微生物限度检查法简介
- 格式:docx
- 大小:37.94 KB
- 文档页数:29
我国药典2020微生物限度检查法1.引言我国药典2020版本中,微生物限度检查法是保证药品质量和安全的重要工具。
微生物限度指的是药品中的微生物数量的限定,包括细菌、酵母和霉菌等。
微生物限度检查法的执行对于药品的生产和使用至关重要,它能够保证药品在生产、存储和使用过程中不受到微生物污染,从而确保药品的质量和安全。
2.微生物限度检查法的内容和流程微生物限度检查法主要包括取样、制备试液、接种培养和菌落计数等步骤。
首先要进行取样,从样品中取得代表性的样品;然后是制备试液,将取得的样品溶解或稀释;接下来是接种培养,将制备好的试液接种到适当的培养基上培养;最后是菌落计数,根据培养后的菌落数量来确定微生物的限度。
3.微生物限度检查法的意义微生物限度检查法的实施,可以有效地控制药品中微生物数量的合理范围内,防止药品在生产、储存和使用过程中因微生物污染而导致药品变质、降解或产生毒性。
采用微生物限度检查法,可以杜绝因微生物污染而引起的医源性感染,保障患者用药安全。
4.对我国药典2020微生物限度检查法的个人观点和理解微生物限度检查法是药品质量控制中不可或缺的一部分,它直接关系到患者的用药安全和药品的治疗效果。
我国药典2020版本对微生物限度检查法做了全面更新和完善,包括对检查方法、标准和限度值的详细规定和说明,这对于药品的生产企业和监管部门都具有重要的指导意义。
在日常生产和监管中,执行我国药典2020版的微生物限度检查法,将有助于提高药品的质量和安全水平,保护患者的用药权益,为人民健康事业做出贡献。
5.总结我国药典2020版本中的微生物限度检查法,是药品质量控制中的重要环节。
通过严格执行微生物限度检查法,可以有效地控制药品中微生物数量,防止药品因微生物污染而造成质量问题和安全隐患。
我国药典2020版的微生物限度检查法的更新和完善,将为药品生产和监管提供科学的依据和指导。
在实践中要严格执行微生物限度检查法,确保药品质量和安全,保障患者的用药权益。
微生物限度检查一、引言微生物在生物学中扮演着重要的角色,除了参与腐败、厌氧发酵、产生生物燃料以外,微生物还有很多应用价值。
食品工业中的微生物检测就是其中之一。
在食品加工和贮藏过程中,如果控制不好微生物的生长和繁殖,很容易引发食品变质或者食物中毒等食品安全问题,因此微生物检测具有重要的意义。
为了保障食品安全,许多国家和地区都出台了标准,规定了食品中微生物的限度。
而微生物限度检查正是检测食品中微生物的一种方法,本文将介绍微生物限度检查的原理、方法与注意事项。
二、微生物限度的意义微生物限度是指食品中可以存在的微生物数的上限。
国际上对微生物限度的要求很高,因为微生物食源性疾病对人体危害非常大,同时微生物还能影响食品的品质和口感,因此必须要严格控制微生物的数量。
微生物限度的制定首先需要考虑食品的种类、处理方法、保存条件、目的人群等因素。
制定微生物限度时,主要考虑到以下两点:1.安全标准:针对人体安全问题,食品中微生物限度需要按照国家法规规定的标准执行,保证口感、安全性等问题。
2.质量标准:针对产品的质量问题,就需要划分出对应不同的等级和标准,在保证安全的前提下,尽量使得食品的DL等级达到一个较高的水平。
三、微生物限度的检测方法微生物限度是通过微生物检测来实现的,不同的食品样品需要使用不同的检测方法,通常包括以下步骤:1.预处理:取适当数量的样品,按照不同的检测方法进行预处理。
2.稀释:采取旋转、振荡或模压方法将制备后的样品进行稀释和拔平。
3.接种:在样品表面均匀涂散微生物,即接种操作。
需要保证接种的微生物数量准确,而且需要进行复现性验证。
4.培养:通过不同的培养方法来检测微生物的生长状态,例如传统的平板法、滤膜法、凝胶法、膜滴法,高通量法等。
5.计数:考虑到每个贝壳/滴子/膜所占面积不同,需要根据微生物在培养时所占据的单元数量确定微生物的数目。
根据不同的显微镜倍数,计算出单位面积内的微生物数量。
6.数据分析:根据食品中微生物的限度标准,将计数结果与标准进行比较,判断样品是否合格。
微生物限度检查
第一篇:微生物限度检查概述
