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参附注射液抗肝脏缺血再灌注损伤作用的研究石臣磊;秦华东;孙宇【期刊名称】《临床肝胆病杂志》【年(卷),期】2009(025)004【摘要】目的研究参附注射液在抗大鼠肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)中的保护作用.方法将30只大鼠随机分为实验组和对照组,建立常温下部分肝脏缺血再灌注动物模型.动态观察血清天冬氨酸转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和内皮素-1(ET-1)的水平.术后取肝组织作光镜和电镜观察.结果实验组血清AST、MDA、TNF-α、ET水平均显著低于对照组水平(P＜0.05),SOD水平高于对照组(P＜0.05).与对照组比较,实验组大鼠肝细胞和肝窦内皮细胞变性和坏死程度较轻.结论参附注射液具有抗肝脏缺血再灌注损伤的保护作用,主要通过抑制氧自由基产生.【总页数】3页(P281-283)【作者】石臣磊;秦华东;孙宇【作者单位】哈尔滨医科大学附属第二临床医院普外四科,黑龙江,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学附属第二临床医院普外四科,黑龙江,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学附属第二临床医院普外四科,黑龙江,哈尔滨,150086【正文语种】中文【中图分类】R575.2+9【相关文献】1.参附注射液对犬肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 余翔;刘保江;韩冲芳2.JAK2/STAT3信号通路在白藜芦醇抗肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制研究[J], 李宝红;宋娟;王东;孟董超;卢彦珍3.参附注射液对兔肝脏缺血再灌注损伤保护作用的研究 [J], 黄海;梁霄4.bcl-2在mitoKATP通道开放剂二氮嗪诱导的抗小鼠移植肝脏缺血再灌注损伤中的作用的研究 [J], 吴乔; 别平; 唐春; 张玉君5.参附注射液对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 张义彬;涂兵;龚建平;刘长安;陈蓁臻;郝荣涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小鼠缺血再灌注（实用版）目录1.小鼠缺血再灌注的背景和意义2.小鼠缺血再灌注的实验方法和操作步骤3.小鼠缺血再灌注的实验结果和分析4.小鼠缺血再灌注的结论和展望正文一、小鼠缺血再灌注的背景和意义小鼠缺血再灌注是指在小鼠体内某一部位发生缺血后，再通过灌注使其恢复血流。
这一过程在生物医学研究中具有重要意义，因为它可以模拟人类某些疾病的发生过程，如心肌梗死、脑卒中等。
通过研究小鼠缺血再灌注，可以深入了解缺血后再灌注对组织和器官的影响，为临床治疗提供理论依据。
二、小鼠缺血再灌注的实验方法和操作步骤1.实验动物选择：选用健康成年小鼠，分为实验组和对照组。
2.制备缺血模型：将实验组小鼠放入灌注装置中，通过调整灌注流量和时间，使小鼠某一部位（如心肌、脑组织等）发生缺血。
3.观察缺血程度：通过检测相关生理指标（如心率、血压、血氧饱和度等），评估小鼠缺血程度。
4.再灌注操作：在观察到缺血程度达到预设值后，恢复灌注流量，使缺血部位重新获得血流。
5.观察再灌注效果：通过检测生理指标，评估再灌注对小鼠的影响。
三、小鼠缺血再灌注的实验结果和分析实验结果显示，在缺血发生后，小鼠的心率、血压、血氧饱和度等指标会发生明显变化。
再灌注后，这些指标会逐渐恢复到正常水平。
但不同缺血时间和程度的小鼠，再灌注后的恢复情况有所不同。
通过对实验结果的分析，可以得出以下结论：1.缺血再灌注对小鼠的组织和器官具有一定的保护作用，能够减轻缺血带来的损伤。
2.缺血时间和程度的不同，再灌注的效果有所差异，提示再灌注治疗需要个体化。
四、小鼠缺血再灌注的结论和展望总之，小鼠缺血再灌注实验为研究缺血后再灌注的生物学效应提供了一个有效模型。
通过对这一模型的深入研究，可以为临床治疗缺血性疾病提供理论依据和技术支持。
大鼠肝脏缺血再灌注损伤模型缺血再灌注损伤，即缺血器官、组织重新获得血液供应，不仅不能使组织、器官功能恢复，反而加重了功能代谢障碍及结构破坏。
对麻醉动物的肝中叶和肝左叶的门静脉和肝动脉进行阻断和再通，由于肝脏中叶和左叶血流的阻断和再通，引起肝脏中叶和左叶明显的再灌注损伤。
