念珠菌感染菌种的分布及耐药性分析

念珠菌的感染及耐药性分析发表时间：2014-05-13T15:23:12.530Z 来源：《医药前沿》2014年第3期供稿作者：韦晓霜[导读] 临床一旦发现真菌感染，应尽早监测真菌的耐药性，按抗真菌药敏结果，进行抗真菌治疗，以减少耐药菌株产生。

韦晓霜（广西桂林市灵川县中医医院检验科 541299）【摘要】目的念珠菌感染及耐药性分析，为临床合理用药提供依据。

方法回顾性分析总结本科室2013年1月至2013年10月痰标本细菌培养阳性率及耐药性。

结果阳性检出132例，真菌56例，占42.4%。

其中以呼吸内科的痰标本为主38例（67.9%）。

结论临床标本中真菌感染以白色念珠菌为主，呼吸道仍是真菌感染最常见的部位，抗感染药以氟胞嘧啶、卡泊芬净、两性霉素B、酮康唑、制霉菌素等最为敏感。

【关键词】念珠菌感染耐药性分析【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）03-0236-02 下呼吸道感染是临床常见的感染性疾病之一，而念珠菌是临床上常见的条件致病菌，严重威胁人类健康。

近年来随着抗感染药的广泛应用，细菌的耐药性不断增强，耐药菌株日益增多。

本人对我院2013年1月至2013年10月痰培养标本病原统计和耐药性进行分析，意在为临床合理用药提供参考。

1 材料和方法1.1标本来源分别来源于临床各科室及门诊送检的痰液、咽拭子标本。

1.2试剂和仪器血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、沙保罗琼脂平板均来至郑州安图生物股份有限公司。

鉴定及药敏均采用湖南长沙天地人生物有限公司生产的酵母样真菌生化.药敏试验卡。

净化工作台，恒温培养箱等。

1.3实验方法将标本按照《全国临床检验操作规程》，同时接种于血琼脂平板、麦康凯琼脂平板、沙保罗琼脂平板。

血琼脂平板是普通培养基、麦康凯琼脂平板分离肠道杆菌、沙保罗琼脂平板分离真菌和念珠菌。

将分纯后的念珠菌按操作说明加入酵母样真菌生化.药敏试验卡，作生化鉴定及药敏试验。

322株酵母样真菌医院感染分布和耐药现状分析摘要目的：了解临床常见真菌的检出率、分布特点及耐药情况。

方法：使用改良沙氏琼脂（sda）培养基，有真菌生长用api条进行鉴定及药敏试验，药物包括制霉菌素、氟康唑、伊曲康唑、两性霉素b及特比奈芬进行等。

结果：分离出322株酵母样真菌，检出率依次为白色念珠菌209株（64.9%），光滑假丝酵母菌49株（15.2%），克柔假丝酵母菌24株（7.5%），热带假丝酵母菌23株（7.1%），其他17株（5.3%）；标本分布情况依次为痰61.3%、分泌物及引流物17.1%、尿液9.3%、粪便6.2%、血液1.6%、其他4.0%；白色假丝酵母菌对特比奈芬、氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素、两性霉素b的耐药率依次为88.5%、21.5%、17.7%、8.6%、2.9%。

结论：在酵母样真菌感染中，以白色假丝酵母样菌检出率最高，痰液送检标本检出率最高，4种酵母样真菌对特比奈芬耐药率最高，其次为氟康唑。

关键词酵母样真菌药敏试验耐药性本文目的是了解医院真菌感染的分布特点及对抗真菌药物的敏感情况，以便为指导临床合理有效使用抗真菌药物提供依据。

资料与方法标本来源：2009年1月～2010年11月住院和门诊患者各种标本中分离得到。

培养及鉴定：改良沙氏琼脂培养基来自于oxoid公司、真菌api 鉴定条来自于梅里埃公司。

按照《全国临床检验操作规程》第3版进行手工鉴定，标本接种于改良沙氏琼脂培养基，生长真菌转种科玛嘉显色培养基中，经35℃、24～48小时培养，根据菌落不同的颜色判断菌种；并通过api条进行手工鉴定。

