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本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断小鼠（Mouse）肿瘤坏死因子β（TNF-β）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被肿瘤坏死因子β（TNF-β）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子β（TNF-β）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、15、30、60、120、240pg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
il-1β的医学解释小伙伴们！今天咱来聊聊il-1β这个东西哈。
一、il-1β是什么呀。
il-1β呢，全称是白细胞介素-1β。
它呀，是白细胞介素-1家族的重要成员之一哟。
白细胞介素就像是身体里的“通信兵”，负责在免疫系统的各个细胞之间传递信息，协调大家一起对抗外来的“敌人”，而il-1β就是其中特别活跃的一个“小战士”。
二、il-1β在身体里是怎么产生的呢。
它主要是由单核巨噬细胞、内皮细胞、上皮细胞等多种细胞产生的。
比如说，当身体受到细菌、病毒这些坏家伙入侵的时候，这些细胞就会被激活，然后就开始大量生产il-1β啦。
就好像听到警报声后，工厂赶紧加班加点生产武器一样，il-1β就是这些细胞生产出来对抗“敌人”的“武器”。
三、il-1β都有啥作用呀。
1. 炎症反应的“点火器”它在炎症反应中起着至关重要的作用哦。
当它被释放到身体里后，就像点燃了一把火，会引起一系列的炎症反应。
它能让血管扩张，让更多的免疫细胞能够快速到达炎症部位，就像是打开了一条“绿色通道”，让“援兵”快速赶来。
同时，它还能增加血管的通透性，让血浆里的一些物质更容易进入组织间隙，参与到对抗“敌人”的战斗中去。
2. 免疫调节的“小管家”il-1β还能调节免疫系统呢。
它可以激活T细胞、B细胞这些免疫细胞，让它们变得更有战斗力，更好地发挥免疫作用。
就像是给这些“士兵”打了一针“强心剂”，让它们在战场上勇往直前。
而且呀，它还能促进抗体的产生，抗体就像是“追踪导弹”，能够精准地找到并消灭入侵的病原体。
3. 发热反应的“幕后推手”我们有时候生病会发烧，这背后也有il-1β的“功劳”哟。
它可以作用于下丘脑的体温调节中枢，让体温升高。
为什么要升高体温呢？原来呀，适当的发热可以增强免疫系统的功能，让免疫细胞的活性更高，更有利于消灭病原体。
这就像是给身体来了一场“高温消毒”，让那些坏家伙在高温下难以生存。
四、il-1β和疾病的关系。
1. 自身免疫性疾病。
在一些自身免疫性疾病中，il-1β可没少“捣乱”。
白细胞介素-1β名词解释白细胞介素- 1β（IL - 1β）可是在我们身体的免疫系统中扮演着超级重要的角色呢！首先呢，白细胞介素-1β是一种细胞因子。
细胞因子就像是身体内细胞之间传递信息的小信使，告诉细胞们该做什么，不该做什么。
IL - 1β主要由单核细胞、巨噬细胞等免疫细胞产生。
当身体受到感染或者有损伤的时候，这些细胞就像被激活了的小战士，开始大量分泌白细胞介素- 1β。
比如说，当细菌入侵我们的身体时，巨噬细胞发现了这些不速之客。
巨噬细胞会一口把细菌吞掉一部分，然后通过一系列复杂的生物化学反应，制造出白细胞介素- 1β。
这个过程就像是一个警报系统被触发了一样。
那白细胞介素-1β产生之后要做什么呢？它有好多重要的功能。
它可以促进炎症反应。
炎症反应可别小看它，虽然我们有时候觉得炎症很讨厌，比如皮肤发炎会红肿热痛，但其实炎症是身体的一种自我保护机制。
IL - 1β会让血管扩张，这样更多的免疫细胞就能从血液中跑到感染或者受伤的部位去。
就像有敌人入侵了一个地方，我们要打开更多的通道让援军过去一样。
而且它还会让局部的温度升高，这可不是偶然的哦，很多细菌在高温下就不那么容易生存了，这就像是给敌人制造了一个不太舒服的环境。
白细胞介素-1β还能在免疫细胞之间起到协调的作用。
它可以刺激T淋巴细胞的活化和增殖。
T淋巴细胞可是免疫系统中的特种部队，能够识别和消灭被病毒感染的细胞或者癌细胞等。
IL - 1β就像是特种部队的动员者，告诉T淋巴细胞：“嘿，兄弟们，有情况，我们得行动起来了！”同时，它也能影响B淋巴细胞，B淋巴细胞可以产生抗体，抗体就像小标签一样，贴在病原体上，让其他免疫细胞更容易识别和消灭它们。
在一些疾病中，白细胞介素-1β也有着特殊的表现。
例如在自身免疫性疾病中，有时候身体会错误地把自己的组织当成敌人，IL - 1β的产生就可能失去控制。
像类风湿性关节炎，关节部位的细胞过度分泌IL - 1β，导致关节处持续的炎症反应，造成关节疼痛、肿胀，甚至关节变形等严重后果。
白介素1β，IL-1βELISA试剂盒说明书白介素1β，IL-1βELISA试剂盒说明书kit规格：48孔配置/96孔配置标准品稀释液：1.5ml×1瓶酶标试剂：3ml×1瓶（48）/6ml×1瓶（96）【白介素1β，IL-1βELISA试剂盒说明书】本试剂仅供研究使用计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒组成：封板膜:2片（48）/2片（96）说明书:1份密封袋:1个标准品：2700ng/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存【白介素1β，IL-1βELISA试剂盒说明书】实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人铁蛋白(FE) 水平。
用纯化的人铁蛋白(FE) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入铁蛋白(FE) ，再与HRP标记的铁蛋白(FE) 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的铁蛋白(FE) 呈正相关。
小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒使用方法检测范围：96T2.5ng/L-80ng/L使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素1β (IL-1β)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平。
用纯化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白介素1β (IL-1β)，再与HRP标记的白介素1β (IL-1β)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素1β (IL-1β)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠白介素1β (IL-1β)浓度。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
M1巨噬细胞标志基因M1巨噬细胞是免疫系统中的重要成员，其表现出一系列特定的标志基因。
本文将对M1巨噬细胞的标志基因进行介绍，以增进读者对该细胞类型的了解。
M1巨噬细胞是一类具有免疫活性的巨噬细胞，主要参与机体的炎症反应和细胞免疫。