肝脏缺血过程中由于肝细胞内ATP迅速耗尽，导致乳酸酮体等的堆积，及线粒体氧化磷酸化功能低下，引发代谢性酸中毒，缺血过程中细胞缺氧使ATP含量下降，导致肝细胞内外Ca2 +重新分布，即Ca2 +内流，引起线粒体的损伤。
再灌注过程中由于氧自由基的爆发性增多，中性粒细胞的聚集，kupffer细胞的激活，细胞凋亡及其他多种细胞因子的作用，使得肝细胞膜损伤，内皮细胞损伤及肝脏微循环障碍等导致肝脏功能代谢障碍及结构破坏。
1.实验动物SPF级Wistar大鼠，健康，雄性，体重为250g-300g。
2.实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。
3.实验周期0h、3h、6h、12h、24h、72h4.建模方法1.选取体重250g-300g大鼠，行术前12 h禁食，自由饮水。
2. 15%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，麻醉成功后将大鼠平躺在手术台上胶带固定四肢，将大鼠腹部至剑突术区剃毛，用10％碘酒和75％乙醇术区消毒。
3.取腹正中切口1cm，打开腹腔，小心分离出肝脏左、中叶之肝蒂（左、中叶肝脏供血的门静脉和肝动脉）。
4. 用无创血管夹夹闭中叶和左叶的门静脉和肝动脉,使约70%的肝脏缺血,以防止发生严重肠系膜静脉淤血。
0.5min后,与非阻断的右叶相比，肉眼可见阻断叶明显变白，说明阻断成功，用止血钳夹闭皮肤切口临时关闭腹腔，同时将大鼠放在37℃恒温加热垫上保温。
5. 完成持续缺血60min后，重新打开腹腔，迅速取出血管夹，恢复缺血肝血流，0.5min左右可见缺血区肝脏由白色逐渐恢复为鲜红色表明再灌注成功，逐层缝合腹腔肌肉和皮肤关闭腹腔，完成手术。
血管再灌注实验报告1. 引言血管再灌注(Ischemia-reperfusion, I/R) 是指血液供应阻断后再恢复供应。
血管再灌注实验常被用于研究心脏、肝脏、肾脏等器官缺血再灌注损伤的机制和治疗方法。
本实验旨在通过建立小鼠心肌缺血再灌注模型，观察心肌组织的损伤程度，探讨可能的保护措施。
2. 材料与方法2.1 实验动物雄性C57BL/6小鼠，体重22-26g，年龄8-10周。
2.2 实验组织心脏组织。
2.3 实验设计将实验动物随机分为以下组别：- 对照组(Sham)：动物接受手术操作，但没有缺血再灌注处理。
- 缺血再灌注组(I/R)：动物在缺血30分钟后再进行1小时的再灌注。
- 预处理组(PreC)：在缺血前15分钟，给予预处理药物。
2.4 缺血再灌注模型建立1. 手术动物采用深度麻醉并固定在手术台上。
2. 通过胸骨处切口，暴露心脏。
3. 用缝线将冠状动脉结扎。
4. 结扎30分钟后，解开缝线并进行1小时的再灌注。
5. 收集心肌组织样本。
2.5 组织损伤评价方法1. 心脏组织样本定量化。
2. 彩色素沉淀法(TTC staining) 观察心脏梗死面积。
3. 光镜下观察组织结构。
2.6 统计分析采用统计学软件进行数据的描述性分析，并使用方差分析(ANOVA) 进行组间比较，p < 0.05认为差异有统计学意义。
3. 结果3.1 心脏梗死面积变化通过TTC染色观察心脏梗死面积的变化，在I/R组中心脏梗死面积显著增加(p < 0.05)，而在预处理组中心脏梗死面积较小，差异有统计学意义。
3.2 组织结构观察使用光镜观察心肌组织结构变化，发现I/R组心肌细胞出现明显的坏死和水肿，而预处理组心肌细胞结构相对完整，坏死和水肿程度明显减轻。
4. 讨论本实验通过建立小鼠心肌缺血再灌注模型，观察心肌组织的损伤程度。
结果表明，缺血再灌注会导致心肌梗死面积增加和心肌组织结构损伤。
然而，在预处理组中给予药物处理后，心肌梗死面积减小，心肌组织结构保持较好。
MG-132对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
李兵;付锦;邹卿云
【期刊名称】《黑龙江医学》
【年(卷),期】2010(034)010
【摘要】目的研究蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制.方法线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,用MG-132干预,TTC 染色测梗死体积,TUNEL法检测细胞凋亡.结果大鼠脑缺血再灌注后,梗死体积和细胞凋亡指数逐渐增高,至24 h达高峰.MG-132干预后,脑梗死体积缩小,作用24 h 缩小44%,细胞凋亡指数减小(P<0.05).结论 MG-132通过抗凋亡而产生神经保护作用,具体机制可能为阻断泛素-蛋白酶体(UPP)途径.
