人血管内皮细胞生长因子
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Mod Diagn Treat 现代诊断与治疗2020 Jan 31 (1)•131 •相关。
吸烟是导致CHD发生的重要因素,也是CHD 患者PCI术后再狭窄的危险因素。
长期吸烟的患者 机体氧化能力降低,血管调节功能变弱,促进血管内 膜增生,从而促进ISR的发生W。
糖尿病会引起机体 代谢紊乱并损伤血管内皮,致使内皮功能不全,是导 致ISR发生的重要因素[9]。
高血压是指血压异常升 高的慢性疾病本研究结果显示,狭窄组中有30 例患者有合并高血压,占比78.95%,提示高血压是 诱发ISR的重要因素之一。
高血压可引起血管壁压 力持续升高,损伤血管内皮细胞,加剧动脉粥样硬化,从而导致ISR的发生%。
由此可见,戒烟、合理饮食,控制血糖、降压是降低冠心病患者PCI术后ISR发 生风险的关键所在。
此外,狭窄组支架直径显著小于 非狭窄组,提示置人较大直径的支架可降低ISR的发 生风险。
吴小朋等[12]研究发现,支架直径是ISR的影 响因素,置入较长直径的支架可有效减少ISR的发生 率。
本研究结果与之相符。
综上所述,在冠心病患者接受p e r冶疗期间对 吸烟、糖尿病、高血压、置入支架直径等相关危险因 素提前做出干预,可有效降低ISR的发生风险,对患 者术后恢复有积极的临床意义。
.参考文献:[1]高润霖.进一步改善稳定性冠心病的诊治:浅谈"中国稳定性冠心病诊断与治疗指南"亮点⑴.中华心血管病杂志,2018,46(11):833- 836.[2] 高立建,陈纪林.从循证医学的角度看冠状动脉旁路移植术与经皮冠状动脉介入治疗之争⑴.中国循环杂志,2018,33(12):1159-1161. [3] 王聪霞,范雅洁.冠心病血管内皮损伤与血管重构的研究进展⑴.西安交通大学学报(医学版)2018,39⑷:455-458.[4] 吴天源,李韶南,罗义,等.血清醛固酮对冠心病患者介入术后心血管事件和支架内再狭窄的预测价值[J].实用医学杂志,2018,34(2):227-230.[5] 王洪涛,余文华,盛燕.静息心电图ST-T改变及静息心率与冠心病严重程度的相关性[J].中国老年学杂志,2019,39(12):2841-2844. [6;|熊青,陈集志,王洪如.684例冠心病患者P C I术后再狭窄发生率 影响因素分析[J].现代诊断与治疗,2018,29(24):4024-4026.[7]廖成标,蒋爱忠,乐建华,等.冠心病合并糖尿病患者支架植人后的预后效果探究[J].现代诊断与治疗,2017,28( 14):2638-2639.[8:]王娟,许浩博,乔树宾,等.吸烟的冠心病患者冠状动脉病变特点 及经皮冠状动脉介入治疗后长期预后评价[J].中国循环杂志,2018,33(11):1〇53-1058.[9] 李强,李新阳,冯文化.血清晚期氧化蛋白产物对冠心病合并糖尿病患者冠状动脉支架植入术后支架内再狭窄的预测价值[J].中国 糖尿病杂志,2018,26(5):394-397.[10] 杨珍珍,赵存瑞,张锦,等.从血脂控制状况与支架内再狭窄的相关性看心脏康复管理的重要性[J].临床心血管病杂志,2017,33(7):650-652.[11] 刘越,姚懿,宋莹,等.入院收缩压升高对行冠状动脉介入治疗的急性冠状动脉综合征患者远期预后的影响[J].中国循环杂 志,20丨8,33(5):429-434.[12] 吴小朋,孙慎杰,张娟,等.经皮冠状动脉介入治疗术患者发生支架内再狭窄的影响因素研究[J].中国全科医学,2015,18(16):1918- 1921.收稿曰期:2019-03-15血管内皮生长因子在乳腺癌中的表达及临床意义曹娟(江苏省连云港市赣榆区人民医院病理科,江苏连云港222100)摘要:目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在乳腺癌中的表达以及临床意义。
万方数据万方数据万方数据筮至翅隆菱笠:查笪内匮生堡圈王垄自堕疸史丝婴窒堂星113(12):2835—2842.[15]MAL,PERINIR,MCKNIGHTW,eta1.Proteitmse-activa-tedreceptors1and4counter-regulateendostatinandVEGFreleasefromhumanplatelets[J].ProcNailAcadSciUSA,2005,102(1):216—220.[16]ITALIANOJE,RICHARDSONJL,PATELHE'ITS。
