家兔血液凝固
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XX:X海林〔0106〕杨秀芳(0107) 小组号:第一大组第二小组小组人员:X海林、杨秀芳、陈坤、陈炳光、龚意珍日期:2021年9月20日室内温度:25℃湿度:58 大气压强:标准大气压一、实验名称:血液凝固二、实验目的:了解血液凝固的根本过程及其影响因素三、实验对象:家兔四、实验步骤和方法(略)五、实验结果:1、观察纤维蛋白在凝血过程中的作用:实验结果发现静置杯内的血液发生凝固;搅拌杯内血液经搅拌过后,毛刷上见到凝固的血块,用水冲洗后发现毛刷上有白色的丝状物。
2、观察影响血液凝固的因素:表1 影响血液凝固的因素实验条件凝血时间粗糙面棉花少许5分4秒石蜡油润滑整个试管外表>20分温度37℃3分4秒浸在盛有碎冰块的烧杯中>20分肝素8U〔加血后摇匀〕>20分草酸钾1~2mg〔加血后摇匀〕>20分从表1可以看出:在粗糙面比照实验中,加有棉花的试管血液在较短的时间内就已凝固,而用石蜡油润滑过的试管中的血液在实验时间到20分钟时还未凝固;在温度比照的实验中,水浴37℃试管中的血液凝固较快,而在0℃中水浴的血液在实验时间到20分钟时还未凝固;血液中参加肝素和草酸钾的实验均是实验时间到了20分钟了还未见凝固。
3、观察内源性和外源性凝血的过程:表2 内源性和外源性凝血途径的观察试剂第一管第二管第三管富血小板血浆0.2ml少血小板血浆0.2ml 0.2ml 生理盐水0.2ml 0.2ml兔脑粉悬液0.2ml0.025mol/LCaCl20.2ml 0.2ml 0.2ml血浆凝固时间3分15秒5分15秒1分从表2可以看出:三支试管中第三支凝固时间最短然后到第一支,最后才是第二支。
七、实验讨论:血液凝固是指血液由流动状态变成不能流动的凝胶状态的过程。
血浆与组织中有直接参与血液凝固的凝血因子,血液凝固是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成的凝血酶,最终使纤维蛋白原变为纤维蛋白的过程。
因此,凝血过程可分为三个过程。
1. 了解血液凝固的基本过程。
2. 掌握影响血液凝固的因素。
3. 学习血液凝固实验的操作方法。
二、实验原理血液凝固是指血液由流动的液体状态转变为不流动的凝胶状态的过程。
这个过程是一个复杂的酶促反应过程,涉及到多种凝血因子和细胞参与。
血液凝固分为内源性凝血和外源性凝血两种途径。
本实验主要观察内源性凝血途径。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:家兔、肝素、草酸钾、生理盐水、液状石蜡、小试管、小烧杯、竹签、秒表、试管架、哺乳动物手术器械、兔手术台、动脉夹、塑料动脉插管、线、水浴器等。
2. 实验仪器:显微镜、离心机、血凝仪等。
四、实验步骤1. 家兔麻醉:按1g/kg的剂量将乌拉坦(氨基甲酸乙酯)柚缘静脉缓慢注入,观察那肌张力、口观与角帆射的变化。
动物麻醉后背位固定于兔手术台上。
2. 颈总动脉插管:在气HW侧辨别肋离颈总动脉,颈总动脉下防两条线备用。
颈总动脉的近心端做一动脉夹,在动脉夹远心端做一巨动脉装勺3cm处结扎,插入塑料动脉插管。
3. 采集血液:打开动脉夹,使血液流入小试管,加入适量的肝素抗凝。
4. 观察血液凝固时间:将血液分别加入小试管中,置于37℃水浴器中,观察血液凝固所需时间。
5. 观察影响血液凝固的因素:分别加入草酸钾、液状石蜡、生理盐水等,观察血液凝固时间的变化。
