预灌装注射器的容器密封完整性测试方法开发和验证 - 副本

预灌封注射器密封系统完整性研究作者：范素俊夏洁敏来源：《上海医药》2012年第07期摘要目的：通过微生物侵入挑战性试验，确认采用预灌封注射器包装的小容量注射剂产品的密封完整性。

方法：按无菌生产要求在预灌封注射器内灌装胰胨大豆肉汤培养基，培养14 d后，置于大肠埃希菌菌悬液中浸泡4 h。

浸泡后样品继续培养7 d，观察细菌侵入情况。

结果：培养7 d后，注射器内培养基均无细菌生长。

结论：预灌封注射器密封系统能满足密封完好性的要求，可保证产品不受细菌侵入。

关键词预灌封注射器细菌侵入密封系统中图分类号：TQ469; R944.1 文献标识码：B 文章编号：1006-1533(2012)07-0036-02Study on the integrity of the prefilled syringes with sealing systemFAN Su-jun,XIA Jie-min（Shanghai Haohai Biological Technology Co.， Ltd.， Shanghai， 201613）ABSTRACT Objective: Seal integrity of the prefilled syringes containing small volume of injection product was confirmed by the bacterial challenging test. Methods: According to production requirements, the pre-casting sterile syringe filling trypticase soy broth was incubated for 14 days, soaked in a suspension containing Escherichia coli for 4 hours. Bacterial contamination was observed after samples were incubated for 7 days. Results: The syringes were not contaminated by the tested E.coli. Conclusion: Prefilled syringes with sealing system can meet the requirements of integrity and protect the products from bacterial invasion.KEY WORDS prefilled syringes; bacterial invasion; integrity预灌封注射器是国内外20世纪90年代开发的一种新型药品包装形式，主要用于小容量注射剂的包装储存并直接用于注射或用于眼科、耳科、骨科等手术冲洗。

预灌封注射器密封系统完整性研究摘要目的：通过微生物侵入挑战性试验，确认采用预灌封注射器包装的小容量注射剂产品的密封完整性。

方法：按无菌生产要求在预灌封注射器内灌装胰胨大豆肉汤培养基，培养14 d后，置于大肠埃希菌菌悬液中浸泡4 h。

浸泡后样品继续培养7 d，观察细菌侵入情况。

结果：培养7 d后，注射器内培养基均无细菌生长。

结论：预灌封注射器密封系统能满足密封完好性的要求，可保证产品不受细菌侵入。

ABSTRACT Objective: Seal integrity of the prefilled syringes containing small volume of injection product was confirmed by the bacterial challenging test. Methods: According to production requirements, the pre-casting sterile syringe filling trypticase soy broth was incubated for 14 days, soaked in a suspension containing Escherichia coli for 4 hours. Bacterial contamination was observed after samples were incubated for 7 days. Results: The syringes were not contaminated by the tested E.coli. Conclusion: Prefilled syringes with sealing system can meet the requirements of integrity and protect the products from bacterial invasion.KEY WORDS prefilled syringes; bacterial invasion; integrity预灌封注射器是国内外20世纪90年代开发的一种新型药品包装形式，主要用于小容量注射剂的包装储存并直接用于注射或用于眼科、耳科、骨科等手术冲洗。

无菌药品容器密封完整性测试方法集锦前言无菌药品的容器密封系统应该能防止微生物侵入。

对于最终密封的产品需要进行密封完整性测试，并将有缺陷的产品剔除。

关于无菌药品的容器密封性，中国GMP附录1无菌药品中有相关的规定：第七十七条无菌药品包装容器的密封性应当经过验证，避免产品遭受污染。

熔封的产品（如玻璃安瓿或塑料安瓿）应当作100%的检漏试验，其它包装容器的密封性应当根据操作规程进行抽样检查。

第七十八条在抽真空状态下密封的产品包装容器，应当在预先确定的适当时间后，检查其真空度。

方法简介根据USP通则<1207>，将容器密封完整性测试的检测方法分成确定性和概率性两种类型。

确定性检测方法：真空衰减法、高压放电法和激光法。

概率性检测方法：微生物挑战法、色水法。

1真空衰减法真空衰减法是将包装容器置于专门的测试腔体内，对测试腔体抽真空，容器内外压差使得容器内部气体通过漏孔泄露进入测试腔体，主机压力传感器监测到压力的变化，将压力变化值和参考值做比较，以判定容器密封完整性是否合格。