【总页数】3页(P742-744)
【作者】李兵;付锦;邹卿云
【作者单位】哈尔滨医科大学附属第二医院,黑龙江,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学附属第二医院,黑龙江,哈尔滨,150086;哈尔滨医科大学,黑龙江,哈尔滨,150088【正文语种】中文
【中图分类】R-332
【相关文献】
1.脑缺血预处理联合山莨菪碱对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用 [J], 蒋崇慧;侯德仁;汤彦;杨光田;邓普珍
2.局灶性脑缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制 [J], 程道宾;
孙圣刚;陈小武;田有勇;王岚;苏颖
3.脑缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的 Meta 分析 [J], 曾晓鹏;邹晓峰;陈丽
4.脑缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的Meta分析 [J], 曾晓鹏;邹晓峰;陈丽;
5.蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用研究 [J], 戴翠莲;罗开良
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海风藤酮对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究史留斌;陈怀仁;王尔慧;嵇振岭【期刊名称】《中国普外基础与临床杂志》【年(卷),期】1998(5)4【摘要】为探讨肝脏缺血再灌注损伤过程中血小板激活因子（ｐｌａｔｅｌｅｔａｃｔｉｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ，ＰＡＦ）及中性粒细胞的作用及其机理，作者在建立大鼠肝脏局部缺血再灌注损伤模型的基础上，对ＰＡＦ的变化及中性粒细胞的浸润程度进行了初步研究，观察了ＰＡＦ拮抗剂海风藤酮对大鼠肝脏局部缺血再灌注损伤的保护作用。
结果表明：肝脏缺血再灌注损伤时肝组织ＰＡＦ含量增高，且随再灌注时间的延长而加重；早期肝组织抗氧化能力下降，大量氧自由基生成，以及细胞内钙超载是损伤的主要原因，而肝脏Ⅱ相损伤主要是由于肝组织ＰＡＦ的积聚，激活中性粒细胞，导致溶酶体酶和毒性自由基的产生所致。
海风藤酮可以拮抗损伤过程中ＰＡＦ增高所致的药理作用，减轻肝脏脂质过氧化程度，改善肝功能，减轻肝脏病变程度。
【总页数】4页(P195-198)【关键词】血小板激活因子;肝脏;缺血再灌注损伤;海风藤酮【作者】史留斌;陈怀仁;王尔慧;嵇振岭【作者单位】南京铁道医学院第一附属医院肝胆外科【正文语种】中文【中图分类】R973.2【相关文献】1.L-精氨酸预处理对肝硬化大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 [J], 张志强;蔡兵;吴鸣宇2.乌司他丁联合17β雌二醇对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 [J], 张营;付晓光;王迅3.依达拉奉对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 [J], 宋德静;孔连宝;卢思聪;蒋维维;刘涛4.海风藤酮对大鼠肝脏缺血保护作用的实验研究 [J], 史留斌5.金纳多对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究 [J], 马玉山因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
【文章编号】1007-9424(200105-0295-03・基础与实验研究・山莨菪碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究董满库3崔彦3陈昌玮3王平3肖广生3周立艳3李晓鸥3吉敏3刘子沛3【摘要】目的探索山莨菪碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。
方法选雄性Wistar大鼠160只,分为正常对照组、缺血再灌注组、生理盐水组和山莨菪碱组,观察了肝脏缺血60分钟及再灌注1、3、6、12及24小时后血浆内皮素21(ET21、透明质酸(HA和谷丙转氨酶(AL T含量变化及肝组织病理学变化。