6. 比较内源性凝血和外源性凝血:将血液分为两组,一组加入组织因子,另一组不加,观察两组血液凝固时间的变化。
7. 数据处理:记录各组血液凝固时间,并进行统计分析。
1. 家兔血液凝固时间约为3-5分钟。
2. 加入草酸钾后,血液凝固时间延长。
3. 加入液状石蜡后,血液凝固时间缩短。
4. 加入生理盐水后,血液凝固时间无变化。
5. 加入组织因子后,血液凝固时间明显缩短。
六、实验讨论1. 血液凝固是一个复杂的酶促反应过程,涉及到多种凝血因子和细胞参与。
2. 草酸钾可以与钙离子结合,降低血液中钙离子的浓度,从而延缓血液凝固。
3. 液状石蜡可以降低血液的粘度,加快血液流动,从而缩短血液凝固时间。
家兔血液凝固实验报告家兔血液凝固实验报告引言:血液凝固是人体内重要的生理过程之一,它在维持血管完整性和止血方面起着关键作用。
为了更好地理解血液凝固过程,我们进行了一项家兔血液凝固实验。
本报告旨在详细描述实验步骤、结果和讨论,以及对实验结果的解释。
实验目的:通过观察家兔血液凝固过程,了解血液凝固的机制和影响因素。
实验材料和方法:1. 实验材料:家兔、注射器、试管、止血带、细胞计数板、显微镜等。
2. 实验步骤:a. 选择一只健康的家兔,确保它处于安静状态。
b. 用止血带约束家兔的前腿,以便容易抽取血液。
c. 用消毒酒精擦拭家兔的耳朵,以减少感染的风险。
d. 使用注射器从家兔的耳朵上抽取适量的血液,并将其转移到试管中。
e. 在试管中观察血液的凝固过程。
记录凝固开始的时间,并定期观察血液的状态。
f. 使用细胞计数板和显微镜观察血液中的血小板数量和形态变化。
实验结果:在实验过程中,我们观察到了以下现象:1. 血液凝固的开始:家兔血液在接触到空气后很快开始凝固,凝固时间约为2-3分钟。
2. 凝固过程的变化:血液逐渐由液态变为凝固状态,形成了血块。
3. 血小板的变化:在血液凝固过程中,我们观察到血小板数量的显著增加,并且它们聚集在血块周围。
讨论和解释:1. 凝固开始的时间:家兔血液相对较快地开始凝固,这可能是由于家兔的血液中含有较高浓度的凝血因子。
凝血因子是一类蛋白质,它们在血液凝固过程中起着重要的作用。
2. 血小板的作用:血小板是血液中的细胞碎片,它们在血液凝固中起着至关重要的作用。
当血管受损时,血小板会聚集在损伤部位,形成血小板血栓,从而阻止出血。
3. 血液凝固的调节:血液凝固是一个复杂的过程,需要一系列凝血因子的相互作用。
在正常情况下,机体能够通过激活和抑制凝血因子来维持血液凝固的平衡。
如果这个平衡被打破,可能会导致出血或血栓形成等疾病。
结论:通过家兔血液凝固实验,我们对血液凝固的过程和机制有了更深入的了解。
机能实验:影响血液凝固的因素(此作业得分94分仅供参考)一、实验目的1、学习家兔的基本手术操作。
2、观察血液凝固的现象。
3、了解血液凝固的基本过程。
4、观察某些因素对血液凝固的影响。
二、实验原理1、血液凝固:血液由流动液体状态变成不流动的胶冻状态,需要多种凝血因子的参与一系列复杂的酶促反应过程。
2、分为凝血酶原激活物的形成、凝血酶原激活生成凝血酶和纤维蛋白原转变为纤维蛋白等三个阶段。
3、分为内源性凝血途径和外源性凝血途径。
三、实验材料1、实验对象:家兔。
2、实验器材与药品:哺乳动物实验手术器械一套,25ml小烧杯2个,竹签,清洁小试管9支,水浴装置一套,冰块,棉花,石蜡油,肝素,草酸钾,0.025mol/L的CaCl2溶液,肺组织悬液,富血小板血浆,少血小板血浆,生理盐水等。