药敏试验：药敏参照2003nccls关于真菌纸片扩散法，m-h平皿、药敏纸片购自rosco公司。

结果真菌检出分布：2009年1月～2010年11月从医院门诊及住院患者不同标本分离出322株酵母样真菌，所有标本中痰标本最多，分泌物次之，分布情况，见表1。

科室分布以老年病科为最多，门诊最少，见表2。

“走进非白念”之“近平滑和光滑念珠菌”徐英春北京协和医院检验科徐英春近平滑念珠菌感染的防治策略近平滑念珠菌的耐药情况及指南推荐近平滑念珠菌的独特之处4132近平滑念珠菌徐英春近平滑念珠菌最新分型狭义的近平滑念珠菌仅指第一种，广义指的是三种亚型的通称由于后两种的发生率低，且基本不发生耐药情况，出于检测上的便捷，不分开描述刘维达.《中华皮肤科杂志》2011;44(8):537-539.2005年以前，近平滑念珠菌被认为是由3种不同基因型(I，Ⅱ和Ⅲ) 组成的一种复合体国外学者根据多位点序列分型研究(MLST)的结果将该复合体明确区分为3个种徐英春近平滑念珠菌位居全球侵袭性念珠菌感染第2位Pfaller MA et al. J Clin Microbiol.2008Jan;46(1):150-6.前瞻性调查分析：2001-2006年全球5346株侵袭性念珠菌感染菌株分布情况菌株分布(%)2001-2006徐英春近平滑念珠菌位于全球最大规模流调的念珠菌血流感染第2位•念珠菌血症流调和药敏试验SENTRY(2008–2009)•研究纳入2008-2009年的79个医学中心的1239名念珠菌血流感染患者菌株分布(%)P faller MA et al.Diag n Mic robiol Infec t Dis. 2010 Nov;68(3):278‐83.徐英春Forrest GN et al. Journal of Infection 2008; 56:126-129.每1000例患者日念珠菌血症发生率2002-2006徐英春近平滑念珠菌位于亚太区念珠菌感染第2位前瞻性调查分析：2001-2006年亚太区958株念珠菌菌株分布情况近平滑念珠菌已成为非白念感染的最常见病原菌占全部念珠菌感染的15.97%M. A. Pfaller,et al., J Clin Microbiol. 2008 Jan; 46(1):150-6.徐英春近平滑念珠菌位于中国念珠菌感染检出率第2位Data on file.研究结果：念珠菌菌株分布情况N=741徐英春近平滑念珠菌在血液及导管/引流液中分离率高居首位研究中期结果：导管/引流液分离的菌株分布Data on file.研究结果：血液中分离的菌株分布(N=347)徐英春近平滑念珠菌最常检出部位为血流及黏膜表面葡萄牙一家医院(Hospital S. Joao)对4年间检出的160例近平滑念珠菌进行分析，其最常见的检出部位为血流及黏膜表面S ilva AP et al. J C lin Mic robiol.2009 Aug ;47(8):2392‐7.徐英春近平滑念珠菌感染的防治策略近平滑念珠菌的耐药情况及指南推荐432近平滑念珠菌近平滑念珠菌的流行病学特点1徐英春全胃肠外营养徐英春近平滑念珠菌更易导致导管相关性B S I可能因为Dunc an M, et al., E merg ing Infec tious Dis eas es. 2004;10(6):1074‐81.近平滑念珠菌比其它念珠菌更容易在导管和其它植入装置的表面和腔内形成生物膜生物膜形成的菌种对抗真菌药物具有较强的耐药性近平滑念珠菌生物膜的形成在院内感染暴发的菌落中比散发的明显增多(P <0.0005)所以临床上对于中心静脉置管等留置导管患者的真菌感染，需要特别注意更可能由近平滑念珠菌引起的导管相关性感染徐英春徐英春近平滑念珠菌感染的防治策略43近平滑念珠菌近平滑念珠菌的流行病学特点12徐英春卡泊芬净的应用与近平滑念珠菌血症发生呈正相关F orrestG N et al. J ournal of Infection 2008; 56:126‐129.回顾性调查分析：2002‐2006年美国一家大型医疗中心念珠菌血症与抗真菌药物使用情况分析徐英春大扶康®对近平滑念珠菌始终保持低耐药率2001‐2009年AR T E MIS 中国5家医院氟康唑对近平滑念珠菌的耐药率徐英春近平滑念珠菌感染的防治策略43近平滑念珠菌近平滑念珠菌的流行病学特点12徐英春导管相关性全胃肠外营养手传播病情危重的低体重婴儿减少留置导管的几率、时间，加强置管期间的护理注重恢复患者胃肠道正常功能，严格营养液的配制，现配现用手卫生，严格遵循无菌操作规程抢先治疗基本防控措施徐英春光滑念珠菌录徐英春2004年-2007年美国41所医疗中心无菌部位分离得到的5900株念珠菌分布白念: 非白念=43% : 57%2004-2007美国无菌部位：非白念比例超白念Lyon GM et al. J Clin Microbiol.2010Apr;48(4):1270-5.仅收集血液、无菌体液等与感染相关的菌株徐英春Horn DL et al.C lin Infec t Dis.2009J un 15;48(12):1695‐703.2004-2008年美国23个医学中心，2019例确诊念珠菌血症的病原体分布白念：非白念=45.6% ：54.4%2004-2008美国PATH ：非白念比例超白念注：PATH= P rospective A ntifungal Th erapy Alliance database26%徐英春2005‐2006法国IC U ：非白念比例与白念相当前瞻性、观察性、多中心研究纳入2005年10月到2006年10月法国300名已经确诊为侵袭性念珠菌感染的患者白念：非白念=57% ：43%•所有纳入的患者中，39.5%为单纯的念珠菌血症，•32.1%为单纯的侵袭性念珠菌感染，28.4%两者都有Leroy O et al. Crit Care Med.2009 May;37(5):1612-8.17%徐英春徐英春徐英春hoff H et al.C linInfec t Dis.2004 Aug 1;39(3):309‐17.