粪肠球菌毒力基因及耐药性分析

医院多重耐药菌的耐药机制及防控措施作者：杜凤霞贾靖王艳鸿刘莉来源：《中国卫生产业》2017年第14期[摘要] 大量广谱抗生素的应用及抗生素的滥用打破了抗菌药物-细菌耐药的动态平衡，造成细菌耐药性增强。

多重耐药菌在医院的传播形势日益严重，也给医院感染控制带来严峻的挑战。

为保障医疗安全，让医务人员了解多重耐药菌的耐药机制，及早采取有效的防控措施，预防和控制多重耐药菌的传播和医院感染的发生。

该文针对多重耐药菌的耐药机制和防控措施进行了综述。

[关键词] 医院；多重耐药菌；耐药机制；防控措施[中图分类号] R515 [文献标识码] A [文章编号] 1672-5654（2017）05（b）-0195-02多重耐药菌的产生与流行已构成社会性危害，防控MDRO感染重于治疗。

研究多重耐药菌的耐药机制，有利于临床制定合理的治疗方案及多重耐药菌感染与传播预防策略[1]。

多重耐药菌的概念（MDRO）[2]：指对通常敏感的常用的3类或3类以上抗菌药物同时呈现耐药的细菌，临床常见多重耐药菌有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、耐万古霉素肠球菌（VRE）、产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的细菌、耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）如耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌（CR-AB）、产KPC的细菌、产NDM-1的细菌、多重耐药/泛耐药铜绿假单胞菌（MDR-PA）和艰难梭菌（CD）等。

1 常见多重耐药菌耐药机制1.1 艰难梭菌耐药机制艰难梭菌（CD）主要引起抗生素相关腹泻和假膜性肠炎，其感染发病率和病死率极高，尤其是多重耐药艰难梭菌，给临床的治疗带来极大的挑战。

目前，随着广谱抗菌药物的大量使用导致患者肠道菌群失调，极易引起艰难梭菌感染。

避免盲目使用广谱抗菌素，从而降低CD 感染的发生和传播。

2001年我国报道了1例多重耐药艰难梭菌感染的病例，绝大多数艰难梭菌菌株对甲硝唑、万古霉素、非达霉素仍呈敏感，但近来报道敏感性逐渐下降甚至呈现耐药，耐药机制可能为铁代谢、细菌DNA修复能力增强等多种因素有关。

耐万古霉素肠球菌临床菌株毒力基因携带情况及差异陈敏强;汪强;周永列;吕火烊;胡庆丰;葛玉梅【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2017(33)5【摘要】目的检测不同种类耐万古霉素肠球菌(VRE)毒力基因携带情况及其差异,为研究VRE致病机制提供基础.方法采用微量稀释法检测浙江地区490株屎肠球菌和862株粪肠球菌临床分离菌株对万古霉素的耐药性.采用PCR检测VRE菌株ace、asa1、cylA、efaA、esp、gelE、hyl七种毒力基因.结果 10％(49/490)屎肠球菌株和0.8％(7/862)粪肠球菌株为VRE.万古霉素耐药屎肠球菌株中,5株未检出任何毒力基因,其余44株仅可检出asa1、esp、gelE和hyl基因,其中esp基因(73.5％,36/49)和hyl基因(53.1％,26/49)为优势基因,以单或双基因为主要携带模式.万古霉素耐药粪肠球菌株中可检出除hyl基因以外其他6种毒力基因,且每株菌均同时携带3～6种致病基因.结论本地区VRE以屎肠球菌为主,耐万古霉素屎肠球菌和粪肠球菌毒力基因携带率、携带种类和模式均有明显差异.%The aim of this study is to determine the diversity of virulence genes carried by different vancomycin-resistant enterococci (VRE),which will provides a basis for studying pathogenic mechanism of VRE.Microdilution-based drug sensitivity test was applied to detect the vancomycin resistance of 490 Enterococcus faecium isolates and 862 Enterococcus faecalis isolates in Zhejiang area.The seven virulence genes (ace,asa1,cylA,efaA,esp,gelE and hyl) in the isolates of VRE were detected by PCR.According to the results of drug sensitivity test,10％ of the E.faecium isolates (49/490) and 0.8％ of theE.faecalis (7/862) were identified as VRE.In the vancomycin-resistantE.faecium isolates,five isolates were negative for any of the target genes and the other 44 isolates were positive for asa1,esp,gelE and hyl genes alone,in which the esp (73.5％,36/49) and hyl (53.1％,26/49) were the predominant genes and single or double virulence genes acted as the major carrying models.Except for the hyl gene,the vancomycin-resistant E.faecalis isolates were positive for the other six pathogenic genes,and the isolates could carry 3-6 pathogenic genes.All the data indicate thatE.faeciurn is the major species of VRE in the local area,and the carrying rate,types and models of virulence genes in the vancomycin-resistant E.faecium and E.faecalis isolates are obviously different.【总页数】4页(P423-426)【作者】陈敏强;汪强;周永列;吕火烊;胡庆丰;葛玉梅【作者单位】浙江省人民医院检验中心,杭州 310014;浙江省新华医院,杭州310005;浙江省人民医院检验中心,杭州 310014;浙江省人民医院检验中心,杭州310014;浙江省人民医院检验中心,杭州 310014;浙江省人民医院检验中心,杭州310014【正文语种】中文【中图分类】R378.1【相关文献】1.贵阳地区儿童幽门螺杆菌临床分离菌株毒力基因cagA和vacA的表达情况以及与抗生素耐药之间的关系 [J], 秦丹;朱莉;龙梅;熊妍;刘文莉;全小丽2.105株携带耶尔森菌强毒力岛大肠杆菌的毒力基因型和部分菌株毒力因子序列研究 [J], 吕殿红;魏文康;黄忠;温肖会3.双重PCR检测携带有tl和tdh基因的副溶血弧菌毒力菌株 [J], 吴彩云;蔡俊鹏;杨汝德;陈清;罗立新;吴后波;俞守义4.不同肺炎链球菌株毒力基因携带与转录水平差异及其与血清型的关系 [J], 张艳琳; 熊昊5.某县医院肠球菌临床分离株耐药性及毒力基因携带情况分析 [J], 郭伟;黄江华;吴蓓;陈芳;何晓华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

