呼吸道病原体抗原七项的检测及临床意义Word版
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2024呼吸道7项检测的临床意义肺炎衣原体IgM抗体肺炎衣原体(C.pneUmoniae,CP)是呼吸道感染主要病原之一,与小儿肺炎、哮喘及慢性咳嗽等呼吸道疾病密切相关。
CP感染所致的肺炎占5%-20%,症状和体征无特异性,多数起病缓慢,潜伏期一般为30天左右,临床开始时出现流感样的上呼吸道症状,如咽炎、头痛、发热,一般低于38o C z数天至数周后出现持续性干咳,如不积极治疗可持续数月,痰分泌很少或无痰,肺部可闻及干湿啰音。
胸片表现类似非典型性肺炎,常为单侧节段性肺炎,严重者病变较广泛,甚至波及双肺,也可伴胸膜炎或胸腔积液。
肺炎衣原体的实验室检测可辅助诊断急性肺炎衣原体感染,常用的检测方法有分离培养、血清学检测、核酸扩增技术等,目前临床主要使用血清学检测方法。
IgM抗体在感染后1~2周出现,3~4周达高峰。
因此XP-IgM阳性可作为急性期感染的辅助诊断指标。
肺炎支原体IgM抗体肺炎支原体(M.pneumoniae,MP)是引起无症状性、轻度或少数严重上呼吸道和下呼吸道感染的常见人类病原体,已经发现肺炎支原体感染占所有肺炎病例的15-20%,肺炎支原体主要通过呼吸道飞沫传播,平时多为散发病例,全年均可发病,但发病季节以秋冬初春为高峰,约每隔3~7年发生一次地区性流行。
学龄儿童患病较多,学龄前儿童包括婴幼儿也可发生肺炎支原体感染。
肺炎支原体的实验室检测可辅助诊断急性肺炎支原体感染,常用的检测方法有分离培养、血清学检测、核酸扩增技术等,目前临床主要使用血清学检测方法。
IgM 抗体在感染后1-2周出现,3~4周达高峰,由于MP的潜伏期为2~3周,当患者出现症状就诊时MP-IgM水平已经很高,因此,MP-IgM阳性可作为急性期感染的诊断指标。
甲型、乙型流感病毒IgM抗体甲、乙型流感病毒属于正黏病毒科,为单股、负链RNA病毒,是引起流行性感冒(简称流感)的主要病原体之一;流感是一种传播性强、传播速度快的呼吸道感染疾病,其典型症状是发热且有咳嗽、上呼吸道症状(如咽痛、流鼻涕)和全身症状(如头痛、肌痛、萎靡不振)。
呼吸道病毒五项临床意义呼吸道病毒五项联合检测包括:肺炎支原体,肺炎衣原体,呼吸道合胞病毒,腺病毒,柯萨奇病毒B组,现就五项病毒检测临床意义简介如下1、肺炎支原体肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)是引起上呼吸道感染、气管支气管炎及非典型肺炎的常见病原体之一。
MP感染可在任何年龄发生,尤其以5~20岁更多见。
MP通过飞沫,以气溶胶微粒的形式传播,感染后引起肺炎支原体肺炎(Mycoplasmal pneumonia,MPP),每隔3~5年出现1次地区性流行,占各类肺炎总数的10%~20%,入伍新兵患肺炎者30%~50%由MP引起,约占非细菌性肺炎的1/3以上。
由于肺炎支原体感染所致的社区获得性肺炎患者临床表现不典型,经过10-20d的潜伏期,可出现一些非特异性症状如头痛和发热,常伴有无力和干咳,根据临床症状不易作出鉴别诊断,常被忽视而导致严重的合并症。
由于肺炎支原体无细胞膜,作用于细胞膜的抗菌药物对其无杀伤作用,加上其感染初期临床表现不明显,另外,MP感染还可以造成肺外各系统改变,且有死亡病例的报道,已引起临床关注。
因此,及时、有效的进行肺炎支原体感染的实验室诊断变得尤为重要。
肺炎支原体可在呼吸道粘膜上皮内潜伏,部分患者无明显症状;但大部分患者为显性感染。
在3岁以下儿童以上呼吸道感染多见,成人以肺炎表现为主。
肺炎支原体肺炎潜伏期14~21天,起病缓慢,IgM抗体一般在感染后1周出现,3~4周达高峰,可持续存在3~6个月。
