2013年全国通用 届高考一轮复习 选修1.2 微生物的培养与应用

课 时
等
规 范
训
练
培养基中加入某种化
选择 学物质，用来抑制不 培养和分离出特定微生物
基 础
用
知 识
培养 需要的微生物的生 (如分离酵母菌和霉菌，可
梳 理
途
基 长，促进所需要的微 以在培养基中加入青霉素)
感 悟
考
点
生物的生长
透 析
高
鉴别不同种类的微生物，如 根据微生物的代谢特
考 命 题
鉴别
用伊红-美蓝培养基鉴别饮
感 悟 考 点 透 析
高 考 命 题 把 脉
课 时 规 范 训 练
基 础 知 识 梳 理
感
悟
考
点
透
为什么在倒平板时，等平板冷却后要将平板倒置？
析
高
考
提示： 将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的水珠滴落到平 命 题
把
板上造成污染。
脉
课
时
规
范
训
练
基
础
下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法，请回答相关问题：
基 础 知 识 梳 理
感 悟 考 点 透 析
高 考 命 题 把 脉
课 时 规 范 训 练
基
础
知
识
梳
[考纲展示]
理
感
悟
1．微生物的分离和培养
考 点
透
2．某种微生物数量的测定
析
高
考
3．培养基对微生物的选择作用
命 题
把
4．利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的 脉 课
时
应用
规 范
训
练
基
础
知 识

100 ℃ 煮沸 5～6
min
80 ℃煮
15 min 或在70～ 75 ℃煮
30 min
70%酒 精、氯 气等
酒精 灯火 焰的 外焰
干热灭菌 箱，60～ 170 ℃， 维持1～
2h
高压蒸汽 灭菌锅， 恒温121 ℃，维持
15～30
min
应用 日常 范围 用品
不耐高 温的液
体
用酒精
擦拭双 手，用 氯气消
④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。
⑤操作第一步即取菌种之前及每次划线之前都需要进行 火焰灼烧灭菌，划线操作结束时，仍需灼烧接种环，每次灼 烧目的如下表：
产 β­胡萝卜素酵母的筛选与色素提取实验。请回答下列问题：
(1)实验用的培养皿常用的两种灭菌方法是_____________；为了
减少灭菌后器皿被污染，灭菌前应该________________。
(2)为了筛选出酵母菌，培养基中添加了青霉素，其目的是____。
(3)右图是灭菌锅及其局部剖面示意图，图中甲、
做的目的是__________________________；
(2)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通
过________灭菌，在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线
的末端开始划线。这样做的目的是___________。
(3)在示意图 A 和 B 中，________表示的是用
成功可以增加稀释度的范围
在具有显著的菌落特征 从适宜的稀释度的平板上的菌 的区域菌落中挑取菌体 落中挑取菌体
适用于好氧菌
适用于厌氧菌和兼性厌氧菌
可以根据菌落的特点获 得某种微生物的单细胞
菌落
既可以获得单细胞菌落，又能 对微生物计数

④纯化原理：上图甲菌体的分散是通过一系列的连续(liánxù)划线操作实现的；上 图乙菌体的分散是通过一系列的 梯度稀释 和 涂布平板操作实现的。
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4．菌种的保存方法 (1)对于频繁使用的菌种，可以采用临时(lín shí)保的藏方法。 (2)对于需要长期保存的菌种，可以采用甘油(ɡān yóu)管藏的方法。
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氮源
无机物：N2、NH3、氨盐、 能提供氮元素 合成 蛋白质 、核酸以 硝酸盐；
的物质
及含氮代谢产物
有机物：尿素、牛肉膏、
蛋白胨等
生长必不可少 生长因子
的微量有机物
酶和核酸的成分
维生素、氨基酸、碱基等
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水 无机盐
细胞生命活动必不可少的 不仅是良好的溶剂， 培养基、大气、
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【答案】 (1)有机化合物 A 选择 (2)提高培养液中的溶解氧(合理即可) 不同 (3)稀释涂布平板法 接种环 涂布器 灼烧
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视角 2 综合考查微生物的培养与应用 2．(2017·泰安市二模)回答有关微生物的培养与应用问题： (1)微生物的培养需要使用培养基，不同培养基的配方不同，但一般都具有 水、无机盐、碳源、____________；在配制从土壤中筛选纤维素分解菌的培养 基时，需加入____________作为唯一的碳源，该培养基属于____________培养 基。
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5.微生物实验室培养的基本操作程序
1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存
1. 芽孢是细菌发育后期形成的休眠体，耐高温，故消毒仅杀 死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物而不包括其芽 孢和孢子。 2. 灭菌和消毒的实质大都是使微生物的蛋白质或核酸发生变 性。 3. 微生物分离中的无菌技术：获得纯净培养物的关键是防止 杂菌污染，无菌技术可从如下四个方面展开： (1)对实验操作的空间，操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 (2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 (3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火 焰附近进行。 (4)实验操作时，应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物 品相接触。
如蒸熟的马铃薯和普通牛肉 汤，前者用于培养霉菌，后 者用于培养细菌。
化学组 成
目的用 途
菌种的鉴别P28 菌种的分离P22
固体培养基：菌落
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动)
2、培养基配制原则
• （1）目的要明确：根据微生物的种类、培养 目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微 生物对培养物质的需求不同。 • （2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度 和比例。创新方案P169 • （3）pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范 围不同。 • 细菌pH为：6.5-7.5； • 放线菌pH为：7.5-8.5； • 真菌pH为：5.0-6.0。
(1)纯化的原理：在培养基上将细菌稀释或分散成________， 形成单个菌落，此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。
(2)微生物的常用接种方法：__________和稀释涂布平板法，

