转氨基作用实验报告

一、实验目的1. 了解转氨基作用的基本原理及过程。

2. 掌握实验操作步骤，学会使用纸层析法观察转氨基作用。

3. 分析实验结果，加深对转氨基作用的认识。

二、实验原理转氨基作用是指氨基酸分子中的氨基和α-酮酸分子中的酮基相互转移，生成新的氨基酸和α-酮酸的过程。

本实验通过纸层析法观察转氨基作用，利用纸层析技术分离反应产物，分析反应过程中氨基酸和α-酮酸的变化。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：L-苯丙氨酸、α-酮戊二酸、FeCl3、NaOH、层析纸、滤纸、铅笔、剪刀、烧杯、滴管、移液器、紫外灯等。

2. 实验仪器：实验台、天平、烘箱、显微镜、冰箱等。

四、实验步骤1. 配制反应液：取L-苯丙氨酸、α-酮戊二酸、FeCl3和NaOH按一定比例配制反应液。

2. 进行反应：将配制好的反应液放入烧杯中，在室温下反应一段时间。

3. 层析分离：取一张层析纸，用铅笔在距一端1cm处划一条起始线，用滴管将反应液滴在起始线上，待液滴干燥后，将层析纸放入装有展开剂的层析箱中。

4. 展开剂：取适量展开剂（如正丁醇-冰醋酸-水，体积比为4:1:5）倒入层析箱中，使展开剂液面略高于层析纸上的反应液滴。

5. 展开过程：待展开剂上升至层析纸的另一端时，取出层析纸，晾干。

6. 观察结果：用紫外灯照射层析纸，观察反应产物在层析纸上的分布情况。

五、实验结果与分析1. 实验现象：在紫外灯照射下，层析纸上出现两个明显的色带，分别对应L-苯丙氨酸和α-酮戊二酸。

2. 实验分析：通过观察层析纸上反应产物的分布情况，可以判断转氨基作用是否发生。

在本实验中，层析纸上出现了两个明显的色带，说明L-苯丙氨酸和α-酮戊二酸发生了转氨基作用，生成了新的氨基酸和α-酮酸。

六、实验总结1. 通过本实验，我们了解了转氨基作用的基本原理及过程，掌握了实验操作步骤，学会了使用纸层析法观察转氨基作用。

2. 实验结果表明，在FeCl3和NaOH的催化作用下，L-苯丙氨酸和α-酮戊二酸发生了转氨基作用，生成了新的氨基酸和α-酮酸。

第1篇一、实验目的1. 了解转氨基作用的基本原理和过程。

2. 掌握转氨基实验的操作步骤。

3. 观察并分析转氨基作用的结果，加深对转氨基作用的理解。

二、实验原理转氨基作用是指氨基在转氨酶的催化下，从一个氨基酸转移到另一个α-酮酸上的过程。

该过程不产生游离的氨，而是通过氨基转移酶将氨基从一个化合物转移到另一个化合物上。

转氨基作用在生物体内具有重要的生理意义，如氨基酸的合成、分解以及代谢等。

实验中，我们以丙氨酸和α-酮戊二酸为底物，在转氨酶的催化下进行转氨基反应，通过纸层析法观察反应结果，从而验证转氨基作用的实现。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 丙氨酸- α-酮戊二酸- 转氨酶- 水合氯醛- 硫酸铵- 氯化钠- 氨水- 纸层析纸- 展开剂2. 实验仪器：- 电子天平- 恒温水浴锅- 离心机- 研钵- 移液管- 试管- 滴管- 显微镜四、实验步骤1. 准备实验试剂：- 将丙氨酸和α-酮戊二酸溶解于水中，配制成一定浓度的溶液。

- 将转氨酶溶解于水中，配制成一定浓度的溶液。

2. 制备反应混合液：- 取一定量的丙氨酸溶液和α-酮戊二酸溶液，混合均匀。

- 加入适量的转氨酶溶液，混匀。

3. 水浴加热：- 将反应混合液放入恒温水浴锅中，加热至一定温度，保持一段时间。

4. 冷却反应混合液：- 将加热后的反应混合液取出，置于室温下冷却。

5. 纸层析：- 将制备好的反应混合液滴在纸层析纸上，待溶剂自然挥发后，用展开剂进行展开。

6. 观察结果：- 观察纸层析纸上各物质的迁移距离，分析反应结果。

五、实验结果与分析1. 结果观察：- 在纸层析纸上，观察到丙氨酸和α-酮戊二酸的反应产物，分别为丙酮酸和谷氨酸。

2. 结果分析：- 实验结果表明，在转氨酶的催化下，丙氨酸和α-酮戊二酸发生了转氨基反应，生成了丙酮酸和谷氨酸。

这验证了转氨基作用的实现。

六、实验总结通过本次实验，我们了解了转氨基作用的基本原理和过程，掌握了转氨基实验的操作步骤，并通过纸层析法观察到了转氨基作用的结果。

氨基转换作用实验报告一、实验目的本实验旨在探究氨基转换作用的过程和机制，通过对实验现象的观察和数据的分析，深入理解生物体中氨基酸代谢的重要环节。

二、实验原理氨基转换作用是指在转氨酶的催化下，一种氨基酸的氨基转移到另一种α酮酸的酮基上，生成相应的新氨基酸和新的α酮酸。

本实验以丙氨酸和α酮戊二酸为底物，在谷丙转氨酶（GPT）的催化下发生氨基转换反应，生成谷氨酸和丙酮酸。

通过检测反应前后丙酮酸的生成量，可以间接反映氨基转换作用的强度。

三、实验材料与设备（一）实验材料1、新鲜的动物肝脏（如猪肝）2、 01mol/L pH 74 的磷酸缓冲液3、 01mol/L 丙氨酸溶液4、01mol/L α酮戊二酸溶液5、 2,4-二硝基苯肼溶液6、 04mol/L NaOH 溶液（二）实验设备1、离心机2、恒温水浴锅3、分光光度计4、移液器5、试管、量筒、烧杯等玻璃仪器四、实验步骤1、制备肝脏匀浆称取新鲜的猪肝_____g，用预冷的 01mol/L pH 74 的磷酸缓冲液冲洗，除去血液和结缔组织。

