血常规(血细胞分析仪、直方图)
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白细胞直方图解析三分类的血液分析仪一般都以电阻抗原理进行白细胞分类,仪器依据大多数正常形态的白细胞细胞在溶血素作用后的大小排列,人为设置了4个辨别线,将白细胞直方图划分三个区域,来辨别小白细胞、中白细胞和大白细胞。
一.白细胞直方图的基本概念1.电阻抗原理根据血细胞是非导电的性质,悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒,在通过检测小孔时可引起电阻的变化为基础,对血细胞进行计数和体积测量。
2.直方图定义以血细胞体积大小为横座标,不同体积的细胞出现的相对频率为纵座标,来描绘细胞群体分布情况的曲线图形称作血细胞直方图。
3.白细胞直方图在计数白细胞时,要加入溶血素使红细胞破坏,此时白细胞膜受到破坏,细胞浆流失,使白细胞体积大小发现变化,因此需要强调的是在白细胞直方图上细胞排列的顺序不是细胞的原始大小,而是经溶血液修饰的细胞大小。
图1,加入溶血素前的细胞大小LYMGRANMOEOBASORBCPLT图2.为加入溶血素后的细胞大小(在直方图上所示)二.白细胞分类原理(一)辨别线的设置1.低辨别线(LD):在30至60fL之间自动寻找最适位置。
2.高辨别线(UD):固定在300fL ,用作粒度分布的异常监视。
3.辨别线1(T1):自动寻找从LD至UD之间白细胞分布曲线的波谷,第一波谷值设为“TROUGH”辨别线1(T1),4. 辨别线2(T2):自动寻找从LD至UD之间白细胞分布曲线的波谷,第二波谷值设为“TROUGH”辨别线2(T2)。
(二)辨别线的作用1.对正常形态的白细胞进行粒度分类从以下两图可以直观地看到白细胞分类情况。
WL与T1之间为W-SCR%,相当于LYM%;T1与T2之间为W-MCR%,相当于MEX%(单核细胞、嗜酸细胞和嗜碱细胞之和,)。
T2与WU之间为W-LCR%,相当于NEUT%)。
2.监视白细胞粒度分布的情况,提供异常分布信息白细胞粒度分布正常时,白细胞直方图显示三峰性分布,在低辨别线(LD)与高辨别线(UD)之间有两个谷值(T1)和(T2)。
白细胞数目 WBC 109/L
红细胞数目 RBC 1012
/L 血红蛋白 HGB g/L
血小板数目 PL T 109
/L ● 由直方图得出的结果:
淋巴细胞百分比 Lym% % 中间细胞百分比 Mid% % 中性粒细胞百分比 Gran% %
淋巴细胞百分比 =
100⨯++PG
PM PL PL
中间细胞百分比 = 100⨯++PG
PM PL PM
粒细胞百分比 = 100⨯++PG
PM PL PG
其中:
PL = 淋巴细胞区域内的细胞数
PM = 中间细胞区域内的细胞数 PG = 中性粒细胞区域内的细胞数
平均红细胞体积 MCV fL 红细胞分布宽度变异系数 RDW-CV %
1
)(2
--∑n X X
n
i
X /
红细胞分布宽度标准差 RDW-SD fL 20%出的直方图宽度
平均血小板体积 MPV fL
血小板分布宽度 PDW %
1
)(2
--∑n X X n
i
●
由计算得出的结果:
淋巴细胞数目 Lymph# 109/L 中间细胞数目 Mid# 109/L 中性粒细胞数目 Gran# 109/L 红细胞压积 HCT %
10
MCV
RBC HTC ⨯=
平均红细胞血红蛋白含量 MCH pg
10)
()
/(⨯=
L RBC L g HGB MCH
平均红细胞血红蛋白浓度 MCHC g/L
100(%)
)
/()/(⨯=
HTC L g HGB L g MCHC
血小板压积 PCT %
10
MPV
PLT PCT ⨯=。
全自动血细胞分析SOP一,检验目的及原理1,目的:用BC-3000 Plus全自动血细胞分析仪,在临床和实验室定量分析血液细胞,对人体的血液中三种有形成分(红细胞,白细胞,血小板)的19项参数和3个直方图进行对患者和健康人群来讲,观察有无各种原因引起的贫血,出血和失血,目前机体有无细菌及病毒感染,可筛查出各种血液病,如白血病,血小板减少性紫癜等。
