全血细胞计数

1.仪器检测原理 定量地吸取血液取样，按规定的倍率稀释后，被送入各检测器容器，在检测

容器中，有孔眼状细孔，在其两侧的电极之间通有直流电。当浮游在稀释试样中的血球，通过细孔时，电极之间的直流电阻将发生变化。根据直流电阻的变化血球的大小作为电脉冲被检测出来。根据电脉冲的个数，可算出血球数。另外，可通过求该脉冲大小，就可按血球的大小描出粒度分布，并且，通过解析粒度分布，可得到各种解析数据。 1.1 WBC、HGB检测原理

（1）全血模式： 1) 血液通过吸液管被吸入旋转阀； 2) 由旋转阀定量的6μL的血液，用稀释液1.994ML被移送到WBC检测器的同时，添加WBC／HGB溶血剂1.0ML，成1∶500的稀释试样。这个状态下约使其反应10秒后，在白细胞膜保持原来的状态下，红细胞发生溶血，血小板收缩。同时血红蛋白变成红色的正铁化的血红蛋白。 3) WBC检测器中的被稀释／溶血后的试样中，约1ML被移送到HGB检测器。 4) WBC检测器中的试样，通过细孔被吸引500μL，这时，根据PC检测法，对血球通过细孔时的脉冲数进行计数。 5) 在HGB测量器中，由发光二极管照射波长为555NM的光，能照射到HGB细胞中的试样。此试样的浓度作为吸光率的测量，与试样进入前测量的只有稀释液时的吸光率相比较，以求出HGB（血红蛋白值）。 （2）稀释模式： 1) 事先用清洗液稀释成1∶26的血液试样，通过吸液管被吸入旋转阀。 2) 由旋转阀定量的78μL稀释血液，用稀释液1.922ML被送到WBC检测器的同时，添加WBC／HGB溶血剂1.0ML，成1∶1000的稀释试样。这个状态下约使其反应溶血，血小板收缩。同时血红蛋白变成红色的正铁化的血红蛋白。 3）WBC检测器中的被稀释溶血后的试样中，约1ML被移送到HGB检测器。 4）WBC检测器中的试样，通过细孔吸引500μL，这时，根据DC检测法， 对 血球通过细孔时的脉冲数进行计数。 5）在HGB测量器中，由发光二极管照射到HGB细胞中的试样。此试样的浓度作为吸光度被测量，与试样进入前测量的只有稀释液时的吸光度相比较，以求出HGB（血红蛋白值）。 大庆油田总医院集团乘风医院检验科 1. 全血细胞分析（血常规）检测

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1.2RBC、PLT测量原理 （1）全血模式： 1）血液通过吸液管被吸入旋转阀。 2）由旋转阀定量4.0μL血液，用稀释液1.996ML稀释成1∶500，作为稀释试样被移送到搅拌容器。（第一次稀释）。 3）接着，被稀释成1∶500的试样用旋转阀定量40μL，用稀释液1.960μL稀释成1∶25000，被移送到RBC/PLT检测器。（第二次稀释） 4）RBC／PLT检测器中的试样，通过细孔被吸取250μL。同时，RBC及PLT由DC检测法被计数。同时，HCT（红细胞比积），由红细胞脉波峰值检测法来求出。 （2）稀释模式： 1）用清洗液事先稀释1∶26的血液试样，用吸液管吸入旋转阀。 2）旋转阀定量2.08μL的稀释血液，用1.99792ML的稀释液被移到RBC／PLT检测器，稀释成1∶25000的稀释试样。 3）RBC/PLT检测器中的试样，通过细孔被吸引250μL，同时RBC及PLT根据DC检测法来计数。同时，HCT（红细胞比积值）根据红细胞脉冲波峰值检测法求出。 1.3 红细胞计算 红细胞常数（红细胞平均体积，红细胞平均血红蛋白量，红细胞平均血红蛋白浓度）根据RBC、HGB及HCT来求出。 （1） 细胞平均体积（MCV） 根据RBC及HCT，由下式来求出。 MCV（fL）＝HCT（%）／RBC（×106／μL）×10 （2）红细胞平均血红蛋白量（MCH） 根据RBC及HGB，由下式来求出。 MCH（pg）＝HGB（g/dL）／RBC（106／μL）×10 （3） 胞平均血红蛋白浓度（MCHC）根据HCT及HGB，由下式来求出。 MCHC（g/dL）＝HGB（g/dL）／HCT（%）×100 1.4 WBC的分类原理 （1）WBC粒度分布，采用4条辨别线划分3个区域，来辨别小型白细胞，中型白细胞，大型白细胞，低辨别线（LD）在30至60fL之间的最合适位置上自动决定，高鉴别线（UD）固定在300fL，用作粒度分布的异常监视。进一步求出（LD）和（UD）之间的范围内的WBC粒度分布的谷值，最初的谷值设为TROUGH辨别线1（T1），另一个谷值设为TROUGH辨别线2（T2）。 大庆油田总医院集团乘风医院检验科 1. 全血细胞分析（血常规）检测 质量手册 第3页、共13页 第 1 版、第3次修订 规程编写：戴涛 日期：2006-6-2 附件3：SOP文件、临检 审核：王崇波 日期：2011-3-30

