番茄红素对离体蟾蜍心功能影响的实验研究

实验四：离子和体液对离题蛙类心脏的影响实验人：同组人：【实验目的】✧学习离体蛙心的灌流方法。

✧观察钠、钙、钾等离子，异丙肾上腺素、乙酰胆碱、阿托品、心得安等药物对心脏活动的影响。

【实验原理】心脏具有自动节律性。

离体心脏用理化性质近似于血浆的生理溶液（任氏液）进行灌流，以保持其新陈代谢顺利进行，这种节律性可维持较长时间。

心脏正常节律性活动有赖于内环境理化因素的相对稳定，所以改变灌流液成分，则可引起心脏活动的改变。

心肌细胞生物电活动的基础是钠、钾、钙等跨膜离子流。

因此细胞外液中这些离子浓度的变化会对心脏的活动产生不同的影响。

调节心脏活动的神经、体液因素对心脏活动的直接作用是神经递质或激素与心肌细胞相应受体结合，导致心脏活动的增强或减弱。

乙酰胆碱与异丙肾上腺素就是通过这种方式发挥作用的。

特异的受体阻断剂能阻断相应的递质与受体的作用。

在本实验中通过结扎、插管的方法制得离题活蛙心。

【实验材料和器材】蟾蜍，两栖类手术器械，八木氏套管，蛙心夹，万能滑轮，换能器，铁支架，蛙板，任氏液，0.65％NaCl，4％CaCl2，4％KCl，0.01％异丙肾上腺素，0.01％乙酰胆碱，心得安，阿托品【实验步骤】1. 离体蛙心的制备暴露心脏：同蟾蜍心搏过程描记实验2. 插管，游离心脏：将心包膜、动脉膜、肝系膜去除干净。

结扎右主动脉：在右主动脉下穿过两根线，分别结扎，中间剪断。

总结扎线：一端自左主动脉下方穿过，另一端从左右肝静脉下方穿过，打一松结，当心房收缩上提时结扎。

将两侧前腔静脉，左右肺静脉结扎在内，注意远离静脉窦。

从结扎线以外剪断。

静脉插管：在左右肝静脉和后腔静脉下穿线，打一松结，在左肝静脉远端剪开一楔形切口，将装满灌流液的静脉插管插入静脉，见蛙心膨胀变白后结扎线扣。

用灌流液将心脏内血液完全洗出。

左主动脉插管：在左主动脉弓下穿线，打一松结，在动脉管壁远端剪一楔形切口，插入灌流器的导管，见有灌流液流出后结扎线扣。

注意动脉插管勿插入主动脉圆锥。

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番茄红素对离体蟾蜍心功能影响的实验研究作者：张建武等
来源：《中国民族民间医药杂志》2013年第06期
番茄红素在自然界中分布很广泛。

在植物中主要是存在于成熟的红色水果和蔬菜中，在秋橄榄浆果中的含量较高。

番茄红素素有“藏在西红柿里的黄金”之美称，已被联合国粮农组织、食品添加剂委员会和世界卫生组织认定为A类营养素，并被50多个国家和地区作为具有营养与着色双重作用的食品添加剂。

许多证据证明番茄红素有抗氧化、抗动脉粥样硬化、抗骨质疏松、抗癌等作用，但未见有关番茄红素对两栖类动物心功能影响的研究报道。

本实验通过离体蛙心灌注实验研究番茄红素溶液对离体蟾蜍心率和心肌收缩力的影响，报道如下。

第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。

2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。

3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。

二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。

在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。

实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。

2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。

四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。

用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。

2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。

3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。

4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。

b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。

c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。

d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。

5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。

五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。

2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。

3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。

4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。

六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。

2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。

离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究实验报告实验报告课程名称：生理科学实验实验类型：动物实验实验项目名称：离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究同组学生姓名：指导老师：实验12 离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究（浙江大学医学院2010级临床医学专业1B班第5组，浙江，杭州，310058）【摘要】目的了解离体心脏灌流的方法，观察钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响并探讨作用机制。

