荧光光谱FL.
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珀金埃尔默荧光分光光度计fl激发和发射范围
珀金埃尔默荧光分光光度计(PerkinElmer Fluorescence Spectrometer)是一种常用的荧光光谱仪器,可以用于测量物质的荧光性质。
该仪器通常由两个主要部分组成:激发光源和检测系统。
激发光源通常使用氙灯或氩灯产生紫外或可见光。
激发光源的光谱范围的确定取决于所使用的灯泡及滤光片的选择。
通常,激发光源的波长范围可以从大约200纳米到700纳米,允许对一系列样品进行荧光激发。
发射光通过一个光栅分光镜分离,并使用光电二极管(Photodiode)或光电多道器(Photomultiplier Tube)进行检测和放大。
发射光的波长范围通常可以从大约200纳米到900纳米,取决于光学系统和检测器的性能。
总的来说,珀金埃尔默荧光分光光度计的激发和发射范围可以根据所使用的光源、滤光片、光栅、检测器等组件的选择来定制。
稳态/瞬态荧光光谱仪(FLS 920)操作说明书中级仪器实验室一、仪器介绍1.FLS 920稳态/瞬态荧光光谱仪具有两种功能稳态测量:激发光谱(荧/磷光强度~激发波长)、发射光谱(荧/磷光强度~发射波长)、同步扫描谱(固定波长差、固定能量差、可变角)。
瞬态测量:荧光(磷光)寿命(100ps—10s)。
适合各类液体和固体样品的测试。
2.主要应用高分子和天然高分子自然荧光的研究溶液中大分子分子运动的研究固体高分子取向的研究高聚物光降解和光稳定的研究光敏化过程的研究3.主要性能指标光谱仪探测范围:(光电倍增管, 190-870nm;Ge探测器,800-1700nm)荧光寿命测量范围:100ps-10s信噪比:6000:1(水峰Raman)可以配用制冷系统,为样品提供变温环境液氮系统(77K-320K)使用Glan棱镜,控制激发光路、发射光路的偏振状态使用450W氙灯和纳秒、微秒脉冲闪光灯做激发光源F900系统软件:控制硬件,包括变温系统,数据采集、分析4. 仪器主要部分结构图5.仪器光路图二、仪器测试原理(SPC)时间相关单光子计数原理是FLS920测量荧光寿命的工作基础。
时间相关单光子计数法(time-correlated single photon counting)简称“单光子计数(SPC)法”,其基本原理是,脉冲光源激发样品后,样品发出荧光光子信号,每次脉冲后只记录某特定波长单个光子出现的时间t,经过多次计数,测得荧光光子出现的几率分布P(t),此P(t)曲线就相当于激发停止后荧光强度随时间衰减的I(t)曲线。
这好比一束光(许多光子)通过一个小孔形成的衍射图与单个光子一个一个地通过小孔长时间的累计可得完全相同的衍射图的原理是一样的。
三、测量之前需要特别注意的事项1. 在切换光源、修改设置或放样品之前必须把狭缝(Δλ)关到最小(0.01nm),否则会损坏光电倍增管!如果打开样品室盖子之后,Em1的Signal Rate增加,请停止实验并立即与工作人员联系!2. 测量样品的瞬态性质之前,请用F4500荧光光谱仪对样品的稳态性质进行表征,了解样品的激发光谱和发射光谱及最佳激发波长和发射波长;3. 用PMT检测时,必须等稳压电源CO1的温度示数在-17℃以下才可以开始采集数据;4. 严禁用稳态瞬态荧光光谱仪测量未知样品紫外可见区的稳态光谱!5. 狭缝范围0.01~18nm,调节时注意不要超过其上限;6. 每次设置完参数后都要点击Apply或者回车键确定;7. 文件保存路径为:C:\users\导师\自己文件夹;8. 用未开封的新软盘拷贝数据;9. 如实填写仪器使用记录,爱护仪器。
