高考生物真题按知识点分类汇编 制备和应用固定化酶

04酶和ATP1.（2024·全国甲卷）ATP可为代谢提供能量，也参与RNA的合成，ATP结构如图所示，图中～表示高能磷酸键，下列叙述错误的是（）A.ATP转化为ADP可为离子的主动运输提供能量B.用α位32P标记的ATP可以合成带有32P的RNAC.β和γ位磷酸基团之间的高能磷酸键不能在细胞核中断裂D.光合作用可将光能转化为化学能储存于β和γ位磷酸基团之间的高能磷酸键2.（2024·河北高考）下列关于酶的叙述，正确的是（）A.作为生物催化剂，酶作用的反应物都是有机物B.胃蛋白酶应在酸性、37℃条件下保存C.醋酸杆菌中与发酵产酸相关的酶，分布于其线粒体内膜上D.从成年牛、羊等草食类动物的肠道内容物中可获得纤维素酶3.（2024·广东卷）现有一种天然多糖降解酶，其肽链由4段序列以Ce5-Ay3-Bi-CB方式连接而成。

研究者将各段序列以不同方式构建新肽链，并评价其催化活性，部分结果见表。

关于各段序列的生物学功能，下列分析错误的是()肽链纤维素类底物褐藻酸类底物W₁W₂S₁S₂Ce5-Ay3-Bi-CB+++++++++ Ce5+++——Ay3-Bi-CB——+++++ Ay3——+++++ Bi————CB————组1组2组3组4组5组6注：—表示无活性，+表示有活性，+越多表示活性越强。

A.Ay3与Ce5催化功能不同，但可能存在相互影响B.Bi无催化活性，但可判断与Ay3的催化专一性有关C.该酶对褐藻酸类底物的催化活性与Ce5无关D.无法判断该酶对纤维素类底物的催化活性是否与CB相关4.（2024·6月浙江卷）脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。

脲酶被去除镍后失去活性。

下列叙述错误的是（）A.镍是组成脲酶的重要元素B.镍能提高尿素水解反应的活化能Cl为唯一氮源的培养基生长繁殖C.产脲酶细菌可在以NH4D.以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌5.(2024·安徽）细胞呼吸第一阶段包含一系列酶促反应，磷酸果糖激酶1(PFK1）是其中的一个关键酶。

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学问点19 生物技术实践1.(2021·广东高考·T3)关于DNA的试验,叙述正确的是( )A.用兔的成熟红细胞可提取DNAB.PCR的每个循环一般依次经过变性—延长—复性三步C.DNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物D.用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质呈红色【解题指南】(1)题干关键词:提取DNA、PCR、二苯胺试剂、甲基绿。

(2)关键学问:DNA的提取与检测方法、PCR反应过程、甲基绿的作用。

【解析】选C。

本题主要考查了试验的原理、选材以及试剂的使用。

兔为哺乳动物,其成熟的红细胞中无细胞核,不能从中提取DNA,故A项错误;PCR每次循环都可以分为变性—复性—延长三步,故B项错误;在沸水浴的条件下,DNA遇二苯胺变成蓝色,故C项正确;甲基绿使DNA呈现绿色,不论是细胞核还是细胞质,只要含有DNA,都会呈绿色,故D项错误。

2.(2021·江苏高考·T11)下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,错误的是( )A.固定化酶的主要目的是实现酶的重复利用B.溶解氧交换受阻是固定化酶应用的重要限制因素C.固定化细胞用于生产能分泌到细胞外的产物D.凝胶与被包埋细胞之间不是通过共价键结合【解析】选B。

本题主要考查固定化酶和固定化细胞。

固定化酶制作的目的是能够顺当从发酵产物中把酶分别出来,并能够使酶反复使用,故A项正确;溶解氧交换受阻会影响细胞呼吸,是固定化细胞应用的重要限制因素,故B项错误;固定化细胞用于生产、获得细胞的代谢产物,故C项正确;将细胞包埋在多孔载体内部而制成固定化细胞,细胞并不与凝胶通过共价键结合,故D项正确。

3.(2021·江苏高考·T17)关于“腐乳的制作”试验,下列叙述错误的是( )A.将腐乳坯积累起来会导致堆内温度上升,影响毛霉生长B.腐乳坯若被细菌污染,则腐乳坯表面会消灭黏性物C.勤向腐乳坯表面喷水,有利于毛霉菌丝的生长D.装坛阶段加入料酒,可有效防止杂菌污染【解析】选C。

五年2018-2022高考生物真题按知识点分类汇编89-生物技术工程-酶的研究及应用（含解析）一、单选题1．（2022·湖南·高考真题）洗涤剂中的碱性蛋白酶受到其他成分的影响而改变构象，部分解折叠后可被正常碱性蛋白酶特异性识别并降解（自溶）失活。