在激发因子的刺激下，M1巨噬细胞会表达一系列特定的标志基因，这些基因的表达可以用来鉴定和描述M1巨噬细胞的功能和状态。
一、M1巨噬细胞的标志基因1. IL-1β（白细胞介素1β）：IL-1β是一种重要的炎症介质，能够刺激炎症反应的发生和持续。
M1巨噬细胞在活化过程中会产生大量的IL-1β，从而促进炎症反应的进行。
2. TNF-α（肿瘤坏死因子α）：TNF-α是一种重要的细胞因子，具有多种生物学功能。
M1巨噬细胞可以通过产生TNF-α来诱导炎症反应，并参与细胞免疫的调控。
3. iNOS（一氧化氮合酶）：iNOS是一种重要的酶类分子，能够催化一氧化氮的生成。
M1巨噬细胞在激活状态下会表达iNOS，从而产生大量的一氧化氮，进而参与对细胞的免疫杀伤作用。
4. CXCL10（趋化因子10）：CXCL10是一种趋化因子，能够引导免疫细胞向炎症部位迁移。
M1巨噬细胞在激活状态下会产生大量的CXCL10，从而吸引其他免疫细胞聚集在炎症部位。
5. IL-6（白细胞介素6）：IL-6是一种重要的细胞因子，能够调节炎症反应和免疫应答。
M1巨噬细胞在活化过程中会产生IL-6，从而参与调控免疫应答的进行。
二、M1巨噬细胞的功能和意义M1巨噬细胞在机体的免疫应答中扮演着重要角色。
其标志基因的表达使其具有以下功能和意义：1. 抗感染作用：M1巨噬细胞通过产生一系列炎症介质和趋化因子，能够引导其他免疫细胞迁移到感染部位，并参与对病原微生物的清除。
2. 免疫调节作用：M1巨噬细胞产生的细胞因子和趋化因子可以调节免疫细胞的活化状态和功能，从而参与免疫应答的调控。
3. 炎症反应调控：M1巨噬细胞通过产生炎症介质和趋化因子，能够调节炎症反应的过程和强度，从而维持炎症反应的平衡。
白介素1β结构白介素1β（Interleukin-1β，IL-1β）是一种重要的细胞因子，参与调节免疫和炎症反应。
它由多种细胞产生，如巨噬细胞、淋巴细胞和上皮细胞等。
IL-1β在免疫应答中发挥着重要的作用，既可以促进炎症反应，又可以调节细胞增殖和分化。
IL-1β的结构具有独特的特点，它是一种由成熟的IL-1β前体通过蛋白酶切割而成的活性细胞因子。
IL-1β前体由一个信号肽、一个生物活性的成熟IL-1β分子和一个终止肽组成。
成熟IL-1β分子具有典型的二级结构，包括一个α螺旋和一个β折叠片段。
这种结构使得IL-1β能够与其受体结合，并触发下游信号转导通路。
IL-1β通过与其受体IL-1R结合，引发一系列的信号转导事件。
这些信号转导通路包括NF-κB和MAPK等，进而调节免疫和炎症反应。
IL-1β的作用范围广泛，不仅在免疫和炎症反应中起着重要作用，还参与了一些疾病的发生和发展。
IL-1β在免疫和炎症反应中发挥着重要的作用。
它可以增强免疫细胞的活力，促进炎症反应的发生。
同时，IL-1β还可以诱导细胞凋亡和坏死，对细胞的生存和死亡起着调节作用。
在炎症反应中，IL-1β还可以诱导其他炎症因子和趋化因子的产生，进一步加剧炎症反应。
IL-1β的异常表达与多种疾病的发生和发展密切相关。
例如，IL-1β过度表达与炎症性疾病如类风湿性关节炎和炎症性肠病等有关。
同时，IL-1β在肿瘤的发生和转移过程中也起着重要的作用。
研究表明，抑制IL-1β的活性可以有效抑制肿瘤的生长和转移。
IL-1β作为一种重要的细胞因子，在免疫和炎症反应中发挥着重要的作用。
它的结构独特，通过与其受体结合，调节免疫和炎症反应。
IL-1β的异常表达与多种疾病的发生和发展密切相关。
深入研究IL-1β的结构和功能，对于揭示免疫和炎症反应的机制，以及疾病的防治具有重要意义。
白介素1β结构
白介素1β（Interleukin-1 beta，IL-1β）是一种蛋白质，属于白介素家族的一员。
它在免疫系统中发挥着重要的调节作用。
本文将从结构的角度来描述白介素1β，并探讨其在免疫调节中的作用。
白介素1β是由一个单链多肽组成，具有153个氨基酸残基。
它的分子量约为17.5 kDa。
在细胞内，白介素1β以非活性的前体形式存在，需要通过一系列的酶切作用才能激活为活性形式。
激活后的白介素1β能够与其受体结合，进而触发一系列的信号传导通路，从而参与免疫调节过程。
白介素1β在免疫调节中发挥着重要的作用。
它能够诱导炎症反应，并参与免疫细胞的活化和增殖。
此外，白介素1β还能够促进炎症细胞的迁移和粘附，增强炎症反应的持续性。
与此同时，白介素1β还能够调节其他免疫因子的产生，如肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素6（IL-6），从而进一步加强炎症反应。
尽管白介素1β在免疫调节中发挥着重要的作用，但过度的白介素1β产生也会对机体产生不利影响。
过度的炎症反应会导致组织损伤和疾病的发生。
因此，调控白介素1β的产生和活性对维持免疫平衡至关重要。
总结起来，白介素1β是一种重要的免疫调节因子，它通过参与炎症反应和调节其他免疫因子的产生来发挥作用。
然而，过度的白介
素1β产生会导致炎症反应的过度，从而对机体产生不利影响。
因此，对白介素1β的调控十分重要，可以为炎症性疾病的治疗提供新的思路。
希望通过对白介素1β结构和功能的深入研究，能够为免疫调节的研究和炎症性疾病的治疗提供更多的启示。
小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E10395m检测范围：0.16 ng/ml, - 10 ng/ml,最低检测限：0.04 ng/ml,特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠IL-1ra，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-1ra含量。
说明●试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
●浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
●中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
●刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗IL-1ra抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-1ra抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-1ra呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate )：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）。
7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）。
8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