四、实验方法和观察项目1、动物手术(1)将家兔称重后,按5ml/kg的剂量自耳缘静脉缓慢注射20%乌拉坦。
(2)麻醉完成后将家兔以仰卧位固定于兔手术台上,将颈部被毛用粗剪剪去。
(3)在颈部腹面正中从甲状软骨水平向后至胸骨上缘做5-7cm的纵行切口,一次钝性分离皮下组织、肌肉及气管表面结缔组织直至暴露气管。
分离气管,行气管插管术。
(4)分离一侧的颈总动脉,将颈总动脉游离2-3cm,穿双线备用。
用其中一线结扎劲总动脉远心端,近心端用动脉夹闭。
用眼科剪在颈总动脉靠近远心端结扎线处剪一斜口(约45°),将动脉插管向心脏方向插入动脉内约1cm,用另一线结扎,已备取血。
2、实验准备按结果记录表准备好8个试管,并对人员进行分工。
3、取血打开动脉夹,经颈总动脉插管放血入个试管中,每支试管采血约15ml。
注意及时记录采血完成时间并将各试管尽快置于其实验条件下,所有试管加入血液后都要充分摇匀。
4、理化因素对血液凝固的影响及其结果观察接触面粗糙程度、温度以及试剂对血液凝固的影响观察各试管内血液凝固所所需时间。
在每支试管采血完成后开始计时,每隔30s将试管轻轻倾斜1次,观察试管中的血液是否凝固,发现血液呈凝胶状不再流动时停止计时,以此得到各试管血液凝固所需时间。
一、实验目的通过本实验,了解家兔血液凝固的基本过程,探讨影响血液凝固的因素,为临床诊断和疾病预防提供理论依据。
二、实验材料1. 实验动物:家兔一只2. 实验试剂:凝血酶、生理盐水、EDTA-Na2、抗凝剂、试管、试管架、滴管、毛刷等3. 实验仪器:恒温箱、离心机、显微镜等三、实验方法1. 家兔准备:将家兔进行麻醉,并采取耳缘静脉血,加入抗凝剂进行抗凝处理。
2. 血液分离:将抗凝血液离心,分离出血清。
3. 血液凝固实验:(1)取三支试管,分别标记为A、B、C;(2)向A试管中加入1ml家兔血清,B试管中加入1ml生理盐水,C试管中加入1mlEDTA-Na2溶液;(3)向A、B、C试管中分别加入1滴凝血酶;(4)观察各试管中血液凝固情况。
4. 影响因素实验:(1)温度影响实验:将A、B、C试管分别置于0℃、25℃、45℃的恒温箱中,观察血液凝固情况;(2)pH值影响实验:向A、B、C试管中分别加入1滴1.0M HCl、1.0M NaOH、1.0M磷酸盐缓冲液(pH值约为7.4),观察血液凝固情况;(3)离子强度影响实验:向A、B、C试管中分别加入1滴1.0M NaCl、1.0M KCl、1.0M CaCl2,观察血液凝固情况。
四、实验结果1. 血液凝固实验结果:A试管:血液凝固,形成血凝块;B试管:血液不凝固;C试管:血液凝固,形成血凝块。
2. 影响因素实验结果:(1)温度影响实验:A试管(0℃):血液凝固,但凝固速度较慢;B试管(25℃):血液凝固,凝固速度适中;C试管(45℃):血液凝固,凝固速度较快;(2)pH值影响实验:A试管(1.0M HCl):血液凝固,凝固速度较快;B试管(1.0M NaOH):血液凝固,凝固速度较慢;C试管(1.0M磷酸盐缓冲液):血液凝固,凝固速度适中;(3)离子强度影响实验:A试管(1.0M NaCl):血液凝固,凝固速度较快;B试管(1.0M KCl):血液凝固,凝固速度适中;C试管(1.0M CaCl2):血液凝固,凝固速度较慢。
家兔血液凝固实验报告
目录
1. 简介
1.1 背景
1.2 目的
1.3 方法
2. 实验结果
2.1 实验组结果
2.2 对照组结果
3. 讨论
