血小板计数的参考方法

第二节血小板检测血小板以其数量（血小板计数、血小板平均容积和血小板分布宽度）和功能（黏附、聚集、释放、促凝和血块收缩等）参与初期止血过程。

一、筛检试验（一）血小板计数见本篇第二章。

（二）血块收缩试验【原理】血块收缩试验（clot retraction test，CRT）是在富含血小板的血浆中加入Ca2＋和凝血酶，使血浆凝固形成凝块。

血小板收缩蛋白使血小板伸出伪足，伪足前端连接到纤维蛋白束上。

当伪足向心性收缩，使纤维蛋白网眼缩小，检测析出血清的容积可反映血小板血块收缩能力。

【参考值】①凝块法：血块收缩率（％）=[血清（ml）／全血（ml）×（100％-Hct％）]×10-0％，参考值：65．8％±11．0％。

②血块收缩时间（h）：2h开始收缩，18～24h完全收缩。

【临床意义】1．减低（<40％）见于特发性血小板减少性紫癜（ITP）、血小板增多症、血小板无力症、红细胞增多症、低（无）纤维蛋白原血症（hypo（a）fibrinogenmia）、多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）、原发性巨球蛋白血症（primarymacroglobtr1inemia）等。

2．增高见于先天性和获得性因子Ⅷ缺陷症等。

二、诊断试验（一）血小板相关免疫球蛋白测定【原理】血小板相关免疫球蛋白（platelet associated immunoglobulin，PAIg）包括PAIgG、PAIgM、PAIgA，现以PAIgG 测定为例叙述。

将人抗IgG抗体包被在酶标反应板孔内，加入受检血小板破碎液，再加入酶标记的抗人IgG抗体，与结合在板上的PAIgG 相结合，最后加入底物显色，颜色深浅与血小板破碎液中的PAIgG的量成正相关。

受检者所测得的吸光度（A值）可从标准曲线中计算出血小板破碎液中的PAIgG含量。

近来用流式细胞术（FCM）和免疫荧光显微术测定日趋增多。

【参考值】ELISA法：PAIgG为0～78．8ng／107血小板；PAIgM为0～7．0ng／107血小板；PAIgA为0～2．0ng／107血小板；FCM：一般<10％（应建立本实验室的参考值）。

检验科血常规五分类标准摘要：血常规检验是临床常用的检验项目之一，通过测试血液中各类细胞的数量和形态，可以提供有关人体血液功能、机能和病理状态的重要信息。

本文将对血常规检验的五分类标准进行详细解析，包括红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白浓度、血小板计数和血细胞比容。

一、红细胞计数红细胞计数是指在单位体积内的红细胞数量。

正常成年男性红细胞计数参考值为（4.3-5.8）× 10^12/L，成年女性参考值为（3.5-5.0）× 10^12/L。

高于正常范围可能是骨髓增生异常或其他疾病的表现，低于正常范围可能是贫血的表现。

二、白细胞计数白细胞计数是指在单位体积内的白细胞数量。

正常白细胞计数参考值为（4.0-10.0）× 10^9/L。

高于正常范围可能是感染、炎症、白血病等疾病的表现，低于正常范围可能是某些化疗药物的副作用或其他疾病的表现。

三、血红蛋白浓度血红蛋白浓度是指单位体积内的血红蛋白含量。

正常血红蛋白浓度参考值为（110-150）g/L。

高于正常范围可能是慢性骨髓增生性疾病或其他疾病的表现，低于正常范围可能是贫血或出血疾病的表现。

四、血小板计数血小板计数是指在单位体积内的血小板数量。

正常血小板计数参考值为（100-300）× 10^9/L。

高于正常范围可能是炎症、感染或骨髓造血异常的表现，低于正常范围可能是出血性疾病的表现。

五、血细胞比容血细胞比容是指单位体积内红细胞所占的比例。

正常血细胞比容参考值为（37-47）%。

高于正常范围可能是红细胞增多症的表现，低于正常范围可能是失血或贫血的表现。

结论：血常规检验是临床上常用的检验方法之一，通过对红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白浓度、血小板计数和血细胞比容的测试，可以获取有关人体血液情况的重要信息。

根据相应的参考范围，可以判断患者是否存在贫血、感染、炎症等疾病，并为医生提供更准确的诊断依据。

关键词：血常规、红细胞计数、白细胞计数、血红蛋白浓度、血小板计数、血细胞比容。

血小板计数的参考方法1、范围本标准规定了血小板计数参考方法的技术要求。

本标准适用于建立血小板计数参考方法的实验室。

2、规范性引用文件国际血液学标准化委员会（ICSH）-2001血小板计数的参考方法3、定义参考方法（Referencemethod）一种可清楚和准确描述的用于特定检测的技术，该技术要有依据，可提供足够准确和精密的实验数据以评价其他实验方法检测结果的有效性。

