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干扰素说明书篇一：重组人干扰素α1b说明书重组人干扰素α1b说明书【中文名称】重组人干扰素α1b【产品英文名称】Recombinant Human Interferon α2b【功效主治】本品适用于治疗病毒性疾病和某些恶性肿瘤。
已批准用于治疗慢性乙型肝炎、丙型肝炎和毛细胞白血病。
已有临床试验结果或文献报告用于治疗病毒性疾病如带状疱疹、尖锐湿疣、流行性出血热和小儿呼吸道合胞病毒肺炎等有效，可用于治疗恶性肿瘤如慢性粒细胞白血病、黑色素瘤、淋巴瘤等。
【化学成分】主要组成成分:重组人干扰素α1b【药理作用】本品具有广谱的抗病毒、抗肿瘤及免疫调节功能。
干扰素与细胞表面受体结合，诱导细胞产生多种抗病毒蛋白，从而抑制病毒在细胞内的复制；可通过调节免疫功能增强巨噬细胞、淋巴细胞对靶细胞的特异细胞毒作用，有效的遏制病毒侵袭和感染的发生；增强自然杀伤细胞活性，抑制肿瘤细胞生长，清除早期恶变细胞等。
急性毒性试验:小白鼠尾静脉注射人用量3倍(按体重计算)的本品，无急性毒性反应。
长期毒性试验:狗注射人用剂量5.6倍和28倍；大白鼠注射人用剂量的5.6倍、28倍和140倍(均按体重计算)，分别连续注射3个月【药物相互作用】使用本品时应慎用安眠药及镇静药。
【不良反应】本品不良反应温和，最常见的是发热、疲劳等反应，常在用药初期出现，多为一次性和可逆性反应；其他可能存在的不良反应有头痛、肌痛、关节痛、食欲不振、恶心等；少数病人可能出现颗粒白细胞减少、血小板减少等血象异常，停药后可恢复。
如出现上述患者不能忍受的严重不良反应时，应减少剂量或停药，并给予必要的对症治疗。
【禁忌症】1 已知对干扰素制品过敏者。
2 有心绞痛、心机梗塞病史以及其他严重心血管病史者。
3 有其他严重疾病不能耐受本品的副作用者。
4 癫痫和其他中枢神经系统功能紊乱者。
【产品规格】10μg【用法用量】每支用灭菌注射用水1ml溶解，肌肉或皮下注射。
剂量和疗程如下:慢性乙型肝炎:本品30～50μg/次，隔日1次，皮下或肌内注射，疗程4～6个月，可根据病情延长疗程至1年。
干扰素干扰素（interferon,IFN）是由灭活的或活的病毒作用于易感细胞后，由易感细胞基因组编码而产生的一组抗病毒物质。
除病毒以外，细菌、真菌、原虫、立克次氏体、植物血凝素以及某些人工合成的核苷酸多聚物（如聚肌胞）等都能刺激机体产生干扰素。
凡能刺激机体产生干扰素的物质统称为干扰素诱生剂。
干扰素的主要成分是糖蛋白，按其抗原性不同可分为α、β和γ三种主要类型。
其活性及抗原性皆取决于分子中的蛋白质，而与其糖基无关。
脊椎动物细胞是产生干扰素的主要细胞，但无脊椎动物（甲壳类及昆虫）及植物细胞（如丁香等）亦发现有干扰素类似物。
干扰素对细胞表面的干扰素受体有高度亲和力，它与受体的相互作用可激发细胞合成新的mRNA，产生多种效应蛋白，发挥抗病毒、抗种瘤及免疫调节等作用。
干扰素不具有特异性，即由一种病毒所诱发产生的干扰素，能抗御多种病毒甚至其他的胞内寄生的病原生物的能力。
动物实验证明，干扰素能抑制多种致癌性DNA病毒和RNA病毒，从而抑制病毒诱发的肿瘤生长。
干扰素制剂可用以治疗某些病毒性感染（如慢性乙型肝炎、带状疱疹等），以及治疗多种肿瘤（如骨肉瘤、白血病、多发性骨髓瘤等）。
初期用于病毒性疾病，继而扩大到恶性肿瘤的治疗。
但目前所用的干扰素，不论是纯化的天然干扰素，还是以DNA重组技术产生的干扰素，均有许多毒性，临床使用时常可造成白细胞减少、贫血、头痛、发热、肝功能异常、中枢神经系统中毒等。
临床应用的干扰素诱生剂，如聚肌胞，毒性较大，而且价格昂贵，此外，人血清中存在破坏聚肌胞的核糖核酸酶，故难以在临床推广应用。
干扰素是一类糖蛋白，它具有高度的种属特异性，故动物的IFN对人无效。
干扰素具有抗病毒、抑制细胞增殖、调节免疫及抗肿瘤作用。