此外，加热也能使碱性蛋白酶失活，如图所示。

下列叙述错误的是（）A．碱性蛋白酶在一定条件下可发生自溶失活B．加热导致碱性蛋白酶构象改变是不可逆的C．添加酶稳定剂可提高加碱性蛋白酶洗涤剂的去污效果D．添加碱性蛋白酶可降低洗涤剂使用量，减少环境污染2．（2022·浙江·统考高考真题）用果胶酶处理草莓，可以得到比较澄清的草莓汁；而利用稀盐酸处理草莓可以制得糊状的草莓酱。

果胶酶和盐酸催化果胶水解的不同点在于（）A．两者催化果胶水解得到的产物片段长度不同B．两者催化果胶水解得到的单糖不同C．两者催化果胶主链水解断裂的化学键不同D．酶催化需要最适温度，盐酸水解果胶不需要最适温度3．（2020·江苏·统考高考真题）甲、乙两个实验小组分别进行了“酵母细胞固定化技术”的实验，结果如下图所示。

出现乙组实验结果的原因可能为（）A．CaCl2溶液浓度过高B．海藻酸钠溶液浓度过高C．注射器滴加速度过慢D．滴加时注射器出口浸入到CaCl2溶液4．（2020·浙江·统考高考真题）下列关于淀粉酶的叙述，错误的是A．植物、动物和微生物能产生淀粉酶B．固相淀粉酶比水溶液中的淀粉酶稳定性更高C．枯草杆菌α-淀粉酶的最适温度比唾液淀粉酶的高D．淀粉被淀粉酶水解形成的糊精遇碘-碘化钾溶液不显色5．（2018·江苏·统考高考真题）下列关于酵母细胞固定化实验的叙述，正确的是A．用温水使海藻酸钠迅速溶解，待其冷却到室温后用于包埋细胞B．进行包埋时，用于悬浮细胞的CaCl2溶液浓度要适宜C．注射器(或滴管)出口应尽量贴近液面以保证凝胶珠成为球状D．包埋酵母细胞的凝胶珠为淡黄色半透明状，并具有一定的弹性6．（2019·江苏·统考高考真题）下列关于加酶洗涤剂的叙述，错误．．的是A．加酶洗衣粉中一般都含有酸性脂肪酶B．用加酶洗涤剂能减少洗涤时间并节约用水C．含纤维素酶洗涤剂可以洗涤印花棉织物D．加酶洗衣粉中的蛋白酶是相对耐高温的二、多选题7．（2018·江苏·统考高考真题）下列关于加酶洗衣粉的叙述，错误的是A．洗衣粉中添加的酶通常是由微生物发酵生产而来B．洗衣粉中的蛋白酶通常会将添加的其他酶迅速分解C．在50 ℃热水中用加酶洗衣粉洗衣时，其中的酶会迅速失活D．加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不会影响其中酶的活性三、综合题8．（2022·湖南·高考真题）黄酒源于中国，与啤酒、葡萄酒并称世界三大发酵酒。

专题七：生物技术实践——（2019—2023）五年高考生物学真题专项汇编【老高考版】1.[2023年全国甲卷]为了研究蛋白质的结构与功能，常需要从生物材料中分离纯化蛋白质。

某同学用凝胶色谱法从某种生物材料中分离纯化得到了甲、乙、丙3种蛋白质，并对纯化得到的3种蛋白质进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。

已知甲的相对分子质量是乙的2倍，且甲、乙均由一条肽链组成。

回答下列问题。

（1）图中甲、乙、丙在进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时，迁移的方向是_________（填“从上向下”或“从下向上”）。

（2）图中丙在凝胶电泳时出现2个条带，其原因是_________。

（3）凝胶色谱法可以根据蛋白质_________的差异来分离蛋白质。

据图判断，甲、乙、丙3种蛋白质中最先从凝胶色谱柱中洗脱出来的蛋白质是_________，最后从凝胶色谱柱中洗脱出来的蛋白质是_________。

（4）假设甲、乙、丙为3种酶，为了减少保存过程中酶活性的损失，应在_________（答出1点即可）条件下保存。

2.[2022年全国乙卷]化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。

用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。

为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体生长和S产量的影响，结果见表。

（1）通常在实验室培养微生物时，需要对所用的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有（4）若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。

3.[2021年全国乙卷]工业上所说的发酵是指微生物在有氧或无氧条件下通过分解与合成代谢将某些原料物质转化为特定产品的过程。

利用微生物发酵制作酱油在我国具有悠久的历史。

某企业通过发酵制作酱油的流程示意图如下。

回答下列问题：（1）米曲霉发酵过程中，加入大豆、小麦和麦麸可以为米曲霉的生长提供营养物质，大豆中的__________可为米曲霉的生长提供氮源，小麦中的淀粉可为米曲霉的生长提供_____________。