2、肺炎衣原体肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,C.pn)又称TWAR,能引起呼吸道感染,包括肺炎、支气管炎、鼻窦炎、耳炎、咽炎及喉炎等,也与其它疾病如冠状动脉粥样硬化、心肌炎、心内膜炎、急性心肌梗死、恶性肿瘤、脑血管病、肾功能不全、帕金森氏病等有关,因而受到愈来愈多的重视。
C.pn感染是世界各地广泛存在的常见病,一年四季均可发生,无显著的性别差异和地区差异。
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检验医学资讯(201403)“呼吸道病原体抗原七项”检测的临床意义一、呼吸道病毒简介呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为侵入门户,主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。
据统计,90%以上急性呼吸道感染由病毒引起。
常见的呼吸道病毒包括:A型流感病毒(甲型流感病毒)、B型流感病毒(乙型流感病毒)、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型,各种病毒在电镜下的形态见图1。
流感病毒呼吸道合胞病毒腺病毒副流感病毒图1 各种病毒在电子显微镜下的形态二、呼吸道病毒临床诊断现有的主要方法:1、抗原检测;2、抗体检测;3、病毒分离培养;4、分子生物学方法等。
现将上述检测方法的优劣小结于表1。
目前临床上使用较多的是抗原检测和抗体检测。
表1 四种呼吸道病毒检测方法的比较检测方法优点缺点病毒分离培养特异性高,金标准培养条件要求高、灵敏度低,标本中病原体量少时,易致假阴性。
抗原检测酶联免疫吸附法较快速有非特异性反应间接免疫荧光法简便、快速有非特异性反应需要使用荧光显微镜直接免疫荧光法简便、快速、灵敏度和特异性均较高且可用于疾病的早期诊断需要使用荧光显微镜抗体检测灵敏度、特异性较高对疾病早期诊断没有太大帮助分子生物学方法灵敏度和特异性均很高操作繁琐,价格昂贵三、呼吸道病原体抗原的优越性1、从理论上讲,只要有病毒感染,通过抗原检测都能鉴定出,而抗体检测却要在人体产生免疫应答以后才能进行鉴定。
2、机体产生IgM一般需要一周左右的时间,而有免疫缺陷或免疫系统不健全的个体如儿童,特别是3岁以下的小孩,其产生抗体往往需要更久,且抗体产生的水平也较低。
若检测的是IgG,则不能很好地区分既往感染和急性感染。
因此,抗原检测的方法对婴幼儿和儿童的呼吸道感染的病因诊断、鉴别诊断和临床用药指导比抗体法更有优势(详见表2)。
表2 呼吸道病毒抗体检测和抗原检测的比较病原体抗体IgM检测病原体抗原检测检测最佳时间一般在感染一周左右病毒感染出现症状后即可检测出临床意义回顾性诊断,适用于疾病后期的诊断,多用于循证医学可用于疾病早期诊断对患者的治疗有重要指导意义检测灵敏度不能很好地检测变异的病毒将多种抗体进行组合,能更好地应对变异的病毒检测方法一般使用酶联免疫(ELISA)或者间接免疫荧光法,有非特异性荧光一般使用直接免疫荧光法,几乎没有非特异性反应四、为什么要早期全面检测?1、病毒治疗针对性强2、病毒治疗有时效性3、避免抗生素的滥用五、项目开展的价值和社会效益分析本项目可用于呼吸道病原学的研究;提高医院对呼吸道病毒的诊疗水平;还可用于呼吸道传染病流行的监控等。
七项呼吸道病毒检测试剂盒(鉴定)使用说明书【产品名称】通用名称:七项呼吸道病毒检测试剂盒英文名称:D3 Ultra DFA Respiratory Virus Screen & ID Kit【包装规格】鉴定试剂:80人份/盒【预期用途】用于临床定性检测7种呼吸道病毒:甲型(A型)流感病毒,乙型(B型)流感病毒,呼吸道合胞病毒,腺病毒,副流感病毒1、2和3型。
【检验原理】荧光素(FITC)标记的单克隆抗体与病毒抗原结合,形成稳定的抗原-抗体复合物,在荧光显微镜下观察,呈现特异性绿色荧光。
