布鲁菌病的血清学检验

布鲁氏菌病的血清学分析与细菌学检测方法布鲁氏菌病是由布鲁氏菌引起的一种人畜共患的传染病，其临床症状多样化且类似于其他感染性疾病，因此需要通过血清学分析和细菌学检测方法来确诊。

本文将对布鲁氏菌病的血清学分析和细菌学检测方法进行介绍。

首先，血清学分析是布鲁氏菌病确诊的重要方法之一。

在感染布鲁氏菌后，人体会产生特异性抗体作为免疫反应的体现。

通过检测患者的血液样本中的抗体水平，可以判断是否存在布鲁氏菌感染。

常用的血清学检测方法包括鲁斯菌血凝试验（RBPT）、红细胞沉降试验（RBT）、血凝凝集试验（CFT）、鲁斯菌凝聚试验（SAT）等。

这些血清学检测方法基于对患者血清中布鲁氏菌抗体进行定性或定量检测，具有灵敏度高、特异性好的特点。

鲁斯菌血凝试验是一种常用的初筛试验，通过观察血清与鲁斯菌悬液的凝集反应来判断是否感染布鲁氏菌。

如果血清中存在布鲁氏菌抗体，凝集反应会发生，并形成凝集现象。

红细胞沉降试验和血凝凝集试验则可以更准确地测定患者血清中布鲁氏菌抗体的滴度，用于判断感染程度。

鲁斯菌凝聚试验则是一种特异性较高的试验，通过将鲁斯菌的抗原与患者血清混合，观察是否会发生凝聚反应，来确定是否感染布鲁氏菌。

除了血清学分析，细菌学检测方法也是布鲁氏菌病确诊的重要手段之一。

细菌学检测方法主要通过从患者的体液（如血液、淋巴结组织等）或粪便中分离和培养布鲁氏菌，然后进行鉴定来确诊。

常用的细菌学检测方法有无菌抽取、培养和染色等步骤。

其中，无菌抽取是从患者体液或组织中取得标本，并采用无菌技术处理，以避免细菌污染。

接着，标本会被接种于培养基上，利用培养基中的营养物条件和条件的控制，使布鲁氏菌得以生长和繁殖。

最后，通过染色技术如格拉姆染色、新西兰染色等，可以观察和鉴定生长在培养基中的细菌是否为布鲁氏菌。

细菌学检测方法的优势在于可以直接检测布鲁氏菌的存在，并可以对感染量进行定量分析。

此外，细菌学检测还可以对分离到的菌株进行药敏试验，以确定该菌株对不同抗生素的敏感性，从而辅助临床治疗的选择。

布鲁菌病的诊断提示及治疗措施布鲁菌病（brucellosis）又称波状热。

是由布鲁菌引起的动物源性传染病，主要病理改变是肝、脾、骨髓、淋巴结的炎性变，以及由此而产生的菌血症及变态反应。

其临床特点是长期发热、多汗、关节痛及肝脾大。

人群普遍易感。

【诊断提示】1.流行病学注意患者的职业情况及与病畜及皮毛接触的程度，尤其是与流产的动物接触史。

2.临床表现潜伏期一般1～3周，最短3d，最长达1年。

起病大多缓慢。

①发热、多汗，开始为低热，以后逐渐加重，以弛张热多见，也可表现为不规则热或持续低热。

发热数周后，体温逐渐消退，经数日或1～2周的缓解期，症状重新出现，反复发作，可迁延数月而形成波浪热型。

多数患者于每日热退时常伴有大汗，是本病的特征之一。

②关节痛，多数患者表现为游走性肌肉和关节疼痛，多见于大关节及脊柱。

③肝、脾、淋巴结肿大。

④生殖系统症状，男性患者可发生睾丸炎、附睾炎。

多为一侧睾丸肿大；女性患者可有子宫内膜炎、输卵管炎、卵巢炎，可致流产。