1）LYM＝［W－SCC（小型白细胞数）］ 为辨别线（LD）到（T1）间的小型白细胞数，可认为与淋巴球数有很大的关联。 2）MXD＝［W－MCC（中型白细胞数）］ 为辨别线（T1）到（T2）间的中型白细胞数，可认为与单核细胞，嗜碱细胞、嗜酸细胞的总数有很大关联。 3）NEUT＝［W－LCC（大型白细胞数）］ 为辨别线（T2）以上的大型白细胞数，可认为与中性白细胞有很大关联。 4）LYM％［W－SCR（小型白细胞比率）］ 小型白细胞数相对于全部白细胞数（WBC）的比率。 5）MXD％［W－MCR（中型白细胞比率）］ 中型白细胞数相对于全部白细胞数（WBC）的比率。 6）NEUT％［W－LCR（大型白细胞比率）］ 大型白细胞数相对于全部白细胞数（WBC）的比率。 （2）白细胞粒度分布异常标志： WL：低辨别线（LD）的相对度数超过规定值。可认为是血小板凝聚或含有多数大型血小板的原因。 T1：当低的谷值辨别线不能决定时。 T2：当高的谷值辨别线不能决定时。 F1：小型白细胞分布异常。T1的相对度数超过规定值。 F2：中型白细胞分布异常。T1或T2的相对度数超过规定值。 F3：大型白细胞分布异常。T2的相对度数超过规定值。 WU：高辨别线（UD）的相对度数超过规定值。溶血不充分（对于溶血剂的 红细胞膜电极极强的标本等），或含有多数异常血球等的情况。 AG：为小于低辨别线（LD）的粒子数超过规定值时。可推测为发生血小板聚集。这对白细胞测量没有影响，但有可能造成血小板数偏低，而对血小板有异常标记。 1.5RBC/PLT粒度分布解析 (1) RBC粒度分布：RBC可由，分别在25—75fL、200—250 fL之间自动决定的低、高2个辨别线（LD）和（UD）之间的粒子数来求出。粒度分布，分别对各个辨别线上的相对度数是否有异常，是否有2个以上的峰值，分布幅的异常等进行检查。 1) 红细胞分布幅（RDW－CV），求出全粒度面积68.26％，度数时的点L1和 大庆油田总医院集团乘风医院检验科 1. 全血细胞分析（血常规）检测 质量手册 第4页、共13页 第 1 版、第3次修订 规程编写：戴涛 日期：2006-6-2 附件3：SOP文件、临检 审核：王崇波 日期：2011-3-30

L2，然后由下式来求出： RDW－CV（％）＝L2－L1／L2＋L1×100 2) RDW-SD：设峰值的高度为100％时，度数为20％处的分布幅作为红细胞分 布幅RDW－SD。 (2) RBC粒度分布异常标志： RL：在低辨别线（LD）处的相对度数超过规定值。可认为是燥声的影响、红细胞形态异常、血小板凝聚等原因。 RU：在高辨别线（LD）处的相对度数超过规定值。可认为是燥声的影响。 MP：具有2个以上粒度分布峰值时。 DW：设峰值的高度为100%时，20%度数的粒度分布幅出现异常。20%度数与粒 度分布不相交2次时标有此标记。 (3）PLT粒度分布： 血小板粒度分布解析，使用3条辨别线来进行。分别为2－6FL和12－30FL之间自动决定的2条辨别线（LD）和（UD），以及固定辨别线12FL。 1) 血小板分布幅（PDW）：设峰值高度为100％时20％度数处的分布幅为PDW。其单位为FL（=10-15L） 2) 平均血小板容积（MPV）：由下式来求出。 MPV（FL）＝PLT（％）／PLT（×103／μL）×1000 3) 大型血小板比率（P-LCR） 12FL辨别线以上的大型血小板的比率。作为12FL固定辨别线和（UD）之 间粒子数占（LD）之间的粒子数的比率来求出。 (4) PLT粒度分布异常标志： PL：低辨别线（LD）处的相对度数超过规定值时。可认为是燥声的影响。 PU：高辨别线（UD）处的相对度数超过规定值。可认为是血小板凝聚或燥声的影响。 MP：具有2个以上粒度分布峰值时。 DW：设峰值的高度为100%时，20%度数的粒度分布幅出现异常。20%度数与粒度分布不相交2次时标有此标记。 2.标本采集与处理 (1）受检者（体检对象或病人）的准备：吸烟、进食、运动和情绪激动等，均可影响血液成分。甚至一日之间，白细胞总数，嗜酸性粒细胞绝对值，淋巴细 胞各亚群的比例等均有一定的波动。服用某些药物可能明显干扰实验，因此采血前应询问是否服用过明显干扰药物，并尽可能在一定时间内避免干扰 大庆油田总医院集团乘风医院检验科 1. 全血细胞分析（血常规）检测