甲胎蛋白(AFP)测定

两种不同方法检测甲胎蛋白的比较摘要】目的探讨研究酶联免疫吸附法(ELISA)和电化学发光分析法(ECLIA)对甲胎蛋白(AFP）检测的效果。

方法对65例血清标本同时采用ELISA 和ECLIA方法进行AFP检测，并对同一标本连续测定20次进行批内变异的比较，同时对标本每天测定1次，连续测定20天进行批间变异比较。

评价两种方法的稳定性、敏感性及重复性。

结果ECLIA其检出限为0.50μg /ml，线性范围为0.50μg /ml～ 3000μg /ml；当AFP<400μg/ ml时，ELISA和CL对AFP检测敏感性差别无统计学意义；当AFP>400μg/ ml时，ECLIA检测敏感性高于ELISA，P ＜0.05，有统计学差异；ECLIA低、中、高值批内和批间CV均小于5，较ELISA重复性好、稳定性高。

结论ECLIA敏感性高、稳定性、重复性好。

【关键词】甲胎蛋白电化学发光分析法酶联免疫吸附法【中图分类号】R446.6 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2012）13-0280-02Two different methods for the detection of alpha-fetoprotein comparison. Hu xiao-qing, The People's Hospital Laboratory of Nanxiong, Nanxiong Guangdong，512400 China.【Abstract】 Objectives Study of ELISA and ECLIA on alpha-fetoprotein( AFP ) detection effect.Methods On65 serum specimens from patients with ELISA and ECLIA methods for AFP detection, and determination of the same specimen consecutive20times within a batch variability compared to specimens were measured every day,1 times,20 days of continuous determination of interassay variation comparison. Evaluation of two methods of stability, sensitivity and reproducibility.Results ECLIA the detection limit is0.50μg / ml, linear in the range of 0.50μg / ml ～3000μg / ml; when AFP <400μg / ml, ELISA and CL on AFP detection sensitivity difference was not statistically significant; when AFP >400μg / ml, ECLIA detection sensitivity is higherthan that of ELISA, P < 0.05, with statistical difference; low, high value of ECLIA, intra and inter CV were less than 5, is ELISA good repeatability, high stability.Conclusions ECLIA high sensitivity, stability, good repeatability.【Key Words】 AFP ECLIA ELISA甲胎蛋白(Alpha fetal protein, AFP）是1956年Bergstrandh和Czar在人胎儿血清中发现的一种单一多聚体肽链的糖蛋白，其分子量平均为68000[1]，系肝细胞内粗面内网核糖颗粒所合成，在胎儿血清中正常存在的一种特殊蛋白，正常成人肝细胞失去合成AFP的能力。

AFP的免疫检测甲胎蛋白( A F P )主要在胎儿肝中合成,分子量6 .9 万,在胎儿1 3 周A F P占血浆蛋白总量的1／3 。

在成人,AFP可以在大约80％的肝癌患者血清中升高，在生殖细胞肿瘤出现A FP阳性率为50％。

在其他肠胃管肿瘤如胰腺癌或肺癌及肝硬化等患者亦可出现不同程度的升高。

但当肝细胞发生癌变时，却又恢复了产生这种蛋白质的功能而且随着病情恶化它在血清中的含量会急剧增加，甲胎蛋白就成了诊断原发性肝癌的一个特异性临床指标。

过去一直认为是诊断原发性肝癌的特异性肿瘤标志物，具有确立诊断、早期诊断、鉴别诊断的作用。

近年大量的临床却发现，AFP达到上千，但多年都没有肝癌的迹象；同时发现约20％的晚期肝癌患者，直至病故前，AFP仍不超过10。

甲胎蛋白是肝癌的特异性标志，但血清甲胎蛋白阳性未必都是肝癌。

在临床中发现，血清谷丙转氨酶升高的患者同时有血清甲胎蛋白升高。

一、AFP单克隆抗体的制备单抗的理化性状高度均一，生物活性单一，与抗原结合的特异性强，可重复性高，对环境的高度敏感性，弱凝集反应和不呈现沉淀反应，便于人为处理和质量控制并且来源容易。

1、原理：是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。

这两种细胞分别是经抗原免疫能产生抗体的小鼠脾细胞和能在体外长期繁殖的小鼠骨髓瘤细胞，用聚乙二醇（PEG）为细胞融合剂使细胞融合产生杂交瘤细胞，通过次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷（HAT）选择基的作用只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经反复的免疫学检测筛选和单个细胞培养，最终获得既能产生所需单克隆抗体又能长期体外繁殖的杂交瘤细胞系。