3.1 结果分析
3.2 结果解释
4. 结论
简介
背景
家兔是常见的实验动物之一,可用于进行各种生物学研究。
血液凝固是一个重要的生理过程,对血液系统功能的研究有着重要意义。
目的
本实验旨在观察家兔血液的凝固情况,了解其凝血机制,为进一步研究血液系统提供参考数据。
方法
在实验中,我们将分别收集实验组和对照组的家兔血液样本,加入不同的试剂后观察其凝固时间,并进行比较分析。
实验结果
实验组结果
实验组的家兔血液在加入试剂后观察到明显的凝固现象,凝固时间较短,形成坚实的凝块。
对照组结果
对照组的家兔血液在相同条件下未观察到明显的凝固现象,血液保持
液态状态,未形成凝块。
讨论
结果分析
实验结果表明,实验组的试剂对家兔血液具有促使凝固的作用,可能
与其中所含的成分有关。
而对照组未观察到凝固现象,则可能是由于
缺乏促凝因子。
结果解释
家兔血液的凝固机制复杂,包括多种凝血因子和抗凝机制参与其中。
通过实验可以初步了解这一过程,为进一步研究提供基础。
结论
本实验通过观察家兔血液的凝固情况,揭示了家兔凝血机制的一部分,为深入研究血液系统提供了参考。
姓名:吴海林(0106)杨秀芳(0107) 小组号:第一大组第二小组小组人员:吴海林、杨秀芳、陈坤、陈炳光、龚意珍日期:2012年9月20日室内温度:25℃湿度:58 大气压强:标准大气压一、实验名称:血液凝固二、实验目的:了解血液凝固的基本过程及其影响因素三、实验对象:家兔四、实验步骤和方法(略)五、实验结果:1、观察纤维蛋白在凝血过程中的作用:实验结果发现静置杯内的血液发生凝固;搅拌杯内血液经搅拌过后,毛刷上见到凝固的血块,用水冲洗后发现毛刷上有白色的丝状物。
2、观察影响血液凝固的因素:表1 影响血液凝固的因素实验条件凝血时间粗糙面棉花少许5分4秒石蜡油润滑整个试管表面>20分温度37℃3分4秒浸在盛有碎冰块的烧杯中>20分肝素8U(加血后摇匀)>20分草酸钾1~2mg(加血后摇匀)>20分从表1可以看出:在粗糙面对比实验中,加有棉花的试管血液在较短的时间内就已凝固,而用石蜡油润滑过的试管中的血液在实验时间到20分钟时还未凝固;在温度对比的实验中,水浴37℃试管中的血液凝固较快,而在0℃中水浴的血液在实验时间到20分钟时还未凝固;血液中加入肝素和草酸钾的实验均是实验时间到了20分钟了还未见凝固。
3、观察内源性和外源性凝血的过程:表2 内源性和外源性凝血途径的观察试剂第一管第二管第三管富血小板血浆0.2ml少血小板血浆0.2ml 0.2ml 生理盐水0.2ml 0.2ml兔脑粉悬液0.2ml0.025mol/LCaCl20.2ml 0.2ml 0.2ml血浆凝固时间3分15秒5分15秒1分从表2可以看出:三支试管中第三支凝固时间最短然后到第一支,最后才是第二支。
七、实验讨论:血液凝固是指血液由流动状态变成不能流动的凝胶状态的过程。
血浆与组织中有直接参与血液凝固的凝血因子,血液凝固是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成的凝血酶,最终使纤维蛋白原变为纤维蛋白的过程。
因此,凝血过程可分为三个过程。
不同因素对家兔血液凝固的影响摘要 目的 通过测定某些条件下的血液凝固时间,探究不同因素对血液凝固的影响。
方法 采用颈动脉放血取血,用不同因素处理各试管血液,记录凝血时间。
结果 试管中放有肺组织浸液的先发生凝血反应,其次是放有少许棉花的试管中的血液发生凝固,再是放有生理盐水的血液发生凝固,其他因素作用下的家兔血液在试验结束仍然没有发生凝血反应。