将肝脏剪碎，放入匀浆器中，加入适量的磷酸缓冲液，制成 10%的肝脏匀浆。

2、反应体系的配制取 4 支试管，编号为 1、2、3、4。

向 1 号试管中加入 05ml 肝脏匀浆、05ml 01mol/L 丙氨酸溶液、05ml 01mol/L α酮戊二酸溶液和15ml 磷酸缓冲液，混匀，作为实验组。

向 2 号试管中加入 05ml 煮沸的肝脏匀浆（以灭活转氨酶）、05ml 01mol/L 丙氨酸溶液、05ml 01mol/L α酮戊二酸溶液和 15ml 磷酸缓冲液，混匀，作为对照 1。

向 3 号试管中加入 05ml 肝脏匀浆、05ml 01mol/L 丙氨酸溶液、05ml 磷酸缓冲液，混匀，作为对照 2。

向4 号试管中加入05ml 肝脏匀浆、05ml 01mol/L α酮戊二酸溶液、05ml 磷酸缓冲液，混匀，作为对照 3。

3、反应将上述 4 支试管置于 37℃恒温水浴锅中保温 30 分钟。

转氨基作用实验报告
实验目的：
通过转氨基作用实验，观察和验证化合物在有机溶剂中的转氨基能力，从而了解它们是否具有转氨基活性。

实验原理：
转氨基作用是有机化合物中氢原子与还原剂之间的相互作用，产生新的有机化合物。

实验中常用的还原剂是亚硝酸钠，它可以被转化为亚硝基离子，再与氢原子发生反应，形成相应的亚硝胺化合物。

实验步骤：
1. 准备反应溶液：称取适量的待测化合物和亚硝酸钠溶液，放入反应瓶中。

2. 开始反应：将反应瓶密封，加热反应瓶中的溶液，并进行搅拌。

3. 观察反应：观察反应溶液的颜色变化、气体产生等情况，记录反应时间。

4. 结果分析：根据实验结果，分析待测化合物是否具有转氨基能力。

实验结果：
实验中观察到有机溶液发生颜色变化、气体产生等现象，反应时间大约为10分钟。

这表明待测化合物具有转氨基能力。

实验结论：
通过转氨基作用实验，验证了待测化合物具有转氨基活性。

这
种活性可能对其在药物合成、有机合成等领域具有重要的应用价值。

转氨基作用纸层析法实验报告
静态硝基呋喃实验报告
本实验采用离子转氨基作用纸层析法对静态硝基呋喃样品进行分析，
以了解静态硝基呋喃的性质。

首先，我们将样品溶液采用端正操作稀
释至0.5％，v / v。

然后，采用离子网的设计，将离子转氨基作用纸浸
渍到溶质中，使其充分地渗入浸渍纸中。

并用湿润的抹布擦拭浸渍纸，以保持它的稳定性。

接着，把离子转氨基作用纸张插入乙醇中，以防
止乙醇的氧化作用。

下一步，在乙醇中加入五氧化二磷，用于硝基基
团与乙醇的反应。

随后，样品离子溶液倒入离子转氨基作用纸条，并
敷设在操作台上，使样品不断滴漏入乙醇中，以反映静态硝基呋喃化
合物的名称。

最后，均匀洒上碳化钙，慢慢加热，总热量达到120°C 时，静态硝基呋喃就可以分解了。

经过离子转氨基作用纸层析法实验，我们可以确定静态硝基呋喃是一
种非常活跃的有机物质，有毒性。

静态硝基呋喃与乙醇酯的反应可以
充分地反映出静态硝基呋喃的分解机理，以及其有机物的活性性质。

经过实验，我们发现，在120°C的加热环境下，静态硝基呋喃可以完
全分解。

综上，本实验使用离子转氨基作用纸层析法，完成了对静态硝基呋喃
样品的分析，充分地反映了静态硝基呋喃有机物质的性质和活性性质，由此可以了解静态硝基呋喃的分解机理。

一、实验目的1. 理解转氨基作用的基本原理。

2. 掌握利用纸层析法观察转氨基作用的方法。

3. 通过实验验证转氨基作用在生物体内的重要性。

二、实验原理转氨基作用是一种生物体内重要的生化反应，主要是指在酶的催化下，氨基酸分子中的氨基与α-酮酸分子中的羰基进行交换，从而形成新的氨基酸和新的α-酮酸。

这一过程对于生物体内氨基酸的代谢和蛋白质的合成具有重要意义。

纸层析法是一种常用的分离和鉴定技术，通过在固定相（如滤纸）上展开待测物质，根据物质在固定相和流动相之间的分配系数不同，实现物质的分离和鉴定。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 丙氨酸（Ala）- 丙酮酸（Pyruvate）- 苹果酸（Malic acid）- 乙酸（Acetic acid）- 硫酸铵- 磷酸二氢钠- 水合三氯乙醛- 硝酸银- 氨水- 乙醇- 氨基苯甲酸- 硫酸铜- 铁氰化钾- 酚酞- 氢氧化钠- 氨基酸标准品2. 实验仪器：- 纸层析装置- 热水浴- 烘箱- 移液器- 移液管- 电子天平- 恒温水浴锅- 离心机- 紫外分光光度计四、实验步骤1. 配制氨基酸和α-酮酸混合溶液：将丙氨酸和丙酮酸按照一定比例混合，加入适量水合三氯乙醛，搅拌均匀，作为待测溶液。

