细菌纤维素的生物合成 ppt课件

_维____素____的____微____生____物可以大量繁殖；
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3、你能否设计(shèjì)一个对照实验，说明选择培养基 的作用？
若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应
控制(kòngzhì)的变量是将______纤__维__素改粉为 ___葡_萄__糖___。
纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤
维素所产生的__葡_萄__糖___ 含量进行定量测定。
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内容(nèiróng)总结
课题3 分解纤维素的微生物的分离。纤维素是以一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物， 是地球上含量最丰富的多糖类物质。C1酶、Cx酶。1、纤维素分解菌选择培养基属于______（固
课题 3 (kètí) 分解纤维素的微生物的分离
纤维素：
棉花是自然界 中纤维素含量 最高的天然 产物 (tiānrán)
纤维素能被土壤中微生物分解利用，这是因为他 们能够(nénggòu)产生纤维素酶
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讨论(tǎolùn)：食草动物是怎样消化食物中纤维素的？
在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素的微 生物，其原理(yuánlǐ)也是产生纤维素酶而分解纤维素。
提示：自变量为培养基的种类(zhǒnglèi)，即普通培养基
和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照, 或者将纤维素改为葡萄糖。
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1、土壤(tǔrǎng)取样 地点(dìdiǎn)：富含纤维素的环境中 2、选择(xuǎnzé)培养 目的：增加纤维素分解菌的浓度 选用的培养基： 液体选择培养基

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真菌类纤维素分解微生物
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木霉属（Trichoderma）
01
能够分泌多种纤维素酶，对纤维素的分解能力强。
青霉属（Penicillium）
02
部分种类具有分解纤维素的能力，产生葡萄糖等单糖。
曲霉属（Aspergillus）
03
一些种类能够分解纤维素，产生有机酸等代谢产物。
控制措施
使用无菌技术，包括无菌操作台、无菌培养基和接种工具；对接种环境进行定期消毒，保持环境清洁 。
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分离效果不佳的原因分析
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培养基选择不当
可能导致目标微生物无法生长或生长缓慢 。
接种量不足
可能导致目标微生物在培养基上无法形成 可见的菌落。
培养条件不适宜
如温度、湿度、pH值等，可能导致目标 微生物无法生长或生长不良。
选择性培养基的组成
以纤维素为唯一碳源的培 养基，通过添加特定氮源 、无机盐、生长因子等物 质，促进目标微生物的生
长。
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培养条件
在适宜的温度、pH值、氧 气等条件下进行培养，使
目标微生物得以繁殖。
分离原理
利用目标微生物对纤维素 的分解能力，使其在选择 性培养基上形成明显的菌 落，从而与其他微生物区
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操作步骤详解及注意事项提醒
3. 微生物分离与纯化
采用稀释涂布平板法或划线分离法等方法，将目标微生物从混合菌群中分离出来。
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通过多次划线或稀释涂布，获得纯化的单一菌落。
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操作步骤详解及注意事项提醒
01

目标:
1、知道纤维素酶的种类及作用 2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维 素的微生物的实验方法
一、基础知识
㈠纤维素与纤维素酶 1.纤维素
纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高 分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。
植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤 维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高 的天然产物。
水
A、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？
是液体培养基，原因是配方中无凝固剂（琼脂）
B、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有， 是如何进行选择的？
有选择作用，本配方中纤维素作为主要碳源，只有能 分解纤维素的微生物可以大量繁殖。
C、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用
提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择 培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤 维素改为葡萄糖。
五、课题延伸
为了确定分离得到的是纤维素分解菌， 还需要进行发__酵__产__纤__维__素__酶_实验，纤维素酶的 发酵方法有__液__体__ 发酵和_固__体___ 发酵。纤 维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤 维素所产生的_葡__萄__糖___ 含量进行定量测定。
课堂总结
分解 纤维 素的 微生 物的 分离
纤维素酶催化分解后红色 复合物无法形成，培养基
定
培
上就会出现以纤维素分解
培
养基中加入酚红指示剂，如 菌为中心的透明圈
养 现 观果察pH菌升落高周指围示是剂否会有变红红色的 观察菌落周围是否出现
基 象 环带出现来鉴定尿素分解菌 透明圈来筛选纤维素分解菌
方 法
脲酶检测法
刚果红染色法
6、纯化培养
在产生明显的透明圈的菌落，挑取并 接种到纤维素分解菌的选择培养基上， 在300C－ 370C培养，可获得纯化培养。

=0.28。
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b．Huggins公式：
ηsp/C= [η] + K’ [η]2C
式中K’ — 与溶剂-溶质体系的温度有关的常数。对硝酸纤 维素的乳酸酯溶液，K’ =40；对醋酸乙酯溶液，K’ =0.35。
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c．Martin公式： ηsp = [η]CeK’ [η]C
Mn < Mη ≤ Mw
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三、纤维素分子量和聚合度的测定方法
化学方法：端基分析法； 热力学方法：沸点升高、冰点降低法、蒸气压下降法、
渗透压法；
光学方法：光散射法；
动力学方法：黏度法、超速离心沉淀及扩散法；
其他方法：凝胶渗透色谱法。
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测定方法
端基分析 沸点升高 冰点下降 气相渗透压 膜渗透压 光散射 超速离心 沉降速度 超速离心 沉降平衡
f
η为比例常数，称之
为流体的黏度系数， 简称黏度。单位
mPa•s (cP)。
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2．高分子溶液的几种黏度定义
相对黏度： ηr =η/η0
增比黏度：ηsp = (η-η0 ) /η0 =ηr -1 比浓黏度：ηsp /C
特性黏度：
[η]＝lim C→0
ηsp /C
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溶解分级法测定纤维素多分散性的结果
( 铜氨溶液 )
液比
30 75 125 175 225 末溶残渣
相继溶解的各级分的重量 (纤维素重量％)
8．8 9．9 16．4 18．2 26．0 20．8
聚合度
160 350 545 820 1,083 1,161