【主要组成成份】组份名称规格主要成分1 DFA染色试剂鉴定试剂流感A试剂:2 mL每试剂瓶为一项与病毒抗原相对应的荧光单克隆抗体流感B试剂:2 mL腺病毒试剂:2 mL呼吸道合胞病毒试剂:2 mL副流感1试剂:2 mL副流感2试剂:2 mL副流感3试剂:2 mL2 40X浓缩洗液25 mL PBS3 固定液15 mL 甘油4 阳性质控板5块包被病毒抗原【储存条件及有效期】2ºC-8ºC避光保存18个月。
【适用仪器】荧光显微镜,激发波长490 nm,发射波长520 nm。
【样本要求】鼻咽部取样后保存于生理盐水中,应在24小时内送检。
【检验方法】1、取样:用鼻咽拭子从病人的鼻咽部取样或者使用鼻腔灌洗液,将鼻咽拭子放入储存管中(含有生理盐水)。
2、样本准备步骤:①将样本充分震荡混匀约10-15秒。
②在400-600xg转速下离心5-10分钟。
③弃上清。
④在沉淀中加2-3 mL PBS缓冲液(不能使用试剂盒中的浓缩洗液),充分震荡混匀约10-15秒。
⑤在400-600xg转速下离心5-10分钟。
⑥吸走上清和黏液层,小心不要吸到沉淀。
⑦重复步骤4到6,直至黏液层被完全去除。
⑧在沉淀中加0.5-1 mL的PBS缓冲液。
⑨用移液器反复吹吸来重悬细胞沉淀,形成一个略混浊的悬液。
3、直接样本测试步骤:①在8孔板上的孔内滴加25 µL的细胞悬浊液,每样本需滴加七孔。
七项呼吸道病毒综合检测项目简介七项呼吸道病毒综合检测采用抗原检测方法,能覆盖常见的大多数呼吸道病毒,包括:A型(甲型)流感,B型(乙型)流感,呼吸道合胞病毒,腺病毒,副流感病毒1、2和3型,共七种呼吸道疾病相关病毒。
使用国外先进的直接免疫荧光法,灵敏度最低可以检测1.0PFC的病毒量,而且和多种病毒、细胞及细菌均无交叉反应。
临床意义
适检症状
学龄儿童高热,鼻炎,咽炎,细支气管炎,肺炎等呼吸道感染;成年人持续性高烧不退,不明原因发热,急性呼吸道感染等。
标本采集要求
1.拭子伸入鼻部后向鼻咽部水平伸入(不要向鼻腔伸入),伸入距离为从耳垂部到鼻尖长
度的一半,一般针对两周岁以下儿童,伸入距离约为拭子绒毛头的长度两倍。
2.拭子伸入后要轻轻捻动拭子转圈
3.取样后在一小时之内洗脱到生理盐水管中
4.4、2-8℃保存运输。
临床项目收费标准。
呼吸道疾病患者的发病与死亡主要是由呼吸道病毒感染引起的[1],呼吸道病毒通过空气或飞沫形式传播,在呼吸道黏膜上皮细胞中增殖,引起呼吸道甚至全身感染,尤其对于老人、儿童和免疫缺陷患者,可引起多种疾病,而且病毒种类繁多,症状相似,临床上很难鉴别[2]。
本文利用直接免疫荧光法(DFA)检测呼吸道感染患儿鼻咽分泌物中7种常见呼吸道病毒的抗原,旨在了解太原地区儿童呼吸道病毒流行趋势,为临床诊疗及疫情监控提供依据。
1资料与方法1.1一般资料收集2017年2月至2018年1月我院住院的呼吸道感染患儿2881例,其中男1791例,女1090例,男女比例为1.64∶1,年龄1d至16岁,参照《诸福棠实用儿科学》[3]诊断标准确诊为呼吸道感染。
1.2仪器与试剂呼吸道病毒抗原检测试剂盒为美国Diagnostic Hybrids 公司产品。
NIKON E100型荧光显微镜购自日本NIKON公司。
1.3方法1.3.1标本采集:将植绒鼻咽拭子向患儿鼻咽部水平伸入约5cm后轻轻转动拭子取样,之后将鼻咽拭子放入含2ml生理盐水的储存管中(生理盐水没过拭子),2h内送检。
1.3.2细胞涂片制备及结果判定:在漩涡混匀器上振荡拭子储存管15~30s后去掉植绒拭子,2000r/min离心5min,弃上清后加入1×PBS液振荡15~30s,2000r/min离心5min,洗涤沉淀数次后,留取200μl上清液,吸管吹打沉淀形成细胞悬液,在载玻片的每个孔内加入25μl细胞悬液,风干后将载玻片浸没在冷丙酮溶液固定10min,之后风干玻片。