DOI：10.12138力.issn.1671—9638.20216175•论著•全国细菌耐药监测网2014—2019年粪便标本细菌耐药监测报告全国细菌耐药监测网［摘要］目的了解全国粪便标本分离病原菌的菌群分布及耐药情况。

方法从2014—2019年全国细菌耐药监测网报告中提取粪便标本的相关数据(去除肠道正常定植菌群)，分析肠道致病菌及其耐药率的变迁。

结果共分离菌株61809株，居前3位的是沙门菌属(82.12%)、志贺菌属(8.08%),弧菌属(4.03%)，沙门菌属在每年粪便标本致病菌中占绝对优势，均在70%以上，以2018年占比最高(87.16%)。

6年间居前6位的致病菌菌种无变化,仅菌种构成比每年略有变化，沙门菌属呈上升趋势，志贺菌属呈下降趋势。

各菌属分别以未分型沙门菌(49.39%)、福氏志贺菌(46.64%),副溶血弧菌(91.20%)、嗜水气单胞菌(55.80%),肠致病性大肠埃希菌(85.02%)为主。

肠道致病菌对氨苄西林耐药率均较高，其中志贺菌属和致腹泻性大肠埃希菌(>90%)高于沙门菌属和弧菌属。

沙门菌对左氧氟沙星耐药率较低，但呈上升趋势，由低于3%上升至10%左右；志贺菌属对环丙沙星耐药率2016年较低(29.9%)；除氨苄西林外，弧菌属对其他抗菌药物耐药率均较低(<6%);气单胞菌属出现了耐碳青霉烯类菌株，气单胞菌属和致腹泻性大肠埃希菌对阿米卡星耐药率较低。

结论细菌性腹泻的病原菌种类较多，以沙门菌属和志贺菌属为主，耐药情况较为严重，且不同菌属、菌种之间差异较大，应继续加强抗菌药物合理应用的管理及医院感染防控，做好耐药菌监测工作。