此方法的测试步骤包括：抽真空、保压和测试。

此方法适用性很广，可用于常压、微负压和高真空的各类容器检漏，适用于粉体、液体填充容器的检漏，不可用于卡式瓶的检漏。

2高压放电法高压电检漏是指在待检品上外加高压电，根据无缺陷和有缺陷时电学参数、表征的差异实现对待检样品的密封完整性测试确认。

此方法要求容器内灌装的液体有一定的电导率。

高压放电法适用于水针西林瓶、液体安瓿瓶、液体填充预注射器和卡式瓶的完整性测试。

3激光法激光法是通过监测容器顶空压力、水汽和顶空氧变化来判定容器的完整性，原理是发射的激光穿透容器顶空，容器顶空的水汽和氧对激光有吸收，激光吸收量和对应的物质含量成正比。

顶空水汽的吸收峰宽度和顶空压力成正比，因此可以通过顶空水汽的吸收峰宽来获得顶空压力。

此方法适用于负压冻干粉针西林瓶，其内部有一定含量的顶空水汽，可通过此方式进行完整性测试。

无菌药品包装容器的密封性验证方案1.概述：无菌药品的容器应能在整个有效期内有完好的密封性，防止微生物的浸入。

药品包材的设计及选择要考察相互的配合情况。

无菌容器/密封件系统的完整性测试可以在培养基灌装时进行。

2.目的：评估产品包装的密封性，以充分保护产品在储存期的无菌状态。

3.依据：《药品生产质量管理规范》2010修订版：附录1：第九十五条无菌药品包装容器的密封性应经过验证，以避免产品遭受污染。

4.责任：质量部、生产部对本验证负责。

5.微生物浸入试验法验证密封完整性：往产品容器内灌入培养基并按照常规方式压塞封盖，灭菌后冷却备用。

将冷却后的容器倒置并将瓶口完全浸没于高浓度（108CFU/ml）的运动性菌液中，4小时后，将容器外表面消毒并培养，看是否有挑战性细菌在容器内生长。

多准备一些灌装培养基的样品，在与产品相同地的贮存条件下贮存。

在贮存的一定时间间隔（12,24，36和48个月等），取出部分样品，进行微生物浸入试验，以确定密封系统在贮存期内的有效性。

6.范围：西林瓶、胶塞及铝盖的密封性验证，共有10ml及2ml两种规格。

7.用品：胆盐乳糖培养基铜绿假单胞菌（ATCC 9027）乙酸异丙醇8.实施：8.1制备样品：取已经按相应清洗灭菌操作规程制备好的西林瓶、胶塞及铝塑组合盖150套，西林瓶内灌装入已灭菌的胆盐乳糖培养基，在正常生产线上抽真空、压塞、轧盖。

将每一试样品倒转，使培养基与西林瓶内表面及胶塞充分接触，在30～35℃竖立倒置培养14天，培养基应澄清，无菌落生长。

8.2制备微生物菌悬液：从铜绿假单胞菌（ATCC 9027）的新鲜斜面上取培养物，分别接入含6ml无菌胆盐乳糖培养基的试管中，在30～35℃下培养18～24h；将每管的培养物分别转入含600ml相同培养基的容器内，于30～35℃下培养（约24小时），在培养结束时，能明显见容器内培养基出现浑浊，计数，当菌落数大于108CFU/ml时，停止培养，待用（在微生物侵入试验开始，所用菌悬液浓度（活菌数）必须达到1×108CFU/ml。

医疗器械包装完整性试验验证方案1 试验目的对的包装系统，按照YY/、YY/T0313 和“包装完整性试验方案”进行包装完整性验证，来评价包装系统的符合性。

2 试验样品：产品及其包装3 试验依据：制定本规范参考了下列文件中的一些信息，但没有直接引用里面的条文。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

4 试验项目a) 单包装初始污染菌；b) 单包装阻菌性(不透气性)；C) 单包装材料的细胞毒性。

5 试验结论按“包装完整性验证方案”对所有项目进行了验证，结果表明：全部合格。

6 验证和试验小组成员：7 试验日期：8 附件附件A 单包装初始污染菌试验报告；附件B 单包装阻菌性(不透气性)试验报告；附件C 单包装材料的毒性检测报告；附件A单包装初始污染菌试验报告A1 试验项目单包装初始污染菌A2 试验方法样品制备在10万级洁净条件下，脱去单包装的外包装物，取出单包装10只，置于密封的无菌容器内，作为试验样品待用。