上海笃玛生物科技有限公司本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断小鼠（Mouse）白细胞介素1β（IL-1β）ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被白细胞介素1β（IL-1β）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB 显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素1β（IL-1β）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
上海笃玛生物科技有限公司5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL 3mL 无检测抗体-HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液6mL 3mL 无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、7.5、15、30、60、120pg/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法1.手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min 后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。
2.自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步骤1.从室温平衡20min 后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；3.样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6.每孔加入底物A、B 各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入终止液50μL，15min 内，在450nm 波长处测定各孔的OD 值。
结果判断绘制标准曲线：在Excel 工作表中，以标准品浓度作横坐标，对应OD 值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程计算各样上海笃玛生物科技有限公司本浓度值。
试剂盒性能1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R 值，大于等于0.9500。
2.灵敏度：检测范围5-150pg/mL，最低检测浓度小于1.0pg/mL。
3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性：板内、板间变异系数均小于15%。
5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。
6.有效期：6个月免责声明1.试剂盒仅供研究使用，不得用于临床实验或人体实验，否则所产生的一切后果，由实验者承担，本公司概不负责。
2.严格按照说明书操作，实验者违反说明书操作，后果由实验者承担。
FOR RESEARCH USE ONLY.NOT FOR USE IN DIAGNOSTIC PROCEDURES.Mouse Interleukin 1β(IL-1β)ELISA Kit instruction Intended useThis IL-1βELISA kit is intended Laboratory for Research use only and is not for use in diagnostic or therapeutic procedures.The Stop Solution changes the color from blue to yellow and the intensity of the color is measured at 450nm using a spectrophotometer.In order to measure the concentration of IL-1βin the sample,this IL-1βELISA Kit includes a set of calibration standards.The calibration上海笃玛生物科技有限公司standards are assayed at the same time as the samples and allow the operator to produce a standard curve of Optical Density versus IL-1βconcentration.The concentration of IL-1βin the samples is then determined by comparing the O.D.of the samples to the standard curve.Sample collection and storagesSerum -Use a serum separator tube and allow samples to clot for 30minutesbefore centrifugation for 10minutes at approximately 3000×g.Remove serum and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cyclesPlasma -Collect plasma using EDTA or heparin as an anticoagulant.Centrifugesamples for 30minutes at 3000×g at 2-8℃within 30minutes of collection.Store samples at -20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Cell culture supernates and other biological fluids -Remove particulatesby centrifugation and assay immediately or aliquot and store samples at -20℃or -80℃.Avoid repeated freeze-thaw cycles.Note:The samples shoule be centrifugated dequately and no hemolysis orgranule was allowed.Materials required but not supplied1.Standard microplate reader(450nm)2.Precision pipettes and Disposable pipette tips.3.37℃incubatorPrecautions1.Do not substitute reagents from one kit to another.Standard,conjugate and microplates are matched for optimal e only the reagents supplied by manufacturer.2.Do not remove microplate from the storage bag until needed.Unused stripsshould be stored at 2-8°C in