微生物限度检查(Microbial Limit Test,简称MLT)是对制剂中微生物数量进行测定的一种方法,是药品质量控制中非常重要的一环。
微生物在药品中存在可能会影响药品的质量、安全性以及疗效。
因此,微生物限度检查是保障药品质量和安全的关键环节之一。
微生物限度检查通常是针对某些指定的有害微生物,如
大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等进行检测,通过这些微生物的限度常数,可以判断药品是否符合质量标准,进而保证药品的质量和安全性。
在进行微生物限度检查时,需要特别注意检测操作的洁
净度和严谨性,要求操作过程中不能够将无关微生物带入检测样品中,因此,检测过程中严格遵循操作规程和良好的实验技巧非常关键。
总的来说,微生物限度检查在药品质量控制中具有非常
重要的作用。
在检测操作过程中,不仅需要注意操作的洁净度,还需要准确判断检测数据的可靠性,确保所检测的微生物限度在规定范围内。
微生物限度检测方法微生物限度检测是指在药品、食品、化妆品等产品中,对微生物的数量和种类进行检测,以确保产品的质量安全。
微生物限度检测方法的选择和执行对产品的质量控制和安全性评价具有重要意义。
本文将介绍常见的微生物限度检测方法及其应用。
一、培养法。
培养法是一种常见的微生物限度检测方法,它通过将样品接种在适当的培养基上,利用微生物在培养基上生长、分裂和形成可见的典型菌落的特性,来检测微生物的数量和种类。
培养法主要包括菌落计数法、膜过滤法等。
菌落计数法是将样品均匀涂布在含有营养物质的琼脂平板上,经过一定时间的培养后,根据菌落的数量来确定微生物的数量。
膜过滤法是将样品过滤到孔径为0.45μm的膜上,然后将膜放置在含有营养物质的琼脂平板上培养,根据在膜上形成的菌落数量来确定微生物的数量。
二、生物学法。
生物学法是利用微生物的生物学特性,通过培养微生物或者利用生物学试剂来检测微生物的数量和种类。
生物学法主要包括酶标记法、PCR法等。
酶标记法是利用酶标记的抗体或抗原来检测微生物的数量和种类,其原理是将酶标记的抗体或抗原与待检测微生物发生特异性反应,然后通过酶反应产生显色物质或荧光物质来进行检测。
PCR法是利用聚合酶链式反应技术,通过扩增微生物的特异基因序列来检测微生物的数量和种类。
三、物理化学法。
物理化学法是利用微生物的生理生化特性,通过测定微生物的生长代谢产物或者利用特定的物理化学性质来检测微生物的数量和种类。
物理化学法主要包括ATP生物发光法、流式细胞术等。
ATP生物发光法是利用微生物在生长过程中产生的ATP来进行检测,通过测定样品中的ATP含量来确定微生物的数量。
流式细胞术是利用流式细胞仪对微生物进行快速、高效的检测和鉴定,通过测定微生物在流式细胞仪中的光散射和荧光信号来确定微生物的数量和种类。
综上所述,微生物限度检测方法多种多样,每种方法都有其适用的范围和特点。
在实际应用中,需要根据产品的特点和检测的目的选择合适的检测方法,并严格按照相应的标准和规范进行执行,以确保产品的质量安全。
微生物限度检查法标准操作规程第一篇:微生物限度检查法标准操作规程概述1.引言微生物限度检查法(Microbial Limit Test, MLT)是药品、医疗器械、食品和化妆品等生物制品产品质量控制检验的重要手段之一。
它的意义在于保证制品中微生物污染的可控性,保障产品的安全有效性。
本篇文章将围绕微生物限度检查法的标准操作规程,对其概述进行介绍。
2.主要内容2.1 微生物限度检查法的定义微生物限度检查法(Microbial Limit Test, MLT)是指对药品、医疗器械、食品和化妆品等生物制品产品中细菌和真菌等微生物数量进行检查的方法和标准。
它是评价产品质量与卫生安全性的重要方法。
2.2 微生物限度检查法的目的微生物限度检查法的目的在于评价药品、医疗器械、食品和化妆品等生物制品产品中的微生物数量是否在规定的限度范围内,以保证产品的安全性和有效性。
同时,微生物限度检查法也可为制品的生产、质量控制和质量管理提供有效依据。
2.3 微生物限度检查法的适用范围微生物限度检查法适用于药品、医疗器械、食品和化妆品等生物制品的质量控制检验。
其中,针对药品类,在我国《药典》中有详细规定。