2020年高考生物专题复习：生物技术实践一、考点突破（1）微生物的分离和培养（2）某种微生物数量的测定（3）微生物对培养基的选择利用（4）利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用（5）酶的存在与简单制作方法（6）酶活力测定的一般原理和方法（7）酶在食品制造和洗涤等方面的应用（8）制备和应用固定化酶（9）从生物材料中提取某些特定的成分（10）运用发酵技术加工食品的基本方法（11）测定食品加工中可能产生的有害物质（12）植物的组织培养（13）蛋白质的提取和分离（14）PCR技术的基本操作和应用二、重难点提示纵观近几年的高考，本专题考点主要集中在微生物的培养和利用、植物的组织培养、DNA的粗提取和PCR技术操作，诸如血红蛋白的提取与分离、酶技术以及植物有效成分的提取等知识点是新课标所增加的知识点，在今后的高考试题中必然会有体现，复习时也应加以重视。

专家点拨一、本讲内容框架图二、重点知识点拨（一）微生物的培养与应用1. 培养基（1）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

（2）培养基类型①按培养基的物理性质可分为固体培养基和液体培养基两种，其中固体培养基用于菌种分离、鉴定、菌落计数等。

而液体培养基常用于科研或工业生产等。

长有菌落的琼脂固体培养基液体培养基②按培养基的功能可分为选择培养基和鉴别培养基。

③按照人们对培养基中成分的了解程度可分为天然培养基和合成培养基两种。

说明：代谢类型不同的微生物，对培养基营养成分的要求不同，如自养型微生物可以利用无机碳源，而异养型微生物则必须利用有机碳源。

不论代谢类型如何，微生物对营养物质的要求都包括碳源、氮源、水、无机盐、生长因子五类。

2. 关于无菌技术（1）实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌；常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、化学药剂消毒。

对不同的对象需采用不同的消毒或灭菌方法。

历年(2020-2024)全国高考生物真题分类(酶和ATP)汇编 〖2024年高考真题〗(2024年1月浙江省)17. 红豆杉细胞内的苯丙氨酸解氨酶（PAL）能催化苯丙氨酸生成桂皮酸，进而促进紫杉醇的合成。

低温条件下提取PAL 酶液，测定PAL 的活性，测定过程如下表。

下列叙述错误的是（）A. 低温提取以避免PAL 失活B. 30℃水浴1小时使苯丙氨酸完全消耗C. ④加H2O补齐反应体系体积D. ⑤加入HCl溶液是为了终止酶促反应（2024年高考全国甲卷）2. ATP可为代谢提供能量，也参与RNA的合成，ATP结构如图所示，图中～表示高能磷酸键，下列叙述错误的是（）A. ATP转化为ADP可为离子的主动运输提供能量B. 用α位32P标记的ATP可以合成带有32P的RNAC. β和γ位磷酸基团之间的高能磷酸键不能在细胞核中断裂D. 光合作用可将光能转化为化学能储存于β和γ位磷酸基团之间的高能磷酸键（2024年广东省）15. 现有一种天然多糖降解酶，其肽链由4段序列以Ce5-Ay3-Bi-CB方式连接而成。

研究者将各段序列以不同方式构建新肽链，并评价其催化活性，部分结果见表。

关于各段序列的生物学功能，下列分析错误的是（ ）纤维素类底物 褐藻酸类底物肽链W1 W2 S1 S2Ce5-Ay3-Bi-CB + +++ ++ +++Ce5 + ++ — —Ay3-Bi-CB — — ++ +++Ay3 — — +++ ++Bi — — — —CB — — — —注：—表示无活性，+表示有活性，+越多表示活性越强。

A. Ay3与Ce5 催化功能不同，但可能存在相互影响B. Bi无催化活性，但可判断与Ay3的催化专一性有关C. 该酶对褐藻酸类底物的催化活性与Ce5无关D. 无法判断该酶对纤维素类底物的催化活性是否与CB相关〖2022年高考真题〗1．（2022∙江苏∙统考高考真题）下列关于细胞代谢的叙述正确的是（）A．光照下，叶肉细胞中的ATP均源于光能的直接转化B．供氧不足时，酵母菌在细胞质基质中将丙酮酸转化为乙醇C．蓝细菌没有线粒体，只能通过无氧呼吸分解葡萄糖产生ATPD．供氧充足时，真核生物在线粒体外膜上氧化[H]产生大量ATP2．（2022∙重庆∙统考高考真题）植物蛋白酶M和L能使肉类蛋白质部分水解，可用于制作肉类嫩化剂。

