色谱柱冲洗方法
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液相色谱清洗流程:(反相系统)
流动相:1:准备80度左右的热水,加30%左右的异丙醇,2:3% 的双氧水3:10%的硝酸。
4,纯水。
用两通代替色谱柱,流量3ml/min,把四个通道滤头全部放入准备好的流动相。
各通道25%比例。
打开排空阀,流动相冲洗5分钟。
关闭排空阀,取此流动相为样品。
进样100微升,运行10针。
每针1分钟。
(依次使用上述4种流动相处理)
更换样品瓶玻璃滤头,和排空阀过滤白头、
装上柱子,用10%水和纯乙腈或者甲醇,分别冲洗柱10分钟流量1ml/min。
再用分析方法的流动相平衡柱20-30 分钟。
液相柱反冲流程
将色谱柱出口接到进口管线上,用混合流动相,水,甲醇,乙腈等,或者反复梯度:例:
0分钟10%甲醇90%水。
120分钟100%甲醇。
240 分钟10 %甲醇。
360分钟100 %甲醇…….。
流量0.1-0.2ml/min。
柱原来的进口端侵泡在有混合液体的烧杯内。
以保证流出污染物溶解
分散。
色谱柱使用注意事项
一、色谱柱有方向:
柱子标签上箭头指示方向为,流动相溶液流动方向。
若方向
反,会影响柱效和使用寿命。
二、新柱子使用:
新柱子使用前,先要活化,具体方法:
1、把柱子接在泵上,检测器一端不接(注意)。
废液直接从
柱子另一端流出。
2、用纯甲醇溶液,以1ml/min,流速冲洗20—30分钟,即
可。
三、日常保养及维护(柱子连接色谱系统)
要根据不同的情况对色谱柱进行保养:
①反相色谱柱每天实验后的保养:使用缓冲液或含盐的流动相,
实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30min,洗掉色谱柱中的
盐,再用色谱甲醇冲洗30min。
注意:不能用纯水冲洗柱子,
应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷。
②长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的
溶剂下。
对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,并将购买
新色谱柱时附送的堵头堵上。
储存温度: 室温。
色谱柱在使用过程中易显现的问题和解决方法色谱柱日常维护每天用充足的时间来维护色谱柱,您将节省更多有利于处置色谱柱故障的时间,调试您的色谱柱的寿命也会变得更长,色谱柱的使用寿命,除了与所分析的样品和流动相及使用频率有关,zui重要的是与日常维护紧密相关。
色谱柱的使用寿命重要依据柱效和柱压两个指标来衡量,假如一支色谱柱的柱效太低或者太高,通常被认为该色谱柱的使用寿命已尽结束。
因此,延长色谱柱的使用寿命关键是,清除引起柱效下降和柱压上升的因素,通过以下几点帮战您完成色谱柱的日常维护工作。
一、流动相的pH应在使用范围内以硅胶为基质的反相色谱柱的pH范围为2~9,流动相超出其pH范围将会导致硅胶基质流失和键合相碳链断裂,使柱效下降,寿命变短。
二、去除样品和流动相汇总的固体颗粒样品和流动相中含有固体颗粒物质会堵塞色谱柱筛板,不但会引起柱压的上升,而且也会引起柱效下降。
因此,建议使用超纯水和色谱纯试剂,在分析前对样品进行针筒过滤,流动相过0.45um滤膜。
三、使用保护柱或在线过滤器保护柱和在线过滤器上都有筛板,其孔径与色谱柱筛板孔径相同,因此可以阻拦固体颗粒物质到达色谱柱,有效防止色谱柱筛板的堵塞。
由于柱压上升在分析故障中占很大比例,因此除对样品和流动相进行过滤外,建议您在色谱柱进样端加上保护柱或在线过滤器。