方法取离体蟾蜍蛙心，分别用任氏液、无钙、高钙、高钾、乙酰胆碱、肾上腺素等灌流。

结果蟾蜍离体心脏在1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.84±0.16，0.81±0.17，两者有显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.95±1.53，3.89±1.49，两者无显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为49.00±6.09，48.90±6.81，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在无钙任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.80±0.16，1.18±0.29，两者无显著差异；无钙任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为 3.83±1.38，1.58±0.42，两者有显著差异；无钙任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为48.50±5.95，54.60±14.84，两者无显著差异。

蟾蜍离体心脏在22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.61±0.23，0.53±0.23，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.74±1.17，5.39±1.62，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，心率（次/分）分别为50.20±7.87，49.90±8.32，两者无显著差异。

一实验目的1、学习制备离体蛙心脏及离体心脏灌流的方法。

2、观察钠离子、钾离子、钙离子3种离子，去甲肾上腺素、乙酰胆碱、温度、酸碱度等因素对心脏活动的影响。

3、通过实验使学生初步对递质、受体、受体兴奋剂及受体阻断剂的概念有所感知。

二实验原理心脏正常的节律性活动必须在适宜的理化环境中进行，一旦适宜的环境被破坏，例如酸碱度及离子浓度的急剧改变等，心脏的活动就会受到影响。

在整体内，心脏的活动受自主神经的双重支配，交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素，使心肌收缩力量增强，心率加快；而迷走神经兴奋时，其末梢释放乙酰胆碱，使心肌收缩力量减弱，心率减慢。

强心甙类药物能够增强心肌收缩能力，减慢心率。

青蛙心脏离体后，用理化特性近似于血浆的任氏液灌流，在一定时间内，可保持其比较稳定的节律性收缩和舒张。

改变任氏液的组成成分，如改变Na+﹑K+﹑Ca2+ 的浓度及酸﹑碱度等，心脏跳动的频率和幅度就会发生相应的改变。

当血钾离子过高时，心肌兴奋性、自律性、传导性和收缩性均降低，表现为收缩力减弱、心动过缓和传导阻滞，严重时心脏可停搏于舒张期。

而血钙离子升高时，心肌收缩力增强，但过高时可使心室停搏于收缩期。

而血钙离子降低时，心肌收缩力减弱。

血钠离子轻微变化对心肌影响不明显，只有发生明显变化时才会影响心肌的生理特性，钠离子剧烈升高时心脏的兴奋性和自律性虽升高，但兴奋的传导性和收缩性却下降，严重时可使心脏停搏于舒张期。

三使用仪器、材料1、实验仪器：生物信号采集处理系统，张力换能器，小动物手术器械，蛙板，细线，滴管，烧杯，蛙心夹，蛙心插管，滴管，万能支架等2、实验材料：0.4%肝素-任氏液插管用，任氏液，0.65%氯化钠，2%氯化钙，1%氯化钾，1%乳酸，2.5%碳酸氢钠，1：10000肾上腺素，1：10000乙酰胆碱，1：5000阿托品等溶液四. 实验步骤1、双毁髓法处死青蛙2、蛙类离体心脏制备3、实验装置连接4、记录不同离子及药物对心脏收缩的影响先描记正常的蛙心搏动曲线作为对照，注意观察心搏频率、心室的收缩和舒张程度。