their pouch with the desiccant provided.3.Mix all reagents before using.Remove all kit reagents from refrigerator and allow them to reach room temperature (20-25°C)Materials suppliedName 96determinations48determinationsMicroelisa stripplate12*8strips 12*4strips Standard 0.3ml*6tubes0.3ml*6tubesSample Diluent6.0ml3.0ml上海笃玛生物科技有限公司HRP-Conjugate reagent 10.0ml 5.0ml 20X Wash solution 25ml 15ml Chromogen Solution A 6.0ml 3.0ml Chromogen Solution B6.0ml 3.0ml Stop Solution 6.0ml 3.0ml Closure plate membrane22User manual 11Sealed bags 11Note:Standard (S0→S5)concentration was followed by:0,7.5,15,30,60,120pg/ml.Reagent preparation20×wash solution:Dilute with Distilled or deionized water 1:20.Assay procedure1.Prepare all re a g e n t s before starting assay procedure.It is recommended that all Standards and Samples be added in duplicate to the Microelisa Stripplate.2.Add standard:Set Standard wells,testing sample wells.Add standard 50μl tostandard well.3.Add Sample:Add testing sample 10μl then add Sample Diluent 40μl to testingsample well;Blank well doesn’t add anyting.4.Add 100μl of HRP-conjugate reagent to each well,c over with an adhesive stripand incubate for 60minutes at 37°C.5.Aspirate each well and wash,repeating the process four times for a total of fivewashes.Wash by filling each well with Wash Solution (400μl )using a squirt bottle,manifold dispenser or plete removal of liquid at each step is essential to good performance.After the last wash,remove any remaining Wash Solution by aspirating or decanting.Invert the plate and blot it against clean paper towels.6.Add chromogen solution A 50μl and chromogen solution B 50μl to each well.Gently mix and incubate for 15minutes at 37°C.Protect from light.7.Add 50μl Stop Solution to each well.The color in the wells should changefrom blue to yellow.If the color in the wells is green or the color change does not appear uniform,gently tap the plate to ensure thorough mixing.8.Read the Optical Density (O.D.)at 450nm using a microtiter plate readerwithin 15minutes.Calculation of results1.This standard curve is used to determine the amount in an unknown sample.The standard curve is generated by plotting the average O.D.(450nm)obtained for each of the six standard concentrations on the vertical (Y)axis上海笃玛生物科技有限公司versus the corresponding concentration on the horizontal (X)axis.2.First,calculate the mean O.D.value for each standard and sample.All O.D.values,are subtracted by the mean value of the zero standard before result interpretation.Construct the standard curve using graph paper or statistical software.3.To determine the amount in each sample,first locate the O.D.value on the Y-axis and extend a horizontal line to the standard curve.At the point of intersection,draw a vertical line to the X-axis and read the corresponding concentration.4.Any variation in operator,pipetting and washing technique,incubation time or temperature,and kit age can cause variation in result.Each user should obtain their own standard curve.5.The sensitivity by this assay is 1.0pg/ml 6.StandardcurveStorage ：2-8℃.validity ：six months.FOR RESEARCH USE ONLY;NOT FOR THERAPEUTIC OR DIAGNOSTIC APPLICATIONS!PLEASE READ THROUGHENTIRE PROCEDURE BEFORE BEGINNING!。