供试液制备在无菌条件下，将灭菌的浸有氯化钠溶液的棉拭子在单包装内壁涂抹120cm2，然后放在试管内充分振荡待用。

试验方法a) 用灭菌操作技术，将供试液置于Φ90mm的培养皿内各1ml，共10只，再注入约45℃的营养琼脂培养基约15ml，混匀，待凝固后，在37℃的恒温箱中，放置培养48h。

b) 取出后，每平皿以总计细菌菌落，以两平皿为1组取平均值。

C) 试验数据分析计算将每样取5份平均样，按以下公式计算菌数：若每组平皿平均菌数≤10cfu，则判供试品合格。

若每组平皿平均菌数＞10cfu，则判供试品不合格。

试验结果每组平均数≤10cfu。

A3 结论在本研究条件下，供试样品初始污染菌试验合格。

产品初始污染菌检测记录附录B单包装阻菌性（不透气性）试验报告B1 试验项目单包装封口的阻菌性（不透气性）。

药品包装密封完整性检测方法概述药品包装密封完整性是指药品包装密封系统能够提供的保护药品的能力。

它通过确保药品在生产、储存和运输过程中免受污染或损坏，从而确保药品的有效性和安全性。

药品包装的密封完整性是确保药品质量和安全的重要因素。

药品包装密封完整性测试通过物理化学或是微生物方法直接或是间接地证明包装密封完整性。

《药品生产质量管理规范》2010 年修订版明确规定，无菌药品包装容器的密封性应当经过验证，避免产品遭受污染。

2020 年 5 月国家药品监督管理局药品审评中心发布的《化学药品注射剂仿制药质量和疗效一致性评价技术要求》已明确密封性检测方法需经适当的验证; 在稳定性考察部分中明确稳定性考察初期和末期进行无菌检查，其他时间点可采用包装密封完整性替代。

包装密封完整性可采用物理完整性测试方法( 如压力/真空衰减等)进行检测，并进行方法学验证。

《美国药典》 USP1207系列指导原则对于包装系统密封性相关研究和评价工作具有较高的借鉴意义，其对无菌药品包装系统密封性的概念，范围，检验等主要包括三个章节：USP1207.1产品生命周期的包装系统密封性检查-检测方法的选择与验证，USP1207.2密封性泄漏检测技术，USP1207.3包装密封质量检测技术。

本文参考该系列指导原则，对药品包装密封完整性的检测方法关内容进行介绍和梳理。

药品包装密封完整性检测，即包装泄漏检测，理想状况下，应能够检测到给定包装产品所不能接受的最小泄漏。

换言之，包装产品所能接受的最大泄漏水平应在检测范围内。

美国药典USP1207对于包装系统完整性检验的方法：主要由传统的微生物挑战法、色水法、气泡释放法、无损定量测试法（真空衰减）、高压放电法、激光法。

并将微生物挑战法与色水法定性为概率性的检测方法，真空衰减法、高压放电法、激光法定性为确定性检测方法。

微生物挑战法实施相对容易，在仪器投入方面成本不高，但其属于破坏性测试方法，对原料损耗相对偏大，无法定量漏孔级别；尤其在当泄漏通道为曲折路径时，漏检率较高。

引言化学药品注射剂仿制药质量与疗效一致性评价技术要求（征求意见稿）中，稳定性研究技术要求中提到：“稳定性考察初期和末期进行无菌检查，其它时间点可采用容器密封性替代。

容器密封性可采用物理完整性方法（例如压力/真空衰减等）进行检测，并进行方法学验证。

”1、常见的容器密封完整性验证方法主要有如下几种1.1 微生物侵入实验法验证密封完整性：往产品容器内灌入培养基并按常规方式压塞，轧盖，灭菌后冷却备用。

将冷却后的容器倒置并将瓶口完全浸没于高浓度的运动菌液中，如大肠埃希菌，铜绿假单胞菌或粘质沙雷菌，4小时后，将容器外表面消毒并培养，看是否有挑战性细菌在容器内生长。

1.2 饱和盐水法测试密封性：有些产品可以做盐水渗入试验：在玻璃瓶灌入注射用水，并按常规方法密封（压塞、轧盖），此后，将其倒置于一盛有饱和盐水的托盘内，是胶塞及铝盖全部进入饱和盐水中。