结论 少量生理盐水、少许棉花、肺组织浸液能够促进血液凝固,缩短凝血时间。
液体石蜡、草酸钾、冰块、肝素能够减慢凝血过程,延长凝血时间。
关键词 家兔;血液凝固1. 材料和方法1.1. 实验对象:家兔。
1.2. 实验仪器:兔手术台,常规手术器械,注射器,小烧杯,试管架,试管,动脉夹,动脉插管,秒表。
1.3. 实验药品和试剂:石蜡油,冰块,肝素,草酸钾溶液,肺组织浸液,氨基甲酸乙酯,生理盐水。
1.4. 实验方法1.4.1麻醉固定家兔称重后,按1g/kg 体重剂量耳缘静脉注射200g/L 氨基甲酸乙酯。
待兔麻醉后,将其仰卧,先后固定四肢及兔头。
1.4.2颈部手术剪去颈前被毛,颈前正中切开皮肤6~7cm,直至下颌角上1.5cm,用止血钳钝性分离软组织及颈部肌肉,暴露左、右颈总动脉鞘。
用玻璃分针分离出两侧动脉鞘内颈总动脉,在一侧颈总动脉远心端结扎,近心端用动脉夹夹住,并在动脉下面预先穿一细线备用。
用眼科剪在靠近结扎处动脉壁上剪一“V ”字形切口,将动脉插管向心方向插入颈总动脉内,结扎导管以备取血。
1.4.3取8支试管,按下表准备不同的实验条件表1-1 血液凝固和影响血液凝固的因素1.4.4取血试管编号 实验条件 凝血时间(秒)每管加血2ml 1 NaCl 0.1 ml (室温24)2 放棉花少许 3石蜡油涂管内壁 4冰浴 5肝素1ml 62﹪草酸钾0.1ml 7 肺组织浸液0.1ml开动脉夹,每管加入血液2 ml 。
1.4.5记录凝血时间每个试管加血2 ml 后,即刻开始计时,每隔壁15 s 倾斜一次,观察血液是否凝固,至血液成为凝胶状不再流动为止,记录所经历的时间。
兔子血凝实验报告血凝实验步骤血凝血抑试验一、1%红细胞准备:新鲜鸡抗凝血、PBS缓冲液或生理盐水、离心管、低速离心机步骤:1、抗凝血第一次离心:1500rpm,5min。
去除上层白细胞血浆等2、加入PBS或生理盐水,颠倒混匀3、第二次离心:1500rpm,5min。
去除上层白细胞血浆等4、第三次离心:2000rpm,10min。
去除上层白细胞血浆等5、99ml生理盐水或PBS+1ml红细胞。
二、血凝物品准备:待检测的样品、1%鸡红细胞、96孔血凝板、移液器及吸头、恒温箱试验步骤:1、用PBS(生理盐水)铺板:采用50微升体系进行试验。
调节移液器至50微升,吸取PBS缓冲液加入96孔血凝板中,有几个样品就加几排孔。
2、倍比稀释:吸取50微升待检样品依次加入第1纵排孔中,吹打15下后吸取50微升再加入第2纵排孔,再吹打15下,吸取25微升加入第3纵排孔中,依次类推,直至第11纵排孔,吹打混匀后吸50微升后连同吸头一起弃去,第12纵排为红细胞对照。
3、加红细胞:加1%红细胞,每孔50微升,然后置于37℃温箱或者室温反应20-40分钟左右,读数即可。
4、读数时,以出现完全凝集的孔作为病毒的血凝滴度。
三、4单位抗原1、物品准备:病毒抗原、PBS缓冲液、1%鸡红细胞、单道和多道移液器及吸头、20ml青瓶及塞子、96孔微量血凝板2、测定病毒滴度:血凝,假设测得的血凝滴度为2的8次方,则四单位病毒的稀释倍数为2的6次方(2的8次方除以4),即64倍稀释。
3、计算抗原用量根据所需的四单位抗原的总量来确定抗原液的用量。
比如,需四单位抗原总量为20ml,则利用公式:抗原原液*64(稀释倍数)=20ml,求出抗原原液的体积为0.312ml,需要PBS缓冲液的体积约19.7ml,根据计算的结果配置即可。
