谱技术是当今最重要、最有效的尿素浓度测定方法之一。
在尿素液相色谱技术的应用中,重要的是构建合适的体系,保证检测的精度和准确性。
尿素液相色谱技术考虑到不同溶剂的选择、抑制剂选择以及检测系统的选择,其中,不同溶剂的选择是构建检测体系的关键,体系的选择主要考虑:①溶剂的极性及尿素的极性;②还原剂的添加;③滤过技术的采用;④体系的稳定性等。
在尿素检测体系中,检测结果的准确性和可靠性有赖于柱状层析和检测系统的选择。
为了确保检测结果的准确性,柱状层析和检测系统的选择应符合标准的要求,以获取更准确的浓度测定结果。
此外,为了确保测定过程的准确性,应加强样品前处理,比如室温溶液的过滤,样品的混合和pH调整等,以及选择合适的阴离子交换柱。
实验十七 血清尿素的测定(二乙酰一肟法)【目的】1. 掌握血清尿素的测定原理和方法。
2. 了解尿素测定的参考范围及临床意义。
【原理】尿素(urea )在强酸、加热的条件下,与二乙酰缩合生成红色的二嗪化合物(Fearon 反应),其颜色深浅与尿素含量成正比。
与同样处理的标准液在540nm 处比色,求得尿素含量。
由于二乙酰不稳定,一般由二乙酰一肟与强酸作用产生。
其反应式如下:CH 3C CCH 3O O +H 2OH +CH 3CCCH 3O N OH +NH 2OH二乙酰一肟二乙酰羟胺CH 3CCCH 3O O 二乙酰+C ON H 2NH 2尿素H +CH 3C C CH 3N N C O+H 2O2二嗪衍生物【器材】试管、试管架、微量加样器及吸量管、沸水浴、分光光度计。
【试剂】 1.酸性试剂在三角烧瓶中加去离子水约100ml ,然后缓慢加入浓硫酸44ml 、85%磷酸66ml ,冷至室温,加入氨基硫脲50mg 及硫酸镉(CdSO4·8H 2O)2g ,溶解后移入1L 容量瓶中,加去离子水至1L 。
置棕色瓶中,4℃可保存半年。
2.二乙酰一肟溶液称二乙酰一肟20g 溶于去离子水中并定容至1L 。
置棕色瓶中,4℃可保存半年。
3.尿素标准贮存液(100mmol/L)精确称取于60~65℃干燥恒重的尿素(MW 为 60.06)0.6g ,溶解于无氨去离子水,并定容至100ml ,加0.1g 叠氮钠防腐,4℃可保存6个月。
4.尿素标准应用液(5mmol/L)取5ml上述贮存液用无氨去离子水稀释至100ml。
【操作】取试管3支,按下表操作:表3-19 血清尿素测定加入物 (ml) 空白管标准管测定管血清--0.02尿素标准应用液-0.02 -去离子水0.02 --二乙酰一肟溶液0.5 0.5 0.5酸性试剂 5.0 5.0 5.0混匀,置沸水浴加热 12分钟,取出置冷水中冷却 5分钟,以空白管调零,在 540nm 波长处读取各管吸光度。
尿素的测定方法可分为两大类:一类直接法,尿素直接和某试剂作用,测定其产
物,最常见的为二乙酰一肟法;另一类是尿素酶法,用尿 素酶将尿素变成氨,
然后用不同的方法测定氨。 1)尿素酶法(直接法):尿素酶法利用尿素酶催
化尿素水解生成铵盐,铵盐可用纳氏试剂直接显色、酚-次氯酸盐显色或酶偶联
反 应显色。 尿素测定目前多采用尿素酶偶联法:用尿素酶分解尿素产生氨,
氨在谷氨酸脱氢酶的作用下使NADH氧化为NAD+时,通过34 0nm吸光度的降
低值可计算出尿素含量。 此反应是目前自动生化分析仪上常用的测定原理。
此外,尿素酶水解尿素产生氨的速率,也可用电导的方法进行测定,其电导的增
加 与氨离子浓度有关,反应只需要很短的时间,适用于自动分析仪。 2)酚
-
次氯酸盐显色法:尿素酶水解尿素生成氨和酚及次氯酸盐,在碱性环境中作用
形成对-醌氯亚胺,亚硝基铁氰化钠催化此反 应: 对-醌氯亚胺同另一分子
的酚作用,形成吲哚酚,它在碱性溶液中产生蓝色的解离型吲哚酚: 此反应
敏感,血清用量少(10μl),无需蛋白沉淀,一般用于手工操作测定中。
3)
纳氏试剂显色法:尿素经尿素酶作用后生成氨,氨可与纳氏试剂(HgI2.2KI的
强碱溶液)作用,生成棕黄色的碘化双汞铵。 尿素酶法的优点是反应专一,
特异性强,不受尿素类似物的影响,缺点是操作费时,且受体液中氨的影响。
⑵
二乙酰一肟法(直接法):尿素可与二乙酰作用,在强酸加热的条件下,生成
粉红色的二嗪化合物(Fearom反应),在54 0nm比色,其颜色强度与尿素含量
成正比。二乙酰不稳定,用二乙酰一肟代替,后者遇酸水解成二乙酰。 试
剂中加入Fe3+或Cd2+及硫氨脲,可提高灵敏度,增加显色稳定性,其中
Fe3+
和Cd2+有氧化作用,还能消除羟胺的 干扰作用。提高酸的浓度可增加灵敏度。
二乙酰一肟与尿素的反应不是专一的,与瓜氨酸也有显色。本法灵敏、简单,产
生的颜色稳定, 缺点是加热时有异味释放,一般临床已很少使用此方法。 尿
素测定用血清或血浆,体液中尿素的浓度常用尿素中含有的氮来表示,称为尿素
氮。如欲换算成尿素,可根据60g 尿素含有28g氮计算,即1g尿素相当于
0.467g
尿素氮,或是1g尿素氮相当于2.14g尿素。 正常参考值:血清尿素氮为
2.8-7.1mmol/L,相当于尿素1.8-6.8mmol/L。