2,原理:电阻法测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释,用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。
WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下,分别通过各自的计数微孔,流入管道,通过两个光电传感器,在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。
用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。
电极插在液体中计数微孔的两边,在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境,根据血细胞非传导性的性质,当有细胞通过计数微孔时,将引起阻抗的变化,阻抗变化的大小与细胞体积成正比。
WBC根据体积的大小,它有多种形态,由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同,WBC的体积大小会发生变化。
在一定的程序控制下,显示出WBC 的三分类——淋巴细胞、中间细胞(嗜酸+嗜碱+单核)和中性粒细胞。
被稀释的血样加入溶血剂后,红细胞溶解,释放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂结合形成复合物,用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强,用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较,得到血红蛋白浓度(空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态)。
二,标本1,标本种类:末梢血为200-300微升,静脉血2毫升。
2,采集标本容器及添加剂:容器:末梢血为一次性朔料试管,静脉血为真空采血管。
添加剂:不同实验使用不同的抗凝剂,不能互相代替。
血常规用EDTA-k2抗凝。
3,采集方法:毛细血管采集或静脉穿刺采集。
采集时间:患者随到随时采集。
4,标本运送:标本采集后,应及时送检。
5,标本接受:标本的编号与化验单上的编号要一致,清楚,正确及完整。
全自动血细胞分析SOP一,检验目的及原理1,目的:用BC-3000 Plus全自动血细胞分析仪,在临床和实验室定量分析血液细胞,对人体的血液中三种有形成分(红细胞,白细胞,血小板)的19项参数和3个直方图进行对患者和健康人群来讲,观察有无各种原因引起的贫血,出血和失血,目前机体有无细菌及病毒感染,可筛查出各种血液病,如白血病,血小板减少性紫癜等。
2,原理:电阻法测量的血样先用稀释液进行指定比例的稀释,用以测量WBC、RBC、PLT 和HGB等参数。
WBC、RBC 计数池的稀释标本在负压作用下,分别通过各自的计数微孔,流入管道,通过两个光电传感器,在这两个光电传感器之间的液量就是仪器分析计数的标本量。
用阻抗法测量WBC、RBC 和PLT 的体积分布和数目。
电极插在液体中计数微孔的两边,在计数微孔的两边周围建立了一个电场环境,根据血细胞非传导性的性质,当有细胞通过计数微孔时,将引起阻抗的变化,阻抗变化的大小与细胞体积成正比。
WBC根据体积的大小,它有多种形态,由于稀释液、溶血剂和溶血时间的不同,WBC的体积大小会发生变化。
在一定的程序控制下,显示出WBC 的三分类——淋巴细胞、中间细胞(嗜酸+嗜碱+单核)和中性粒细胞。
被稀释的血样加入溶血剂后,红细胞溶解,释放出血红蛋白,血红蛋白与溶血剂结合形成复合物,用波长525nm 的单色光在WBC计数池内测定此化合物的透过光强,用这个透过光强与空白状态的透过光强相比较,得到血红蛋白浓度(空白状态是指WBC计数池中只有稀释液的状态)。
二,标本1,标本种类:末梢血为200-300微升,静脉血2毫升。
2,采集标本容器及添加剂:容器:末梢血为一次性朔料试管,静脉血为真空采血管。
添加剂:不同实验使用不同的抗凝剂,不能互相代替。
血常规用EDTA-k2抗凝。
3,采集方法:毛细血管采集或静脉穿刺采集。