3. 微生物限度检查法的标准操作规程3.1 样品处理样品处理过程应密闭、无菌且保持无菌状态。
洗手、穿戴无菌工作服及手套等工艺应符合规定,以避免二次污染。
3.2 检验方法微生物限度检查法主要分为计数法和筛选法,具体方法可根据制品的特性进行选择使用,并符合规定的国家标准。
对于细菌,常用的检验方法包括菌落计数法、薄膜过滤法等;对于真菌,常用的检验方法包括直接涂片法、薄膜过滤法等。
3.3 限度对于不同的制品,在药品中通常采用菌落计数法,在制品中微生物的限度规定一般标准分别为:细菌总数不超过10^3CFU/g或/mL,霉菌和酵母菌总数不超过10^2CFU/g或/mL。
3.4 结果判定若检测出的微生物数目符合规定限度,则判定结论为合格;若其中一个指标不符合规定,则判定为不合格。
微生物限度检查法名词解释
微生物限度检查法是一种用于检测和分析微生物在一定条件下的生长、繁殖和分布的检查方法。
该方法通常用于检测和分析生物制品、药品、食品、水源和其他领域中存在的微生物污染情况。
微生物限度检查法的主要目的是确保生产和处理过程中没有引入过多的微生物,从而避免在产品、溶液或环境中形成微生物种群,导致产品质量下降、产品变质、环境污染等问题。
微生物限度检查法也是药品生产和质量管理中的重要组成部分,以确保药品的质量和安全性。
在微生物限度检查法中,通常需要对样品进行预处理,然后在一定条件下培养,计数并评估微生物的生长情况。
根据计数的结果,可以确定样品中微生物的数量是否超过了规定的限度,从而判断样品是否被污染。
微生物限度检查法可以广泛应用于许多领域,例如医疗卫生、食品工业、化妆品工业、水处理等。
微生物限度检查法是一个重要的质量管理工具,它可以帮助生产和管理人员及时发现和解决问题,确保产品质量和安全。
微生物限度法在我们的日常生活和科学研究中,微生物无处不在。
它们既可以是我们的朋友,比如帮助我们消化食物的肠道菌群;也可能成为我们的敌人,引发各种疾病和食品变质。
为了确保我们所使用的药品、食品以及其他相关产品的质量和安全性,就需要有一种有效的方法来检测和控制其中微生物的数量,这就是微生物限度法大显身手的地方。
微生物限度法,顾名思义,是用于检测和限定产品中微生物存在数量的一种方法。
它的应用范围相当广泛,涵盖了药品、食品、化妆品等多个领域。
通过这种方法,我们能够了解产品中微生物的污染程度,判断其是否符合相关的质量标准和安全要求。
那么,微生物限度法具体是如何操作的呢?一般来说,它包括样品采集、预处理、微生物培养、计数和结果判定等多个步骤。
首先是样品采集。
这一步骤需要特别小心,以确保采集到的样品具有代表性。
对于固体样品,可能需要通过粉碎、混合等方式使其均匀;对于液体样品,则要充分摇匀。
而且,采样过程中要避免外部微生物的污染。
样品采集完成后,就需要进行预处理。
这是为了让微生物从样品中释放出来,并去除可能干扰检测的物质。
比如,在检测药品时,可能需要进行溶解、稀释等处理;对于食品,可能需要去除油脂、蛋白质等成分。
接下来是微生物培养。
这是微生物限度法的核心步骤之一。
将预处理后的样品接种到适合微生物生长的培养基上,然后在特定的温度、湿度和氧气条件下进行培养。
不同类型的微生物需要不同的培养条件,比如细菌通常在 30-37℃培养,霉菌和酵母菌则在 20-25℃培养。
经过一段时间的培养后,就可以对微生物进行计数了。
这可以通过肉眼观察培养基上的菌落数量来完成。
但要注意的是,一个菌落可能是由一个或多个微生物细胞形成的,所以需要根据具体情况进行换算。
最后是结果判定。
根据培养后得到的微生物数量,对照相关的标准和规范,来判断样品是否合格。
如果微生物数量超过了规定的限度,那么产品就可能存在质量问题。
微生物限度法的准确性和可靠性对于保障公众健康至关重要。
微生物限度检查微生物限度检查是一种常见的检验方法,用于评估制药产品、食品和环境的微生物质量。
微生物限度检查主要包括总大肠菌群、总菌落计数、霉菌和酵母菌的检验。
总大肠菌群是一类常见的微生物群体,其检验结果可以反映样品中可能存在的致病性微生物的数量。
在微生物限度检查中,常用的方法是将样品置于适当的培养基上进行培养,然后通过观察菌落形态和计数来确定总大肠菌群的数量。