将其放入灭菌设备并按常规的灭菌程序灭菌，分析瓶中内容物是否含氯化钠检查密封完整性。

1.3 亚甲基蓝溶液法：取适当数量的玻璃瓶，在玻璃瓶中灌入注射用水，按常规方法压塞、轧盖。

胶塞及样品的处理最好模拟实际生产工艺。

将样品倒置，放入装有一定浓度亚甲基蓝溶液的容器中，使其完全浸没。

将容器放入真空箱中抽真空，维持一段时间，真空箱恢复至常压，继续维持一段时间。

取出，用水冲洗瓶外，目检。

亚甲基蓝溶液不得渗入瓶内。

开发阶段的容器密封完整验证方法有时也用于生产过程中的检测。

2、常见的密封完整性检查方法主要有如下几种2.1 利用染色浴测试密封性：在高温灭菌箱灭菌之后，染色浴的测试可以在灭菌腔室内进行（如果技术条件允许的话），也可在另一个可以调整压力的容器中进行。

将容器完全浸没在染色浴，并且存在负压的环境中。

如果该容器有裂缝，空气就会从瓶中溢出，当容器表面有正压时，染色溶液会从裂缝进入瓶内部。

通过目检剔除变色的容器。

对于小批量产品，染色浴是一个相对经济的做法，不需要很多技术仪器，而且可以检出较大的泄漏。

预灌装注射器的容器密封完整性测试方法开发和验证引言使用预罐装注射器作为生物制剂的首选容器密封系统一直在增加，作为主要的容器密封系统，预灌装注射器必须提供完整屏障，以保护药物产品在其整个保质期的稳定性和无菌。

药品制造商被要求检查和证明系统能够保持微生物屏障的完整性。

在2008年，FDA进一步提升容器密封完整性（CCI）测试作为无菌产品稳定性协议的一个组成部分。

为了应对越来越严格的监管预期，制药行业带动和见证了CCI测试的重大技术进步。

基于仪器的技术，如高压放电检测（HVLD）、真空/压力衰减、大规模提取和失踪气体检测（氦气、氧气等）出现了，证明检测能力相比传统染色方法和微生物侵入方法提升了。

许多技术已经被用于在线100%检验和/或药品稳定性CCI测试。

本文，我们将强调我们当前的思考，试图设计一种系统的方法用于CCI测试方法的选择、开发和验证。

总论为了在容器密封系统和药物输送装置中同时发挥作用，预灌装注射器以许多独特的设计元素为特色。

它们通常包括由众多接口密封的多个容器腔体，例如，当前带针的玻璃注射器（图1）提供了注射器针筒腔体用来装药品和一个独立的针防护腔体用来保护针头，注射器针筒腔体一端由柱塞密封，另一端由针密封，针尖插在针护套上。

注射器针防护腔体，由注射器针筒头密封，保护针外表面免受潜在的污染。

在CCI测试方法开发的过程中，需要识别、评估和考虑与每个腔体和密封接口有关的潜在的失效模式。

此外，注射器里的柱塞允许在一定范围内沿着针筒移动，在储运和销售过程中，处于低压环境时，由压力变化引起的柱塞移动可能潜在地影响密封的完整性。

因此，很有必要评估在这些特殊条件下柱塞密封的完整性。

除了预灌装注射器复杂的设计，包装在注射器里面的药品也需要考虑。

例如，预灌装的注射器已经广泛用于生物制剂中，它们中的一些可能需要极低的温度储藏（如-70度）。

由于注射器组成的密封特性，尤其是弹性体（如针护套和柱塞）是温度依赖的，如果基于弹性体特性的理论理由不充分，CCI测试可能需要在极低温度下进行。

-药业专论•Monogppa oo Pharmaceutical Industry221年1月20 0第30卷第2期Vol. 30, No. 2, January 20, 2021China Pharmaceuticalsdoi ：10. 3969/j. issn. 1006 -4931. 2021. 02. 002注射剂包装密封完整性检测技术研究进展**基金项目：国家质检总局科技计划项目［2014IK247］。

第一作者：陈江，男，硕士研究生，工程师，研究方向为药品相容性、密封完整性、基因毒素杂质、元素杂质，（电话）023 -67773010 （电子信箱）chenjiang@ customs, gov. cn 。

△通信作者：王国民，男，博士研究生，研究员，研究方向为注射剂仿制药一致性评价，（电话）023 -67756396（电子信箱）chqwgm@163. com 。

陈 江12，王俊苏1 ,，关天横1，聂福平1,李 贵3,张国波2，王国民1A(1.重庆海关技术中心，重庆440022； 2.重庆玉成产品质量检测有限公司，重庆401142；3.重庆奧凯科技有限公司，重庆40121)摘要：目的为注射剂一致性评价中密封完整性的检测提供参考。