荧 光 光 谱(Fluorescence Spectroscopy)韩荣成(10303023)北京大学,03级生物医学工程一、背景知识:1.荧光,是指物质在吸收紫外光后发出的波长较长的紫外荧光或可见荧光,以及吸收波长较短的可见光后发出波长较长的可见荧光。
除了紫外荧光和可见荧光,还有红外荧光、X射线荧光等。
在很多情况下,分子从激发态回到基态过程中,能量通过热量等形式散失到周围。
但是在某些情况下,能量能以光子发射的形式释放出来。
分子的能量状态在光学分析中涉及的分子能量有:E0=Ee+Ev+Er,其中Ee:价电子运动能(electron);Ev:原子在平衡位置的振动能(vibration);Er:分子绕其重心的转动能(rotation)。
Ee 大约为1eV数量级;Ev大约为10-1~10-2 eV ;Er 大约为10-4~10-5eV数量级,可见⊿Ee>⊿Ev>⊿Er分子吸收能量后,处于激发态的分子通过非辐射过程丢失能量,首先到达S1的最低振动能级,这一过程称为内转换(internal conversion),发生在10-11s内。
从S1的最低振动能级以光子形式放出能量而回到基态的不同振动能级,这一过程称为荧光(fluorescence),发生在10-9s内;如果以非辐射的形式丢失能量则称为淬灭(quenching)。
如果某种物质在被某种波长的光照射以后能在较长的时间内发出比荧光波长更长的波长的光,则称这种光为磷光。
磷光产生的机制与荧光是不同的,虽然它们都属于发射光谱,但磷光不是处于第一电子激发态的最低振动能级的分子直接释放出光子回到基态的结果,而是从某种能量低于第一电子激发态的最低振动能级的另一种亚稳能级⎯三重态向基态的各振动能级以辐射方式产生跃迁时发出的光。
所谓三重态或三线态,是指分子中电子自旋量子数S=1,即原来两个配对的自旋方向相反的电子之一自旋方向改变,以至电子自旋之和不为0的情况。
荧光光谱分析荧光光谱分析是一种广泛应用于化学、生物学和材料科学领域的分析技术。
通过测量样品受激发后发出的荧光信号,可以获得关于样品的结构、组成和性质的重要信息。
本文将对荧光光谱分析的原理、应用以及发展前景进行探讨。
随着科学技术的不断进步,人们对于材料的要求也越来越高。
物质的结构和性质对于其在各个领域的应用至关重要。
然而,传统的分析方法往往受到许多限制,无法满足研究人员的需求。
荧光光谱分析作为一种无损、高灵敏度、快速、多功能的分析技术,已经成为研究人员广泛采用的工具。
荧光光谱分析的原理基于荧光现象。
当样品受到激发光照射时,其中的某些分子或原子会吸收能量,电子跃迁至高能级。
随后,这些电子会自发地返回到低能级,并释放出激子光子,即荧光。
这些发出的荧光光子的能量和波长与受激发时所吸收的能量和波长相关。
通过测量荧光的强度和波长分布,可以获取材料的结构信息。
荧光光谱分析可以用于研究多种材料,包括分子、晶体、纳米颗粒等。
荧光光谱可以提供有关材料的光学性质、能带结构、化学组成、能级分布等重要信息。
在化学领域,荧光光谱常用于研究化学反应的动力学、分子间相互作用、物质的量子产生和复合等。
在生物学领域,荧光光谱可用于生物标记、药物筛选、细胞成像等。
在材料科学领域,荧光光谱可以用于研究材料的电子结构、载流子迁移、能量转移等。
除了以上应用外,荧光光谱分析还有许多其他领域的应用。
例如,在环境监测中,利用荧光光谱可以检测水体和空气中的有害物质;在食品安全方面,荧光光谱可用于检测食品中的添加剂和有害物质;在石油和化工行业,荧光光谱可用于研究催化剂和反应物的反应动力学。
尽管荧光光谱分析具有广泛的应用前景,但也存在一些挑战和限制。
首先,荧光光谱分析需要精确的仪器设备和专业的操作技术。
其次,样品的配制和制备对于获得准确的荧光光谱数据至关重要。
此外,一些复杂的样品可能会产生干扰和背景荧光。
针对这些挑战,科研人员不断提出新的方法和技术,以提高荧光光谱分析的准确性和可靠性。