四、正确使用缓冲盐缓冲盐使用欠妥会使其在流动相(含有机溶剂)中析出,堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙,使填料板结,柱压上升;同时拦阻了基质上的键合的碳链自由伸展,使用色谱柱的保管本领下降,柱效降低。
建议使用前要过滤,使用后要冲洗。
实在方法如下:1、等度条件:使用缓冲盐前和使用后需要过滤流动相1.0ml/min流速冲洗60min.2、梯度条件:用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前,用与初始流动相构成相同的过滤流动相像1.0ml/min流速冲洗60min;分析完成后,再用该过滤流动以1.0ml/min冲洗色谱柱120min。
色谱柱的活化方法是为了确保柱子的性能和分析准确性。
以下是一般用于活化色谱柱的方法:
冲洗:在使用新色谱柱之前,首先进行冲洗,以去除储存在柱内的任何残留物或杂质。
通常使用一种合适的溶
剂,例如甲醇、乙腈或水,通过色谱柱进行冲洗。
冲洗过程通常需要几个柱体积的溶剂。
平衡:在开始样品分析之前,色谱柱需要平衡。
这意味着将与分析样品相同的溶剂通过柱子,以确保柱子内部的条件与分析期望的条件相匹配。
平衡通常需要通过传递柱体积的溶剂来完成。
样品前处理:样品前处理是为了确保样品不会对色谱柱造成污染或损坏。
这可能包括样品的过滤、稀释或其他处理步骤,具体取决于分析的特性。
使用适当的流速:使用适当的流速来进行分析,以避免色谱柱受到过大的压力或温度升高。
流速通常由柱子的尺寸和材料以及分析条件来确定。
定期维护:在柱子使用期间,定期维护和检查是必要的。
这包括检查密封性、检查柱温度、更换柱端子、清洗或替换柱保护装置(如前柱或后柱),以确保柱子的性能和寿命。
避免柱子受到强酸、强碱、有机溶剂和高温的不良影响。
这些条件可能对柱子造成损害。
使用适当的柱温度:根据分析要求,控制色谱柱的温度。
柱温度可以影响分离效果和分析速度。
准确记录:记录分析条件、样品和结果,以便追踪和重现分析。
不同类型的色谱柱(例如反相、离子交换、正相等)可能需要不同的活化和使用方法。
因此,在活化或使用特定色谱柱之前,最好查阅相关的厂商指南或规程,以确保正确的操作。
高效液相色谱仪系统冲洗流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改,请根据实际需要进行相应的调整和使用,谢谢!并且,本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料,如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等,如想了解不同资料格式和写法,敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!高效液相色谱仪(HPLC)是一种广泛应用于药品分析、生物化学、食品科学等领域的分析仪器。
色谱分析中色谱柱使用前和后的处理色谱柱是在色谱分析中不可或缺的一部分,其作用是将复杂的混合物分离成各种单一成分。
色谱柱的使用前后的处理对实验结果具有极大的影响。
正确的处理方法可以延长色谱柱的使用寿命、提高实验结果的准确性和可重复性。
本文将介绍色谱柱使用前和使用后的处理方法。
色谱柱的使用前处理1.洗涤在使用一根新的色谱柱之前,需要洗涤柱子。
在洗涤过程中,要使用合适的洗涤溶液,并注意洗涤的时间。
使用不适当的洗涤溶液和时间会破坏柱子的性能,或者对柱子进行污染。
2.等温在进行实验之前,需要将柱子等温。
这个过程是为了使得柱子中的流动相和静止相进入平衡状态,从而对实验结果产生影响。
在等温的过程中,要注意柱子的温度和平衡时间。