亲爱的同学：这份试卷将再次记录你的自信、沉着、智慧和收获，我们一直投给你信任的目光……学习资料专题第4节固定化酶的制备和应用课时过关·能力提升一、基础巩固1.酶制剂、固定化酶已经广泛地应用于各个领域,下列有关叙述错误的是( )A.用乳糖酶分解乳糖,可以提高牛奶的可消化性B.制备固定化酶的常见方法之一是凝胶包埋法C.固定化酶固定时可能会造成酶的损伤而影响活性D.检测牛奶中乳糖的分解时需用双缩脲试剂答案:D解析:检测牛奶中乳糖的分解时应用斐林试剂。

2.下列不属于固定化酶在利用时的特点的是( )A.有利于酶与产物分离B.可以被反复利用C.能自由出入依附的载体D.一种固定化酶一般情况下不能催化一系列酶促反应答案:C解析:固定化酶在利用时被固定在一定的空间内,不能自由出入。

3.下列关于固定化酶技术的叙述,正确的是( )A.固定化酶技术就是固定反应物,使酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B.固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C.固定化酶中的酶无法重复利用D.固定化酶技术是将酶固定在一定空间内的技术答案:D解析:固定化酶技术是利用物理或化学的方法将酶固定在一定空间内的技术,其优点是酶被固定在一定装置内可重复利用,不足是无法同时催化一系列酶促反应。

4.研究认为,用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。

如将从大肠杆菌中得到的磷酸二酯酶固定到尼龙膜上制成制剂,可用于降解残留在土壤中的有机磷农药,与用微生物降解相比,其起作用不需要适宜的( )A.温度B.pHC.水分D.营养答案:D解析:固定化酶与微生物相比较,它的活性发挥不需要营养。

5.下列有关酶的制备和应用的叙述,正确的是( )A.酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶B.透析和酸解等方法常用于酶的分离与纯化C.蚕丝织物能使用添加蛋白酶的洗衣粉进行洗涤D.多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层答案:A解析:酸解法不能用于酶的分离与纯化。

多酶片中的胃蛋白酶应位于片剂的最表层。

2021年高中生物 3.2制备和应用固定化酶练习苏教版选修1答案 C3．下面制备固定化酵母菌细胞的正确步骤是 ( )。

①配制饱和硼酸—氯化钙溶液②制备海藻酸钠溶液③海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合④酵母菌细胞活化⑤固定化酵母菌细胞A．①②③④⑤B．④①③②⑤C．④⑤②①③D．④①②③⑤解析制备固定化酵母细胞应先加入蒸馏水进行酵母细胞活化，然后配制饱和硼酸­氯化钙溶液，再制备海藻酸钠—酵母细胞胶液，并将其以恒定的速度滴入预先盛有50 mL 饱和硼酸—氯化钙溶液的烧杯中，同时搅拌令凝胶珠形成。

答案 D4．固定化细胞常用包埋法固定，原因是 ( )。

A．包埋法固定操作最简便B．包埋法对酶活性的影响最小C．包埋法固定具有普遍性D．细胞体积大，难以被吸附或结合解析因为细胞个体大，而酶分子很小，个体大的细胞难以被吸附或结合，而个体小的酶容易从包埋材料中漏出。

答案 D5．下列有关固定化酶和固定化细胞的说法正确的是 ( )。

A．某种固定化酶的优势在于能催化系列生化反应B．固定化细胞技术一次只能固定一种酶C．固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可在细胞外起作用D．固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性迅速下降解析酶具有专一性，一种酶固定后也不可能催化系列生化反应；固定化细胞技术固定的是一系列酶；固定化酶和固定化细胞都能反复使用，若条件适宜，一般不会出现酶的活性下降问题。

答案 C二、非选择题(共30分)6．(13分)右图为固定化酶的反应柱示意图，其中①为反应柱，②为固定化酶，③为分布着小孔的筛板，请据图回答下面的问题。

(1)下列关于固定化酶中用到的反应柱理解正确的是( )。

A．反应物和酶均可自由通过反应柱B．反应物和酶均不能通过反应柱C．反应物能通过，酶不能通过D．反应物不能通过，酶能通过(2)与一般酶制剂相比，固定化酶的突出优点是________，固定化细胞的优点是_______________________________________________________________。

考点二：酶的应用基础知识一、果汁中的果胶和果胶酶1.果胶(1)果胶的成分与存在:果胶是植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一,它由半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯组成。

(2)果胶与果汁加工:果胶不仅影响出汁率,还会使果汁浑浊。

2.果胶酶(1)来源:黑曲霉、苹果青霉等。

(2)组成:果胶酶并不是特指某一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,主要包括果胶酶和果胶甲酯酶。