2. 纸层析：将混合溶液点在滤纸上，将滤纸放入展开剂中，进行纸层析。

3. 显色：取出滤纸，晾干，用硝酸银和氨水进行显色，观察氨基酸和α-酮酸分离情况。

4. 定性鉴定：将滤纸放入展开剂中，加入氨水，观察氨基酸和α-酮酸分离情况，并进行定性鉴定。

5. 定量分析：将滤纸放入紫外分光光度计中，测定氨基酸和α-酮酸的吸收峰，计算其浓度。

6. 重复实验：重复以上步骤，验证实验结果的准确性。

五、实验结果与分析1. 转氨基作用实验结果：在纸层析过程中，氨基酸和α-酮酸在滤纸上分离，说明转氨基作用发生了。

2. 定性鉴定结果：通过观察滤纸上的颜色变化，可以判断出分离出的物质为氨基酸和α-酮酸。

3. 定量分析结果：通过紫外分光光度计测定，可以计算出氨基酸和α-酮酸的浓度。

转氨基作用实验结果讨论
转氨酶是一类重要的酶，它在生物体内起到了重要的代谢作用。

本次实验旨在研究不同条件下转氨基的作用效果，以深入了解转氨酶的性质。

实验方法：首先，我们收集了一些新鲜动物肝脏、肌肉等组织样本，并制备出10%的组织悬液。

接着，我们将样本和悬液分别分成两组，进行不同条件下的转氨基反应。

其中，实验组的转氨基反应在常温下进行，而对照组则是在高温下进行。

实验时间为30分钟，每15分钟记录一次反应结果。

在实验过程中，我们发现实验组的转氨基反应速度比对照组明显快了很多。

此外，实验组的反应体系中添加了酵素，而对照组的反应体系中没有添加酵素。

这说明了酵素的重要性，它可以促进反应速度，使反应更加高效。

在实验结果分析方面，我们发现实验组的转氨基作用效果明显比对照组更好。

在同样的反应时间内，实验组的转氨基反应产生了更多的产物，并且产物的含量也更高。

这说明了转氨酶在常温下的作用效果要比在高温下更好。

我们还发现样本的种类也会对转氨酶的作用效果产生影响。

比如说，肝脏样本中的转氨酶活性要比肌肉样本中的高很多。

这是因为肝脏
是人体内重要的代谢器官，其中的代谢酶更加活跃。

我们还对实验结果进行了统计分析，发现实验组的转氨酶活性明显高于对照组。

这进一步印证了实验组的优势，说明了转氨酶在常温下的作用效果要比在高温下更佳。

转氨基作用实验结果表明，转氨酶是一类重要的酶，它的作用效果会受到多种因素的影响。

在实际应用中，我们需要根据具体情况进行调整，以达到最好的转氨基反应效果。

实验十六转氨基作用【目的】氨基酸的转氨作用在体内所有器官组织几乎都能进行，但不同的组织器官ALT（GPT）的活性大小不同。

【原理】丙氨基酸与α-酮戊二酸在Ph7.4时，经ALT催化进行转氨基作用生成丙酮酸和谷氨酸。

丙酮酸与2，4-二硝基苯肼作用，生成棕红色丙酮酸2，4-二硝基苯腙，用颜色深浅表示酶活性大小。

本实验以肝和肌进行比较。

ALT丙氨酸 + α–酮戊二酸谷氨酸 + 丙酮酸37℃丙酮酸 + 2,4 –二硝基苯肼丙酮酸二硝基苯腙（棕红色）【试剂】1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4）称取磷酸氢二钠（Na2HPO4）11.928g,磷酸二氢钾(KH2PO4)2.176g加蒸馏水溶解并稀释至1000ml。

2．ALT基质液称取DT-丙氨酸1.79g, α-酮戊二酸29.2mg于烧瓶中,加0.1 mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液80ml,煮沸溶解后待冷,用1mol/L NaOH调节pH至7.4(约加0.5ml),再用0.1mol/L磷酸盐缓冲液稀释到100ml,混匀加氯仿数滴置冰箱可保存数周。

3．2，4-二硝基苯肼溶液2，4-二硝基苯肼19.8mg用10mol/L HCl 10ml溶解后,加蒸馏水100ml,置于棕色瓶内,冰箱保存。

4.0.4 mol/L氢氧化钠溶液将16g氢氧化钠溶解于水中，并加水至1000ml。

【器材】乳钵和细砂、滴管、试管、试管架、恒温水浴箱。

【操作】1．将家兔处死后，立即取出肝和肌，分别以冰生理盐水洗去血液。

取10g新鲜肝和肌组织，分别剪碎，加pH7.4缓冲液10ml加细砂研碎,研成匀浆后再加pH7.4缓冲液20ml混匀,用棉花过滤,此即为肝和肌的浸提液.2.取试管2支按下表操作：表3-18 转氨基作用操作步骤【结果及分析】【思考题】比较两管颜色，说明哪种组织ALT活性高，为什么？。