3.检查在实验之前,必须检查柱子的性能。
检查的方法是进行水平推动试验和反洗试验。
每次检查都要对试验结果进行记录。
色谱柱的使用后处理1.冲洗在柱子使用之后,需要将柱子进行冲洗。
这个过程是为了保证柱子质量,避免样品残留。
冲洗的方法是使用适当的溶液,实验压力和冲洗时间也需要控制。
2.保存在完成实验之后,需要保存柱子,延长其使用寿命。
保存柱子的方法是封住两端,然后在一个干燥的地方存储。
需要注意的是,在保存柱子的过程中,要避免柱子的碰撞和振动。
3.检查在使用某一根柱子多次之后,需要对柱子进行检查。
经过多次使用之后,柱子的性能会发生改变,此时需要更换柱子。
对于性能出现问题的柱子,需要进行维修或者更换。
总结色谱柱的使用前和使用后的处理对实验结果产生了很大的影响。
正确的处理方法可以确保色谱柱的性能,提高实验结果的准确性和可重复性。
在使用色谱柱进行实验之前,一定要进行洗涤和等温操作。
在使用色谱柱之后,还需要进行冲洗和保存操作。
如果柱子的性能出现问题,需要进行检查和更换。
正确的处理方法可以延长色谱柱的使用寿命,从而为科学实验提供更加准确的结果。
as19阴离子色谱柱活化
AS19阴离子色谱柱的活化步骤如下:
先用去离子水冲洗色谱柱,以去除其中的杂质和颗粒。
用100%的甲醇冲洗色谱柱,以去除其中的有机物。
用50%的硝酸冲洗色谱柱,以去除其中的硅酸盐和金属离子。
用去离子水冲洗色谱柱,以去除硝酸。
用100%的甲醇冲洗色谱柱,以去除其中的水分。
用100%的硝酸冲洗色谱柱,以活化色谱柱中的硅胶。
用去离子水冲洗色谱柱,以去除硝酸。
用100%的甲醇冲洗色谱柱,以去除其中的水分。
用50%的氢氧化钠冲洗色谱柱,以去除其中的酸性物质。
用去离子水冲洗色谱柱,以去除氢氧化钠。
用100%的甲醇冲洗色谱柱,以去除其中的水分。
用5%的氢氧化钠冲洗色谱柱,以活化色谱柱中的硅胶。
用去离子水冲洗色谱柱,以去除氢氧化钠。
用100%的甲醇冲洗色谱柱,以去除其中的水分。
将色谱柱置于干燥箱中干燥,然后使用密封夹子密封好色谱柱的两端。
完成以上步骤后,AS19阴离子色谱柱就成功地被活化了。
在接下来的使用过程中,应按照正常的操作流程进行使用和维护,以保证色谱柱的性能和使用寿命。
凝胶色谱柱洗涤流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。
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正相手性色谱柱(AD-H.OD-H)使用说明警告:(1)将色谱柱接到色谱仪之前,必须先用合适的溶剂冲洗流路(包括流通阀和定量环)。
如之前是反相系统,先用水把系统中可能含有的盐冲洗干净,再用异丙醇以2ml/min冲洗1小时左右,再接色谱柱。
(四根管路同时冲洗)(2)有些溶剂(比如丙酮、氯仿、DMF、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF)会破坏手性固定相,应禁用。
(3)如果使用的是自动进样器,进样间隔的冲洗液也必须更换成合适的溶剂。
操作限制:对于150 x 4.6 mm ID,250 x 4.6 mm ID分析柱:(1)流动相方向:参照色谱柱标签上的箭头(2)典型流速:0.5~1.0 ml/min,不能超过 1.5 ml/min。
最大流速也和流动相粘度(流动相成分)有关,必须小心不能超过柱压上限。
(3)柱压范围:< 50 Bar (约700 psi),最高不能超过100 Bar (约1400 psi)。
(4)温度范围:0~40°C色谱条件:(1)流动相组成流动相条件:正己烷/异丙醇=100/0-0/100(V/V)正己烷/乙醇=100/0-0/100(V/V)*流动相中异丙醇换成乙醇,样品的保留时间缩短。