⑤神经系统症状：主要表现为神经痛，以腰骶神经痛及坐骨神经痛多见，亦可引起脑膜炎。

轻型病人只有低热、乏力、食欲缺乏等。

如病程迁延而进入慢性期，则有消瘦、贫血、关节及肌肉痛，甚至出现关节强直。

3.实验室检查白细胞计数正常或轻度减少，淋巴细胞增高、血沉增快，提示病情活动。

血液、骨髓、乳汁、子宫分泌物等细菌培养可获阳性结果。

血清学检查：血清凝集试验，多在两周出现阳性反应，1：160以上有诊断价值。

补体结合试验，1：16以上即为阳性，对慢性患者有较高的特异性。

皮肤试验，方法是以布鲁菌抗原做皮内试验，阴性有助于排除布鲁菌感染。

阳性仅反映曾有过感染，接种疫苗者可呈阳性。

【防治措施】1.病原治疗急性期及病情活动时采用抗菌治疗，需联合用药：多西环素200mg/d，分2次口服，加利福平600～900mg/d，空腹分2次服，疗程6周，复发率15%。

亦可选用多西环素联合复方磺胺甲噁唑或利福平联合氟喹诺酮类药物。

2021年第1期 吉林畜牧兽医·经验交流·JingYan JiaoLiu畜间布鲁氏菌病的血清学检测方法白 翠1，马晓媛1，王 楠1，曹东阳1，胡泽宇1，李海燕2，郑 聪3，刁鹏翔41.吉林省动物疫病预防控制中心，吉林长春 130062；2.吉林省通化市二道江区畜牧兽医总站，吉林通化 134000；3.吉林省吉林市龙潭区江北乡畜牧兽医站，吉林吉林市 132000；4.吉林省吉林市昌邑区两家子乡畜牧兽医站，吉林吉林市 132000布鲁氏菌病（简称布病）是由布鲁氏菌引起的人畜共患的传染、变态反应性疾病。

病原体可以通过体表皮肤黏膜、呼吸道、消化道进入机体。

人感染布病主要是与职业、饮食和生活习惯有关。

由于布鲁氏菌感染一周后可出现特异性血清抗体，因此，国内外均用血清学试验检测该病。

方法主要有虎红平板凝集、试管凝集试验、胶体金免疫层析试验和酶联免疫吸附试验。

1 虎红平板凝集试验虎红平板凝集试验操作简单，价格便宜，但有时会产生假阳性和假阴性，适合大量样品的初筛。

1.1 材料准备1.1.1 虎红平板凝集抗原、标准的阳性和阴性血清，按说明书使用。

1.1.2 被检血清应新鲜，无明显蛋白凝块，无溶血和无腐败气味。

1.1.3 洁净的玻璃板，其上划分成4 cm2 的方格。

1.2 操作方法1.2.1 试验前，将血清和抗原在室温恢复30 min。

1.2.2 在玻璃板上加入25 µL的被检血清。

1.2.3 被检血清旁加入等量的抗原。

1.2.4 用牙签类小棒混合均匀，在4 min内观察结果。

1.3 结果判定1.3.1 在阴阳对照成立的条件下，试验成立。

1.3.2 被检血清在4 min内出现肉眼可见凝集现象，为阳性（+）， 无凝集现象，呈均匀粉红为阴性（-）。

2 试管凝集试验操作时间比虎红凝集试验长，比较繁琐，但特异性较好，实用性也比较强，多用于复核。

2.1 操作过程2.1.1 血清的稀释牛、马、骆驼一般从1:50开始，稀释4个滴度；猪、狗和羊从1:25开始稀释，同样是4个稀释度。

布鲁氏菌病诊断标准
布鲁氏菌病诊断标准如下：
(一) 流行病学：发病前病人与家畜或畜产品，布氏菌培养物有密切接触史，或生活在疫区的居民，或与菌苗生产、使用和研究密切联系者。