医学教|育网搜集整理若有决定性方法，参考方法的准确性必须与决定性方法进行比较。

参考方法应溯源至一级计量标准并且须标示不准确度和不精密度。

4、总则4.1本标准采用间接法计数血小板（Platelet，PLT）。

即用荧光标记PLT后，用流式细胞仪检测红细胞（Redbloodcell，RBC）和PLT的比值，同时用单通道阻抗原理的半自动细胞计数仪准确计数RBC，用RBC除以RBC和PLT的比值得出PLT的计数值。

4.2为了保证参考方法检测结果的精密度和准确性，建立参考方法的实验室必须进行比对。

5、血小板计数参考方法的原理首先将EDTA抗凝血标本用无菌缓冲液进行预稀释，再用特定的荧光抗体对PLT进行染色。

溶液中已染色的血小板被稀释成计数浓度，用流式细胞仪检测血小板和红细胞，根据荧光强度和散射光强度将阈值设在可从RBC中区分PLT的位置，以检测出RBC和PLT的比值。

用RBC的计数值除以RBC/PLT的比值计算出PLT计数值。

6、血标本6.1用合乎要求的塑料注射器或真空采血系统采集健康人的静脉血标本。

6.2标本的收集要求使用EDTA二钾为抗凝剂，抗凝剂的浓度为3.7至5.4umol/ml血（1.5～2.2mg/ml血）。

6.3盛有标本的试管应有足够的剩余空间以便于血标本的混匀操作。

6.4标本中不能有肉眼可见的溶血或小凝块。

6.5标本置于18℃～22℃室温条件下，取血后4小时之内完成检测。

6.6为了保证RBC和PLT分布的均一性，在预稀释和加标记抗体前动作轻柔地将采血管反复颠倒，充分混匀标本。

血小板计算公式血小板计算公式是通过测量血液中的血小板数目来评估一个人的血小板功能和疾病状态的一种方法。

血小板是人体中的一种细小的细胞碎片，主要起到止血和血栓形成的作用。

正常的血小板计数范围通常在150-450 × 10^9/L之间。

血小板计算公式的基本原理是通过测量血小板在显微镜下的数量来估算患者的总血小板数。

这种测量方法简便快捷，可以帮助医生更准确地判断患者的血小板状况和疾病风险。

血小板计算公式的计算公式如下：血小板计数（计算）= 平均每个小方格中的血小板数× 10 × 显微镜倍数× 血液稀释倍数其中，平均每个小方格中的血小板数是指在显微镜下观察到的血小板数目的平均值。

显微镜倍数是指使用显微镜观察血液标本时所使用的放大倍数。

血液稀释倍数是指将血液标本与药液稀释后的倍数。

现在，让我们详细了解一下每个参数的具体含义。

首先，平均每个小方格中的血小板数是通过在显微镜下观察到的血小板数目计算得出的。

在仔细观察血液标本时，我们可以清晰地看到许多小方格，每个小方格内有多个血小板。

通过统计多个小方格内的血小板数目，求得平均数，可以更准确地得到每个小方格中的血小板数。

其次，显微镜倍数是指使用显微镜观察血液标本时所使用的放大倍数。

不同的显微镜具有不同的放大倍数，而不同的放大倍数会影响到我们观察到的血小板数目。

因此，在进行血小板计算时，需要根据所使用的显微镜倍数进行相应的调整。

最后，血液稀释倍数是指将血液标本与药液稀释后的倍数。

稀释血液标本可以帮助我们更清晰地观察到血小板，从而提高计算的准确性。

在计算时，我们需要考虑到血液稀释倍数对最终的计算结果的影响。

通过使用血小板计算公式，医生可以更加准确地评估患者的血小板功能和疾病状态。

根据不同的计算结果，医生可以及时采取相应的治疗措施，以降低患者的血小板病风险。

同时，血小板计算公式也可以为科学研究提供重要参考数据，帮助科研人员深入探索血小板相关的疾病机制。

血小板计数参考方法血小板计数是衡量一个人血液中血小板数量的一个重要指标。

血小板是血液中的细胞片段，主要功能是在凝血过程中起到重要的作用。

正常血小板计数范围可以根据不同的性别、年龄和健康状况而有所不同。

以下是一些常见的血小板计数参考方法。

1.血常规检查：血常规检查是最常用的测量血小板计数的方法之一、这种方法通过机器自动计数血液中的血小板数量，并以每立方毫升血液中的计数来表示。

正常血小板计数范围通常为150,000-450,000个/微升。

2.骨髓检查：骨髓检查是通过从骨髓中取样来验证和评估血小板计数的方法之一、这种方法可以进一步了解血小板的生成和释放情况，帮助医生确定是否存在任何骨髓异常导致血小板计数增加或减少的原因。