*流动相中醇含量增加,样品的保留时间缩短。
(2)如果分离碱性或者酸性化合物,可能需要在流动相加入少量添加剂碱性样品需要添加碱性添加剂,一般为二乙胺,比例一般为0.1%酸性样品需要添加酸性添加剂,一般为三氟乙酸,比例一般为0.1%色谱柱保养及注意事项:(1)样品检测前需仔细询问送样人员样品中可能含有的溶剂,如果工艺中用到丙酮、氯仿、DMF、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二氯甲烷、THF,则需尽量烘干。
样品尽量溶解在流动相中,并用0.45μm滤膜过滤。
不能使用强碱性物质作为流动相添加剂或者溶解样品,因为这样会损坏填料中的硅胶成分。
(2)如果系统中或者色谱柱中含较高浓度的异丙醇或者乙醇时,由于他们的粘度比较大,平衡色谱柱时需特别注意压力变化,可采用低流速平衡,当柱压下降后再逐渐升高至要求的流速。
实验结束后用甲醇冲洗色谱柱的原因实验结束后用甲醇冲洗色谱柱的原因------------------------------------------------色谱技术是一种实验室常用的分离技术,它可以将混合物中的组分分离开来,便于组分的分析和测定。
在实验室中,分离色谱柱是一种常用的分离方法,通常在实验结束后,会使用甲醇对色谱柱进行冲洗。
那么,为什么要用甲醇对色谱柱进行冲洗呢?### 一、甲醇有较好的溶剂性甲醇是一种具有良好溶剂性的有机溶剂,它具有很强的溶解力,可以将固体和液体混合物中的各种成分分离开来。
由于甲醇具有很强的溶解力,因此在实验室中,它常用于对色谱柱进行冲洗。
### 二、甲醇具有良好的蒸发性甲醇具有良好的蒸发性,在室温下可以很快蒸发,不会留下任何残留物。
而且,甲醇的蒸发性非常强,可以在很短的时间内将其他溶剂快速蒸发,从而使色谱柱保持干净和平整。
### 三、甲醇对人体无害甲醇是一种无色、无味、无害的有机溶剂,不会对人体造成任何伤害,可以直接接触皮肤,也不会对皮肤造成伤害。
因此,在实验室中,我们可以安全地使用甲醇对色谱柱进行冲洗。
### 四、甲醇具有较低的成本甲醇是一种低成本的有机溶剂,在市场上价格不贵,而且量大。
所以在实验室中,我们通常会选择使用甲醇对色谱柱进行冲洗。
### 五、具有很强的去除能力甲醇具有很强的去除能力,可以快速去除固体和液体中的杂质和有机物,从而使色谱柱保持平整、干净。
所以,在实验室中,我们通常会选择使用甲醇对色谱柱进行冲洗。
### 总结通过上述分析可以看出:甲醇是一种具有较好溶剂性、去除能力和无害性的有机溶剂,具有成本低廉的特点,因此在实验室中常常会使用甲醇对色谱柱进行冲洗。
色谱柱冲洗方法是指在色谱分析中,为了清洗色谱柱,去除残留的样品和杂质,保护色谱柱的使用寿命,而采取的一系列操作。
常用的色谱柱冲洗方法包括以下几种:
1. 洗脱剂冲洗法:用洗脱剂反复冲洗色谱柱,以去除残留的样品和杂质。
常用的洗脱剂有甲醇、乙醇、乙酸乙酯等。
2. 水冲洗法:用纯水反复冲洗色谱柱,以去除残留的盐类和其他水溶性杂质。
3. 酸碱冲洗法:用酸或碱溶液反复冲洗色谱柱,以去除残留的有机酸、有机碱和其他酸碱性杂质。
4. 溶剂冲洗法:用纯溶剂反复冲洗色谱柱,以去除残留的样品和杂质。
常用的溶剂有乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。
在进行色谱柱冲洗时,需要注意以下几点:
1. 冲洗时要注意保护色谱柱,避免使用过于强烈的冲洗剂或过于频繁的冲洗,以免损坏色谱柱。
2. 冲洗时要注意洗脱剂的选择,根据不同的样品和分析要求
选择合适的洗脱剂。
3. 冲洗后要及时检查色谱柱的状态,如有异常应及时更换或修复。