(3)作用:将果胶分解成可溶性的分子使出汁率提高,也使浑浊的果汁变得澄清。

3.果胶酶的应用(1)水果加工业:水果中的果胶经果胶酶水解后,可降低果汁的粘度,有助于压榨;在葡萄酒酿造中加入果胶酶能起到澄清作用,还可促使葡萄汁中的酒石酸发生沉淀;果胶酶可用于桔子脱囊衣,制造果粉和低糖果冻。

(2)饲料工业:果胶酶与纤维素酶、半纤维素酶等配合,可降解植物细胞壁中的果胶和纤维,促使淀粉、脂类、维生素和蛋白质等释放出来,从而提高饲料的营养价值;果胶酶可降低饲料的粘度,促进饲料在动物消化道内的消化吸收。

二、α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测1.固定化酶(1)形成:将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种⑨介质上,使之成为⑩不溶于水而又有 酶活性的制剂。

(2)特性:与游离酶相比较, 稳定性好,与底物和产物容易分离,易于控制,能反复多次使用;便于 运输和贮存,有利于自动化生产。

2.固定化酶的制作方法:由酶的性质和载体特性所决定,主要包括吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。

3.α-淀粉酶水解作用的检测重点难点一、果汁中的果胶和果胶酶1.探究利用苹果或山楂匀浆制作果汁的最佳条件的实验(1)实验原理果胶 半乳糖醛酸+半乳糖醛酸甲酯。

果胶酶的活性受温度(或pH)的影响,处于最适温度(或pH)时活性最高。

果肉的出汁率、果汁的澄清度与果胶酶的活性大小呈正相关。

果胶不溶于乙醇。

(2)实验流程第一步制匀浆第二步烧杯A 烧杯B5 g匀浆 5 g匀浆10 mL黑曲霉提取液10 mL水间歇搅拌20~30 min第三步试管1 试管2 试管3 试管4A烧杯混合物4 mL A烧杯混合物4 mL B烧杯混合物4 mL B烧杯混合物4 mL 沸水浴不加热沸水浴不加热第四步加入95%酒精4 mL2.影响果汁产量的物质及处理方法(1)影响果汁产量的物质:纤维素和果胶是组成水果的重要物质,这两种物质的存在使制作果汁时存在两个问题:一是果肉的出汁率低,制作耗时长;二是榨取的果汁浑浊、粘度高、容易发生沉淀。

制备和应用固定化酶（2012上海）9．酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有A．热稳定性 B．催化高效性 C．催化特异性 D．可反复使用性【答案】D【解析】固定化酶指通过物理或化学的方法，将水溶性酶与非水溶性载体结合，既能与反应物接触又能与产物分离，与直接使用酶相比，除催化效率高、特异性强外，还可反复使用酶；酶的热稳定性一般都不强。

故D正确。

【试题点评】本题考查了固定化酶与直接使用酶的区别及酶的特性，重点在于理解两者的区别，找出固定化酶依据的基本原理，难度中等。

（2012江苏）17.下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误．．的是（）A.从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小B. 作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药C. 尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌【答案】C【解析】化学结合法可能影响酶的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影响酶的分子结构，A正确；消化酶在消化道内起作用，B正确；尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开，而不能再次使用，C错；固定化酵母细胞在凝胶珠中，用无菌水冲洗可洗去CaCl2和表面的杂菌，D正确【试题点评】本题考查酶的应用，涉及固定化酶中的原理、操作和应用等知识。

属于了解层次。

（2011上海）38．通过酶工程可将联苯水解酶用于生产实践。

酶工程通常包括酶的生产、＿＿＿＿＿＿＿、酶的固定化和酶的应用等方面。

酶固定化的好处是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

【答案】酶的分离纯化便于重复利用能连续进行反应（2010山东）34. 【生物—生物技术实践】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。

用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。

课时跟踪检测（八) 固定化酶的制备和应用一、选择题1．下列叙述不属于固定化酶特点的是（）A．酶固定化后,活性提高B．酶对酸、碱、温度敏感，易失活C．在溶液中直接使用酶,难以回收,成本高D．固定化酶使酶既可催化反应物,又易与产物分离2．下列关于固定化技术的叙述,不．正确的是( )A．从操作角度来考虑，固定化细胞比固定化酶更容易B．固定化细胞比固定化酶对酶活性影响更小C．固定化细胞固定的是一种酶D．将微生物的发酵过程变成连续的酶反应应选择固定化细胞3．下图所示的固定化方式中，适宜固定化酶的是（)A．①②③ B．①②C．②③ D．①③4．下列关于固定化细胞的说法错误的是( )A．固定化细胞技术是利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间内的技术B．固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可在细胞外起作用C．固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性迅速下降D．包埋法常用的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等5．下列关于制备固定化酵母细胞的操作，正确的是（）A．制备好海藻酸钠溶液后，要立即将其与酵母细胞混合以防凝固B．制备固定化酵母细胞的过程中可能用到注射器C．以恒定的速度把混合液注射到CaSO4溶液中D．凝胶珠在硼酸。