[返回]干扰素的发现干扰素（IFN）是最先发现的细胞因子，早在1957年，lssacs等人发现病毒感染的细胞产生一种因子，可抵抗病毒的感染，干扰病毒的复制，因而命名为干扰素。
[返回]干扰素的性质及类型干扰素是由多种细胞产生的具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的可溶性糖蛋白。
干扰素（IFN）是一种广谱抗病毒剂，并不直接杀伤或抑制病毒，而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白，从而抑制乙肝病毒的复制；同时还可增强自然杀伤细胞（NK细胞）、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力，从而起到免疫调节作用，并增强抗病毒能力。
干扰素是一组具有多种功能的活性蛋白质（主要是糖蛋白），是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。
它们在同种细胞上具有广谱的抗病毒、影响细胞生长，以及分化、调节免疫功能等多种生物活性。
目录1干扰素2干扰素简介3治疗有效率4干扰素多少钱5发现6什么叫干扰素（IFN）7品种及价位8作用机制1.8.1 ①间接性2.8.2 ②广谱性3.8.3 ③种属特异性4.8.4 ④发挥作用迅速1干扰素药物类别：抗肿瘤药，抗病毒药；所属类别：生物反应调节剂药物名称：干扰素英文名称：Interferon药物别名：序号中文别名英文别名一．α干扰素制剂/规格：序号制剂规格1．注射剂 5×10。
单位（1 ml）；1×106。
单位（1 ml）；2．冻干剂l×10。
单位成份/化学结构：序号成份化学结构药理作用：1.抗病毒作用：其抗病毒活性不是杀灭而是抑制病毒，它一般为广谱病毒抑制剂，对RNA和DNA病毒都有抑制作用。
当病毒感染的恢复期可见干扰素的存在，另一方面用外源性干扰素亦可缓解感染。
2．抑制细胞增殖干扰素抑制细胞分裂的活性有明显的选择性，对肿瘤细胞的活性比正常细胞大500～1000倍。
干扰素抗肿瘤效果可以是直接抑制肿瘤细胞增殖，或通过宿主机体的免疫防御机制限制肿瘤的生长。
3．诱导细胞凋亡：干扰素可以诱导肿瘤细胞凋亡，从而杀灭肿瘤细胞。
4.干扰素对体液免疫、细胞免疫均有免疫调节作用，对巨噬细胞及NK细胞也有一定的免疫增强作用。
药动学：干扰素在肌内注射或皮下注射后入血的速度较慢，需较长时间才能在血中测到。
肌内注射后Tmax为5～8小时。
一次肌注：106单位，血清浓度为100单位/ml，这比在病毒感染时自然产生的干扰素量为高。
基因工程药物之干扰素的制备流程概述干扰素是一类重要的基因工程药物，具有抗病毒、抗肿瘤等作用。
本文将详细介绍干扰素的制备流程，包括干扰素的基因工程、表达和纯化等主要步骤。
1. 干扰素的基因工程干扰素的基因工程是制备干扰素的第一步，可以通过重组DNA技术构建包含干扰素基因的重组质粒。
具体步骤如下：•选择干扰素基因：从已知的干扰素基因库中选择合适的基因序列。
•克隆基因：将选定的干扰素基因通过PCR扩增等技术获得基因片段。
•构建重组质粒：将干扰素基因插入适当的表达载体中，构建重组质粒。
2. 干扰素的表达完成基因工程后，接下来是通过表达系统将干扰素基因表达为蛋白。
常见的表达系统包括大肠杆菌、哺乳动物细胞等，其中大肠杆菌表达系统是最常用的。
表达步骤如下：•转染表达宿主：将构建好的重组质粒导入表达宿主中。
•培养表达宿主：在适当的培养条件下，培养表达宿主，促使干扰素基因表达为蛋白。
•蛋白提取：采用合适的方法提取表达的干扰素蛋白。
3. 干扰素的纯化获得表达的干扰素蛋白后，还需要进行纯化步骤，将目标蛋白从其他杂质中分离出来，确保干扰素的纯度。
常见的纯化方法包括亲和层析、离子交换层析等：•亲和层析：利用干扰素与某种亲和基质之间的特异识别作用，实现干扰素的分离纯化。
•离子交换层析：根据蛋白的电荷性质，通过离子交换柱将干扰素与杂质分离。
4. 干扰素的检测与质控最后一步是对制备好的干扰素进行检测与质控，确保其质量符合要求。