在制药产品和食品领域,总大肠菌群的检验结果必须符合相关法规的要求,以确保产品的安全性和质量。
总菌落计数是评估样品中细菌和真菌总数量的常用方法。
在微生物限度检查中,常用的方法是将样品进行适当的稀释,然后将稀释液均匀涂布或点接到琼脂平板上进行培养。
经过一定时间的培养后,通过观察菌落形态和计数来确定总菌落计数。
总菌落计数的结果可以反映样品中微生物的总数量,是评估样品微生物质量的重要指标。
霉菌和酵母菌是常见的真菌类微生物,其检验结果可以反映样品中可能存在的霉变和腐败情况。
在微生物限度检查中,常用的方法是将样品进行适当的稀释,然后将稀释液均匀涂布或点接到含有抑制剂的琼脂平板上进行培养。
经过一定时间的培养后,通过观察菌落形态和计数来确定霉菌和酵母菌的数量。
霉菌和酵母菌的检验结果可以帮助评估样品的质量,并采取相应的控制措施。
在微生物限度检查中,还有其他一些常用的检验项目,如大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等。
这些项目的检验方法与总大肠菌群和总菌落计数类似,通过培养和观察菌落形态和计数来确定微生物的数量。
这些检验项目主要用于评估样品中可能存在的致病性微生物的数量,以确保制药产品和食品的安全性。
总之,微生物限度检查是一种重要的质量控制方法,可以评估样品中微生物的数量和质量。
通过采用适当的培养和观察方法,可以得到准确的微生物检验结果,为制药产品、食品和环境的质量控制提供科学依据。
中国药典微生物限度检查法
中国药典是中华人民共和国国家药品监督管理局编制的用于药品质量标准和规范的权威性文献。
其中,微生物限度检查是对药物产品中的微生物污染进行评估和控制的重要环节。
中国药典中的微生物限度检查法主要包括以下几个方面:
1.检测项目:微生物限度检查主要关注细菌、真菌和酵母菌
的存在与数量。
通常会检测大肠杆菌、铜绿假单胞菌、霉
菌和酵母菌等常见微生物。
2.样品准备:样品准备过程中,要根据具体要求制备适当稀
释的样品溶液。
根据不同产品的特点和要求,可能需要使
用适当的培养基进行预处理。
3.检测方法:中国药典中提供了一系列的微生物限度检测方
法,包括涂片法、水洗法、滤膜法等。
这些方法可以根据
不同的样品类型和特性选择适合的检测方法。
4.培养和观察:按照检测方法的要求,将样品接种在适当的
培养基上,进行培养并观察一定时间。
观察期间,需要注
意各种细菌、真菌和酵母菌的生长情况。
5.计数和判定:根据培养结果,进行微生物数量的计数,并
与规定的限度标准进行比较。
根据比较结果,判定样品是
否符合微生物限度标准。
通过微生物限度检查,可以评估药物产品中的微生物污染状况,并确保其在接受者使用时的安全性。
中国药典中的微生物限度
检查法为药品质量控制提供了重要的指导和标准。
微生物限度检查——微生物总数检查微生物限度检查是一种质量控制方法,用于评估样品中微生物的数量和种类,以确保样品符合相关标准和规定。
其中的微生物总数检查是其中一个重要的组成部分,它可以帮助确定样品是否符合卫生要求和产品质量标准。
微生物总数检查是通过特定的培养基和培养条件,对样品中可能存在的细菌、霉菌、酵母等微生物进行培养和计数,以获得样品中微生物总量的信息。
该方法可以检测出不同种类的微生物,包括细菌、霉菌、酵母等,适用于各种食品、药品、化妆品等产品的质量检测。
微生物总数检查的原理是,将一定量的样品接种到特定的培养基中,在适宜的温度和湿度条件下进行培养。
通过计数菌落数目,可以得出样品中微生物的总数。
一般情况下,培养基的选择和培养条件的设置需要根据不同的样品和检测目的进行调整。
微生物总数检查的流程包括以下几个步骤:1、样品处理:将待检测的样品进行适当处理,以便于接种和计数。
2、接种:将处理后的样品接种到相应的培养基中,使微生物在培养基中生长繁殖。
3、培养:将接种后的培养基放在适宜的温度和湿度条件下进行培养,一般需要一定时间,根据具体情况而定。
4、计数:在培养结束后,对培养基中的菌落数目进行计数,得出样品中微生物的总数。
5、结果分析:根据计数结果进行分析,判断样品是否符合相关标准和规定。