eta1.AngiogenesisisregulatedbyanovelITKX蛔rlISm:pro-andall・tiangiogenicproteinsareorganizedintoseparateplateletalphagranulesanddifferentiallyreleased[J].Blood,2008,111(3):1227—1233.[17]CAINEGJ,LIPGJ,BIAMNAD.Platelet.derivedVEGF,Fit-1。
anglopolefin-1andP-selectininbreastandprostatecancer..furtherevidenceforaroleofplateletsinttmlouran-giogenesis[J].AnnMed,2004,36(4):273—277.[18]AGUAYOA。
KA.NⅡAIUIANH,MANSHOURIT,eta1.An.giogenesisinacuteandchronicleukemiasandmydodysplasficsyndromes[J].Blood,2000,96(6):2240—2245.[19]KARPJE。
PILlR,GOJOI,eta1.TargetingvasculareIl—dothefialgrowthfactorforrelapsedandrefractoryadultacutemyelogenousleukemias;therapywithsequential1-beta-d-锄-binofuranosylcytosine;mitoxantrone,andbevacizmwab[J].ClinCancerRes,2004,10(11):3577—3585.[203GERBERHP,MALIKAK,SOLARGP,eta1.VEGF睁g山她haematopoieticstemcellsurvivalbyaninternalall-toerineloopmechartism[J].Nature,2002。
第34卷第4期吉林医药学院学报V01.34N o.4—286—2013年08月J our nal of Ji l i n M edi cal C ol l e ge A ug.2013文章编号:1673—2995(2013)04-0286-03血管内皮生长因子与几种肿瘤发生发展的关系综述T he r el a t i ons hi p of va s cul a r endot hel i al gr ow t h f ac t or and t he devel opm ent of s eve r al ki nds of c a nce r s姜亚磊1,闫晓英1,狄烊1,孟天娇1综述,金宏2,齐玲2+审校(吉林医药学院:1.2010级临床本科班,2.病理教研室,吉林吉林132013)摘要:血管内皮生长因子是一种分泌性糖蛋白,其具有促进新生血管形成的作用,新生血管的形成是肿瘤生长的必要条件,因此,血管内皮生长因子在肿瘤的发生、发展中起到了十分重要的作用。
本文针对血管内皮生长因子与几种常见肿瘤发生发展的关系进行综述,以便更深入探讨血管内皮生长因子与肿瘤的关系。
关键词:血管内皮生长因子;肿瘤;血管生成;发展中图分类号:R363.1文献标识码:A血管内皮生长因子(vasc ul ar endot hel i a l gr ow t h f act or,V E G F)又称血管通透因子(vas cul ar per m eabi l i—t yf act or,V PF)…,它是一种分子量为40000—45000的分泌性糖蛋白,可以增加微血管的通透性,促进血浆纤维蛋白原的外渗,产生纤维素网络,这有利于肿瘤间质及新生血管的形成;还可以刺激内皮细胞增殖、迁移,诱导内皮细胞表达蛋白水解酶、组织因子、基金项目:吉林省教育厅项目(2012330);吉林医药学院大学生科研基金项目(201206).作者简介:姜亚磊(1990一),男(汉族),在读本科.通讯作者:齐玲(1974一),女(汉族),副教授,博士.基质胶原酶等,这不仅有利于新生血管的形成,而且有利于肿瘤细胞脱落进入血管或向邻近纤维蛋白和结缔组织基质扩散。
药(质子泵抑制剂或H 2受体拮抗剂)加2种抗生素(新大环内酯类、羟氨苄青霉素、硝基咪唑类、呋喃唑酮)。
适应症为消化性溃疡、慢性活动性胃炎、M AL T 淋巴瘤、胃癌高发区慢性萎缩性胃炎、儿童HP 感染者。
停药1个月以上复查阴性者为根除。