第1篇一、实验概述本次实验通过纸层析法观察转氨基作用，旨在学习氨基酸纸层析的基本原理，掌握氨基转移反应的过程和条件，以及通过纸层析法分析转氨基反应的结果。

实验过程中，我们使用了多种氨基酸作为底物，转氨酶作为催化剂，通过观察层析板上氨基酸的迁移情况，分析了转氨基作用的效率及其影响因素。

二、实验结果与分析1. 氨基酸纸层析原理纸层析法是一种常用的分离和鉴定化合物的方法。

在本次实验中，纸层析法用于分离混合氨基酸，并观察转氨基反应的结果。

层析原理基于不同物质在固定相（滤纸）和流动相（层析溶剂）中的分配系数不同，导致物质在层析过程中的迁移速率不同，从而实现分离。

2. 转氨基反应的观察实验中，我们选取了多种氨基酸作为底物，包括丙氨酸、甘氨酸、谷氨酸等。

在转氨酶的催化下，这些氨基酸发生转氨基反应，生成相应的α-酮酸和新的氨基酸。

通过观察层析板上氨基酸的迁移情况，我们可以分析转氨基反应的效率。

（1）丙氨酸转氨基反应：实验结果显示，丙氨酸在转氨酶的催化下，发生转氨基反应生成丙酮酸和新的氨基酸。

层析板上丙氨酸的斑点明显减少，丙酮酸的斑点明显增多，表明转氨基反应发生。

（2）甘氨酸转氨基反应：实验结果显示，甘氨酸在转氨酶的催化下，发生转氨基反应生成甘酮酸和新的氨基酸。

层析板上甘氨酸的斑点明显减少，甘酮酸的斑点明显增多，表明转氨基反应发生。

（3）谷氨酸转氨基反应：实验结果显示，谷氨酸在转氨酶的催化下，发生转氨基反应生成α-酮戊二酸和新的氨基酸。

层析板上谷氨酸的斑点明显减少，α-酮戊二酸的斑点明显增多，表明转氨基反应发生。

3. 影响转氨基反应的因素（1）pH值：实验结果显示，不同pH值条件下，转氨基反应的效率有所不同。

在适宜的pH值范围内，转氨基反应的效率较高。

因此，pH值是影响转氨基反应的一个重要因素。

（2）温度：实验结果显示，不同温度条件下，转氨基反应的效率有所不同。

在一定温度范围内，随着温度的升高，转氨基反应的效率逐渐提高。

实验十二 转氨作用【实验目的】1．通过实验掌握水平方向滤纸层析原理和技术 2．了解转氨作用过程。

【实验原理】转氨基作用是由转氨酶（氨基转移酶）催化的，在这个反应中，α-氨基酸的氨基与α-酮酸的酮基之间交换，α-氨基酸转变成相应的α-酮酸，α-酮酸变成新的一种α-氨基酸。

转氨基作用是一种可逆反应。

每个转氨基反应均由专一的转氨酶所催化，在不同的生物有机体中均有转氨酶分布。

本实验是将丙氨酸和α-酮戊二酸与肝匀浆一起水浴反应，肝中的丙氨酸氨基转移酶（ALT ，又称谷丙转氨酶GPT ）含量丰富，该酶可将丙氨酸的氨基转移给α-酮戊二酸，产生丙酮酸和谷氨酸。

利用圆盘纸层析鉴定谷氨酸的存在，并且验证组织中的转氨作用。

在肝脏谷丙转氨酶(GPT)催化的转氨基作用，反应方程式如下：CHCOOH CH 2NH 2CH 2COOH ++COCOOH CH 3CHCH 3COOH NH 2CCOOH CH 2OCH 2COOH 谷氨酸丙氨酸丙酮酸α‐酮戊二酸【实验材料】1． 实验器材培养皿；表面皿；滤纸；匀浆器；试管；试管架；恒温水浴锅；毛细管；移液管；喷雾器；剪刀；铅笔；格尺。

2． 实验试剂⑴ 0.01M pH7.4磷酸缓冲液：0.2MNa 2HPO 4溶液81ml , 0.2MNaH 2P04溶液19ml 混匀，蒸馏水稀释20倍。

⑵ 0.1M 丙氨酸溶液：称取丙氨酸0.891克先溶于少量0.01MpH7.4磷酸缓冲液中，以1MNa0H 仔细调节至pH7.4后，用磷酸盐缓冲液加至100ml 。

⑶ 0.01M ａ-酮戊二酸溶液：称取ａ-酮戊二酸1.461克先溶于少量0.01M pH7.4磷酸缓冲液中，用1M Na0H 仔细调节至pH7.4后，用磷酸盐缓冲液加至100ml 。

⑷ 0.1M 谷氨酸溶液：称取谷氨酸0.735克先溶于少量0．01M pH7.4磷酸缓冲液中， 以1MNa0H 仔细调节至pH7.4后，用磷酸缓冲液加至100ml 。

竭诚为您提供优质文档/双击可除转氨作用实验报告篇一：实验六纸层析法观察转氨基作用实验报告实验六纸层析法观察转氨基作用【实验名称】：纸层析法观察转氨基作用09救援一班第三大组李岚宇20XX222336室温：28°（一）实验目的：1、学习氨基酸纸层析的基本原理。

2、掌握氨基酸纸层析的操作原理。

（二）实验原理：转氨基作用是氨基酸代谢过程中的一个重要反应，在转氨酶的催化下，氨基酸的а-酮酸与α-酮基的互换反应称为转氨基作用。

转氨基作用广泛地存在于机体各组织器官中，是体内氨基酸代谢的重要途径。

氨基酸反应时均由专一的转氨酶催化，此酶催化氨基酸的α－氨基转移到另一α－酮基酸上。

各种转氨酶的活性不同，其中肝脏的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化如下反应：α—酮戊二酸+丙氨酸谷氨酸+丙酮酸本实验以丙氨酸和α-酮戊二酸为底物，加肝匀浆保温后，用纸层析法检查谷氨酸的出现，以证明转氨基作用。