将这种细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，可从小鼠腹水中得到高效价的单克隆抗体。

2、制备步骤1)获得抗原：市场上购得商品化AFP,免疫BALB/c小鼠，获得致敏的B淋巴细胞；2)细胞的选择与融合：建立杂交瘤细胞的目的：是制备对抗原特异的单克隆抗体，所以融合细胞一方必须选择经过抗原(AFP)免疫的B细胞，通常来源于免疫动物的脾细胞。

高质量体检项目解读血清甲胎蛋白（AFP）异常指标的分析一、引言体检对于个人健康的关注日益增加，而血清甲胎蛋白（Alpha-fetoprotein，简称AFP）是体检中常见的一项指标。

本文将对AFP异常指标进行详细解读，以帮助读者更好地了解其意义与相应的健康风险。

二、AFP简介AFP是一种胚胎发育期合成的糖蛋白，在胎盘和肝脏等组织中均有表达。

正常情况下，AFP在出生后的血液中会逐渐降低至较低水平。

血清甲胎蛋白的异常指标主要包括升高和降低两种情况。

三、AFP升高的可能原因1. 胎儿神经管缺陷：AFP升高是神经管缺陷的重要指标，如脊柱裂、脑脊髓管缺陷等。

2. 胎儿染色体异常：AFP升高可能与胎儿染色体异常有关，如唐氏综合征等。

3. 肝脏疾病：AFP在肝细胞癌、肝硬化、肝炎等肝脏疾病中常常升高。

4. 卵巢癌和睾丸癌：AFP也是一种标志性指标，卵巢癌和睾丸癌患者血清AFP往往升高。

5. 其他因素：饮食因素、肝功能异常、肾病综合征等也可能导致AFP升高。

四、AFP降低的可能原因1. 妊娠：正常妊娠期间，AFP水平会自然降低，降低幅度与妊娠周数和孕龄相关。

2. 肝细胞功能减退：肝硬化等导致肝细胞功能减退，会引起AFP水平的降低。

3. 恶性肿瘤治疗：某些抗癌药物和化疗后，AFP水平可能下降。

五、注意事项1. 孕妇应尽早进行产前筛查，以了解胎儿的健康情况。

2. AFP异常值并不代表一定存在疾病，需综合考虑个体情况和其他相关指标进行综合判断。

3. AFP异常可能需要进一步检查，如超声检查、基因检测等，以明确病因。

4. 高质量体检机构能够提供更准确的检测结果和解读，选择可信赖的机构进行体检至关重要。

六、结论血清甲胎蛋白（AFP）作为体检中的常见项目，其异常指标可能与多种疾病和健康问题相关。

对AFP升高或降低的解读需要综合个体情况和其他相关指标进行判断。

通过合理的检测和进一步的检查，可以更好地了解自身的健康状态，及早发现潜在问题并采取相应措施。

．甲胎蛋白（AFP）AFP是早期诊断原发性肝癌最敏感、最特异的指标，适用于大规模普查，如果成人血AFP值升高，则表示有患肝癌的可能。

AFP含量显著升高一般提示原发性肝细胞癌，70~95%患者的AFP升高，越是晚期，AFP含量越高，但阴性并不能排除原发性肝癌。

AFP水平在一定程度上反应肿瘤的大小，其动态变化与病情有一定的关系，是显示治疗效果和预后判断的一项敏感指标。

AFP值异常高者一般提示预后不佳，其含量上升则提示病情恶化。

通常手术切除肝癌后二个月，AFP值应降至20ng/ml以下，若降的不多或降而复升，提示切除不彻底或有复发、转移的可能。

在转移性肝癌中，AFP值一般低于350-400ng/ml。

妇产科的生殖腺胚胎癌、卵巢内胚窦癌AFP也会明显升高。

AFP中度升高也常见于酒精性肝硬化、急性肝炎以及HBsAg携带者。

某些消化道癌也会出现AFP升高现象。

孕妇血清或羊水AFP升高提示胎儿脊柱裂、无脑症、食管atresia或多胎，AFP降低(结合孕妇年龄)提示未出生的婴儿有Down’s综合征的危险性。

正常参考值：0～15 ng/ml2．癌胚抗原（CEA）在正常成人的血液中CEA很难测出。

CEA是一种重要的肿瘤相关抗原，70-90%的结肠腺癌患者CEA高度阳性，在其它恶性肿瘤中的阳性率顺序为胃癌（60-90％）、胰腺癌（70-80％）、小肠腺癌（60-83％）、肺癌（56-80％）、肝癌（62-75％）、乳腺癌（40-68％）、泌尿系癌肿（31-46％）。