氯化钙溶液中应浸泡10 min左右6．（江苏高考)下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是（）A．从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小B．作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药C．尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D．将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌7．下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是（)A．在固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧B．利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件C．利用固定化酵母细胞进行发酵,糖类的作用只是作为反应底物D．固定化酵母细胞时，如果海藻酸钠浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母菌细胞数目少8．下列有关固定化酶技术和固定化细胞技术的叙述正确的是（）A．固定化酶和固定化细胞的目的是限制酶与反应物接触，控制反应速率B．酶更适合包埋法固定化，细胞更适合吸附法固定化C．加酶洗衣粉是含有固定化酶制剂的洗衣粉D．固定化细胞对酶的活性影响小，与固定化酶相比应用更广泛二、非选择题9．固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。

专题27 生物技术在其他方面的应用考点1 制备和应用固定化酶1.(2013江苏单科,6,2分)下列有关固定化酶和固定化细胞的叙述,正确的是( )A.可用包埋法制备固定化酵母细胞B.反应产物对固定化酶的活性没有影响C.葡萄糖异构酶固定前后专一性不同D.固定化细胞可以催化各种反应底物的一系列反应答案 A2.(2013浙江自选,17,10分)利用紫甘薯制酒可提高其附加值。

请回答:(1)为提高紫甘薯的利用率,工厂化生产时,可加入果胶酶和淀粉酶,其中果胶酶可来自等微生物。

由于酶在水溶液中不稳定,因此常将酶固定在某种介质上制成。

(2)果胶酶可将紫甘薯匀浆中的果胶水解成。

A.半乳糖醛酸和葡萄糖B.半乳糖和果糖C.半乳糖醛酸甲酯和果糖D.半乳糖醛酸和半乳糖醛酸甲酯(3)紫甘薯匀浆流经α-淀粉酶柱后,取适量流出的液体,经脱色后加入KI-I2溶液,结果液体呈红色。

表明该液体中含有。

A.淀粉B.糊精C.麦芽糖D.葡萄糖(4)在发酵前,为使酵母菌迅速发生作用,取适量的干酵母,加入温水和。

一段时间后,酵母悬液中会出现气泡,该气泡内的气体主要是。

将酵母菌接种到待发酵液后,随发酵的进行,酵母菌在条件下产生了酒精和二氧化碳。

(5)下图表示发酵液pH对酒精浓度的影响。

据图判断,最佳pH值是。

答案 (10分)(1)黑曲霉(或苹果青霉) 固定化酶(2)D(3)B(4)蔗糖 CO2无氧(5)4.7考点2 蛋白质的分离考点3 PCR技术的基本操作和应用3.(2013江苏单科,22,3分)小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应,为了克服这个缺陷,可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。

下列相关叙述正确的是(多选)( )A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶D.一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞答案 BD。

考点74 固定化酶和固定化细胞技术1．利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例（1）高果糖浆的生产须要葡萄糖异构酶。

（2）葡萄糖异构酶的优点：稳定性好、可以持续发挥作用。

（3）在生产中干脆运用酶的缺点：无法回收，造成奢侈。

2．固定化酶的反应如图为固定化酶的反应柱示意图运用固定化酶技术，将这种酶（葡萄糖异构酶）固定在一种颗粒状的载体上，再将这些酶颗粒装到一个反应柱内，柱子底端装上分布着很多小孔的筛板。

酶颗粒无法通过筛板上的小孔，而反应溶液却可以自由出入。

生产过程中，将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入，使葡萄糖溶液流过反应柱，与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成果糖，从反应柱的下端流出。

反应柱能连续运用半年，大大降低了生产成本，提高了果糖的产量和质量。

3．固定化细胞技术（1）概念讲解固定化细胞技术概念：利用物理或化学方法将细胞固定在肯定空间的技术。

细胞中含有一系列酶，在细胞正常生命活动的过程中，通过代谢产生所须要的代谢产物。

（2）将酶或细胞固定化的方法①包埋法：将酶（或细胞）包埋在微小网格里。

②化学结合法：将酶（或细胞）相互连接起来。

③吸附法：将酶（或细胞）吸附在载体表面上。

4．固定化酶和固定化细胞的联系与区分（1）联系：应用相同，都能催化某些反应。

（2）区分①固定化细胞技术操作简单，成本低，简单回收；②固定化细胞技术对酶活性影响更小；③固定化细胞固定的是一系列酶；由于大分子难以通过细胞膜，固定化细胞的应用有肯定的限制。