纸层析属于分配层析。

以滤纸为支持物，滤纸纤维与水亲合力强，水被吸附在滤纸的纤维素的纤维之间形成固定相。

有机溶剂与水不相溶，把预分离物质加到滤纸的一端，使流动溶剂经此向另一端移动，这样物质随着流动相的移动进行连续、动态的不断分配。

由于物质分配系数的差异，而使移动速度就不一样，在固定相中，分配趋势较大的组分，随流动相移动的速度就慢，反之，在流动相分配趋势较大的成分，移动速度快，最终不同的组分彼此分离，物质在纸上移动的速率可以用比值Rf表示：ALT物质在一定的溶液中的分配系数是一定的，故比值Rf也相对稳定，因此在同一层析体系中可用Rf值来鉴定被分离的物质。

（三）实验材料与仪器：试剂：1、0.01mol/Lph7.4磷酸盐缓冲液。

2、0.2mol/Lna2hpo4溶液81ml与0.2mol/Lnah2po4溶液19ml混匀,用蒸馏水稀释20倍。

3(:转氨作用实验报告)、0.1mol/L丙氨酸溶液称取丙氨酸0.891克,先溶于少量0.01mol/Lph7.4磷酸盐缓冲液中,以1.0nnaoh仔细调至ph7.4后,加磷酸盐缓冲液至100ml。

氨基转移作用实验报告氨基转移作用实验报告概述：氨基转移作用是生物化学中一种重要的酶促反应，它在细胞内起着关键的代谢调节作用。

本实验旨在通过观察氨基转移作用的实验现象，了解其机理和应用。

实验材料与方法：1. 实验材料：- 氨基转移酶：选取乳酸脱氢酶（LDH）作为氨基转移酶。

- 底物：选择乳酸和α-酮戊二酸作为底物。

- 辅助试剂：包括缓冲液、辅酶NADH等。

2. 实验方法：- 步骤一：制备实验体系。

1) 首先制备含有LDH的反应液。

2) 分别制备含有乳酸和α-酮戊二酸的底物溶液。

3) 准备辅助试剂。

- 步骤二：进行氨基转移作用实验。

1) 将LDH反应液、乳酸溶液和α-酮戊二酸溶液混合，加入辅助试剂。

2) 记录反应体系的吸光度变化。

- 步骤三：数据处理与分析。

1) 绘制吸光度-时间曲线。

2) 分析曲线的趋势和特点。

实验结果与讨论：在实验中，我们观察到了氨基转移作用的实验现象。

根据实验结果，我们得出以下结论：1. 氨基转移作用是一个动态过程。

在实验过程中，我们观察到反应体系的吸光度随时间的变化而发生明显的变化。

这表明氨基转移作用是一个动态的过程，随着时间的推移，底物被转化为产物。

2. 氨基转移作用具有特异性。

在本实验中，我们选择了乳酸和α-酮戊二酸作为底物。

根据实验结果，我们发现只有在有LDH存在的情况下，反应体系才会发生明显的吸光度变化。

这说明氨基转移作用具有特异性，只有特定的底物和酶才能发生反应。

3. 氨基转移作用在生物代谢中起重要作用。

氨基转移作用是细胞内一种常见的代谢调节过程。

通过将氨基基团从一个底物转移到另一个底物，细胞可以调节代谢途径中的物质转化和平衡。

本实验结果进一步验证了氨基转移作用在生物代谢中的重要性。

结论：通过本实验，我们深入了解了氨基转移作用的实验现象、机理和应用。

氨基转移作用是生物化学中一个重要的酶促反应，对于生物体的代谢调节起着关键作用。

进一步的研究和应用可以帮助我们更好地理解细胞内的代谢过程，并为药物研发和疾病治疗提供理论基础。

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2、掌握氨基酸纸层析的操作原理。

（二）实验原理：转氨基作用是氨基酸代谢过程中的一个重要反应，在转氨酶的催化下，氨基酸的а-酮酸与α-酮基的互换反应称为转氨基作用。

转氨基作用广泛地存在于机体各组织器官中，是体内氨基酸代谢的重要途径。

氨基酸反应时均由专一的转氨酶催化，此酶催化氨基酸的α－氨基转移到另一α－酮基酸上。

各种转氨酶的活性不同，其中肝脏的丙氨酸氨基转移酶（ALT）催化如下反应：α—酮戊二酸 + 丙氨酸谷氨酸 + 丙酮酸本实验以丙氨酸和α-酮戊二酸为底物，加肝匀浆保温后，用纸层析法检查谷氨酸的出现，以证明转氨基作用。

纸层析属于分配层析。

以滤纸为支持物，滤纸纤维与水亲合力强，水被吸附在滤纸的纤维素的纤维之间形成固定相。

有机溶剂与水不相溶，把预分离物质加到滤纸的一端，使流动溶剂经此向另一端移动，这样物质随着流动相的移动进行连续、动态的不断分配。

由于物质分配系数的差异，而使移动速度就不一样，在固定相中，分配趋势较大的组分，随流动相移动的速度就慢，反之，在流动相分配趋势较大的成分，移动速度快，最终不同的组分彼此分离，物质在纸上移动的速率可以用比值Rf表示： ????ALT物质在一定的溶液中的分配系数是一定的，故比值Rf也相对稳定，因此在同一层析体系中可用Rf值来鉴定被分离的物质。