实验三蟾蜍心兴奋传导系统分析
实验三主要研究了蟾蜍心脏的兴奋传导系统，主要包括动作电位的产生与传导、心脏节律的产生与调控等方面。

通过实验，我们掌握了一些基本的实验技能和实验操作技巧，同时也深入了解了蟾蜍心脏的生理特点和心脏兴奋传导系统的结构和功能。

首先，我们对蟾蜍心脏进行了解剖，发现蟾蜍心脏由两个心房和一个心室组成，心房与心室之间有一个室房结，室房结的位置正好位于心房和心室之间。

这种心脏结构与人类的心脏结构不同，但其生理特点与人类的心脏相似，是进行心脏生理实验的优良材料之一。

我们随后对蟾蜍心脏进行了一些电生理实验，通过插入电极在心房、室房结和心室部位记录了心脏的电信号，并对信号进行了分析。

实验结果表明，蟾蜍心脏的动作电位是通过离子通道的开闭来实现的，离子通道的特性不同决定了不同位置的动作电位形态不同。

我们进一步探究了心脏兴奋传导的路径和机制。

实验结果表明，蟾蜍心脏的心房和心室之间的室房结具有极高的传导速度和折返率，这是保证心脏正常收缩的重要保障。

通过对心房特殊区域的刺激，我们还能够观测到心房内的自律节律点，证明了心房也具有自主节律产生的能力。

最后，我们还进行了心脏兴奋传导的调控实验，发现不同的药物能够对心脏的兴奋传导系统产生不同的影响，如苯妥英钠、钾离子和氯化钙等药物对心脏的心房、室房结和心室部位的动作电位产生了不同的影响。

这些药物的作用机制大都与离子通道相关，进一步证明了离子通道在心脏兴奋传导中的重要作用。

蟾蜍心脏实验二1.蟾蜍心搏过程2.心室期外收缩与代偿间歇3.蟾蜍心脏的神经支配4.离体蟾蜍心脏灌流3.蟾蜍心脏的神经支配4.离体蟾蜍心脏灌流3蟾蜍心脏的神经支配1.了解蛙类心脏的神经支配。

2.观察迷走神经干对心脏活动的影响。

蛙和蟾蜍的心脏受迷走神经和心交感神经的双重支配。

它们的迷走神经和颈交感神经混合成一个神经干，称迷走交感神经干。

在正常情况下，迷走神经兴奋时，心脏搏动减弱减慢；交感神经兴奋时，心脏搏动增强加快。

由于迷走神经的兴奋性较高，因而低频低强度电刺激迷走交感干时，多产生迷走效应；高频高强度刺激时，易产生交感效应；中等频率和强度的刺激，往往表现为先迷走后交感的双重效应。

若在心脏处滴加阿托品，可封闭迷走神经对心脏的影响，而表现为单纯的交感效应。

材料实验动物：中华蟾蜍手术器材：解剖针、手术剪、眼科剪、圆头手术镊、蛙板、刺激输出线、刺激电极、张力换能器、蛙心夹、棉花、棉线、任氏液、滴管、1%阿托品。

实验仪器：BL420F/E+，张力换能器；铁架台观察项目1.开动仪器描记一段正常心搏曲线。

然后用低频低强度电刺激迷走交感神经干观察和记录心搏活动的变化。

之后用中等频率和强度的电刺激，观察和记录心搏活动的变化。

最后用高频高强度电刺激，观察和记录心搏活动的变化。

刺激方式为连续刺激、波宽10 ms。

2.在静脉窦和心房部位加阿托品溶液2-3 滴，5分钟后，再用原刺激强度刺激神经干。

观察并记录心搏活动的变化。

这时由于阿托品封闭迷走神经对心脏的作用，迷走效应不会出现，而表现单纯的交感效应。

注意事项刺激参数设置要合理神经周围的组织液需用棉球吸干，以防短路每次刺激的时间不宜过长，每次刺激要间隔3-5分钟，以防损伤神经 须常用任氏液湿润神经和心脏，以防组织干燥而失去生理机能交感神经和迷走神经的效应往往随季节、气温和动物个体而变化，在实验过程中灵活掌握结果对实验结果进行正确简明的表述1.2.离体蟾蜍心脏灌流4了解离体心脏灌流的方法观察钠、钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响并探讨各作用机制。