［关键词］粪便；全国细菌耐药监测网；抗菌药物；细菌；耐药性［中图分类号］R181.3+2Antimicrobial resistance of bacteria from fecal specimens:surveillance report from China Antimicrobial Resistance Surveillance System in2014—2019China Antimicrobial Resistance Surveil l ance System［Abstract］Objective To investigate the distribution and antimicrobial resistance of pathogens isolated from fecal specimens in China.Methods Relevant data of fecal specimens(excluding intestinal normal colonized bacteria)were extracted from surveillance report of China Antimicrobial Resistance Surveillance System(CARSS)in2014-2019, changes of intestinal pathogenic bacteria and antimicrobial resistance rates in the past6years were analyzed.ResultsA total of61809strains were isolated,the top3were Salmone l laspp,(82.12%),Shigella spp.(8.08%)andVibrio spp.(4.03%),Salmone l la spp.accounted for more than70%of pathogenic bacteria in fecal specimens each year,with the highest proportion of87.16%in2018.In the past6years,there was no change in the top6 pathogenicbacteriastrains，onlyconstituentratiosofbacterialspecieschangedslightlyeachyear，Sa mone aspp.showed an upward trend,while Shige l la spp.showed a downward trend.The major bacteria were unclassified spe­cies of Salmonella(49.39%),Shigella f l exneri(46.64%),Vibrio parahaemolyticus(91.20%),Aeromonas hy­droph i la(55.80%)and enteropathogenic Escherichia coli(85.02%).Resistance rate of enteropathogenic bacteria to ampicillin was high,Shige l la spp.and diarheagenic Escherichia coli(>90%)were higher than Salmone l la spp.and Vibrio spp..Resistance rate of Salmone l la to levofloxacin was low,but show a rising trend,which increased from less than3%to about10%；resistance rate of Shige l la spp.to ciprofloxacin was low(29.9%)in 2016；resistance rates of Vibrio spp.to antimicrobial agents(except ampicillin)were low(<6%)；carbapenem-re-sistant Aeromonasspp strainsemerged，resistanceratesof Aeromonasspp anddiarrheagenic Escherichiaco i to amikacin were both low.Conclusion There are multiple species of pathogenic bacteria causing bacterial diarrhea,［攵稿日期］2020-11-24全国细菌耐药监测网联系邮箱:naiyaojiance@mainly Sa mone aspp . and Shige aspp . ， antimicrobialresistanceisserious ， di f erentbacterialspecies and strainsvarysignificantly ，itisnecessarytocontinuetostrengthenthemanagementofrationalapplicationofantimi-crobialagentsaswe l aspreventionandcontrolofhealthcare-associatedinfection ，anddoagoodjobinthesurveil- lanceofantimicrobial-resistantbacteria[Keywords ] faeces ； China Antimicrobial Resistance Surveillance System ； antimicrobial agent ； bacteria ； antimi ­crobialresistance全国细菌耐药监测网(China Antimicrobial Re ­sistance Surveillance System , CARSS , http :// www . carss. cn)成员单位已覆盖全国31个省、直辖市和自治区的1 429所医疗机构。

临床常见肠杆菌科细菌的耐药性分析目的：监测临床常见肠杆菌科细菌的分布及耐药现状，为临床合理使用抗茵药物提供依据。

方法：临床标本按常规分离培养，用DADE BEHRING MicroScan 分析系统鉴定菌种，药敏试验数据采用K－B纸片法，按NCCLS规定的标准进行。

结果：2006年2月～2008年8月共获得604株肠杆菌科细菌，其中列前3位的分别是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产气肠杆菌。

它们主要来源于痰、中段尿及分泌物。

六种常见菌株对亚胺培南全部敏感，对头孢哌酮／舒巴坦，哌拉西临／他唑巴坦及阿米卡星的耐药率在 2.7％～30.5％；对头孢类抗生素的平均耐药率依次为头孢吡肟(25.1％)83.5％。

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs检出率分别为29.1％、20.4％。

结论：肠杆菌科细菌对亚胺培南均无耐药，可考虑为重症感染临床首选药物；阿米卡星、头孢哌酮／舒巴坦。

哌拉西林／他唑巴坦耐药率相对较低，可选择用药；对头孢类抗生素由四代头孢菌素到一代头孢菌素其耐药性递增，应慎用；氨苄西林的耐药率很高。

应避免使用。

标签：肠杆菌科细菌耐药性资料与方法菌株来源：2006年2月～2008年8月从我院临床感染标本中分离获得。

标准质控菌株：金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿色假单胞菌杆菌ATCC27853、大肠杆菌ATCC25922均购自国家卫生部临床检验中心。

ESBLs阳性标准株肺炎克雷伯菌ACTIT00603由北京协和馈赠。

药敏试验：采用纸片扩散法。

药敏纸片及Mueller－Hintor(MH)培养基由天和生物制品有限公司提供：头孢噻肟(30μg)，头孢他啶(30μg)，头孢吡肟(30μg)，头孢哌酮／舒巴坦(75／30μg)，哌拉西林／他唑巴坦(100／10μg)，阿米卡星(30μg)，环丙沙星(5μg)，亚胺培南(10μg)，氨曲南(30μg)，氨苄西林(10μg)，头孢唑啉(30μg)，头孢呋辛(30μg)，头孢西丁(30μg)。