3.血脂检测：血脂检测是通过测量患者血液中的胆固醇和脂蛋白水平来评估血小板计数的方法之一、高血脂症的患者往往有较高的血小板计数，因为血脂异常可以导致血小板活化和聚集。

4.家族史：有些遗传病和疾病会导致血小板计数异常。

了解患者的家族史可以帮助医生确定是否存在潜在的遗传因素导致血小板计数的变化。

5.疾病病史：一些疾病和病症会导致血小板计数异常。

例如，白血病、骨髓纤维化和自身免疫性血小板减少性紫癜等疾病通常伴随着血小板计数的减少。

另一方面，感染、炎症和创伤可能导致血小板计数升高。

6.生活方式和饮食：生活方式和饮食也可能影响血小板计数。

抽烟、饮酒、使用一些药物和摄入不平衡的饮食可能会导致血小板计数异常。

总之，血小板计数是评估一个人血液系统健康状况的重要指标之一、通过血常规检查、骨髓检查、血脂检查、家族史和疾病病史等方法，可以对血小板计数进行评估，并帮助医生确定是否存在任何潜在的异常或疾病。

对于血小板计数异常的患者，及时的诊断和治疗非常重要，以维持血液系统的正常功能和健康。

血小板计数临床意义
参考范围：(100～300)×109/L
临床意义
1.血小板减少
(1)血小板生成减少再障、急性白血病、骨髓转移瘤、骨髓纤维化。

(2)血小板破坏过多特发性(自身免疫性)血小板减少性紫癜、脾
功能亢进、体外循环。

(3)血小板分布异常脾肿大、各种原因引起的血液稀释。

(4)其他疾病弥散性血管内凝血、阵发性睡眠血红蛋白尿症、某
些感染(如伤寒、黑热病、麻疹、出血热多尿期前、传染性单核细胞增
多症、粟粒性结核和败血症)、出血性疾病(如血友病、坏血病、阻塞
性黄疸、过敏性紫癜)。

(5)用药药物中毒或过敏引起。

如甲砜霉素有骨髓抑制作用，可
引起血小板减少;抗血小板药噻氯匹定、阿司匹林也可引起血小板减少;应用某些抗肿瘤药、抗生素、磺胺药、细胞毒性药可引起血小板减少。

2.血小板增多
(1)疾病见于原发性血小板增多症、慢性粒细胞性白血病、真性
红细胞增多症、多发性骨髓瘤、骨髓增生病、类白血病反应、霍奇金病、恶性肿瘤早期、溃疡性结肠炎等。

(2)创伤急性失血性贫血，脾摘除术后、骨折、出血后，可见一过性血小板增多。

准确计数血小板的方法及临床意义准确计数血小板是现阶段临床医学检验的关注热点，传统计数血小板数值不准确、结果不可靠等缺陷很大程度上损害了需求输血小板群体的切身利益，十分不利于医学检验的可持续发展；所以重视准确计数血小板方法及其本身所具有的临床价值意义便显的极为必要。

结合实际来看，血小板本身体积很小，且具有明显的无色、极易粘附等特质，往往在人体皮肤破损，血液流出时，血小板便会迅速粘附血管壁，所以一直以来血小板的采集检测难度也比较大，以往的很多采血或者计数方法，都无法达到准确计数血小板的效果；但近年来随着医疗科技的不断发展，各种医学技术的全面完善，准确计数血小板也逐渐成为现实。

比如现在的免疫学测定和二维激光散射方法便可以达到准确计数血小板的目的。

1.准确计数血小板的方法1.1利用免疫学测定准确计数血小板目前准确计数血小板方法主要是以免疫学测定和二维激光散射来体现，其中免疫学测定最早自上世纪80年代末时出现，近年来随着医疗技术的进步，该方法正式开始应用至临床实践中，这个过程中先以浓度对等荧光微球替换红细胞，之后求出血小板所占荧光微球的比例数值，再用所求数值乘荧光微球浓度，最终便可得到比较准确的血小板数，期间所使用主要设备即血液分析仪，按照相应流程选取质量参数达标的血液分析仪，直接计数荧光血小板，便可保障测定结果的准确性和可靠性完全达到预期。

1.2二维激光散射法准确计数血小板二位激光散射法准确计数血小板较之免疫学测定而言，现代化特征更加明显，其原理主要是按照同质性球体光散射MIE 理论，在球形状血小板逐个经过激光照射区域期间，从两个不同的角度做实时测定，比如高角度观察细胞折射系数，低角度分析相应细胞大小等；以此达到精确计数血小板的目的。