（三）实验材料与仪器：试剂：1、0.01mol/L pH 7.4磷酸盐缓冲液。

2、0.2mol/L Na2HPO4溶液81ml与0.2mol/L NaH2PO4溶液19ml混匀,用蒸馏水稀释20倍。

一、实验目的1. 了解氨基转换反应的基本原理和方法；2. 掌握氨基转换反应的实验操作步骤；3. 分析实验结果，探讨影响氨基转换反应的因素。

二、实验原理氨基转换反应是指在一定条件下，氨基酸分子中的氨基与另一物质发生交换，生成新的氨基酸。

本实验采用水合肼作为氨基转换试剂，通过加热使水合肼与氨基酸发生反应，实现氨基的转换。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）氨基酸：L-苯丙氨酸、L-赖氨酸、L-亮氨酸；（2）水合肼；（3）硫酸；（4）氢氧化钠；（5）乙醚；（6）冰乙酸；（7）无水乙醇；（8）实验试剂：盐酸、氢氧化钠、乙醚、无水乙醇等。

2. 实验仪器：（1）电热恒温水浴锅；（2）分析天平；（3）圆底烧瓶；（4）冷凝管；（5）滴定管；（6）分光光度计；（7）研钵；（8）漏斗；（9）玻璃棒；（10）试管等。

四、实验步骤1. 准备实验试剂：称取一定量的氨基酸，溶解于适量水中，配制成一定浓度的氨基酸溶液。

2. 氨基转换反应：（1）取一定量的氨基酸溶液于圆底烧瓶中；（2）加入适量的水合肼，搅拌均匀；（3）将圆底烧瓶置于电热恒温水浴锅中，加热至80℃；（4）维持80℃水浴反应30分钟；（5）停止加热，自然冷却至室温。

3. 分离与纯化：（1）向反应体系中加入适量的硫酸，搅拌均匀；（2）静置，待反应体系分层；（3）用滴定管取上层清液，加入适量的乙醚，振荡、静置，待分层；（4）取下层乙醚层，用分液漏斗分离；（5）将乙醚层转移至另一个烧瓶中，加入适量的氢氧化钠溶液，振荡、静置，待分层；（6）取下层水层，用滴定管取适量，加入适量的无水乙醇，振荡、静置，待分层；（7）取下层乙醇层，用滴定管取适量，加入适量的氢氧化钠溶液，振荡、静置，待分层；（8）取下层氢氧化钠溶液，用分液漏斗分离。

4. 确定产物：（1）取一定量的产物，用分光光度计测定其吸光度；（2）以氨基酸为对照，计算产物的产率。

五、实验结果与分析1. 实验结果：（1）产物为L-赖氨酸；（2）产率为70%。

氨基转换作用实验报告一、实验目的本实验旨在探究氨基转换作用的原理和过程，通过实验操作和观察，深入理解氨基在生物体内的转移和代谢机制。

二、实验原理氨基转换作用是指在转氨酶的催化下，一种氨基酸的氨基转移到另一种酮酸上，生成新的氨基酸和新的酮酸的过程。

转氨酶在生物体内广泛存在，对于氨基酸的代谢和平衡起着重要的调节作用。

本实验以谷氨酸和丙酮酸为底物，在谷丙转氨酶（GPT）的催化下，谷氨酸的氨基转移到丙酮酸上，生成丙氨酸和α酮戊二酸。

通过检测反应前后丙氨酸和α酮戊二酸的生成量，可以判断氨基转换作用的发生和程度。

三、实验材料和仪器1、实验材料新鲜的动物肝脏（如猪肝）1%谷氨酸溶液1%丙酮酸溶液01%磷酸吡哆醛溶液01mol/L 氢氧化钠溶液002%茚三酮溶液2%乙酸溶液2、实验仪器研钵离心机移液器恒温水浴锅分光光度计试管、刻度吸管、容量瓶等四、实验步骤1、制备酶液称取新鲜的动物肝脏约 5g，用预冷的生理盐水洗净血水，剪碎后放入研钵中，加入少量石英砂和预冷的 001mol/L 磷酸缓冲液（pH74），研磨成匀浆。

将匀浆转移至离心管中，在4℃下以3000r/min 的转速离心10min，上清液即为酶液。

2、反应体系的制备取 4 支试管，编号为 1、2、3、4。

按照下表加入试剂：｜试管编号|1%谷氨酸溶液（mL）｜1%丙酮酸溶液（mL）｜01%磷酸吡哆醛溶液（mL）｜酶液（mL）｜｜｜｜｜｜｜｜1|05|05|01|05|｜2|05|05|01|—｜｜3|05|—｜01|05|｜4|—｜05|01|05|3、反应条件的设置将 4 支试管置于 37℃恒温水浴锅中保温 30min。

4、终止反应保温结束后，向每支试管中加入 05mL 2%乙酸溶液，终止反应。

5、丙氨酸的测定分别取上述 4 支试管中的反应液 1mL，加入到另外 4 支新的试管中，编号为 5、6、7、8。

向每支试管中加入 05mL 01mol/L 氢氧化钠溶液，摇匀。

实验四转氨基作用（纸层析法）原理氨基酸分子上的氨基转移到α-酮酸分子上的反应过程称为转氨基作用（或称氨基移换作用）。

转氨基作用是氨酸代谢的重要反应之一，由转氨酶催化。

经转氨后，原来的α-—氨基酸变成了相应的α-—酮酸，原来的α-—酮酸则成为新的、相应的α-—氨基酸。

本实验观察谷氨酸与丙酮酸在肌匀浆中的谷氨酸—丙酮酸转氨酶（简称GPT）的催化进行转氨基的过程。

然后用纸层析法检查反应体系中丙氨酸的生成。

为便于观察转氨基作用，在反应中须加一碘醋酸（或—溴醋酸），以抑制谷氨酸和丙酮酸的其它代谢过程。

试剂1．0.9% NaCl溶液。

2．PH7.4 0.01mol/L磷酸缓冲液：取0.2mol/LNa2HPO4溶液81ml与0.2mol/LNaH2PO4溶液19ml 混匀，稀释至2000ml。