对1890例念珠菌血流感染的回顾性研究白念珠菌光滑念珠菌近平滑念珠菌克柔念珠菌热带念珠菌念珠菌属粗计死亡率(%)徐英春光滑念珠菌目录徐英春美国2001‐2007光滑念珠菌耐药情况2536名念珠菌血症患者中，光滑念珠菌为642名P faller MA et al. J C lin Mic robiol.2009 Oc t;47(10):3185‐90.徐英春光滑占念珠菌属百分比(%)<11-910-1920-2930-3940-4950-5960-6970-79>80N=642Pfaller MA et al. J Clin Microbiol.2009 Oct;47(10):3185-90.•2536名念珠菌血症患者中，光滑念珠菌阳性为642名•随着患者年龄的增加，光滑念珠菌血流定植发生率增加•>80岁年龄人群光滑念珠菌血症发生率最高，达到32%徐英春老年患者光滑念珠菌对大扶康®耐药率减<11-910-1920-2930-3940-4950-5960-6970-79>80耐药性比例(%)MA et al. J C lin Mic robiol.2009 Oc t;47(10):3185‐90.•2536名念珠菌血症患者中，光滑念珠菌阳性为642名•随着年龄的增加，光滑念珠菌对氟康唑的耐药性显著下降•>80岁人群对氟康唑的耐药性最低，只有5%，即敏感性达95%患者数14625328014614112879徐英春SENTRY2008-2009•全球最大规模的念珠菌血症流调和药敏试验SENTRY(2008–2009)•研究纳入2008-2009年的79个医学中心的1239名念珠菌血流感染患者P faller MA et al.Diag n Mic robiol Infec t Dis. 2010Nov;68(3):278‐83.徐英春光滑念珠菌耐药性数据‐中青年患者P faller MA et al.Diag n Mic robiol Infec t Dis. 2010 Nov;68(3):278‐83.20-39年龄段患者n=1840-59年龄段患者n=71如果分年龄段来看光滑念珠菌对各类抗真菌药物的耐药性数据那么，20-39和40-59这两个年龄段的患者的耐药性比例最高对棘白菌素类、三唑类都存在一定比例的耐药情况耐药率(%)徐英春光滑念珠菌耐药性数据‐老年患者及总体情况P faller MA et al.Diag n Mic robiol Infec t Dis. 2010 Nov;68(3):278‐83.60-79年龄段患者n=91总体情况n=215光滑念珠菌对不同的抗真菌药物均存在不同程度的耐药情况整体来看，光滑念珠菌对药物的耐药性与年龄呈负性相关关系耐药率(%)徐英春光滑念珠菌耐药性数据‐IC U 与非IC U全球最大规模的念珠菌血症流调和药敏试验SENTRY 研究(2008-2009)结果光滑念珠菌对抗真菌药物产生了广泛的耐药研究纳入2008-2009年全球79个医学中心的2085名念珠菌血流感染患者P faller MA et al. Int J Antimic rob Ag ents.2011 J ul;38(1):65‐9.N=136N=176耐药率(%)徐英春最新SENTRY2006-2010P faller MA et al. J C lin Mic robiol.2012 J an 25.徐英春光滑念珠菌对棘白菌素类耐药性值得关注调查总共纳入了1669名由光滑念珠菌引起血流感染的患者检测了菌株对氟康唑、伏立康唑、阿尼芬净、卡泊芬净以及米卡芬净的体外敏感性氟康唑*阿尼芬净卡泊芬净米卡芬净光滑念珠菌对三唑类药物和棘白菌素类药物均产生了耐药性，且比例相当耐药率(%)*对氟康唑耐药的162株光滑念珠菌之中•有18株(11.1%)同时对一种或几种棘白菌素类药物产生了耐药•这18株光滑念珠菌均发生了fks 1和fks 2基因位点的获得性变异•对比2001-2004的结果：110株耐氟康唑的光滑念珠菌全部对棘白菌素类药物敏感P faller MA et al. J C lin Mic robiol.2012 J an 25.徐英春2010中国光滑念珠菌敏感性分析总数药物S%S-DD%R%92氟康唑59.826.114.1伏立康唑79.47.613.0on file.徐英春小结一系列研究得出关于光滑念珠菌的重要结论有：•光滑念珠菌对不同的抗真菌药物均存在不同程度的耐药情况•对氟康唑耐药的菌株也有可能对棘白菌素类耐药，对棘白菌素类耐药的菌株也不一定对氟康唑不敏感•随着患者年龄的增加，光滑念珠菌的检出率显著地升高•与检出率不同的是，随着患者年龄的增加，光滑念珠菌对抗真菌药物的耐药性减弱徐英春光滑念珠菌目录徐英春突变体CDR 1可能与CDR 2呼吸缺陷型光滑念珠菌耐药耐药型线粒体敏感型线粒体中国感染与化疗杂志2010;10(1):59-62.Brun S et al. Antimicrob Agents Chemother.2004;48(5):1788—1796.Kaur R et al. Antimicrob Agents Chemother.2004;48(5):1600—1613.徐英春光滑念珠菌耐药性与患者年龄负性相关的原因分析这种光滑念珠菌随着患者年龄的增加而出现的耐药性减弱的原因还不明确，分析认为•与中青年患者相比，尽管老年患者就医比例更高，但是他们接受干细胞移植、器官移植或预防性氟康唑治疗的比例更低•另外，光滑念珠菌的定植在老年患者更为常见："这种定植反映出了与暴露于药物相比较，念珠菌菌种分布的改变与年龄的关系更加密切"这种定植菌株通常为对氟康唑天然耐药菌株而非获得性耐药菌株P faller MA et al. J C lin Mic robiol.2009 Oc t;47(10):3185‐90.徐英春光滑念珠菌目录徐英春•对于尚未确定菌种或由于条件有限无法鉴定菌种的患者，早期治疗是抗真菌治疗的难点和重点•尽早明确病原学诊断以及规范化应用抗真菌药物尤为重要需要抗真菌早期治疗但尚未明确菌种选用氟康唑选用其他药物有效有效但不理想无效足量足疗程增加药物剂量鉴定结果菌株对氟康唑敏感可降阶梯换用氟康唑足量足疗程换药徐英春“特殊使用”抗菌药物须由具有高级专业技术职务任职资格的医师开具处方后方可使用则2011年最新版抗菌药物分级管理目录/抗菌药物临床应用管理办法氟康唑伊曲康唑(口服剂型)酮康唑米卡芬净，卡泊芬净伏立康唑，两性霉素B ，伊曲康唑(静脉剂型)泊沙康唑，阿尼芬净徐英春徐英春。