(二) 临床表现：出现数日乃至数周发热，多汗，肌肉和关节酸痛，乏力兼或肝、脾、淋巴结和睾丸肿大等可疑症状及体征。

(三) 实验室检查：布病玻片或虎红平板凝集反应阳性或可疑，或皮肤过敏试验后24、48小时分别观察一次，皮肤红肿浸润范围有一次在2.0cm×2.0cm及以上(或4.0cm²以上)
(四) 分离细菌：从病人血液、骨髓、其他体液及排泄物中分离到布氏菌。

(五) 血清学检查：标准试管凝集试验(SAT)滴度为1：100及以上，对半年内有布氏菌苗接触史者，SAT滴度虽达1：100及以上，过2——4周后应再检查，滴度升高4倍及以上，或用补体结合试验(CFT)检查，CFT滴度1：10及以上;抗人免疫球蛋白试验(Coomb'S)滴度1：400及以上。

诊断疑似病例：具备(一)、(二)、(三)者。

诊断确诊病例：疑似病例加(四)或(五)中任何一项者。

布病血清学检测在布鲁杆菌病诊断中的效果评价目的：分析和探究布鲁氏杆菌病中应用布病血清學检测的临床效果。

方法：研究时间：2018年9月至2020年5月，选取对象：我中心506例接触过牧业的人员，所有选取人员均接受RBPT（虎红平板凝集试验）、SAT（试管凝集试验）检验，分析最终的检验结果。

结果：RBPT与SAT检测结果相比后所得Kappa 值为0.912，且RBPT与SAT检测结果的一致性相对较好;布鲁氏杆菌病检验中，RBPT检测后的诊断符合率为2.57%（13/506）。

结论：在对接触过牧业人员进行检查的过程中，采取布病血清学检测（虎红平板凝集试验、试管凝集试验）的临床效果较为显著，值得进一步推行。

标签：布鲁氏杆菌病患者;布病血清学检测;诊断符合率;应用效果布鲁氏杆菌病，又称“布氏杆菌病、布病”，属于临床上较为常见的一种动物源性传染病，在牧区较为多发，其传染源为带菌或已发病的牛、羊等，且此类疾病患者的临床表现包括：高热、大汗、乏力、关节疼痛、食欲不振、贫血等，更加会对患者的生命安全造成严重威胁[1-2]。

对此，医院相关工作人员必须要引起高度的重视，以早发现、早治疗、早痊愈为目标进行干预，从而较好的稳定其病情。

本文研究主要分析布鲁氏杆菌病中应用布病血清学检测（虎红平板凝集试验、试管凝集试验）的临床效果，相关内容汇总如下。

1 资料和方法1.1 一般资料根据研究需要，筛选506例我中心接触过牧业的人员作为参考对象，时间：2018年9月至2020年5月。

在506例接触过牧业人员中，男性276例，占比54.55%，女性230例，占比45.45%，年龄最小值与年龄最大值分别为23岁、65岁，平均（44.15±2.37）岁，研究在医院伦理委员会批准的基础上展开，此次研究有意义。

1.2 方法本次选取的506例研究对象均需保持空腹状态后，对其进行静脉血样标本的采集，一般情况下，血样标本的采集量为4ml，其次，严格按照对应试剂的说明书和操作规范进行RBPT（虎红平板凝集试验）和SAT（试管凝集试验）检验，分析最终检验结果。

羊布鲁氏菌病不同血清学检测方法的比较武水珍X u m u s h o u y i 羊布鲁氏菌病又被称为布病，它是由布鲁斯杆菌感染引发的一种发热、流产、睾丸炎症、关节肿胀为主要症状的人畜共患传染性疾病，该种传染性疾病除了危害羊之外，还可以危害多种反刍动物，同时也会危害到人类的身体健康。