（3）固定化酶和固定化细胞常用的载体材料固定化酶和固定化细胞常用的载体材料有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等，其共同的特点是不溶于水的多孔性载体。

5．制备固定化酵母细胞（1）酵母细胞的活化活化：让处于休眠状态的微生物重新复原正常的生活状态。

本质：加快新陈代谢；方法：加入适量的水。

步骤：取1 g干酵母，放入50 mL的小烧杯中，加入蒸馏水10mL，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合匀称，成糊状，放置1h左右使其活化。

酶的研究和应用【学习目标】1、了解果胶酶的组成和作用。

2、理解检测酶活性的原理。

（重点）3、简述探究温度和PH对果胶酶活性的影响及其最适值的实验。

（重、难点）4、说出加酶洗衣粉的洗涤原理。

5、说明固定化细胞和固定化酶的作用和原理。

（重点）6、掌握制备固定化酵母细胞和利用其进行酒精发酵的方法。

（重、难点）【要点梳理】要点一、果胶酶在果汁生产中的应用【高清课堂：酶的研究和应用417460课题1：基础知识】1、实验原理（1）果胶是植物细胞壁以及胞间层中的主要成分，也是植物汁液中的主要成分。

果胶可结合大量的水分，将植物细胞粘合在一起，降低植物组织的分散性。

若去掉果胶，细胞壁被瓦解，就会使果泥中的植物组织块变得松散，产生更多的果汁，增加出汁率（2）果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁澄清（3）果胶酶催化果胶分解需要适宜的温度和pH（4）果胶不溶于酒精，因而可用于初步鉴定果胶被分解多少要点诠释：果胶酶和纤维素酶的比较：果胶酶的组成是多聚半乳糖醛酸酶，果胶分解酶和果胶酯酶，其化学本质是蛋白质，作用是催化果胶成为可溶性半乳糖醛酸；纤维素酶的组成是C1酶，C X酶和葡萄糖苷酶，其化学本质也是蛋白质，作用是催化纤维素成为纤维二糖，然后再成为葡萄糖。

果胶酶和纤维素酶都是复合酶，并不特指某一种酶，而是一类酶的总称。

2、酶的活性与影响酶活性的因素（1）酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力。

酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示。

在科学研究与工业生产中，酶反应速度用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。

（2）影响酶活性的因素①温度：温度对酶活性的影响是通过影响酶（蛋白质）的稳定性和分子（离子等）运动速率的综合作用的结果。

低温使酶的活性降低，高温能使酶失活。

酶都有一个最适温度。

②pH：酶分子上有许多酸性、碱性氨基酸的侧链基团，这些基团随着pH的变化可处于不同的解离状态，从而影响底物与酶的结合和进一步反应，或影响酶的空间结构，进而影响酶的活性。

基础知识：固定化酶的应用实例1．关于固定化酶中的酶说法正确的是( )A．酶的种类多样，可催化一系列的酶促反应B．酶被固定在不溶于水的载体上，可反复利用C．酶作为催化剂，反应前后结构不改变，所以固定化酶可永远利用D．固定化酶由于被固定在载体上，所以丧失了酶的高效性和专一性特点2．用固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液时，为了能产生酒精，下列措施错误的是( ) A．向瓶内泵入氧气B．应将装置放于适宜的条件下进行C．瓶内应富含葡萄糖等底物D．将瓶口密封，效果更好3．在废水处理中固定化细胞技术具有重要作用，用于处理含氮、氨丰富的废水的微生物通常是( )①酵母菌②青霉素③硝化细菌④反硝化细菌A．①②B．③④C．①③D．②④4．为了认识酶的作用特性，以20%过氧化氢溶液为反应底物的一组实验结果如下表所示。

通过分析实验结果，能得出相应的结论。

在下列有关结论描述中，从表中不能得到实验依据的一项是（）注：过氧化氢可以被过氧化氢酶或Fe3+催化生成水并放出O2。

A．从催化条件来看，酶有温和性B．从催化活性看，酶变性后就失活C．从催化底物范围看，酶有专一性D．从催化反应效率看，酶有高效性5．研究认为，用固定化酶技术处理污染是很有前途的。

