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分解纤维素的微生物的分离一、纤维素与纤维素酶1．纤维素(1)化学组成：.(2)含量：是地球上含量最丰富的多糖类物质。
(3)分布：棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。
2．纤维素酶(1)组成：纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种组分，即C 1酶、C X 酶和葡萄糖苷酶。
(2)作用：纤维素C 1酶、C X 酶,纤维二糖葡萄糖苷酶,葡萄糖二、纤维素分解菌的筛选1．原理：纤维素分解菌产生的纤维素酶能分解刚果红和纤维素形成的红色复合物，使培养基上出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
2．方法：刚果红染色法.1.纤维素酶是一种复合酶，包括C1酶、CX 酶和葡萄糖苷酶等组分。
2．纤维素酶的作用：纤维素――→C1酶、CX 酶 纤维二糖――→葡萄糖苷酶葡萄糖 3．刚果红可与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
4．以纤维素为主要碳源的选择培养基培养可以增加纤维素分解菌的浓度。
5．分离后，为确定得到的是纤维素分解菌，还需进行发酵产纤维素酶的实验。
⎩⎨⎧ 方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红三、实验流程四、纤维素分解菌的进一步鉴定1．为确定得到的透明圈中的菌落是纤维素分解菌，需要进行发酵产纤维素酶的实验，发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。
2．纤维素酶的测定方法，一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定。
1．寻找纤维素分解菌应到(..)A ．湿润的环境中........B ．富含纤维素的环境中C ．富含无机盐的环境中.......D ．池塘中解析：选 B.在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，因此寻找纤维素分解菌应到富含纤维素的环境中寻找。
2．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是(..)A ．分解尿素的细菌............B ．硝化细菌C ．分解纤维素的细菌..........D ．乳酸菌解析：选 C.分解纤维素的细菌能将纤维素分解，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。
分解纤维素的微生物的分离一、学习目标:1.简述纤维素酶的种类及作用。
2.从土壤中分离出分解纤维素的微生物。
3.讨论分解纤维素的微生物的应用价值。
二、知识梳理：（一）、纤维素与纤维素酶1.纤维素:由C、H、O三种元素组成,是一种多糖。
是自然界中纤维素含量最高的天然产物,此外,木材、作物秸秆等也富含纤维素。
2.纤维素酶的作用:纤维素酶是一种,一般认为它至少包括三种组分,即C1酶、酶和酶,前两种酶使纤维素分解成,第三种酶将纤维二糖分解成。
（二）、纤维素分解菌的筛选1.筛选方法:染色法。
2.筛选原理:刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应,当纤维素被纤维素酶分解后,红色复合物无法形成,出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
（三）、实验设计1.土壤取样:采集土样时,应选择富含的环境。
2.选择培养(1)目的:增加的浓度,以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。
(2)制备选择培养基:参照课本旁栏中的比例配制。
(3)选择培养:称取土样20 g,在无菌条件下加入装有30 mL 培养基的锥形瓶中,将锥形瓶固定在上,在一定温度下振荡培养1~2 d。
也可重复选择培养。
(4)梯度稀释:依次将培养液稀释101~107倍。
(5)将样品涂布到鉴别的培养基上。
(6)刚果红染色法:挑选产生的菌落,一般即为分解纤维素的菌落。
三、当堂检测：1.（单选）纤维素酶是一种由多种酶组成的复合酶，其中将纤维二糖分解成葡萄糖的是A. 葡萄糖苷酶B. C1酶C. 纤维二糖酶D. C x酶2.（单选）获得分解纤维素的微生物一般从土壤中取样，下列方法中不合理的一项是A. 在取样之前将取样用的铁铲和盛土样的信封消毒B. 选择枯枝败叶多的地方进行取样C. 取样之前30天将滤纸埋在土壤中，从腐烂的滤纸上分离样品D. 取样之后的土壤在接种之前先做消毒处理3. （多选）苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着可以降解苯酚的微生物。