6 HP 疫苗的研制我国学者最先证明HP 可通过免疫预防,其免疫保护作用主要来自粘膜免疫系统。
当前疫苗研制工作正在世界范围进行,最近法国和美国联合研制了一种安全、有免疫性的HP 疫苗,国内亦有多家单位正在研制,但均处于动物试验阶段〔9〕。
综上所述,自发现HP 15年来,对其研究工作取得了可喜的成果。
今天的研究方向是,HP 菌株的生物分型与毒力鉴定、HP 致病和致癌机制的基础研究、准确性高和创伤性小的诊断方法、价廉高效的根除方案以及HP 疫苗的研制与应用等。
7 参考文献11汪志鸿1幽门螺杆菌相关疾病的研究进展1中华医院管理杂志 1997;13(12):760121D ixon M F ,et al .Classif ication and gradi ng of gastr itis :The updated Sydney Syste m .Am J Sury Pathol 1996;20:1161131M adara ,JL .M igration of neutrophil through epitheli almonoayers.Trends Cell Biol 1994;4:7141Lanas A I ,et al .R isk factors assoc i ated with refactory pep -tic ulcers.Gastroen terol 1995;109:1124151黄自平,等1幽门螺杆菌感染与胃粘膜淋巴组织增生1中华内科杂志 1996;9:609161王承党,等1幽门螺杆菌感染对功能性消化不良患者胃排空功能的影响1胃肠病学 1997;2(1):16171侯安存,等1小儿幽门螺杆菌感染调查1中华流行病学杂志 1995;16(4):237181周殿元,等1关于幽门螺杆菌若干问题的意见1中华消化杂志 1997:17(5):287191刘岱青,等1幽门螺杆菌与疫菌研究现状及前景 中华医学信息导报 1998:13(5):21(1998-03-26收稿)血管内皮生长因子与肿瘤山东省立医院(250021) 吴泰璜 苏忠学 目前,已分离纯化出20多种血管生成因子及相关因子,包括酸性成纤维细胞生长因子(aFGF )、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF )、转化生长因子Α Β(TGF Α Β)、肿瘤坏死因子Α(TNF Α)、血小板来源的内皮细胞生长因子(PD GF )、血管内皮生长因子(VEGF )等。
血管内皮生长因子与热休克蛋白90α和胸苷激酶1在肝恶性肿瘤临床诊断中的应用价值探讨陈丹1陈博2陈涌泉31中国人民解放军陆军第七十三集团军医院检验科,厦门361003;2安徽医科大学附属巢湖医院检验科,合肥238000;3福建医科大学附属厦门弘爱医院医学检验中心361006通信作者:陈涌泉,Email:【摘要】目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、热休克蛋白90α(heat shock protein90α,HSP90α)和胸苷激酶1(thymidine kinase1,TK1)在肝恶性肿瘤临床诊断中的应用价值。
方法选取2018年7月至2020年6月安徽医科大学附属巢湖医院收治的肝恶性肿瘤患者[32例,男性23例,女性9例,年龄(47.80±11.78)岁]、肝良性疾病患者[32例,男性21例,女性11例,年龄(49.24±13.22)岁]和同时期体检健康人[32例,男性22例,女性10例,年龄(48.32±12.65)岁]作为研究对象,检测所有研究对象初诊血清样本的VEGF、HSP90α和TK1水平,分析其在肝恶性肿瘤、肝良性疾病患者和健康人群血清中的表达情况及其鉴别诊断效能。
结果肝恶性肿瘤组VEGF、HSP90α和TK1水平分别为284.58(78.40,604.37)pg/ml、122.03(88.76,197.16)μg/ml和2.21(0.89,3.60)pmol/L,肝良性疾病组VEGF、HSP90α和TK1水平分别为120.58(67.64,196.38)pg/ml、77.32(53.43,103.65)μg/ml和0.71(0.23,1.84)pmol/L,健康对照组VEGF、HSP90α和TK1水平分别为122.54(63.52,183.43)pg/ml、65.38(49.86,98.57)μg/ml和0.81(0.29,1.78)pmol/L。
人血管内皮细胞生长因子A(VEGF-A)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!