离体蛙心灌流实验原理离体蛙心灌流实验是一种常见的心脏生理学研究方法，通过在呼吸、循环、体温、神经影响等条件下灌注药物来研究心脏的生理与病理。

实验所需仪器设备包括：离体蛙心、温度控制器、心肌收缩力检测仪、心室压力传感器等。

实验原理主要基于心肌细胞和心脏整体的生理特征和表现来进行。

心肌细胞存在动作电位和细胞内外环境的离子梯度。

当细胞外液体含有高钠离子、低钾离子、低钙离子时，心肌细胞能够进入顺应期，此时的心肌细胞无法被刺激而产生动作电位。

反之，钠离子的浓度降低，钾离子浓度提高，这时心肌细胞便处于易兴奋状态，钙离子通过轻微的电流而内流，而细胞摇摆起来，并随之产生动作电位。

当心脏收到神经作用、荷尔蒙、温度或其他外部因素时，心脏的血流动态和代谢需要作出反应。

例如，正常情况下，随着感知到体内血压过低的指令，自主神经系统将神经冲动传导到心脏，心脏由此加速并增强收缩力。

如果是在休息时进行实验，将变量固定和控制，以达到结构恒定、纯正、严谨的实验结果。

具体实验步骤如下：1.准备一只已经死亡的蛙，并取出其心脏。

将离体的心脏置于台架上，与灌注溶液流经同一管路。

2.将心脏中的血清和杂质用离体灌满心脏的冰冷盐水，以减小水力影响，同时又可维持心肌收缩。

然后放入恒温水浴盆中，设置体温为32度左右。

3.按照实验需要的药物和试剂与灌注保护液混合后，借水泵引入心室，以保证药物充分灌注到心脏。

为了控制在系统通道中的药物浓度和流速，我们需要在止回阀处实现液位控制和压力控制。

4.通过调整同步泵的速率和灌注药物的时间，可以控制心室的灌注压力和流动情况。

同时，使用心肌收缩力检测仪和心室压力传感器等设备，实时监测并记录实验数据。

最后，统计数据并分析实验结果。

总的来说，离体蛙心灌流实验可以更准确地研究心肌细胞和心脏整体对药物、环境、神经和代谢等不同条件的反应，对心脏相关疾病的诊断和治疗具有重要意义。

未知y溶液对蟾蜍心脏活动影响实验报告蟾蜍是一种喜温动物，喜温喜湿，白天多在夜间活动，但如果受到强烈刺激，便会变得不安的。

这是因为蟾蜍神经系统发育不完全，脑神经和运动神经细胞分化较少、功能减退。

蟾蜍心脏有神经细胞和肌肉细胞之分，心脏中血管较多且呈一定形状，因此供血供氧十分重要，且一般不与大脑组织直接接触，否则易发生缺血坏死。

为了验证未知溶液对蟾蜍心脏活动的影响，通过模拟蟾蜍受到未知溶液刺激所引起器官改变来验证蟾蜍心脏活动与神经活动之间关系，研究未知溶液对蟾蜍心血管系统活动的影响规律。

一、实验装置及材料实验装置:1.仪器：电子天平、万能试验机。

2.实验材料：蟾蜍标本（2只）。

3.实验装置：未知 y溶液。

二、实验方法1.实验仪器有显微镜、磁力搅拌器、恒温振荡器、离心管及电风扇。

2.实验方法：将蟾蜍放入装有0.1%硼砂的培养皿中，每100只蟾蜍的头部取一个实验组织，分别在培养皿中进行培养，每个实验组织取50个培养皿进行随机双盲对照组动物实验研究。

3.蟾蜍心脏的活动实验：通过观察实验组织的变化来观察蟾蜍心脏的运动功能。

4.蟾蜍心脏的血流情况实验：将100只蟾蜍分成三组（分别为0 g、4 g,每组各5只）模拟不同时间点蟾蜍心脏活动情况。

分别用10 ml、20 ml新鲜的无菌生理盐水溶液及5 ml自制的未知 y溶液对其进行浸泡和稀释。

5.蟾蜍心脏的活动试验：实验结束后取出蟾蜍心脏，通过观察心脏活动规律来得出蟾蜍心脏的血流变化情况，最终得出结论：未知 y溶液对蟾蜍心脏的血流变化进行分析。

三、实验结果及讨论实验结果表明，未加未知 y溶液，蟾蜍的心肌收缩力与静息时的表现几乎完全相同，未加未知 y溶液时，蟾蜍的心肌收缩力与静息时的表现基本一致，未加未知 y溶液时的心肌收缩力随时间变化更快.这是因为未知 y溶液中的活性成分能使心肌的收缩功能增强。

当未知 y溶液作用于蟾蜍的心脏时，蟾蜍的心脏收缩功能增强，心脏体积增大且收缩强度加强；当未加未知 y 溶液作用于蟾蜍心脏时，蟾蜍的心脏体积缩小且收缩强度加强。