专题二第三节分解纤维素的微生物的分离测试题知识点：有关纤维素的基础知识1．以下材料中纤维素含量最高的是（）A．杨树B．小麦C．玉米D．棉花2．纤维素酶能够分解（）A．纤维素的微生物B．淀粉的微生物C．纤维素D．淀粉3．寻觅纤维素分解菌应到（）A．湿润的环境中B．富含纤维素的环境中C．富含无机盐的环境中D．水池中4、微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是（）A．C1酶和Cx酶B．C1酶和葡萄糖苷酶C．Cx酶和葡萄糖苷酶D．C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶5．以下生物能分解纤维素的是（）①人②兔③牛④蘑菇⑤纤维杆菌A．①②③④⑤B．②③⑤C．②③④⑤D．③⑤6．刚果红是一种染料，能将以下哪些物质染色（）①纤维二糖②葡萄糖③纤维素④苏木精⑤弹性纤维A．①③④B．①②③C．②③④D．③④⑤7．在对纤维素分解菌进行选择培育时用液体培育基的目的是（）A．用液体培育基可取得大量菌体B．纤维素分解菌适宜在液体培育基上生长C．用液体培育基能够充分利用培育基中的营养物质D．用液体培育基可取得高纯度的纤维素分解菌知识点：分解纤维素的微生物的分离的实验设计8．从土壤中挑选蛋白酶产生菌时，所用培育基为（）A．加富培育基B．选择培育基C．基础培育基D．辨别培育基9．辨别纤维素分解菌的培育基中碳源为（）A．CMCNa B．木聚糖C．纤维素D．裂解酶10．分离土壤中纤维素分解菌用到的方式是（）①稀释倒平板法②涂布平板法③单细胞挑取法④选择培育分离A．①②B．②③④C．②③D．①③④11．纤维素分解菌的选择培育基有选择作用，缘故在于其含有（）A．NaNO3 B．KCl C．酵母膏D．纤维素粉12．选择培育时应将锥形瓶固定在（）A．桌子上B．温箱里C．窗台上D．摇床上13．选择培育的结果：培育液变（）A．清澈B．浑浊C．红色D．产生透明圈14．在将样品稀释涂布到辨别纤维素分解菌的培育基上之前一样先进行选择培育，其要紧目的是（）A．完全除去其他微生物B．没成心义，去掉这一步更好C．增加纤维素分解菌的浓度D．使纤维素分解菌充分长大15．刚果红染色时，加入刚果红可在（）①制备培育基时②梯度稀释时③倒平板时④涂布时⑤培育基上长出菌落时A．①③B．②⑤C．③⑤D．④⑤16．两种刚果红染色法的结果是（）A．均会显现透明圈B．均可不能显现透明圈C．方式一显现，方式二不显现D．方式一不显现，方式二显现17．以下对刚果红染色法的表达，不正确的选项是（）A．能够先培育微生物，再加入刚果红进行颜色反映B．能够在倒平板时就加入刚果红C．既能够先培育微生物，再加入刚果红进行颜色反映，也能够在倒平板时就加入刚果红D．能够将刚果红与培育基中的其他物质混合后再灭菌倒平板知识点：分解纤维素的微生物的分离的结果分析与评判18．纤维素酶的测定方式一样是（）A．对纤维素进行定量测定B．对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定C．对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定D．对纤维素分解菌进行定量测定19．以纤维素为惟一碳源挑选出了真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与以下哪一种生物类似（）A．硝化细菌B．蓝藻C．蚯蚓D．兔子20．在加入刚果红的培育基中会显现透明圈，产生的透明圈是（）A．刚果红与纤维素形成的复合物B．刚果红与纤维二糖形成的复合物C．纤维素分解后形成的葡萄糖致使的D．以纤维素分解菌为中心形成的21．下表为纤维素分解菌的辨别培育基配方，请设计实验测定该培育基用于鉴定纤维素分解菌的最适pH。
分解纤维素微生物的分离方法与技巧绪论近年来，随着环境污染问题的日益突出，分解纤维素的微生物研究变得越来越重要。
纤维素是一种复杂的多糖类化合物，其有效降解对于生物质资源的利用具有重要意义。
本文将介绍一些常用的分离方法与技巧，以期为相关研究提供参考。
一、物理分离方法1. 筛选法筛选法是常用的物理分离方法之一。
通过对样品进行适当的物理处理，如研磨、过筛等，可以将纤维素微生物与其他杂质分开。
这种方法简单易行，但存在一定的局限性，无法区分不同种类的微生物。
2. 显微镜观察法显微镜观察法可根据微生物的形态特征进行分离。
将纤维素样品放置在显微镜下进行观察，识别并分离出目标微生物。
这种方法适用于微生物数量较少的情况，但需要一定的显微观察技巧。
二、化学分离方法1. 酸碱处理法酸碱处理法通过调节样品的酸碱度来分离目标微生物。
纤维素微生物对酸碱度较敏感，可以利用这一特性实现分离。
例如，可以将样品浸泡在酸性溶液中，使纤维素微生物脱离样品并转移到溶液中，然后用适当的方法将其分离收集。
2. 加热处理法加热处理法是一种常用的化学分离方法。
纤维素微生物对高温较为敏感，通过加热样品可以使其脱离纤维素并转移到其他介质中。
例如，可以将样品加热至一定温度，使纤维素微生物被释放出来，然后采用适当的方法将其分离。
三、生物分离方法1. 生物筛选法生物筛选法是利用其他微生物对纤维素微生物的生物竞争关系来进行分离。
通过将待分离样品与其他微生物接种在同一培养基中，观察结果可以得出纤维素微生物的分离情况。
2. 培养方法培养方法是常用的生物分离方法。
可以利用纤维素微生物的特殊生长要求，构建适合其生长的培养基，从而分离目标微生物。
例如，可以选择添加纤维素作为碳源的培养基，利用纤维素微生物对碳源的特异性降解，进行分离。
结论分解纤维素微生物的分离方法与技巧多种多样，不同的方法适用于不同的研究目的和样品特点。
在实际应用中，需要根据具体情况选择合适的分离方法，并结合其他分析手段进行综合分析。
课题3 分解纤维素的微生物的分离1.配制的某培养基的成分是纤维素粉、NaNO3、Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素,该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖?()A.酵母菌B.自生固氮菌C.各种细菌D.纤维素分解菌,只有能分解利用纤维素的纤维素分解菌才能在该培养基上大量繁殖。
2.分离纤维素分解菌的实验过程中,下列相关操作有误的是()A.经选择培养后将培养液直接涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上B.选择培养这一步可省略,但培养的纤维素分解菌少C.经稀释培养后,用刚果红染色D.对照组可用同样的稀释培养液涂布到不含纤维素的培养基上,再经稀释,才能将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上。