为了更好的防范该种传染性疾病的传播流行，都需要做好妥善的疫苗免疫接种工作和疫情的检测筛查。

在羊布鲁氏杆菌病诊断过程中常用的检测方法多种多样，主要包括了虎红平板凝集试验、试管凝集试验、酶联免疫吸附试验到等，不同的试验有着不同的操作标准，同时检测的精确性也存在一定差异。

为了进一步研究不同学生检测方法对布鲁氏杆菌病的检测效果，从流行过羊布鲁氏杆菌病的2个规模化养殖场当中采集新鲜血液200份，进行血清学检测，现将具体内容介绍如下：一、试验材料与方法1、试验材料获取本次研究从流行过羊布鲁氏杆菌病的两个规模化养殖场中采集新鲜血液200份，将其放置在4度的温箱当中进行保存。

在检测过程中主要涉及到的试剂为虎红平板凝集抗原、虎红平板凝集试验阳性血清、羊布鲁氏杆菌病抗体检测试剂盒（EILSA ）、布鲁氏杆菌试管凝集抗原、布鲁氏杆菌标准阳性血清、标准阴性血清、绵羊红细胞。

上述材料均从正规途径采集。

在试验过程中所涉及到的仪器主要包括了生化培养箱、酶标仪、全自动酶标洗板机、单多道移液器等。

2、试验方法在试验操作过程中，首先对采集到的血液进行血清分离得到的血清进行编号处理。

虎红平板凝集试验、补体结合试验、试管凝集试验的检测和判定按照布鲁氏杆菌诊断技术标准进行。

羊布鲁氏杆菌抗体检测试验，按照抗体检测试剂盒中的相关说明进行严格的操作，并进行阳性阴性判断。

二、结果分析1、不同血清检测方法200份血清样品当中的阳性率在进行血清学检测过程中，根据布鲁斯杆菌病防治技术规范的相关规定要求，对于普通平板检测为阳性，但试管凝集检测为阴性的血清，应该在试验结束30天之后，再次采集该头患病羊的新鲜血液进行一次检测，如果虎红平板凝集试验的检测结果再次为阳性，则可以判断该血清为阳性，否则判断为阴性。

布鲁氏菌病的诊断标准
布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌引起的人畜共患病，临床上症状多样，易被误诊，因此准确的诊断对于病患的治疗和预防至关重要。

下面将介绍布鲁氏菌病的诊断标准，以帮助临床医生更好地诊断和治疗该疾病。

一、临床表现。

1.急性期，患者可出现发热、乏力、头痛、关节痛等症状，严重者可出现寒战、高热、出汗等。

2.慢性期，患者可出现长期疲劳、食欲不振、体重减轻、关节炎等症状。

二、实验室检查。

1.血清学检查，包括凝集试验、补体结合试验、酶联免疫吸附试验等，阳性结
果有助于诊断。

2.细菌学检查，从患者的血液、骨髓、脑脊液、尿液等标本中分离出布鲁氏菌，有助于确诊。

3.组织病理学检查，对于可疑病灶进行活检，观察组织病理学改变，有助于诊断。

三、影像学检查。

X线、CT、MRI等影像学检查可发现肝脾肿大、骨关节损害等特征性改变，
对诊断有一定帮助。

四、流行病学史。

了解患者的职业、生活环境、接触史等，对于布鲁氏菌病的诊断也具有一定辅
助作用。

五、其他辅助检查。

包括血培养、骨髓培养、尿培养等，有助于发现患者体内的布鲁氏菌。

综上所述，布鲁氏菌病的诊断需要综合临床表现、实验室检查、影像学检查、
流行病学史等多方面信息，以确保准确诊断。

对于疑似病例，应及时进行相关检查，以便早日发现和治疗该疾病，减少病患的痛苦和传播的风险。

希望本文对临床医生在布鲁氏菌病的诊断上有所帮助，提高对该疾病的认识和
诊断水平，为病患的治疗提供更好的支持。

布鲁氏菌病血清学检测方法优缺点对比王　刚1，范伟兴2，刘　坤2，田丽华3，温建新1（1. 青岛农业大学动物医学院，山东青岛　266109；2. 中国动物卫生与流行病学中心，山东青岛　266032；3. 青岛西海岸新区动物疫病预防与控制中心，山东青岛　266400）摘　要：布鲁氏菌病（简称布病）严重危害畜牧养殖业安全和人类健康，而有效的检测方法能够为布病的预防、检测和净化提供技术支持。