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新课标生物·选修1 生物技术实践
②涂布平板操作： a．将涂布器浸在盛有 酒精 的烧杯中。 b．取少量菌液，滴加到培养基 表面 。 c．将沾有少量 酒精 的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽 后，冷却8～10 s。 d．用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。
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新课标生物·选修1 生物技术实践
1．按物理性质分类，该培养基属于哪类？ 【提示】 固体培养基。 2．该培养基含有的营养成分有哪些？ 【提示】 碳源、氮源、生长因子、水和无机盐。
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新课标生物·选修1 生物技术实践
第2步 提炼——要点归纳，整合提升 1．配制原则 (1)目的明确：不同微生物需求不同，根据培养目的进行配 制。 (2)营养要协调：营养物质的浓度和比例要适宜。 (3)pH要适宜：为维持pH的相对恒定，可在培养基中加入 缓冲剂，常用磷酸氢二钾或磷酸二氢钾。
新课标生物·选修1 生物技术实践
2．接种操作的每次划线接种前与接种后都要灼烧接种环或 接种针，其目的分别是什么？
【提示】 (1)划线前灼烧是为了杀死上次划线结束后残留 的菌种。
(2)划线结束后灼烧，能及时杀死接种环或接种针上残留的 菌种，避免污染环境和感染操作者。
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(3)平板划线法：通过 接种环 在琼脂固体培养基表面连续 划线 的操作，将聚集的菌种逐步 稀释 分散到培养基的表面。 其具体操作是：
①将 接种环 放在火焰上灼烧，直到接种环烧红。 ②在火焰旁冷却 接种环 ，并打开棉塞。 ③将试管口通过 酒精灯火焰 。 ④将已冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液。 ⑤将试管口通过火焰，并塞上棉塞。

选修1 生物技术实践
第2讲 微生物的培养和应用
考纲要求
核心素养
1.分析培养基的成分及其作用；平板划线法和稀释 1.微生物的分离和培
涂布平板法的 养
异同；选择培养基和鉴别培养基的区别(科学思维) 2.某种微生物数量的
2.设计实验探究微生物培养的条件及如何分离某 测定
种微生物等(科学探究) 3.培养基对微生物的
3．平板划线法与稀释涂布平板法的比较
比较项目
平板划线法
稀释涂布平板法
原理
将菌液进行一系列的梯度稀释， 通过接种环在琼脂固体培养基表
然后将不同稀释度的菌液分别 面连续划线的操作，将聚集的菌
涂布到琼脂固体培养基的表面， 种逐步稀释分散到培养基上。在
进行培养。在稀释度足够高的菌 数次划线后培养，可以分离到由
(5)某同学在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而 锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是___________________。
[解析] (1)在实验室中，能耐高温的、需要保持干燥的物品，如玻璃 器皿和金属材质的实验器具等可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2) 巴氏消毒法或高温瞬时消毒法与煮沸消毒法相比，其优点表现为在达到消 毒目的的同时，营养物质损失较少。(3)紫外线照射能消毒的原因是其能够 破坏微生物细胞中的 DNA 分子。在利用紫外线照射前，适量喷洒石炭酸 或煤酚皂溶液等消毒液，可强化消毒效果。(4)自来水通常采用氯气消毒。 (5)采用高压蒸汽灭菌时，若压力达到设定要求，而温度未达到相应要求， 最可能的原因是没有排尽高压蒸汽灭菌锅内的冷空气。
[答案] (1)可以 (2)在达到消毒目的的同时，营养物质损失较 少 (3)破坏 DNA 结构 消毒液 (4)氯气 (5)未将锅内冷空气排尽