结果肝脏缺血再灌注后,血浆ET21、HA和AL T含量均显著增高,同时肝脏瘀血很明显;肝脏缺血再灌注前用山莨菪碱后,血浆HA和AL T含量明显降低,同时肝组织瘀血减轻。
结论山莨菪碱可改善再灌注后的肝脏微循环障碍,对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用。
【关键词】肝脏缺血2再灌注损伤山莨菪碱内皮素【中图分类号】R322.4+7;R364.1【文献标识码】AEXPERIMENTA L STU DY ON PR OTECTIVE EFFECTS OF ANISODAMINE ON ISCHEMIA2REPERFUSION IN JUR Y INRAT L IVER DON G M an2ku,CUI Y an,CHEN C hang2wei,et al.Depart ment of Hepatobiliary S urgery,PL A306thHospital,Beijing100101【Abstract】Objective To study the protective effects of anisodamine on liver ischemia2reperfusion injury in rats.Methods One hundred and sixty male Wistar rats were randomly divided into the normal control(n=10,ischemia2reperfusion(n=50,normal saline(n=50and anisodamine(n=50,2.0mg/kggroups.The animals were killed1,3,6,12,24hours after ischemia induced for60minutes and followed byreperfusion.Plasma endothelin21(ET21,hyaluronic acid(HA,glutamic2pyruvic transaminase enzyme(AL Twere measured,and the hepatic histopathologic alterations were alsoobserved.R esults The plasma ET21,HA and AL T concentrations were markedly increased after liver ischemia2reperfusion.The hepatic congestion was significantly obvious.An intravenous injection of anisodamine before ischemia2reperfusion coulddecrease the plasma HA and AL T concentrations and relieve the hepatic congestion.Conclusion Anisodamine can improvehepatic microcirculatory disturbances after reperfusion and have hepatoprotictive effects on rat liver ischemia2reperfusion injury.【K ey w ords】Liver Ischemia2reperfusion injury Anisodamine Endothelin肝脏是一个对缺血缺氧非常敏感的器官,肝脏血流阻断后,细胞内的能量很快耗尽并带来结构和功能上的损伤。
再灌注后,肝脏将发生更严重的损伤,机理更为复杂。
本实验应用山莨菪碱,观察了肝脏缺血再灌注后血浆内皮素21(ET21、透明质酸(HA和谷丙转氨酶(AL T含量的变化,以及肝组织病理学变化,以期探索山莨菪碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。
1材料与方法1.1动物模型制作及分组选用雄性Wistar大鼠160只,重约210250g,由第二军医大学实验动物中心提供。
实验动物术前禁【作者单位】3解放军第306医院肝胆外科(北京100101【作者简介】董满库(1968年-,男,甘肃省甘谷县人,外科硕士研究生,主治医师,主要从事肝胆及胃肠疾病研究。
食12小时,自由进水,戊巴比妥钠(30mg/kg腹腔内注射麻醉后取上腹部正中切口,显露第一肝门部,按Nauta等〔1〕方法制作肝脏缺血再灌注模型。