微生物总数检查在实际工作中的应用场景非常广泛,包括食品安全、药品质量、环境保护等领域。
在食品工业中,微生物总数检查可以用来检测食品中的细菌数量,判断食品是否符合卫生标准和质量要求。
在药品工业中,微生物总数检查可以用来检测药品中的细菌数量,确保药品的安全性和有效性。
在环境保护领域,微生物总数检查可以用来检测水体中的细菌数量,评估水体的污染程度。
总之,微生物总数检查是微生物限度检查中的重要环节,它可以为产品质量和卫生标准提供重要的依据和支持。
随着科学技术的不断发展,微生物总数检查的方法和技术也在不断改进和完善,相信在未来会发挥更加重要的作用。
微生物限度检查法微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。
检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。
微生物限度检查应在环境洁净度10000 级下的局部洁净度100 级的单向流空气区域内进行。
检验全过程必须严格遵守无菌操作,防止再污染,防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。
单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。
供试品检查时.如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂,应证明其有效性及对微生物无毒性。
除另有规定外,本检查法中细菌及控制菌培养温度为30~35 ℃;霉菌、酵母菌培养温度为23~28 ℃。
检验结果以1g 、lml 、10g 、l0ml 或10cm2为单位报告,特殊品种可以最小包装单位报告。
检验量检验量即一次试验所用的供试品量(g 、ml 或cm2)。
除另有规定外,一般供试品的检验量为10g 或10ml;膜剂为100 cm2;贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减。
要求检查沙门菌的供试品,其检验量应增加20g 或20ml (其中10g或10ml 用于阳性对照试验)。
检验时,应从2 个以上最小包装单位中抽取供试品,膜剂还不得少于4 片。
一般应随机抽取不少于检验用星(两个以上最小包装单位)的3 倍量供试品。
供试液的制备根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法制备供试液。
供试液制备若需加温时,应均匀加热,且温度不应超过45℃。
供试液从制备至加入检验用培养基,不得超过1 小时。
除另有规定外,常用的供试液制备方法如下。
1.液体供试品取供试品10ml ,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml ,混匀,作为l:10 的供试液。
油剂可加入适量的无菌聚山梨酯80 使供试品分散均匀。
水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
2.固体、半固体或黏稠性供试品取供试品10g ,加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至1OOml ,用匀浆仪或其他适宜的方法,混匀,作为1:10 的供试液。
微生物限度检测方法
微生物限度检测方法是指用于确定特定微生物在某种产品中的存在情况的检测方法。
微生物限度检测方法主要包括菌落计数法、培养方法、生化方法和分子生物学方法等。
1. 菌落计数法:这是一种常用的微生物限度检测方法,主要是通过将样品加入适当的培养基,经过一定的时间后,观察产生的菌落数目来估计微生物的数量。
可以通过直接计数,也可以通过稀释系列来测定数量。
2. 培养方法:培养方法是将样品加入含有适宜营养成分的培养基中,在一定条件下培养微生物,通过观察生长情况、形态特征、生理生化特性等来确定微生物的存在与否。
常用的培养方法有液体培养和固体培养。
3. 生化方法:生化方法是通过检测微生物生长过程中释放的代谢产物来确定微生物的存在与否。
常用的生化方法有气体生成法、乳酸生成法、酶活性测定等。