常见的检测方法包括SDS-PAGE凝胶电泳、Western blotting等：•SDS-PAGE凝胶电泳：通过电泳分析蛋白的相对分子质量。
•Western blotting：通过特异抗体的靶向检测确认蛋白的存在。
结语通过上述步骤，干扰素的制备工作完成，得到的干扰素蛋白可以用于临床治疗等用途。
干扰素的基因工程、表达和纯化过程都需要严格控制，保证干扰素的质量和稳定性，为临床应用奠定基础。
【药品名称】通用名称：注射用重组人干扰素α1b商品名称：賽若金® SINOGEN®英文名称：Recombinant Human Interferon α1b for Injection汉语拼音：Zhusheyong Chongzu Ren Ganraosu α1b【成份】本品主要成份为重组人干扰素α1b，系由含有高效表达人干扰素α1b 基因的大肠杆菌，经发酵、分离和高度纯化后冻干制成。
辅料：人血白蛋白、氯化钠【性状】本品为白色薄壳状疏松体，加入1ml灭菌注射用水后迅速复溶为澄明液体。
【适应症】本品适用于治疗病毒性疾病和某些恶性肿瘤。
已批准用于治疗慢性乙型肝炎、丙型肝炎和毛细胞白血病。
已有临床试验结果和文献报告用于治疗病毒性疾病如带状疱疹、尖锐湿疣、流行性出血热和小儿呼吸道合胞病毒肺炎等有效，可用于治疗恶性肿瘤如慢性粒细胞白血病、黑色素瘤、淋巴瘤等。
【规格】10μg/支、20μg/支、30μg/支、40μg/支、50μg/支、60μg/支【用法用量】每支用灭菌注射用水1ml溶解，肌肉或皮下注射。
剂量和疗程如下：慢性乙型肝炎：本品一次30~50μg ，隔日1次，皮下或肌内注射，疗程4~6个月，可根据病情延长疗程至1年。
可进行诱导治疗，即在治疗开始时，每天用药1 次，0.5~1个月后改为隔日一次，到疗程结束。
慢性丙型肝炎：本品一次30~50μg，隔日1次，皮下或肌内注射。
治疗4~6个月，无效者停用。
有效者可继续治疗至12个月。
根据病情需要，可延长至18个月。
在治疗的第1个月，一日1次。
疗程结束后随访6~12个月。
急性丙型肝炎应早期使用本品治疗，可减少慢性化。
慢性粒细胞性白血病：本品一次30~50μg，每日1次，皮下或肌内注射，连续用药6个月以上。
可根据病情适当调整，缓解后可改为隔日注射。
毛细胞白血病：本品一次30~50μg ，每日1次，皮下或肌内注射，连续用药6个月以上。
可根据病情适当调整，缓解后可改为隔日注射。
基因工程重组人干扰素概述（doc 17页） 根据来源、基因序列和氨基酸组成分类 I 型干扰素： IFNα、IFNβ、IFN τ、IFN ω 来源：白细胞、成纤维细胞、病毒感染的组织细胞等 功能 ：抗病毒感染、抗肿瘤生长 免疫调节(较弱） 其中IFN-α为多基因产物，有23种以上的亚型。 II 型干扰素：干扰素γ（IFN) 来源：活化的T细胞和NK细胞产生 功能：免疫调节 ➢ 提高单核巨噬细胞、树突状细胞的抗原提呈能力 ➢ 增强Tc细胞和NK细胞的杀伤活性 ➢ 抑制TH2细胞形成，下调体液免疫应答 对其它细胞的作用：IFNγ对其他细胞也有广泛影响：①刺激中性粒细胞，增强其吞噬能力；②活化NK细胞，增强其细胞毒作用；③使某些正常不表达MHCⅡ类分子的细胞（如血管内皮细胞、某些上皮细胞和结缔组织细胞）表达MHCⅡ类分子，发挥抗原递呈作用；④使静脉内皮细胞对中性粒细胞的粘附能力更强，且可分化为高内皮静脉，吸引循环的淋巴细胞。 二 重组干扰素的临床应用 广谱抗病毒活性（rhuIFNα） 慢性乙型、丙型、丁型肝炎；疱疹、病毒性角膜炎。 直接抗肿瘤活性（rhuIFNα） 毛细胞和慢性髓样白血病、 Kaposi肉瘤、非霍奇金淋巴瘤。 免疫调节活性——治疗慢性肉芽肿瘤（rhuIFNγ） 多发性硬化症 rhuIFNβ