动物随机分为4组:①正常对照组(A组,n=10,只行假手术;②缺血再灌注组(B组,n=50,每时相点10只,阻断入肝血流60分钟后松开无创动脉夹,恢复入肝血流,于所需时相点活杀动物取材;③生理盐水组(C组, n=50,每时相点10只,阻断入肝血流前10分钟自尾静脉注射生理盐水1ml,其它同B组;④山莨菪碱组(D组,n=50,每时相点10只,阻断入肝血流前10分钟自尾静脉注射稀释成1ml的山莨菪碱约0.5mg (2.0mg/kg,其余同B组。
1.2主要试剂ET21试剂盒为解放军总医院东亚免疫技术研究所提供;HA试剂盒为海军医学研究所提供;山莨菪碱系连云港东风制药总厂提供。
1.3观察指标与测定方法1.4肝组织病理学变化的观察切取新鲜活肝组织约20g,用10%甲醛溶液固定,按病理学常规制片,HE染色,光镜观察。
1.5统计学处理实验数据用 x±s表示,组间比较用t检验。
2结果2.1血浆ET21含量的变化B、C、D3组血浆ET21于缺血再灌注后迅速升高,3小时达到高峰,与A组相比,差异有显著性意义(P<0.01。
D组血浆ET21虽略有下降,但与B、C组相比差异无显著性意义(P>0.01,见表1。
表1各组大鼠不同时相血浆ET21含量的变化(pg/ml,x-±s组别n缺血再灌注后1h3h6h12h24hA组10 1.1±0.5-----2.2血浆HA含量的变化B、C、D3组血浆HA于缺血再灌注后呈持续增高趋势,至24小时略有下降,但仍维持在较高水平,与A 组比较,差异有显著性意义(P<0.01;D组血浆HA 含量又显著低于B、C组(P<0.05,见表2。
表2各组大鼠不同时相血浆H A含量的变化(pg/ml,x-±s组别n缺血再灌注后1h3h6h12h24hA组1058±2-----B组50258±113324±83521±143682±173650±153C组50262±103 320±63504±83686±203610±103D组50154±143△180±83△324±103△380±123△350±183△与A组比较,3P<0.01;与B、C组比较,△P<0.052.3血浆ALT含量的变化B、C、D3组血浆AL T含量于缺血再灌注后6小时达高峰,24小时仍维持较高水平,与A组比较差异有显著性意义(P<0.01;D组血浆AL T含量又显著低于B、C 组,其差异有显著性意义(P<0.05,见表3。
表3各组大鼠不同时相血浆ALT含量的变化(pg/ml,x-±s组别n缺血再灌注后1h3h6h12h24hA组1019±4-----B组50137±323144±333182±363162±283148±323C组50140±353 148±383176±283152±423150±363D组5082±123△88±153△102±143△91±253△90±183△与A组比较,3P<0.01;与B、C组比较,△P<0.052.4肝组织病理学变化光镜下见正常对照组肝细胞及肝窦内皮细胞均正常,肝组织无明显瘀血。
缺血再灌注后早期,肝组织瘀血非常明显,以门静脉为中心向周围呈放射状,同时肝细胞可见不同程度的坏死。
应用山莨菪碱后,肝细胞瘀血明显减轻,未观察到明显坏死细胞。
3讨论我们在实验中观察到,肝脏缺血再灌注后血浆ET21、HA和AL T含量均显著升高,同时肝脏瘀血非常明显。
ET21是一种由皮内细胞分泌的缩血管多肽,是目前所知的最强的缩血管物质〔2〕。
HA是肝脏间质细胞分泌的一种高分子多糖,主要由肝窦内皮细胞快速而特异性地摄取和降解,可作为肝脏缺血再灌注时反映肝窦内皮细胞功能和微循环功能状态的指标〔3〕。
肝脏缺血再灌注后血浆HA、AL T含量的升高,提示再灌注后出现了肝窦内皮细胞和肝脏微循环功能障碍;同时,肝细胞也受到了损伤。
研究发现,在肝血管平滑肌细胞和贮脂细胞上存在ET A和ET B受体,ET21可作用于ET A受体而导致肝脏微循环障碍〔4,5〕。
动物实验发现,向肝血管灌注ET21后可减少肝脏微循环血流50%60%,并能引起严重的肝细胞损伤〔6〕。
同时,再灌注后由于肝功能受损,乙酰胆碱和儿茶酚胺的蓄积,肝窦内皮细胞的肿胀以及ET21和NO之间的平衡失调可加重肝脏微循环障碍〔7〕,继而导致肝细胞损伤。
另外,再灌注过程中肝窦内皮细胞的损伤先于肝细胞,激活的Kupffer细胞可产生具有广泛生物活性的细胞因子〔8〕,从而激活中性粒细胞并粘附于肝窦内皮细胞,产生并释放氧自由基,可导致肝细胞膜和细胞器膜脂质过氧化损伤〔9〕。
肝脏缺血再灌注前应用山莨菪碱后,血浆HA含量的降低和肝组织瘀血程度的改善以及肝酶的漏出减少,说明山莨菪碱可以改善肝脏微循环,并对再灌注后肝细胞具有一定的保护作用。
山莨菪碱可解除微血管的痉挛,抑制血小板聚集及微血栓形成,促进微动脉和小静脉的自律运动,有利于推动微循环的血流运动。
山莨菪碱的保护作用可能还与山莨菪碱抑制NO的过量产生及清除自由基有关〔10〕。