目前针对布病的血清学检测方法主要包括：布病虎红平板凝集试验（RBT）、试管凝集试验（SAT）、全乳环状实验（MRT）、酶联免疫吸附试验（ELISA）、荧光偏振测定法（FPA）、补体结合试验（CFT）以及琼脂扩散试验（NH-GD）等。

不同的血清学检测方法各有优缺点：RBT操作简便，敏感性较高，但环境会对检测结果产生一定影响；ELISA敏感性较高，可一次性检测多个样本，但对仪器要求较高；FPA短时间内能够检测大量样品，操作简单，特异性和敏感性与ELISA相似，但需要专业的荧光偏振仪器；SAT特异性较强，但敏感性不高，操作步骤繁琐；CFT的特异性和敏感性都高于SAT，但试验较为繁琐，耗时长；MRT一般只用于牛奶样本检测，无需采血，特异性强，但对牛奶的质量有一定要求；NH-GD对疫苗免疫样本和野毒感染样本具有鉴别诊断能力，但抗原纯度要求高。

因此，RBT、MRT、ELISA、FAP和NH-GD更适合用于布病初筛，而SAT和CFT更加适用于布病复核。

未来应探索更多的血清学检测方法，如荧光微球法、半抗原鉴别诊断方法等，以便为布病检测提供更优选择。

关键词：布鲁氏菌病；血清学；检测方法；优缺点对比中图分类号：S851.3 文献标识码：A 文章编号：1005-944X（2021）05-0072-04DOI：10.3969/j.issn.1005-944X.2021.05.016Comparison on the Serological Detection Methods for BrucellosisWang Gang1，Fan Weixing2，Liu Kun2，Tian Lihua3，Wen Jianxin1（1. School of Veterinary Medicine，Qingdao Agricultural University，Qingdao，Shandong　266109，China；2. China Animal Health and Epidemiology Center，Qingdao，Shandong　266032，China；3. Qingdao West-Coast Economic New Area Center for Animal Disease Prevention and Control，Qingdao，Shandong　266400，China）Abstract：The animal husbandry safety and human health have been seriously endangered by brucellosis，against which，the prevention，detection and purification could be technically supported by an effective detection method. Current serological detection methods mainly include rose-bengal plate agglutination test（RBT），standard-tube agglutination test（SAT），whole milk ring test（MRT），enzyme-linked immunosorbent test（ELISA），fluorescence polarization Assay（FPA），complement fixation test（CFT）and native hapten-gel diffusion test（NH-GD），which are with different advantages and disadvantages as follows：RBT is user-friendly with high sensitivity，but is subject to environment to some extent；ELISA can detect several samples at one time with high sensitivity，but advanced device will be required；FPA can detect a large number of samples in a short time with similar specificity and sensitivity as ELISA，but a specific fluorescence polarization instrument will be required；SAT is with good specificity but lower sensitivity and complicated operation steps；CFT is with higher specificity and sensitivity compared to SAT，but is收稿日期：2021-02-07　修回日期：2021-02-26基金项目：山东省现代农业产业技术体系特种经济动物创新团队项目（SDAIT-21）通信作者：温建新。