3.利用农作物秸秆可生产乙醇,生产过程中主要利用微生物将秸秆水解或用酶水解,其主要技术流程如下图所示,下列相关说法错误的是()秸秆碎屑反应罐水解压滤出渣酒精发酵真空分馏A.可用刚果红染色法筛选过程①所需的纤维素分解菌B.过程①加入的纤维素分解菌产生的纤维素酶是葡萄糖苷酶C.酒精发酵接种的酵母菌需在无氧条件下发酵D.酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌;纤维素酶为复合酶,至少包含三种组分,C1酶、C X 酶和葡萄糖苷酶;酒精发酵需在无氧条件下进行;酒精发酵前需对培养基进行高压蒸汽灭菌。
4.某研究性学习小组的同学为了从土壤中筛选纤维素分解菌,利用下列材料和用具进行了实验,请完善下列实验步骤。
材料用具:采集的土样、研钵、配制纤维素分解菌选择培养基的各种原料、琼脂、刚果红溶液、培养箱、无菌水。
实验步骤:(1)利用纤维素分解菌选择培养基的各种原料、琼脂及,配制固体培养基,灭菌;(2)将采集的土壤样品在研钵中研碎后,制成土壤匀浆;(3)利用无菌操作方法把土壤匀浆到培养基上,放在培养箱内培养一段时间;(4)用显微镜观察纤维素分解菌时,要从中挑取材料制成临时装片。
,加入刚果红溶液加以检测。
中学高效课堂高二生物选修1 训练案一、选择题：1、刚果红能与哪项物质形成红色复合物？（）A、纤维二糖B、纤维素C、葡萄糖D、麦芽糖2、寻找纤维素分解菌应到？（）A、湿润的环境中B、富含纤维素的环境中C、富含无机盐的环境中D、池塘中3、以纤维素为惟一碳源筛选出了真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与下列哪种生物类似:A．硝化细菌 B．蓝藻 C．蚯蚓D．兔子4、微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是：（）A．C1酶和Cx酶 B．C1酶和葡萄糖苷酶C．Cx 酶和葡萄糖苷酶 D．C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶5、在加入刚果红的培养基中会出现透明圈，产生的透明圈是: （）A．刚果红与纤维素形成的复合物 B．刚果红与纤维二糖形成的复合物C．纤维素分解后形成的葡萄糖导致的 D．以纤维素分解菌为中心形成的6、从土壤中筛选蛋白酶产生菌时，所用培养基为: （）A．液体培养基 B．选择培养基 C．基础培养基D．鉴别培养基7、下列对刚果红染色法的叙述，不．正确的是: （）A．可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应B．可以在倒平板时就加入刚果红C．既可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，也可以在倒平板时就加入刚果红D．可以将刚果红与培养基中的其他物质混合后再灭菌倒平板8、纤维素酶的测定方法一般是: （）A．对纤维素进行定量测定 B．对纤维素分解菌进行定量测定C．对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定D．对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定9、自养微生物所需碳源和能源为不同的物质，而可作为异养微生物碳源和能源的是: （）A．CO2B．NaHCO3C．碳酸盐D．含碳有机物10、能够测定样品活菌数的方法是:（）A．稀释涂布平板法 B．直接计数法 C．重量法 D．比浊法11、在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于:（）A．空白对照 B．标准对照 C．相互对照 D．条件对照12、下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是:（）A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0．1ml，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，370C恒温培养24-48小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数13．微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是( )A．C1酶和Cx酶B．C1酶和葡萄糖苷酶C．Cx酶和葡萄糖苷酶D．C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶14．下列对刚果红染色法的叙述，不．正确的是( )A．可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应B．可以在倒平板时就加入刚果红C．既可以先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，也可以在倒平板时就加入刚果红D．可以将刚果红与培养基中的其他物质混合后再灭菌倒平板15．自养微生物所需碳源和能源为不同的物质，而可作为异养微生物碳源和能源的是( )A．CO2B．NaHCO3C．碳酸盐D．含碳有机物16．在对纤维素分解菌进行选择培养时用液体培养基的目的是( )A．用液体培养基可获得大量菌体B．纤维素分解菌适宜在液体培养基上生长C．用液体培养基可以充分利用培养基中的营养物质D．用液体培养基可获得高纯度的纤维素分解菌17．从土壤中筛选纤维素分解菌的实验设计，下列流程正确的是()。