医院感染的主要致病菌及耐药性医院感染，又称为医源性感染或卫生丧失感染，是指在医疗环境中患者因接受医疗或接触医疗设施而感染的疾病。

医院感染是全球范围内的重要公共卫生问题，其主要致病菌和耐药性引起了严重关注。

本文将从常见的主要致病菌以及耐药性角度探讨医院感染。

一、革兰阳性菌革兰阳性菌是医院感染中最常见的致病菌之一。

其中，金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是最具代表性的菌株之一。

金黄色葡萄球菌常常引起各类感染，如皮肤和软组织感染、血流感染和呼吸道感染等。

此外，肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae）、肠球菌（Enterococcus faecium）等革兰阳性菌在医院感染中也具有一定的重要性。

革兰阳性菌的耐药性也是医院感染防控的一大挑战。

金黄色葡萄球菌的耐药性不断上升，有些菌株已经表现出对多种抗生素的耐药性。

除了金黄色葡萄球菌，耐甲氧西林的肺炎链球菌和耐万古霉素的肠球菌也给医院感染的治疗带来了困扰。

二、革兰阴性菌革兰阴性菌是医院感染的另一主要致病菌类别。

肠杆菌科（Enterobacteriaceae）是其中最为重要的家族，包括大肠杆菌（Escherichia coli）、肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）和铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）等。

这些菌株通常通过尿道感染、呼吸道感染和血流感染等途径引发感染。

革兰阴性菌的耐药性较为严重。

多重耐药的革兰阴性菌株已经出现，使得传统的抗生素治疗变得越来越困难。

耐头孢菌素的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌以及耐碳青霉烯的铜绿假单胞菌是目前医院感染中需要高度关注的菌株。

三、真菌除了细菌，真菌也是医院感染的重要致病因素之一。

念珠菌属（Candida spp.）是最常见的医院感染真菌。

这些真菌通常引发血流感染、尿路感染和呼吸道感染等。

由于长期广谱抗生素的使用和免疫抑制患者的增加，真菌感染的发病率呈现上升趋势。