4. 分子生物学方法:分子生物学方法主要利用特定微生物的DNA或RNA序列进行检测。
常用的分子生物学方法有聚合酶链反应(PCR)、实时荧光PCR、核酸杂交等。
以上是常见的微生物限度检测方法,不同方法的选择取决于具体的检测要求和需求。
微生物限度检查方法
微生物限度检查方法是检验食品或药品中微生物水平的一种方法。
根据国家卫生部《食品微生物学检验规程》的标准要求,目前常用的微生物限度检查方法包括以下几种:
1.总菌落数测定法:通过菌落计数法,检测某一样品能够培养出的所有微生物数量。
2.大肠菌群检测法:通过检测样品中大肠菌群的数量,来判断食品卫生安全问题。
3.霉菌和酵母菌检测法:通过培养样品中的霉菌和酵母菌,来检测食品是否存在霉变。
4.致病菌检测法:通过检测样品中致病菌的存在与数量,来判断食品是否受到污染。
5.细菌耐热菌数量检测法:通过检测样品中细菌耐热菌的数量,来判断食品加热杀菌处理的有效性。
综上所述,微生物限度检查方法是对食品或药品中微生物水平的一种常规检测方法,其结果对保障公共卫生安全具有重要作用。
微生物限度检查法简介目录•1拼音•2注解1拼音wēi shēng wù xiàn dù jiǎn chá fǎ2注解微生物限度检查法系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查 *** 。
包括染菌量及控制菌的检查。
供试品应随机抽样。
如遇有异常或可疑的样品,须选取有疑义的样品。
一般抽样量为检验用量(2个以上最小包装单位)的3倍量。
供试品在检验前不得开启,在检查前及检查中应防止供试品污染菌受损、致死或繁殖。
凡能从药品、瓶口(外盖内侧及瓶口周围)外观看出发霉、变质的药品,可直接判为不合格,无需再抽样检查。
检查的全部过程均应严格遵守无菌操作,严防再污染。
除另有规定外,本检查法中细菌培养温度为30~35℃,霉菌、酵母菌培养温度为25℃~28℃,控制菌培养温度为36±1℃ 。
细菌、霉菌(酵母菌)计数和控制菌检查,均应作对照试验。
检验结果的报告以1g、1ml或10cm<2>为单位。
培养基及其制备 *** :1 、营养琼脂培养基与营养肉汤培养基见无菌检查法(附录ⅩⅢ B)2 、虎红琼脂培养基胨5g虎红(四氯四碘荧光素)0.0133g葡萄糖10g(或0.133%虎红溶液10ml)磷酸二氢钾(KH2PO4)1g琼脂15~20g*** 镁(MgSO4.7H2O)0.5g水1000ml除葡萄糖、虎红外,取上述成分,混合,加热溶化后,滤过,加入葡萄糖、虎红,分装,115℃灭菌30分钟。
3 、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)胨10g琼脂15~20g酵母浸出粉5g水1000ml葡萄糖20g除葡萄糖外,取上述成分,混合,加热融化后,滤过,加入葡萄糖,分装,115℃ 灭菌15分钟。
4 、胆盐乳糖培养基(BL)胨20g牛胆盐1.3g乳糖(或去氧胆酸钠0.25g)氯化钠5g水100ml磷酸氢二钾(K2HPO4)4.0g磷酸二氢钾(KH2PO4)1.3g除乳糖、牛胆盐外,取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2,煮沸,滤清,加入乳糖、牛胆盐,分装,115℃灭菌30分钟。
5 、曙红美亚甲蓝琼脂培养基(EMB)营养琼脂培养基100ml2%曙红溶液2ml20%乳糖溶液5ml0.5%亚甲蓝溶液1.3~1.6ml取营养琼脂培养基,加热融化后,冷至60℃,按无菌操作加入灭菌的其它叁种溶液,摇匀,倾注平皿。
6 、麦康凯琼脂培养基(MaCC)胨20g1%中性红溶液2.5ml乳糖10g15~20g牛胆盐5g水1000ml氯化钠5g除乳糖、1%中性红溶液、牛胆盐及琼脂外、取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,加入琼脂,加热融化后,再加入其余各成分,摇匀,分装,115℃灭菌30分钟,冷至约60℃,倾注平皿。