预期应用
ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中VEGF-A含量。
实验原理
用纯化的VEGF-A抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的VEGF-A抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的VEGF-A呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制
1、酶标板:一块(96孔)
2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为2,000pg/ml,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成2,000pg/ml,1,000pg/ml,500 pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,62.5pg/ml,31.2pg/ml,样品稀释液直接作为空白孔0pg/ml。
如配制1,000pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)2,000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×20ml。
4、检测稀释液A:1×10ml。
5、检测稀释液B:1×10ml。
6、检测溶液A:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液A1:100稀释(如:10检测溶液A/990检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
7、检测溶液B:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
8、底物溶液:1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液:1×10ml/瓶(2mol/L H2SO4)。
11、覆膜:5张
12、使用说明书:1份
自备物品
1、酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、微量加液器及吸头,EP管
3、蒸馏水或去离子水,滤纸
标本的采集及保存
1、血清:全血标本请于室温放置2小时或4过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
2、血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于1000g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
3、细胞培养物上清或其它生物标本:请1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20或-80保存,但应避免反复冻融。
注:以上标本均应密封保存,4保存应小于1周,-20不应超过1个月,-80不应超过2个月;标本溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤
实验开始前,各试剂均应平衡至室温,试剂不能直接在37溶解;试剂或样品配制时,均需
充分混匀,混匀时尽量避免起泡。
实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1、加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液100,余孔分别加标准品或待测样品100,注意不要有气泡,加样时将样品加于酶标板底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37温育2小时。
为保证实验结果有效
性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2、弃去液体,甩干,不用洗涤。
每孔加检测溶液A工作液100(临用前配制),酶标板加上覆膜,37温育1小时。
3、弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4、每孔加检测溶液B工作液(临用前配制)100,加上覆膜,37温育1小时。
5、弃去孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6、每孔加底物溶液90,酶标板加上覆膜37避光显色(反应时间控制在15-30分钟,当标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显时,即可终止)。
7、每孔加终止溶液50,终止反应,此时蓝色立转黄色。
终止液的加入顺序应尽量与底物
液的加入顺序相同。
8、立即用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度(值)。
注:
1、试剂准备:所有试剂在使用前应平衡至室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。
实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2、加样:加样或加试剂时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预温育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
一次加样时间(包括标准品及所有样品)最好控制在10分钟内。
推荐设置复孔进行实验。
3、温育:为防止样品蒸发,实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内,以避免液体蒸发;
洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的温育时间和温度。
4、洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响最后的酶标仪读数。
5、试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配制使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。
请精确配制标准品及工作液,尽量不要微量配制(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10),以避免由于不准确稀释而造成浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液。
6、反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7、底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
洗板方法
1、手工洗板方法:将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内,浸泡1-2分钟,吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体,在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;根据需要,重复此过程数次。
2、自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
特异性
本试剂盒可同时检测重组或天然的人VEGF-A,且与其它相关蛋白无交叉反应。
计算
各标准品及样本OD值扣除空白孔OD值后作图(七点图),如设置复孔,则应取其平均值计算。
以标准品的浓度为纵坐标(对数坐标),OD值为横坐标(对数坐标),在对数坐标纸上绘出标准曲线。
推荐使用专业制作曲线软件进行分析,如curve expert1.3,根据样品
OD值,由标准曲线查出相应的浓度,乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
说明
1.在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。
所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
2.小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。
请注意在吸取标本/标准品,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
而且,洗涤不充分将影响试验结果。
3.试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,具体以标签上的标示为准。
4.浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
5.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
6.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
7.所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
8.有效期:6个月。