方法以文献研究为基础，结合工作实践经验，对现有注射剂包装密 封完整性检测技术的相关研究进行系统总结。

结果与结论目前，我国还处于药品包装密封完整性研究的初级阶段。

为了顺应我国注 射剂仿制药一致性评价工作的趋势，应进一步加强密封完整性检测的研究工作，同时要根据注射剂和包装选择适宜的密封完整性检测方法。

匕较发现，质量提取法具有较强的综合性能，是注射剂一致性评价中密封完整性检测较理想的方法之一。

关键词:一致性评价；注射剂；仿制药;包装；密封完整性;检测技术中图分类号:R95 文献标志码:A 文章编号:1006 - 4931 (2021 )02 - 0005 - 07Reserrih Progreso of Containrr Closore Interrity Test of InjectionCHEN Jiang ^2, WANG Junsu 】，, GUAN Tianheng 1, NIE Fuping 1, U Gui 3, ZHANG Guobo 2, WANG Guomin 1(I. Chongqing CuUomu Techhlogy Center, Chongqing , Chinn 400022;2. Chongqing Yucheng Probuct Quality Testing Cb , Ud. , Chongqing , Chinn 401122;3. Chongqing Aokni Technolony Cn, , Ud, , Chongqing , Chinn 441122)Abstract : Objective To provide reference for the container closnry integrity (CCl) test in the consistency evaluation of injections.Methode Based co cocuOiriu the literature and combininu 0 with practical experience in the worO , n systematic review was coneactenoo the relatef researcO about CC) test of injectione. ResUts and Conclusion At present , China is still in the primary stage of CC) test. The research o CC) test shoulU be further strenuthenef ,in o reee te comply with the trenU of consistenco evaluation of injecaon for eeneric eruat in ou conatry. Ai the same tirne , the approprmte method of CC) tett shoUa be selecten accoreinu te the injechon anUpachaae. Comparer with other , the quality extract!oo method O oue of the 口耐 ideal methons for CC) in the consistencoevaluation of injechous,which hat a strouu comprehensme performanco.Key wordt : cousmteucy evaluation ; mjectious ; geueric eruat ; pacoaae ; coutaiuee closnre mteeety ; teet techuoloey注射剂的无菌性直接关系患者的生命安全。

7.4.1 培养基配制及器具的灭菌操作人：复核人：日期：7.4.1.2 除菌过滤前TSB培养基微生物限度检验检查依据：微生物检查参照《微生物限度测定标准操作规程》（QC117）,采用薄膜过滤法.营养琼脂培养基的配制：称取营养琼脂培养基干粉（中检所监制，批号：）g，加纯化水ml加热溶解。

检验用平皿的准备：准备直径90 mm的带盖玻璃平皿套，用牛皮纸包裹。

灭菌：以上培养基和物品统一灭菌，灭菌条件：121°C, 30 min。

操作人：复核人：日期：玫瑰红钠琼脂培养基的配制：称取玫瑰红钠琼脂培养基干粉（中检所生产，批号：）g，加纯化水ml，加热溶解。

检验用平皿的准备：准备直径90 mm的带盖玻璃平皿套，用牛皮纸包裹。

灭菌：以上培养基和物品统一灭菌，灭菌条件：121°C, 30 min。

操作人：复核人：日期：Rodac碟培养基的的配制：称取胰酪胨大豆肉汤培养基干粉（上海中科，批号：）g ，卵磷脂（国药集团，批号：）g，吐温80（批号：）g，加入纯化水ml,微温使其溶解，用1.0M的氢氧化钠调节pH值使灭菌后为7.3±0.2，加入琼脂g，加热使其溶解。

灭菌：灭菌条件：121°C, 30 min。

Rodac碟的批号：，生产厂商：，数量：。

操作人：复核人：日期：取样用试管的准备：准备10 ml试管支，内装2 ml生理盐水和一根医用棉签，管口用医用纱布包裹的脱脂棉塞塞住，再用牛皮纸封口。

灭菌：灭菌条件：121°C, 30 min。

操作人：复核人：日期：检查人：复核人：检查日期：报告日期：7.4.1.4 除菌过滤器的膜完整性检测操作人：复核人：日期：日期：操作人：复核人：附灭菌的温度打印记录操作人：复核人：日期：操作人：复核人：日期：检查人：复核人：日期：7.4.2灌装环境的清洁、消毒效果检查及人员着装检查7.4.2.1操作人员微生物监控进入无菌区的人员按照《洁净区人员更衣标准操作规程》（MF149）进行更衣，操作结束后，按照《灌装无菌区人员更衣确认程序》（QA057）对操作者的左手、右手、口罩、胸口处、帽兜额头处、左臂、右臂等部位的微生物数量进行监测。