3．1%谷氨酸钾溶液：取谷氨酸1g ，加水20ml，用5%KOH调到中性，然后用pH7.4 0.01mol/L 磷酸缓冲液稀释至100ml。

4．1%丙酮酸钠溶液：取丙酮酸1g加pH7.4 0.01mol/L磷酸缓冲溶液溶解成100ml。

5．0.25%一碘酸钠溶液：取一碘醋酸0.25g加水1ml，用5%KOH调到中性，然后加pH7.4，0.01mol/L磷酸缓冲液成100ml。

（一碘醋酸可用一溴醋酸代替）。

6．2%HAc操作1．肌匀浆的制备（由实验室准备室制备）取小白兔一只，猛击头部处死后，立即剪颈放血，取肌肉若干经0.9%NaCl溶液洗去血污后，称取肌肉约100g置电动匀浆器中，再加0.01mol/LpH7.4磷酸缓冲液500ml磨成匀浆。

2.转氨基反应：取小试管2支编号，所加试剂以滴为单位。

编号1 2试剂肌匀浆10 10将2号管置沸水浴中5分钟，然后取出冷却1%谷氨酸钾10 101%丙酮酸钠10 100.25%—碘醋酸钾 5 5混匀后同置40℃水浴中保温45分钟（或60分钟）。

在保温过程中，时加振摇。

取出两管各加入2%醋酸2滴，再同置沸水浴中5分钟，使蛋白质完全凝固，冷却后，离心（200r/min）5分钟，（或静置10分钟），将上清液作氨基酸的纸层析。

一、实验名称转氨基活性实验二、实验目的1. 了解转氨基作用在氨基酸代谢中的重要性。

2. 掌握通过纸层析法检测转氨基活性的原理和方法。

3. 学习如何通过实验结果分析转氨基活性的变化。

三、实验原理转氨基作用是指氨基酸分子中的氨基转移至α-酮酸分子上，形成新的氨基酸和新的α-酮酸的过程。

这个过程在生物体内通过转氨酶的催化作用实现。

本实验采用纸层析法，通过观察氨基酸在纸层析上的迁移情况，来检测转氨基活性。

四、实验材料与仪器1. 材料：L-苯丙氨酸、L-丙氨酸、α-酮戊二酸、纸层析纸、丙酮、层析缸、滤纸、铅笔、剪刀、镊子等。

2. 仪器：分析天平、移液管、滴管、酒精灯、电热恒温水浴锅等。

五、实验步骤1. 配制层析液：将丙酮和蒸馏水按体积比1:1混合，配制成层析液。

2. 准备层析纸：将纸层析纸剪成适当大小，用铅笔在纸的一端标记起始线。

3. 配制样品：将L-苯丙氨酸和L-丙氨酸分别溶解于蒸馏水中，配制成一定浓度的溶液。

4. 制备层析样品：取两根毛细管，分别蘸取L-苯丙氨酸和L-丙氨酸溶液，在层析纸上距离起始线1cm处滴加，重复两次，待溶剂挥发后，再滴加α-酮戊二酸溶液，重复两次。

5. 展开层析：将层析纸放入层析缸中，加入层析液，待层析液上升到距起始线1cm处时，取出层析纸，晾干。

6. 观察结果：用铅笔在层析纸上标记出各样品的迁移位置，比较L-苯丙氨酸和L-丙氨酸的迁移距离，分析转氨基活性。

六、实验结果与分析1. 实验结果：L-苯丙氨酸和L-丙氨酸在层析纸上的迁移距离不同，说明两种氨基酸的转氨基活性存在差异。

2. 分析：L-苯丙氨酸的迁移距离较L-丙氨酸远，说明L-苯丙氨酸的转氨基活性较低。

这可能是因为L-苯丙氨酸的氨基转移速率较慢，或者其α-酮酸与层析液之间的相互作用较强。

七、实验结论通过本实验，我们掌握了纸层析法检测转氨基活性的原理和方法。

实验结果表明，L-苯丙氨酸的转氨基活性低于L-丙氨酸。

这为进一步研究氨基酸代谢提供了实验依据。

转氨基实验报告讨论引言转氨酶（Transaminase）是一类催化氨基酸转移反应的酶。

转氨基实验是一种常用的生化实验方法，用于检测体液或组织中的转氨酶活性水平，以判断机体的肝功能和心肌损伤程度。

本实验旨在探讨转氨酶活性与机体健康状况之间的关系，以及转氨酶活性的影响因素。

转氨基实验方法1. 实验材料：- 人体血清样本- AST和ALT酶试剂盒- 试管、离心管、显微镜等实验器材2. 实验步骤：1. 准备工作：将实验器材冷藏，并确认试剂盒的有效期。