布鲁氏菌病诊断技术标准一、流行病学调查布鲁氏菌病（简称布病）是一种由布鲁氏菌引起的动物源性传染病。

本病在流行病学上有明显的特点，包括地区性、季节性及职业性。

在流行地区，患者多有与家畜或畜产品密切接触史，或与布鲁氏菌病流行地区有旅行史。

二、临床表现1.发热：多数患者以不规则热为常见，也有弛张型、稽留型和短期发热者。

2.多汗：尤其在夜间或清晨时，大汗淋漓。

3.乏力：几乎所有病例均有不同程度的乏力。

4.疼痛：常表现为全身性疼痛和关节痛。

5.肝、脾、淋巴结肿大等。

三、实验室检测1.血象：白细胞总数正常或偏低，淋巴细胞相对或绝对增多。

2.细菌学检查：血液、骨髓、脑脊液、关节液等标本，通过培养分离出布鲁氏菌，是确诊布鲁氏菌病的重要依据。

3.免疫学检查：血清学试验（如凝集试验、酶联免疫吸附试验等）检测特异性抗体，可作为确诊依据。

4.其他检查：如肝功能、肾功能等。

四、病理学诊断布病的病理学特征包括淋巴结炎、网状内皮细胞增生以及各种脏器的病理改变。

五、鉴别诊断布病应与疟疾、伤寒、结核病等相鉴别，根据临床表现和实验室检查结果进行综合判断。

六、病情评估与预后判断1.病情评估：根据临床表现和实验室检查结果，评估患者的病情轻重及疾病进展情况。

2.预后判断：布病预后良好，经过及时治疗，大多可痊愈。

但若延误治疗，可引起并发症，甚至危及生命。

七、诊断流程图（详见附图）八、诊断标准分级1.疑似病例：符合流行病学史和临床表现。

2.临床诊断病例：符合疑似病例标准，同时符合实验室检查中的一项阳性指标。

3.确诊病例：符合疑似病例或临床诊断病例标准，同时符合病理学检查结果或分离培养出布鲁氏菌。

布鲁氏菌诊断的金标准
摘要：
一、布鲁氏菌诊断简介
二、布鲁氏菌诊断的金标准
三、金标准的重要性
四、结论
正文：
布鲁氏菌诊断的金标准
布鲁氏菌病是一种由布鲁氏菌引起的传染病，常见于畜牧业发达的地区。

诊断布鲁氏菌病的方法有很多，但金标准一直是血清学检测。

血清学检测是通过检测患者血清中的布鲁氏菌抗体，来判断患者是否感染了布鲁氏菌。

这种方法具有较高的灵敏度和特异性，能够准确地诊断出患者是否感染了布鲁氏菌，因此被认为是布鲁氏菌诊断的金标准。

金标准的重要性
金标准是医学诊断中非常重要的一个概念，它指的是一个诊断方法在灵敏度、特异性、准确性和可重复性等方面的综合表现。

在布鲁氏菌病的诊断中，血清学检测作为金标准，具有其他诊断方法无法比拟的优势。

首先，血清学检测具有较高的灵敏度和特异性，能够准确地诊断出患者是否感染了布鲁氏菌。

其次，血清学检测操作简单、快速，能够满足临床对快速诊断的需求。

最后，血清学检测适用于不同年龄段和不同病程的患者，具有广泛的应用范围。

结论
总的来说，血清学检测作为布鲁氏菌诊断的金标准，在诊断布鲁氏菌病方面具有不可替代的优势。

然而，血清学检测也存在一些局限性，如对抗原的质量和检测方法的选择要求较高，需要专业人员进行操作等。

中国畜禽种业2019.03作者简介：李尤龙（1972，7-），男，云南省罗平县人，大专，兽医师，主要从事畜牧兽医工作。

家畜布鲁氏菌病血清学调查李尤龙1杨艳明2李登峰3（1，云南省曲靖市罗平县大水井乡农业综合服务中心655800；2，云南省曲靖市罗平县畜禽改良工作站655800；3，云南省曲靖市罗平县动物疫病预防控制中心655800）摘要：为深入了解云南省曲靖市罗平县家畜（猪、牛、羊）布鲁氏菌病的防控成效，于2018年8～11月从罗平县所属的13个乡、镇（街道）共采集家畜血清3089份（牛血清150份、猪血清751份、羊血清2188份）进行布病感染情况血清学检测。