如将从大肠杆菌中得到的磷酸三脂酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药。

与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的（）A．温度B．pHC．水分D．营养6．固定化细胞对酶的活性影响最小，根本原因是( )A．避免了细胞破碎，酶的提取纯化过程B．固酶化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用C．酶促反应结束后，能被吸收和重复利用D．细胞结构保证了各种酶的细胞内环境，化学反应中能更好的发挥作用7．以下各项能表示酶活性高低的是( )A．单位时间、单位体积内反应物的总量B．一段时间后生成物的总量C．一段时间后，一定体积中消耗的反应物的量D．单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量8．以下实验必须在恒温条件下进行的是( )A．验证酶的高效性B．验证酶的专一性C．温度对酶活性的影响D．pH对酶活性的影响9．反应物是大分子，应采用的固定化技术和理由是( )A．固定化酶技术；可应用化学结合法或物理吸附法对酶固定，利于大分子和酶的接触B．固定化酶技术；可应用包埋法对酶固定，利于大分子和酶的接触C．固定化细胞技术；一般应用化学结合法或物理吸附法对细胞固定，利于大分子和细胞的接触D．固定化细胞技术；一般应用包埋法对细胞固定，利于大分子和细胞的接触10．关于固定化酶技术说法，正确的是 ( )A．固定化酶技术就是固定反应物，将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术B．固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应C．固定化酶中的酶无法重复利用D．固定化酶是将酶固定在一定空间内的技术参考答案：1．答案： B解析：酶的种类多样，可催化一种的酶促反应2．答案： A解析：在有氧条件下，酵母细胞进行有氧呼吸产生大量能量，有利于生长繁殖，扩大种群的数量，但在无氧条件下酵母细胞能发酵产生酒精和CO2，保证无氧条件的措施是将瓶口密封。

全国高三高中生物专题试卷班级:___________ 姓名：___________ 分数：___________一、综合题1.固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。

东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂(使酶相互连接)，海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。

如图显示的是部分研究结果(注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量)，分析回答有关问题。

(1)从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是________________________________________________________。

(2)乙图曲线表明浓度为________的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力低的原因是__________________________________________________________________。

(3)固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，由丙图可知，固定化酶一般可重复使用________次，之后酶活力明显下降。

(4)固定小麦酯酶采用双重固定法，这是因为________________________________________________________________________。

2.通过植物组织培养技术可以快速繁殖、生产药物及培育无病毒的植株等。

如图是植物组织培养的过程，请回答相关问题。

离体的植物器官、组织或细胞①―→愈伤组织②―→丛芽③―→植株④(1)离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的根本原因是________。

植物组织培养技术所用的MS 培养基中________提供植物细胞生活所必需的无机盐；________提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压。

(2)利用月季的花药离体培养产生单倍体时，选材非常重要。

固定化酶的制备及应用篇一：《固定化酶的制备及应用》我家楼下有个小小的面包店，店主是个很和蔼的大叔，我特别喜欢去他那儿买面包。

每次走进那弥漫着麦香的小店，都感觉像是走进了一个温暖的港湾。

大叔做面包的手艺那可真是一绝，那面包又香又软，口感好得不得了。

有一次，我好奇地问大叔：“大叔，您这面包为啥这么好吃呀？”大叔神秘地一笑，说：“这里面可有大学问呢。

”后来我才知道，原来在面包制作过程中，就用到了类似固定化酶的原理。

那什么是固定化酶呢？简单来说，就像是给酶这个小助手找了个固定的工作岗位，让它能稳定地发挥作用。

酶这个东西呀，就像是一个个小小的魔法师，在生物体内发挥着各种各样神奇的作用。

但是自由的酶就像一个调皮的孩子，不太好控制，有时候干起活来没个准头。

制备固定化酶呢，就像是给这个调皮的孩子制定了一套严格的工作流程。

首先得选好合适的酶，就像大叔选最好的面粉做面包一样重要。

然后得找到一种合适的材料把酶固定住，这个材料就像是一个小小的房子，让酶住进去。

比如说可以用一些特殊的凝胶或者纤维材料。

把酶固定在这些材料上的方法也有很多种，就像把东西粘起来或者包起来那样。

在面包制作中，淀粉酶就像是一个勤劳的小工人。

在正常情况下，淀粉酶可以把面粉里的淀粉分解成糖，这样面包才会有甜味。

但是如果淀粉酶自由散漫，就可能会一下子分解太多淀粉，导致面包口感不好。

要是把淀粉酶固定化了，它就只能在固定的位置上工作，有条不紊地把淀粉变成恰到好处的糖量。

在其他很多方面，固定化酶也发挥着巨大的作用。

在食品行业，除了面包制作，像酿酒的时候，固定化酶可以让发酵过程更加稳定，酿出的酒更好喝。

在环保领域，有些固定化酶可以分解污水中的有害物质，就像一群环保小卫士。

在医药领域，固定化酶可以用来生产一些特殊的药物，就像一个精准的小工匠，把药物分子按照要求组合起来。

固定化酶的制备和应用就像是打开了一扇通往高效、精准生物操作的大门。

它把酶这个神奇的生物工具变得更加可控，从而在各个领域大展身手。