2. 样本处理：将人体血清样本加入离心管中，离心分离血清。

3. 实验操作：根据试剂盒说明书指引，加入适量的试剂，混合均匀后，在恒定温度下反应一段时间。

4. 光度计测定：使用光度计测量反应体系的吸光度，并记录下吸光度数值。

5. 数据处理：根据吸光度数值，计算出转氨酶活性。

结果与讨论本次实验中，我们收集了30份人体血清样本，并进行了AST和ALT转氨酶活性的测试。

通过测量吸光度并计算出各样本的转氨酶活性，我们得到了以下结果：样本编号AST转氨酶活性ALT转氨酶活性1 20 U/L 15 U/L2 25 U/L 18 U/L... ... ...30 30 U/L 25 U/L通过对结果的分析，我们得到了以下几点结论：1. 转氨酶活性与肝功能有关：AST和ALT是最常用的肝功能检测指标之一，其转氨酶活性能够反映肝脏细胞的功能状态。

当肝脏受到损伤时，转氨酶会释放到血液中，导致转氨酶活性的升高。

因此，本次实验中的AST和ALT活性的异常值可能表示一些参与肝脏疾病的潜在风险。

2. 异常值的原因多样化：引起AST和ALT活性异常的原因是多种多样的。

常见的包括酒精滥用、药物过量、肝炎病毒感染以及脂肪堆积在肝脏中等等。

因此，在进行肝功能的评估时，需要综合考虑转氨酶活性的上升是否与患者的病史和症状相符。

3. 实验结果参考范围的制定：根据世界卫生组织的定义，正常人的AST和ALT 活性水平一般在特定范围内。

转氨基实验报告结论根据转氨酶实验结果，可以得出以下结论：1. 转氨酶作为一种重要的生物标志物，能够反映机体内部的生物化学代谢状态以及相关器官的功能情况。

通过转氨酶的检测，可以间接了解到某些疾病的存在与程度。

2. 在本次实验中，我们选择了常见的转氨酶谱系代表：丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）。

ALT主要存在于肝脏细胞中，而AST则广泛分布于多种组织细胞中，包括肝脏、心脏、肌肉等。

3. 实验结果显示，某患者的ALT和AST水平明显升高，超出了正常参考范围。

这种情况表明该患者可能存在肝脏功能异常或损伤，并且损伤较为严重。

由于ALT主要存在于肝脏细胞中，因此ALT的升高可以反映出肝脏细胞的损伤程度。

AST水平也升高可能是因为其他组织细胞的损伤。

4. 根据病史、体征和实验结果综合分析，可以初步判断该患者可能患有肝炎、肝硬化、肝癌等肝脏疾病。

但具体疾病类型还需要进一步的实验检查和医生的专业判断。

5. 在诊断肝脏疾病时，单一的转氨酶检测结果不能完全确定疾病的性质，还需要综合其他临床检查指标进行分析，如肝功能检测、肝病相关病毒标记物检测等。

同时，还需结合病史、体征、影像学检查等全面评估患者的病情。

6. 转氨酶检测结果的异常升高并不一定意味着存在严重疾病，还有可能与其他因素有关，如饮酒、药物影响、剧烈运动等。

因此，在解读转氨酶检测结果时，需要综合患者的个人情况进行判断。

总之，转氨酶实验是一种常用的生化指标检测方法，通过检测ALT和AST的水平，可以初步判断肝脏功能的异常与否，并为临床诊断提供一定的帮助，但单纯的转氨酶检测结果不能完全确定疾病的性质，还需要综合其他临床指标进行分析。

因此，在进行实验时，我们应该结合临床情况进行综合判断，并避免仅仅依赖于实验结果进行诊断，以确保诊断的准确性和确信度。

一、实验目的1. 理解氨基转换反应的基本原理；2. 掌握氨基转换反应的实验操作方法；3. 通过实验观察氨基转换反应的现象，加深对氨基转换反应的理解。

二、实验原理氨基转换反应是指氨基酸分子中的氨基与α-酮酸分子中的酮基发生互换的反应。

该反应在生物体内具有重要作用，是蛋白质代谢和氨基酸生物合成的重要途径。

本实验通过观察丙氨酸与α-酮戊二酸在转氨酶催化下发生的氨基转换反应，验证氨基转换反应的存在。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 丙氨酸- α-酮戊二酸- 转氨酶- 0.1mol/L磷酸缓冲液（pH 7.4）- 硫酸铜溶液- 2,4-二硝基苯肼溶液- 乙醚- 无水乙醇- 水浴锅2. 实验仪器：- 721分光光度计- 离心机- 实验台- 试管- 移液管- 滴定管四、实验步骤1. 配制反应溶液：- 取10mL 0.1mol/L磷酸缓冲液（pH 7.4）于试管中；- 加入2.5mL 0.1mol/L丙氨酸；- 加入2.5mL 0.1mol/Lα-酮戊二酸；- 加入1mL转氨酶；- 混匀后，置于37℃水浴锅中反应30分钟。

2. 取样：- 取反应后的溶液1mL，加入5mL 2,4-二硝基苯肼溶液；- 加入2mL乙醚；- 振荡混匀，静置分层；- 取乙醚层，加入1mL硫酸铜溶液；- 混匀，置于37℃水浴锅中反应30分钟。

3. 比色：- 取出反应后的溶液，用721分光光度计在540nm波长下测定吸光度。

五、实验结果与分析1. 结果：- 反应后的溶液吸光度A540随时间变化曲线如图1所示。

2. 分析：- 由图1可知，反应后的溶液吸光度A540随时间逐渐增加，说明氨基转换反应发生了。

- 在反应初期，吸光度A540增加较快，随后逐渐减慢，说明氨基转换反应在反应初期速率较快，随后逐渐趋于平衡。

六、实验结论通过本实验，我们验证了氨基转换反应的存在，并观察到了反应的现象。

实验结果表明，在转氨酶催化下，丙氨酸与α-酮戊二酸发生了氨基转换反应，生成了新的氨基酸和α-酮酸。