肠球菌-病菌简介肠球菌肠球菌为院内感染的重要病原菌，不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染，还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心骨膜炎和脑膜炎，由于其固有耐药性，所致感染治疗困难。

本文就肠球菌的生物学特性、所致感染的临床表现、肠球菌在院内感染中的地位、致病性、耐药性及所致感染的治疗作一综述。

肠球菌（Enterococcus）属链球菌科，是人类和动物肠道正常菌群的一部分，通常在引起腹腔和盆腔感染所分离的混合菌丝中发现，既往认为肠球菌是对人类无害的共栖菌，但近年研究已证实了肠球菌的致菌力。

在需氧革兰阳性球菌中，它是仅次于葡萄球菌的重要院内感染致病菌[1]，肠球菌亦可引起院外感染。

肠球菌不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染，还可引起危及生命的腹腔感染、败血症、心内膜炎和脑膜炎等[2]。

肠球菌-生物学特性及分类肠球菌为圆形或椭圆形、呈链状排列的革兰阳性球菌，无芽胞，无鞭毛，为需氧或兼性厌氧菌。

本菌对营养要求肠球菌较高，在含有血清的培养基上生长良好。

在血平板上经37℃培养18小时后，可形成灰白色、不透明、表面光滑、直径0.5～1mm大小的圆形菌落，不同的菌株表现为不同的溶血现象。

与同科链球菌的显著不同在于本菌在生化反应上能耐受高盐和胆汁培养基，并对许多抗菌药物表现为固有耐药。

根据其利用糖类的特征可将肠球菌分为3组[3，4]：第一组以鸟肠球菌（E.avium）为代表；第二组以粪肠球菌(E.faecalis)等；包括尿肠球菌(E.faecium)等；第三组以坚韧肠球菌(E.durans)为代表。

其中对人类致病者主要为粪肠球菌和尿肠球菌[3，5]。

在临床分离菌中粪肠球菌占85%～95%、尿肠球菌占5%～10%，其余少数为坚韧肠球菌和其他肠球菌。

肠球菌-临床表现尿路感染为粪肠球菌所致感染中最为常见的，绝大部分为院内感染。

据报道16%的院内尿路感染由肠球菌引起，肠球菌仅次于大肠杆菌居第2位[1]。

其发生多与留置导尿管、其他器械操作和尿路结构异常有关[3]。

耐万古霉素肠球菌耐药表型检测和基因型分析张侠家;沈继录;贾伟华【摘要】Objective To research the resistant characteristics, genotype and prevalence of vancomycin-resistant Enterococci( VRE) . Methods K-B disc diffusion method was used to determine the susceptibility, minimum inhibi-tory concentration ( MIC) for vancomycin of VRE was detected by E-test method;VRE was then subjected to PCR for resistance related genes;6 strains sequencing results of PCR product were contrastively analyzed the amino acid sequence by BLAST. Results 6 VREFm strains were found from 193 strains enterococci;6 VREFm strains were completely resistant to high unit gentamicin, ampicillin, ciprofloxacin, teicoplanin,but were sensitive to linezolid and macrodantin,MIC for vancomycin was more than 256mg/L;Genotypes were vanA;Amino acids in vanA gene have changed with Asn83→Asp( AAC→GAC) . Conclusion VRE in our hospital is mostly multi-drug resistant , which bringS difficulty in clinical treatment for its infection. So the hospital should strengthen the prevention and monitoring, to prevent the spread of VRE strains in the hospital and popular.%目的研究某院耐万古霉素肠球菌( VRE)的耐药特性、基因型及流行情况。