采用虎红平板凝集试验(RBT)进行初筛，然后进行竞争酶联免疫吸附试验确诊。

结果显示，3089份血清全部为阴性，调查数据表明，罗平县家畜布鲁氏菌病的防控取得了一定成效。

关键词：家畜；布鲁氏菌病；血清学调查；罗平县布鲁氏菌病（简称布病）是由布鲁氏菌属细菌感染导致人畜共患的常见传染病，在全世界范围内严重威胁人类健康，影响畜牧业发展。

世界动物卫生组织（OIE ）将其列为法定报告的传染病，我国规定布病为多种动物共患的二类动物疫病。

因此，开展家畜布病的血清学调查具有重要意义。

1材料与方法1.1样本来源、采样要求和采样比例对去年监测出阳性畜的场（户）100%采样监测，对引入饲养期限不足半年的牲畜实行100%采样监测，对养牛20头以上、羊20只以上、猪50头以上的规模场户按5%比例采集血清（种公畜、母畜、育肥畜比例为1:3:1），对监测有阳性畜的养殖场（户、企业）实行100%采样复检。

羊共调查13个乡（镇、街道）105个行政村280个自然村，10个规模场、570户散养户，调查羊35634只，共采集羊血清2188份；猪共调查13个乡（镇、街道）48个行政村73个自然村，31个规模场，66户散养户，调查猪21318头，共采集猪血清751份，牛共调查13个乡（镇、街道）16个行政村20个自然村，3个规模场、17户散养户，调查牛11856头，共采集牛血清150份。

实验四 布鲁氏菌病检疫课程名称：动物传染病学实验学时：4学时一、 实验目的初步掌握布鲁氏菌病试管凝集试验的免疫生物学检疫方法。

二、 实验原理应用血清学方法检出血清中有抗体存在，则说明被检动物为布氏杆菌病患畜。

动物感染布氏杆菌以后首先出现的是凝集抗体，再过一段时间才出现补体结合抗体，最后产生变态反应性。

补体结合反应是一种高度特异性的，其阳性反应与感染的符合率，比血清凝集试验与感染的符合率高。

我国的家畜布氏杆菌病检疫应用的免疫生物学方法主要是凝集试验。

试管凝集反应：本试验按《家畜布氏杆菌病试管凝集反应技术操作规程及判定标准》进行。

三、 实验内容（一）实验准备1、抗原：由兽医生物药品厂生产供应。

使用时用O．5％石炭酸生理盐水作1：20稀释，长霉或出现凝集块的抗原不能应用。

2、 被检血清：必须新鲜，无明显蛋白凝固，无溶血现象和腐败气味。

阳性血清和阴性血清：由兽医生物药品厂生产供应。

3、稀释液：0．5％石炭酸生理盐水，用化学纯石炭酸与氯化钠配制，经高压灭菌后备用。

4、 用具：1ml滴管、10ml滴管、试管架、洗耳球、10ml玻璃试管、移液器。

（二）实验步骤1、布病试管凝集反应牛血清稀释和加抗原的方法试管号（牛编号） 1 2 3 4 5血清最后稀释度 1:25 1:50 1:100 1:2001:4000.5%石灰酸生理盐水（ml） 2.4 0 0.5 0.5 0.5被检血清（ml） 0.1 0.5 0.5 0.5 0.5 弃去0.5诊断抗原1:20 0 0.5 0.5 0.5 0.5 悬空加样判 定比浊管配制方法试管号 抗原稀释(ml) 1:40 0.5%石灰酸生理盐水(ml)清亮度% 判断（标记）1 0 1.0 100 ++++2 0.25 0.75 75 +++3 0.5 0.5 50 ++4 0.75 0.25 25 +5 1.0 0 0 －2、全部试管充分振荡后，置37℃温箱中22~24小时后，用比浊管对照并记录结果。