且该方法可以在无需荧光标记抗体的基础上，通过二维散图有效区分测定血小板，使准确计数血小板的实效性和便捷性得到进一步提升。

1.准确计数血小板的临床价值意义2.1准确计数血小板结果高于正常水平的临床价值意义（1）准确计数血小板结果高于正常水平的临床价值意义，最常见的即其为恶性肿瘤患者病情、预后情况提供了实时参考指标，比如中晚期恶性肿瘤患者体内血液往往处于高凝状，以肺癌为例，晚期肺癌患者血小板增多的现象明显超过早期肺癌患者，且患者血小板增多往往也预示着相应患者预后不佳的风险会呈直线上升。

第三节血小板检查一、选择题【A题型】1.血小板计数的适应证不包括·A.不明原因的出血B.排除血友病C.监测病人的化疗和放疗过程D.疑为骨髓增生E.疑为血小板破坏增加2.血小板计数首选的稀释液是A.高铁氰化钾B.复方碘C.草酸钱D.复方尿素E.稀盐酸3.血小板计数的参考方法为A.普通光学显微镜直接计数法B.普通光学显微镜间接计数法C.免疫法D.血细胞分析仪法E.相差显微镜直接计数法4.血小板计数的稀释液必须具备的条件不包括A.能有效抑制血液凝固B.能防止血小板形态变化C.能完全破坏红细胞D.组成复杂并易于保存E.不利于细菌生长5.可导致血小板假性减少的是A.巨大血小板B.小红细胞C.红细胞碎片D.淋巴细胞核碎片E.细胞质碎片6.可导致血小板假性增多的是A.卫星现象B.红细胞碎片C.巨大血小板D.异常蛋白血症E.血小板聚集或凝集7.血小板计数规范化操作不包括A.充液前必须轻轻摇动血小板悬液2分钟B.显微镜下观察光线要亮C.器材必须洁净、干燥D.灌人计数池后静置15分钟再计数E.采血1小时后完成计数8.血小板计数生理性变化正确的是A.午后低，早晨高B.春季低，冬季高C.月经后低，月经前高D.静脉血低，毛细血管血高E.妊娠中晚期低，分娩后高9.可引起自发性出血的血小板计数小于A. 400 X 109/LB.200 X 109/LC. 100 X 109/LD.60 X 109/LE. 10 X 109/L10.常有血栓形成危险的血小板计数大于A. 1000 X 109/LB.400 X 109/LC. 300 X 109/LD.100 X 109/LE. 60 X 109/L11.血小板增多常见于A.慢性粒细胞性白血病B.血栓性血小板减少性紫癜C.脾功能亢进D.急性白血病E.放射性损伤12.血小板反应性增多见于A.慢性粒细胞性白血病B.原发性血小板增多症C.急性化脓性感染D.真性红细胞增多症E.脾切除13.不能导致血小板生成障碍的是A.急性白血病B.系统性红斑狼疮C.再生障碍性贫血D巨幼细胞性贫血 E.恶性肿瘤骨髓转移.14.导致血小板消耗过多的是A.脾肿大B.血液被稀释C一巨大血小板综合征 D.脾功能亢进 E.弥漫性血管内凝血15.不是原发性血小板增多的是A.常见脾肿大B.为干细胞缺陷C.血小板功能减低D.并发症少E.血小板常大于1000 X 109 /L16.不是继发性血小板增多的是A.多为反应性B.脾肿大罕见C.并发症多见D.血小板功能正常E.血小板常小于1000 X 109 /L17.血小板计数质量保证的主要原则是A.可选用尿素稀释液B.避免血小板被激活一和破坏C.准确辨认血小板D.可用肝素抗凝血E.血标本可以低温保存18.普通光镜直接计数血小板，首选的是A.生理盐水B.复方尿素稀释液C.草酸按稀释液D.高铁氰化钾稀释液E.自动血细胞分析仪稀释液19.关于血小板的主要功能，错误的是A.粘附功能B.聚集功能C.促进血块收缩D.维持血管内皮完整E.抗凝血功能二、问答题 1.血小板计数的稀释液必备的条件有哪些? 2.如何鉴别原发性血小板增多和继发性血小板增多?3.如何评价普通显微镜直接计数血小板的方法?参考答案：BCEDA BBBEA ACBED CBCE1.血小板计数的稀释液必备的条件有哪些?①能有效抑制凝血;②迅速固定血小板，防止血小板聚集和形态变化;③溶血性稀释液要能完全破坏红细胞;④组成简单并易于保存;⑤不利于细菌生长。