粪肠球菌的作用及功能主治粪肠球菌的介绍粪肠球菌（Fusobacterium nucleatum）是一种常见的肠道细菌，被广泛存在于人类的口腔和胃肠道中。

它属于厌氧菌，可以在缺氧环境中存活和繁殖。

粪肠球菌以其特殊的形态和功能，在人类身体中扮演着重要的角色。

粪肠球菌的主要功能粪肠球菌在人体内发挥以下主要功能：1.消化食物：粪肠球菌参与食物的消化，特别是对于纤维素的分解和吸收具有重要作用。

它可以分解纤维素和其他复杂多糖，产生有益的短链脂肪酸，如丙酸、丁酸和乳酸等，为人体提供能量和营养物质。

2.调节免疫系统：粪肠球菌参与调控人体的免疫系统，维持肠道免疫的平衡。

它能够与肠道黏膜上的免疫细胞相互作用，促进免疫细胞的成熟和功能的调节，增强肠道的抵抗力，预防炎症和感染。

3.保持肠道平衡：粪肠球菌与其他肠道菌群一起维持肠道的微生态平衡。

它可以抑制一些有害菌的生长，防止其过度繁殖，从而保护肠道健康。

此外，粪肠球菌还可以与其他益生菌相互作用，促进其生长和功能，进一步增强肠道的益菌群落。

4.抗肿瘤作用：最近的研究表明，粪肠球菌可能具有一定的抗肿瘤活性。

它可以诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤细胞的增殖，对一些肿瘤类型具有一定的杀伤效果。

这一发现为粪肠球菌在肿瘤治疗中的潜在应用提供了新的思路。

粪肠球菌的功能主治粪肠球菌的多种功能使其具备一定的功能主治能力，主要包括以下方面：1.促进肠道健康：粪肠球菌可以促进肠道的蠕动，减少便秘和消化不良等症状。

它还能够减少肠道内有害菌的数量，预防肠道感染和炎症。

2.增强免疫力：粪肠球菌可以调节人体免疫系统的平衡，增强免疫力，预防感冒、流感和其他感染性疾病。

3.改善口腔健康：粪肠球菌存在于口腔中，与口腔健康密切相关。

它可以抑制一些致病菌的生长，减少口腔感染和龋齿的发生。

4.调节肠道菌群：粪肠球菌可以与其他肠道菌群相互作用，维持肠道微生态的平衡。

它能够促进有益菌的生长，减少有害菌的数量，预防肠道菌群失调导致的相关疾病。

粪链球菌简介粪链球菌（Clostridium perfringens）是一种普遍存在于环境中的革兰氏阳性厌氧细菌，也是人体和动物肠道中的正常菌群之一。

它被广泛认为是食品中最常见的致病菌之一，与食物中毒有着密切的关联。

粪链球菌产生的毒素可能引起严重的食物中毒症状，因此对该菌进行深入研究并做好预防措施至关重要。

菌株特性粪链球菌具有以下特点：1.形态特征：–为革兰氏阳性菌，细胞呈梭形。

–存在芽孢，芽孢可在恶劣环境中存活并传播。

–菌落呈灰色或黄色。

2.生长要求：–厌氧生长：粪链球菌主要在缺氧环境中繁殖生长。

–适宜温度：37-40摄氏度是该菌生长的最适温度范围。

3.毒素产生：–粪链球菌产生多种毒素，包括肠毒素、α-毒素、β-毒素和ε-毒素等。

–这些毒素对人体和动物产生不同程度的危害，其中肠毒素是粪链球菌引起食物中毒的主要原因。

食物中毒与粪链球菌粪链球菌与食物中毒之间存在密切关系。

当食物被粪链球菌污染并达到适宜生长条件时，该菌会释放肠毒素，导致食物中毒。

以下是粪链球菌引起食物中毒的常见特点：1.症状：–患者常表现为突发性腹泻、腹痛和呕吐等消化系统症状。

–症状通常在食用污染食物后的6-24小时内出现。

2.食物传播途径：–粪链球菌主要与肉类、禽类、蔬菜和牛奶等食物相关联。

–食用未经充分烹调或冷藏保存的食物可能导致粪链球菌感染。

3.预防措施：–食物加工过程中要注意卫生条件，避免粪链球菌的污染。

–手部卫生是预防食物中毒的重要环节，勤洗手可以减少细菌传播的风险。

–适宜的食品储存和加热处理可以杀死粪链球菌，预防食物中毒。

检测与诊断方法粪链球菌的检测对于食品行业和公共卫生机构非常重要，以下是常见的检测和诊断方法：1.细菌培养：–采集食物样品，通过培养、分离和鉴定，检测样品中粪链球菌的数量。

2.分子生物学方法：–利用PCR技术或其他分子生物学方法，检测样品中粪链球菌的基因序列。

3.毒素检测：–检测样品中是否存在粪链球菌所产生的毒素，确认食品中毒与粪链球菌的关联。