对已知基因序列的干扰素 , 基因文库的调用可以用其序列 3' 端和 5' 端部分事先用同位素 标记过的序列作为探针 , 通过杂交的方法进行调用。由于干扰素基因的种属特异性不是很大 ,| 可以用人的干扰素基因为同源探针 , 从鼠基因文库中调出相应的干扰素基因 , 其方法将在下文 1 中提到。 | 对于扰素基因的取用 , 不仅可以使用构建基因文库的方法 , 对已了解其氨基酸或核昔酸割 成的干扰素也可以用化学合成的方法先合成其编码的 DNA 序列 , 再 对其进行表达。化学合 | 成方法包括固相合成法及液相合成法两大类。与利用基因文库的方法相比 , 化学合成法比较 | 复杂 , 由于每加入一个核昔酸就会有一定比例的错误掺入、基因重叠、基因缺失等情况 , 并且在 l 整个合成过程中这种错误不断积累 , 因此该方法适合比较短的基因 , 而对长的基因则有目的产 | 物含量低、产物纯化困难的缺点。但它也有优点 , 如可根据研究的需要对一些氨基酸进行定点 | 突变 , 或根据宿主菌的特性 , 在不改变其氨基酸组成的情况下使用宿主的偏爱密码子 , 以提高 | 产物的产量。 | 对于不同亚型的干扰素 , 由于同源性较高 , 可以用相同的引物从诱导的小鼠细胞系中提取 mRNA 混合物进行反转录和扩增 , 然后用亚型特异性探针对 CDNA 混合物进行 Southern 印迹 , 这样便可将序列上相差较小的同种、不同亚型的干扰素基因进行分离 , 为生产高纯度的单一干扰素提供了方法 O 三、表达方法 随着对干扰素研究的深入 , 人们了解到鼠干扰素的抗病毒活性主要位于氨基酸序列上的 10~40 位、 78~107 位、 123~166 位的 A 、 B 、 C 区 , 尤其是位于 78 和 79 位的氨基酸对抗病毒 | 活性十分重要。而人 IFNt1 的 121~136 位对抗病毒活性作用较大 , 人 IFN 子的 N 端 10 个集 | 基酸也是保持其活性所必需的。对干扰素结构的了解为更好地构建基因表达奠定了基础。干 | 扰素最初是用其外源序列进行表达的 , 但近年 来的研究表明嵌合表达的干扰素往往优于单一 干扰素 , 因此出现了较多的嵌合表达形式 , 并取得了较好的效果。 1.IFN- α的表达家蚕作为一种用于表达外源基因的宿主有易于养殖、生产周期短、夕阳基因表达量高的优点 , 同时由于家蚕为真核生物 , 能对表达产物自行进行糖基化修饰 , 产生有生物活性的蛋白 , 并且在产物提取的过程中只要将家蚕进行匀浆 , 再进行抽提即可 , 操作上十分方便 , 因此 , 它在基因工程领域内被广泛应用。下面便以人 IFN, α的生产为例介绍家蚕表达体系在干扰素生产中的应用。 用家蚕核型多角病毒 BIIINPV 体外感染的家蚕传代细胞株 BM-N 通过噬菌斑法纯化得到 BmNPV 的τ 3 亚型。利用从感染脂肪体 mRNA 制得的 CDNA 为探针 , 对其多角蛋白序列进行检验 , 其中 10.5kb 的 EcoR I 片段及 3.9 灿的 HindE 片段可与探针杂交 , 将 10.5 灿的 EcoR I 片段克隆到 pBR322 中 , 产生质粒 pBmE360 对其用 HindE 切 , 得到 3.9kb 片段 , 其中 | 含有多角蛋白全部序列 ( 图 123 中为黑色框架 ), 将该片段插入 pUC9 的 HindE 位点 , 产生质 | 粒 p9H18 。将 p9H18 用 EcoR I 切后于 50U BAL31 外切核酸酶缓冲液中 23 ℃水浴 10min, 更 | 掐锺油油菲如 n 入 07 倍他烈的。气 mnlAd EDTA 终止反应。将截短的 p9H18 片段用 Hind E i切 , 并通过琼脂糖凝胶电泳分离 2.7kb 的 Hind 皿平头末端片段 , 将其插入 pUC9 即 p9B310 的 Hind HI-Sma I 位点 O 另外 , 将 pBmE36 的 3.1 峙的 HindE 片段连接到 pUC8 上 , 得到质粒 p8H225, 用 EcoR I 及 Aat E 切 , 得 含有多角蛋白基因下游 3.1kb 基因的 3.5kb 片段 , 将其连接到 p9H18 的 4.7kb 的 EcoR IAat E 片段上 , 产生杂交质粒 p89B310, 它在启动子下游含有多聚接头 (EcoR I 、 BamH ISma I 、 Sal I 、 Pst I 位点 ) 。