采集时间:患者随到随时采集。
4,标本运送:标本采集后,应及时送检。
5,标本接受:标本的编号与化验单上的编号要一致,清楚,正确及完整。
血常规直方图特点及临床意义作者:解放军总医院临床检验科乐家新王成彬丛玉隆传统的血细胞检查完全采用手工方法,不仅操作繁琐费时,而且由于多种原因,计数结果的准确性和精密度难以保证。
1958 年,库尔特采用电阻率变化与电子技术相结合的方法,发明了性能比较稳定的电阻抗法血细胞计数仪,开创了血细胞分析的新纪元。
20 世纪90 年代以来,随着各种高新技术在血细胞分析仪中的应用,使其检测原理不断完善,检测水平不断提高,测量参数不断增加,各种类型的血细胞分析仪已在国内外各医院广泛使用。
但从根本上讲,其检测原理大致分为两部分,即电阻抗法与光散射法。
电阻抗法血细胞计数原理是根据血细胞非传导性的性质,以对电解质溶液中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行血细胞计数和体积测定。
光散射法主要应用于白细胞分析,其检测原理就是利用多项技术(如射频、细胞化学染色和流式细胞术) 联同时检测一个白细胞,综合分析实验数据,得出较为准确的白细胞计数和五分类结果。
血细胞分析仪检测血标本时,除给出细胞数量外,还提供相应的细胞体积分布图。
根据仪器检测的原理不同,可将血细胞分布图形分为直方图和散点图。
直方图是血细胞分析仪用电阻抗原理对血细胞进行检测,以细胞体积为横坐标,细胞的相对数量为纵坐标,表示某一种细胞数量分布情况,可反映细胞体积大小异质性。
包括白细胞、红细胞和血小板三种直方图。
散点图是血细胞分析仪用多项技术(激光、射频及化学染色)联合使用对白细胞进行检测后得到的各类白细胞的散点状分布图。
由于电阻抗法计数细胞的原理是基于细胞在测试系统中产生的脉冲大小与仪器内设定的阈值比较而得出的数据,每个细胞检测时显示的脉冲大小除与细胞本身的大小有关外,还与溶血剂的种类、浓度、用量、溶血时间,稀释液的渗透压、离子强度、pH值、电导率,仪器出厂时仪器内固定的孔电流和脉冲增益等因素有关。
换言之,上述任一参数的变化,均可导致脉冲的变化,致使细胞计数和分类计数的错误。
如何全面分析血常规检验报告单作者:乔永东来源:《学习与科普》2019年第24期随着我国医疗卫生改革工作的深化,各类血细胞分析仪在临床上有了广泛应用,在基层医院已经实现了全面普及,能够为疾病的诊断和治疗提供重要支撑和依据。
但是当前很多临床医生在血常规检查方面仅注重几项检查结果,未能对其他非主要指标以及直方图作用有足够重视,那么该如何全面分析血常规检验报告单呢?1.白细胞计数和白细胞直方图当前医学检查中所使用的血液分析仪不仅可给出细胞数据结果,同时还能够提供细胞体积分布图形,能够表示细胞群体分布,其横坐标为细胞体积大小,纵坐标为不同体积细胞出现相对频率,称之为血细胞直方图,能够显示细胞群细胞分布情况以及平均细胞体积等。
1.1 白细胞计数当机体出现异常细胞、未成熟细胞时,检验单白细胞计数会出现报警信号R,可直接观察到异常细胞区域,如果检验单显示Neu、Neu%增多,需要判断是否出现化脓性细胞感染等,如果显示Neu、Neu%减少,则需要考虑传染病(如伤寒、副伤寒、流感)、血液病(如典型的再障、少数急性白血病)及慢性理化损伤(如电离辐射X线)等。
检验单出现Lym、Lym%增多时,可能会出现细菌或病毒所致急性传染病、急性淋巴细胞白血病等,检验单出现Lym、Lym%减少时,可能接触放射线或者使用促肾上腺皮质激素等药物。
1.2 白细胞直方图白细胞直方图形态为“两峰一谷”,可根据白细胞直方图对某种疾病可能性展开初步判断,当有异常直方图出现时,可能某些部位出现警报信号。
异常直方图曲线形态改变,比如如果淋巴细胞峰左侧区域异常,可能存在血小板聚集、异型淋巴细胞等。
淋巴细胞峰右移,可能存在有急、慢性淋巴细胞白血病等。
2.红细胞计数和红细胞直方图2.1 红细胞计数红细胞和血红蛋白量减少见于临床上各种原因的贫血。
当前临床上红细胞监测在贫血的检测和诊断方面发挥着重要作用,不同病因所引起的贫血,在参数变化方面存在明顯区别。
MCV、MCH、MCHC等指标能够从不同角度反映患者红细胞病理变化,比如MCV、MCH增高,MCHC正常,属于大细胞性贫血。