胃液（胃癌）、唾液（口腔癌、鼻咽癌）以及胸腹水（肺癌、肝癌）中CEA的阳性检测率更高，因为这些肿瘤“浸泡液”中的CEA可先于血中存在。

CEA含量与肿瘤大小、有无转移存在一定关系，当发生肝转移时，CEA的升高尤为明显。

CEA测定主要用于指导各种肿瘤的治疗及随访，对肿瘤患者血液或其他体液中的CEA浓度进行连续观察，能对病情判断、预后及疗效观察提供重要的依据。

CEA 的检测对肿瘤术后复发的敏感度极高，可达80%以上，往往早于临床、病理检查及X光检查。

甲胎蛋白筛查甲胎蛋白筛查体检表格姓名：______________________ 性别：____ 年龄：____ 日期：__________1. 参加甲胎蛋白筛查的目的是：_______________________________________________________________2. 甲胎蛋白（AFP）是一种由胎儿肝脏和胎盘分泌的蛋白质，对于胚胎的生长和发育起着重要的作用。

高浓度的甲胎蛋白可能意味着某些疾病或异常情况的存在。

请填写以下信息：a. 个人病史______________________________________________________________________________________________________________________________________b. 家族病史______________________________________________________________________________________________________________________________________3. 甲胎蛋白筛查的结果将通过以下几种方式进行评估，请在相应选项前打勾：a. 妊娠期妇女：选择一种筛查方法进行评估(1) 血清AFP测定___ 正常妊娠（风险低）___ 高风险妊娠（进一步检查）___ 脊柱动静脉流量改变（SPAC）测定___ 羊水AFP测定b. 糖尿病病史的女性和35岁以上女性：选择一种筛查方法进行评估(1) 血清AFP测定___ 正常妊娠（风险低）___ 高风险妊娠（进一步检查）___ 脊柱动静脉流量改变（SPAC）测定___ 羊水AFP测定c. 高龄产妇：选择一种筛查方法进行评估(1) 血清AFP测定___ 正常妊娠（风险低）___ 高风险妊娠（进一步检查）___ 脊柱动静脉流量改变（SPAC）测定___ 羊水AFP测定d. 高风险妊娠（家族史或个人史）：选择一种或多种筛查方法进行评估(1) 血清AFP测定(2) 脐带动静脉血浆AFP测定(3) 羊水AFP测定(4) 胎儿超声检查(5) 其他：______________________________________________________4. 如选择"高风险妊娠（进一步检查）"，请提供以下信息，以便进行进一步的检查和评估：a. 血清AFP测定结果：______________________ ng/mLb. 脖部透明带测定结果（NT测定）：______________________ mmc. 其他特殊检查结果：________________________________________5. 甲胎蛋白筛查结果：a. 正常范围：______________________b. 实际测定结果：______________________ ng/mL6. 根据甲胎蛋白筛查结果，进一步的操作：a. 继续常规产前检查，观察胚胎发育情况b. 进行进一步的检查（请注明具体检查内容）：______________________c. 发现异常情况（请注明具体情况）：_______________________________7. 其他备注：_____________________________________________________请注意：对于甲胎蛋白筛查的结果解读和后续行动，应根据专业医生的建议来确定，本表格仅供参考。

酶联免疫法与化学发光免疫法检测AFP的比较发表时间：2013-05-09T17:14:22.000Z 来源：《中外健康文摘》2013年第8期供稿作者：黄海深陈志通唐光定江伟河[导读] 化学发光免疫法检测结果的稳定性，灵敏度，精密度均优于酶联免疫法黄海深陈志通唐光定江伟河（广东省阳山县人民医院检验科 513100）【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）08-0125-02 【摘要】目的对甲胎蛋白(AFP)试验进行方法学探讨。