将从基因文库中用 183bp 探针调出的在 ATG 后含有 Sma I 位点 ( 即有序列 CCCGGGATG) 的 IFNm α J 基因片段连接到 p89B310 上 , 便构建成质粒 pIFN2B310 。将 pIFN2B310 与病毒基因组 DNA 便可共转染 BM- N 细胞系或家蚕幼体 , 其具体操作如下 : 向 2.5mL 含有 0.25molACaCl2 、 10 μ g BmNPV DNA 及 65 μ g pIFN2B310 的溶液中加含 0.28II1014NaCl 、 0.7mmoi/L Na2C03 、 0.7IIIII1014 Na2HP04 、 50mmol/L EfEPE (pH 7.1) 的缓冲液 , 进行沉淀。取 0.45ml 沉淀加至 4.5mi 含 3 × 106 个细胞的培养液中 ,12h 后换液一次 , 再培养 4d, 即可得到重组病毒 BmIFN2B310 。用 两个噬菌斑单位的病毒感染 3 × 106 个 BM-N 细胞或用 50 μ L3 × 105 个噬菌斑单位的病毒溶液注人家蚕幼体 , 培养 24h 后收集培养液便可得到干扰素。 2.IFN- 目的表达将人 IFN-R 基因 HimdE 片段插人载体 pSV2-dhfr 中 SV40 晚期启动子 PL 下游的 Pvu E 位点。用此重组质粒与带有黄瞟岭磷酸核糖转移酶 (XGPRT) 基因的质粒 pSU--gpt 共转染次黄瞟岭磷酸核糖转移酶 (HGPRT) 基因缺陷小鼠的骨髓瘤 (sp24) 细胞 O 经过霉盼酸及氨基喋岭培养基筛选 , 便可得到表达人 IFN-R 。具体操作步骤如下 : 将含有人 IFN- p 基因的重组质粒 pBV-92 用 EcoR I 及 Hind E 酶切 , 分别作为探针模板及插入片段 , 同时用 PvuII 切载体 pSVZdhfr 质粒 , 使其线性化后将外源基因插入。将次黄瞟岭磷酸核糖转移酶基因缺陷的 sp2/0 细胞在含有 10% 小牛血清、 10% 青链霉素的 DLfEM 培养基中传 3~4 代后在小空斑瓶中培养 24h, 成半悬浮状 ,400r/ 勺 1in 离心 5min 将细胞沉积加入新鲜培养基 , 再培养 2~4h 。转染液中含目的基因 pSVHIF 和标记基因 pSVZgpt( 比值为 10:1), 其中 DNA 浓度为 20 μ g/IIIlo 在 2IIIol/L CaCl263 阵、 10mmolATris-HCl (pH 7.1)428 μ L 中缓缓加入 2 × HeBs 液 (EEPES50mmol 只 L 、 NaCl280mmolA 、 Na2HP040.75mmolA 、 0.75IIlII1014 Na2HP04,pH 7.1) 约 500 μ L, 加入 sp2/0 细胞培养物中 , 轻轻摇匀 37 ℃孵育 8h 。再更换为含有黄瞟岭 250 μ g/mL 、次黄瞟岭 15 μ g/mL 、胸昔 10 μ g/mL 、氨基蝶岭。 -2 μ g/mL 、霉盼酸 25 问 /mL 的 DhEM 培养基 ,37 ℃ cq 孵箱中选择性培养。一周后更换为含 250 μ g/mL 黄瞟岭的 D; 旧 M 培养基 , 继续培养 2 周以上 , 检查 IFN-P 活性。 3.IFN- γ的表达以鼠干扰素 MuIFN- γ为例 ( 图 12-3) 。用含人 IFN- γ编码区基因的探针与噬菌体γ MG9 构建的鼠 M600 基因组 DNA 文库在 20% 甲酷胶中进行低严格性的杂交 , 膜用 0.3molANaCl 、 0.03II1014 拧棱酸纳及 0.1%NaEbS04 在室温洗涤两次。将结合的噬 菌体用噬菌斑法纯化 , 提取 DNA 后 , 用多种限制性内切酶切 , 以 1% 葡聚糖凝胶电泳纯化后与人 CDNA 探针杂交 , 将γ MG9 中与探针