7 、叁糖铁琼脂培养基(TSI)胨20g*** 亚铁0.2g牛肉浸出粉5g硫代 *** 钠0.2g乳糖10g0.2%酚红溶液12.5ml蔗糖10g琼脂12~15g葡萄糖水1000ml氯化钠5g除叁糖、0.2%酚红溶液、琼脂外,取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,加入琼脂,加热融化后,滤过,再加入其余成分,摇匀,分装,115℃灭菌30分钟,制成高底层(2~3cm)短斜面。
8 、四硫磺酸钠亮绿增菌液(TTB)胨5g硫代 *** 钠30g牛胆盐1g水1000ml碳酸钙 10g取上述成分,混合,微温使溶解,121℃灭菌20分钟。
临用前,取上述培养基,每10ml中加入碘溶液(取碘6g与碘化钾5g,溶于20ml水中)0.2ml和0.1%亮绿溶液0.1ml ,混匀。
9 、沙门氏、志贺氏菌属琼脂培养基(SS)胨5g硫代 *** 钠8.5g牛肉浸出粉5g 1%中性红溶液2.5ml10g 0.1%亮绿溶液0.33ml牛胆盐8.5g 琼脂20g枸橼酚钠8.5g水1000ml枸橼酸铁铵1g除糖、指示剂、琼脂外,取上述成分混合,加热使溶解,调节pH 值使灭菌后为7.2 ±0.1,滤过,加入琼脂,加热融化后,121℃灭菌20分钟,再加入其余成分,摇匀,冷至约60℃,倾注平皿。
10、胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)胨20g枸橼酸钠1g牛肉浸出粉3g枸橼酸铁铵1g乳糖10g1%中性红溶液3ml蔗糖10g18~20g去氧胆酸钠1g水1000ml硫代 *** 钠2.3g除糖、1%中性红溶液及琼脂外,取上述成分混合,微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.2±0.1,加入琼脂,加热融化后,再加入其余成分,摇匀,冷至约60℃,倾注平皿。
11、十六烷叁甲基溴化铵琼脂培养基胨10g牛肉浸出粉 3g氯化钠5g琼脂15~20g十六烷叁甲基溴化铵 0.3g水1000ml除琼脂外,取上述成分混合,微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.5±0.1,加入琼脂,加热熔化后,分装,121℃灭菌20分钟,冷至约60℃,倾注平皿。
12、亚碲酸盐肉汤培养基临用前,取灭菌的营养肉汤培养基,每100ml中加入新配制的1%亚碲酸钠(钾)溶液0.2ml,混匀,即得。
13、卵黄高盐琼脂培养基胨10%氯化钠卵黄液 100ml牛肉浸出粉 1.8g琼脂23g氯化钠30g水650ml除10%氯化钠卵黄液外,取上述成分混合,微温使溶解,调节pH 值使灭菌后为7.6±0.1。
121℃灭菌20分钟,待冷至约60℃,以无菌操作加入10%氯化钠卵黄液,充分摇匀,倾注平皿。
10%氯化钠卵黄液的制备取新鲜鸡蛋一个,以无菌操作取出卵黄,放入10%灭菌氯化钠溶液100ml中,充分振摇,即得。
14、甘露醇高盐琼脂培养基胨10g1%酚红溶液2.5ml牛肉浸出粉 1g琼脂15~20g甘露醇10g水1000ml氯化钠75g除甘露醇、1%酚红溶液及琼脂外,取上述成分混合,微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2,加入琼脂,加热融化后,滤过,分装,115℃灭菌30分钟,冷至约60℃,倾注平皿。
15、蛋白胨水培养基胰蛋白胨10g水 1000ml氯化钠5g取上述成分混合,加热融化,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,分装于小试管中,121℃灭菌20分钟。
16、磷酸盐葡萄糖胨水培养基胨7g葡萄糖 5g磷酸氢二钾(K2HPO4) 3.8g水 1000ml取上述成分混合,微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,分装于小试管中,121℃灭菌15分钟。
17、枸橼酸盐培养基氯化钠5g枸橼酸钠(无水)2g*** 镁(MgSO4·7H2O)0.2g溴麝香草酚蓝指示液 20ml磷酸氢二钾(K2HPO4)0.8g琼脂15~20g磷酸二氢铵(NH4H2PO4)1g水1000ml除溴麝香草酚蓝和琼脂外,取上述成分,混微温使溶解,调节pH 值使灭菌后为6.9±0.1,加入琼脂,加热融化,加入指示剂混匀。