方法①对比实验用酶联免疫法和化学发光免疫法同时测定88例临床送检血清标本甲胎蛋白(AFP)的含量。

②线性实验将标准液按不同的浓度稀释后做线性实验。

③精密度实验用两法对低、中、高值质控品分别进行精密度实验。

结果①结果表明，两法无显著差异(P＞0.05)，相关系数r＝0.995，提示两法呈良好相关性。

②线性实验显示酶联免疫法和化学发光免疫法分别在5～400 ng/ml和2～900 ng/ml范围内呈良好的线性关系。

③精密度实验表明化学发光重复性好于酶联免疫法,特别是病理高值化学发光明显优于酶联免疫法。

结论化学发光免疫法的精密度和准确性均优于酶联免疫法。

【关键词】酶联免疫法化学发光免疫法甲胎蛋白比较【Abstract】 Object: The methodology investigate of Alpha-fetoprotein (AFP) test. Methods: ①Comparative experiments: The simultaneous determination of the serum samples of 88 patients censorship alpha-fetoprotein (AFP) levels by ELISA and chemiluminescent immunoassay. ②Linear experiments: the standard solution is diluted at different concentrations,then doing linear experiments.③Precision experiments: Doing precision experiments on low, medium and high-value quality control materials with the two methods. Results: ①The results show that no significant difference in the two methods(P＞0.05). The correlation coefficient of r = 0.995, these two methods showed a good correlation. ②The linear experiments show that the enzyme linked immunosorbent assay and chemiluminescence immunoassay showed a good linear relationship between the range in 5～400ng/ml and 2～900ng/ml.③Precision experiments show that the repeatability of chemiluminescent immunoassay is better than the enzyme-linked immunosorbent assay, specifically at the pathological high value. Conclusion: The precision and accuracy of the chemiluminescent immunoassay are better than enzyme linked immunosorbent assay.【Key words】 ELISA Chemiluminescent immunoassay Alpha-fetoprotein Comparison 甲胎蛋白（AFP）是哺乳动物胚胎期肝脏卵黄囊合成的一种糖蛋白，是辅助诊断原发性肝癌最常用的检测指标。

一、甲胎蛋白 (Alpha fetoprotein, AFP)甲胎蛋白(AFP)是一种来源于胚胎肝细胞的糖蛋白，属于白蛋白家族，在胎儿的生长发育过程中具有重要的生理功能。

胎儿血清AFP从13 周开始升高，30周达到最高峰，最高可达3-4g/L，出生后迅速下降，周岁时接近成人水平[4]。

健康成年人血清AFP浓度应低于25μg/L[5]。

血清AFP含量检测方法简单，成本低廉，而且具有重要的诊断价值。

(一) 参考范围(ng/ml)[1]出生时：60000 – 120000 ng/ml0-2个月：25 – 1000 ng/ml2-6个月：25 – 100 ng/ml6个月：20 ng/ml成人：<20 ng/ml妊娠3个月：18 – 113 ng/ml妊娠4 - 6个月：160 – 550 ng/ml妊娠7 - 9个月：100 – 400 ng/ml(二) 甲胎蛋白偏高的的生理因素妊娠妇女和新生儿会出现甲胎蛋白的一时性升高，因为甲胎蛋白是胎儿的正常血浆蛋白成分，是胚胎早期的主要蛋白质，妊娠期妇女甲胎蛋白会明显升高，一般在妊娠后3个月，甲胎蛋白就明显升高，到7-8月孕妇母血中AFP量达到最高峰并相对稳定，但仍低于400μg/L，约在产后3周逐渐恢复正常水平。

研究表明，吸烟导致人体血清AFP水平增高，在女性吸烟者中更为明显，并且吸烟量越大，血清AFP含量越高[3]。

(三) 甲胎蛋白偏高的病理因素：(1) 肝癌是常见的造成甲胎蛋白偏高的原因之一，一般正常人血清中甲胎蛋白的含量不到20μg/L，但当肝细胞发生癌变时，却又恢复了产生这种蛋白质的功能，据调查发现约有80%的肝癌患者血清中甲胎蛋白会升高，通常以400μg/L为标准，高于此数值应该考虑肝癌的可能性，一般在肝癌出现症状之前的8个月甲胎蛋白就已经升高，所以肝硬化、慢性肝炎病人、家族中有肝癌患者的人应该根据自己的情况做定期的检查。

因此，甲胎蛋白对肝癌的早期诊断具有一定的意义。