在每个细胞孔上滴加相应的荧光抗体(约25μl),在37℃湿盒中孵育15~30min,磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗玻片,风干后滴封闭液封片,在荧光显微镜下观察结果。
在荧光显微镜下观察到有苹果绿荧光的细胞,为阳性细胞,被Evans蓝染成红色的细胞为阴性细胞。
在200倍荧光显微镜下,每视野≥2个阳性细胞,为阳性标本。
检验医学资讯(201403)
“呼吸道病原体抗原七项”检测的临床意义
一、呼吸道病毒简介
呼吸道病毒是指一大类能侵犯呼吸道引起呼吸道局部病变或仅以呼吸道为侵入门户,主要引起呼吸道外组织器官病变的病毒。
据统计,90%以上急性呼吸道感染由病毒引起。
常见的呼吸道病毒包括:A型流感病毒(甲型流感病毒)、B型流感病毒(乙型流感病毒)、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型,各种病毒在电镜下的形态见图1。
流感病毒呼吸道合胞病毒腺病毒副流感病毒
图1 各种病毒在电子显微镜下的形态
二、呼吸道病毒临床诊断
现有的主要方法:1、抗原检测;2、抗体检测;3、病毒分离培养;4、分子生物学方法等。
现将上述检测方法的优劣小结于表1。
目前临床上使用较多的是抗原检测和抗体检测。
表1 四种呼吸道病毒检测方法的比较
检测方法优点缺点
病毒分离培养特异性高,金标准培养条件要求高、灵敏度低,标本中病原体量少时,易致假阴性。
抗原检测
酶联免疫吸附法较快速有非特异性反应
间接免疫荧光法简便、快速
有非特异性反应需要使用荧光显微镜
直接免疫荧光法简便、快速、灵敏度和特异性均较高
且可用于疾病的早期诊断
需要使用荧光显微镜
抗体检测灵敏度、特异性较高对疾病早期诊断没有太大帮助分子生物学方法灵敏度和特异性均很高操作繁琐,价格昂贵三、呼吸道病原体抗原的优越性
1、从理论上讲,只要有病毒感染,通过抗原检测都能鉴定出,而抗体检测却要在人体产生免疫应答以后才能进行鉴定。
2、机体产生IgM一般需要一周左右的时间,而有免疫缺陷或免疫系统不健全的个体如儿童,特别是3岁以下的小孩,其产生抗体往往需要更久,且抗体产生的水平也较低。
若检测的是IgG,则不能很好地区分既往感染和急性感染。
因此,抗原检测的方法对婴幼儿和儿童的呼吸道感染的病因诊断、鉴别诊断和临床用药指导比抗体法更有优势(详见表2)。
表2 呼吸道病毒抗体检测和抗原检测的比较
病原体抗体IgM检测病原体抗原检测
检测最佳时间一般在感染一周左右病毒感染出现症状后即可检测出
临床意义
回顾性诊断,适用于疾病后期的诊断,
多用于循证医学可用于疾病早期诊断
对患者的治疗有重要指导意义
检测灵敏度不能很好地检测变异的病毒
将多种抗体进行组合,能更好地应对变异
的病毒
检测方法
一般使用酶联免疫(ELISA)或者间接免疫
荧光法,有非特异性荧光一般使用直接免疫荧光法,几乎没有非特异性反应
四、为什么要早期全面检测?
1、病毒治疗针对性强
2、病毒治疗有时效性
3、避免抗生素的滥用
五、项目开展的价值和社会效益分析
本项目可用于呼吸道病原学的研究;提高医院对呼吸道病毒的诊疗水平;还可用于呼吸道传染病流行的监控等。
六、呼吸道病原体检测
我们检验中心/遗传所于3月20日正式开展了“呼吸道病原体抗原7项”。
该检验组合包含了甲型流感、乙型流感、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒1、2和3型7种抗原的检测。
收费标准:326.0元/次,不接受单项申请。
临床意义:主要用于呼吸道感染病原体的早期诊断和鉴定诊断。
标本采集和报告时间:鼻咽拭子或下呼吸道分泌物。
暂定于每周五4:30pm发出检验报告。
欢迎各临床保健科室踊跃开单,我们将竭诚地为临床服务。
咨询电话:临床免疫学检验室,2313065(外线);3065(内线)。
撰稿:罗桂香,编辑:周玉球友情提示:本资料代表个人观点,如有帮助请下载,谢谢您的浏览!。