分装于小试管中,121℃灭菌15分钟,置成斜面。
注:所用琼脂应不含游离糖,用前用水浸泡冲洗。
18、糖、醇发酵培养基基础液胨10g0.5%酸性复红指示剂 10ml糖、醇 0.5%(或溴麝香草酚蓝指示液6ml )氯化钠5g水1000ml取胨和氯化钠加入水中,微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4,加入指示剂混匀,分装每瓶100ml,121℃灭菌15分钟。
配制葡萄糖发酵管时,于100ml基础液中加入0.5g葡萄糖,分装于含杜氏管(Durham)的小试管中。
121℃灭菌15分钟,配制其它糖醇发酵管时,将各种糖醇分别配成10%溶液,与基础液同时于121℃灭菌15分钟。
以无菌操作将5ml糖醇溶液加入100ml基础液内,分装于灭菌小试管中。
注:糖醇溶液亦可采用薄膜过滤法除菌。
19、5%乳糖发酵管胨0.2g乳糖5g氯化钠0.3g溴麝香草酚蓝指示液0.6ml磷酸氢二钠(Na2·HPO4·12H2O)0.2g水1000ml除乳糖和指示剂外,取上述成分,混合,微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4,加入乳糖及指示剂,混匀,分装于含杜氏管的灭菌小试管中,115℃灭菌15分钟。
20、尿素琼脂培养基胨1g葡萄糖1g氯化钠5g20%尿素溶液 1000ml磷酸二氢钾(KH2PO4) 2g琼脂20g0.2%酚红溶液6ml水1000ml除尿素和琼脂外,取上述成分,混合,调节pH值使灭菌后为7.2±0.1,加入琼脂,加热溶化并分装于锥形瓶,121℃灭菌20分钟。
冷至50~55℃,加入经薄膜过滤除菌的尿素溶液,混匀。
尿素的最终浓度为2%,分装于灭菌试管中,置成斜面。
21、氰化钾培养基胨3g磷酸氢二钠(Na2HPO4) 5.64g氯化钠5g氰化钾试液磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.225g水1000ml除氰化钾试液外,取上述成分,混合,调节pH值使灭菌后为7.5±0.1,121℃灭菌20分钟,冷却后,每100ml培养基中加入氰化钾试液1.5ml,分装于12×100mm灭菌试管内,每管4ml,立即用灭菌橡皮塞塞紧,置4℃保存。
同时,以不加氰化钾试液的培养基作为对照培养基,分装于灭菌试管中。
22、赖氨酸脱羧酶试验培养基胨5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1ml酵母浸出粉 3gL赖氨酸(DL赖氨酸) 0.5(1g)/100ml葡萄糖1g水1000ml除赖氨酸外,取上述成分,混合,加热溶解后分装,每瓶100ml。
加入L赖氨酸0.5g(DL赖氨酸1g)调节pH值使灭菌后为6.8,同时以不加赖氨酸培养基作为对照。
分装于灭菌的小试管内,每管1ml并滴加一层液体石蜡,121℃灭菌10分钟。
23、绿脓菌素(pyocyanin)测定用培养基(PDP琼脂)胨20g甘油10ml氯化镁(无水) 1.4g琼脂18~20g*** 钾(无水)10g水1000ml取胨、氯化镁和 *** 钾加入水中,微温使深解。
调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,加入甘油及琼脂,加热溶解,121℃灭菌20分钟,置成斜面。
24、明胶培养基胨5g明胶 120g牛肉浸出粉 3g水 1000ml取上述成分加入水中,浸泡约20分钟,随时搅拌,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,分装于小试管中,115℃灭菌20分钟。
25、硝酸盐胨水培养基胨10g亚硝酸钠0.5g酵母浸出粉 3g水1000ml硝酸钾2g取胨及酵母浸出粉加入水中,微温使溶解,调节pH值使灭菌后为7.3±0.1,加入硝酸钾和亚硝酸钠溶解,混匀。
分装于含杜氏管的小试管中,115℃灭菌20分钟。
试药牛肉浸出粉“Lablemco”powder本品为米色粉末在水中溶解。
牛胆盐 Bile Salt Ox本品为淡黄色或黄棕色粉末;味苦而甜;具吸湿性。