4、取PBS缓冲液19.7ml,加入20ml的小青瓶中,取0.312ml的病毒抗原液,加入到缓冲液中,盖上塞子,充分混匀,最好用涡旋仪混匀,至此,四单位抗原配制完成。
家兔动脉凝血实验报告前言动脉凝血是一种重要的生理过程,能够维持血管完整性,防止血液不易流动。
家兔动脉凝血实验是研究这一过程的常用方法之一。
本实验旨在观察家兔动脉在不同刺激条件下的凝血反应,并探讨各个凝血因子在凝血过程中的作用。
材料与方法材料- 实验动物:健康成年家兔- 实验药物:凝血因子VII、凝血因子VIII、凝血因子IX、凝血因子X、凝血因子XIII、凝血酶- 试剂:标准溶血液、细胞悬液- 实验器材:玻璃注射器、显微镜、实验室计时器、实验室离心机方法1. 家兔准备:选择健康的家兔,禁食12小时,保持兔体清洁,麻醉家兔并固定在实验平台上。
2. 动脉刺激:用玻璃注射器刺激家兔动脉,使其受到轻微的损伤,触发凝血反应。
记录刺激时刻。
3. 观察凝血过程:使用显微镜观察刺激后动脉血管的变化,在实验室计时器上记录每个观察时刻的时间。
4. 凝血因子刺激:通过玻璃注射器逐一注射凝血因子VII、凝血因子VIII、凝血因子IX、凝血因子X、凝血因子XIII,观察凝血过程的变化。
5. 加入凝血酶:在动脉刺激的基础上,加入适量的凝血酶,观察凝血过程的加速情况。
结果与讨论我们进行了家兔动脉凝血实验,并记录了每个观察时刻的凝血情况。
观察结果显示,刺激后动脉血管会出现轻微的损伤,伴随着血栓的形成。
血栓会逐渐增大,最终阻塞动脉通道。
实验表明凝血因子在凝血过程中起着重要的作用。
凝血因子VII、凝血因子VIII、凝血因子IX、凝血因子X、凝血因子XIII的逐一注射会促进凝血过程的加强与加速。
加入凝血酶后,凝血过程进一步加速,形成更大的血栓。
在实验过程中,我们还观察到了一些意外现象。
有时动脉刺激后,血凝块的形成并不及时,说明某些凝血因子的不足或功能异常。
这些现象提示凝血过程的复杂性,还有待进一步研究。
结论:家兔动脉凝血实验是研究动脉凝血过程的有效方法。
凝血因子在凝血过程中起着重要的作用,且凝血因子的缺乏或异常会影响凝血反应的进行。
不同因素对家兔血液凝固的影响
摘要 目的 通过测定某些条件下的血液凝固时间,探究不同因素对血液凝固的影响。
方法 采用颈动脉放血取血,用不同因素处理各试管血液,记录凝血时间。
结果 试管中放有肺组织浸液的先发生凝血反应,其次是放有少许棉花的试管中的血液发生凝固,再是放有生理盐水的血液发生凝固,其他因素作用下的家兔血液在试验结束仍然没有发生凝血反应。
结论 少量生理盐水、少许棉花、肺组织浸液能够促进血液凝固,缩短凝血时间。
液体石蜡、草酸钾、冰块、肝素能够减慢凝血过程,延长凝血时间。
关键词 家兔;血液凝固
1. 材料和方法
1.1. 实验对象:家兔。
1.2. 实验仪器:兔手术台,常规手术器械,注射器,小烧杯,试管架,试管,动脉夹,动
脉插管,秒表。
1.3. 实验药品和试剂:石蜡油,冰块,肝素,草酸钾溶液,肺组织浸液,氨基甲酸乙酯,
生理盐水。
1.4. 实验方法
1.4.1麻醉固定
家兔称重后,按1g/kg 体重剂量耳缘静脉注射200g/L 氨基甲酸乙酯。
待兔麻醉后,将其仰卧,先后固定四肢及兔头。
1.4.2颈部手术
剪去颈前被毛,颈前正中切开皮肤6~7cm,直至下颌角上1.5cm,用止血钳钝性分离软组织及颈部肌肉,暴露左、右颈总动脉鞘。
用玻璃分针分离出两侧动脉鞘内颈总动脉,在一侧颈总动脉远心端结扎,近心端用动脉夹夹住,并在动脉下面预先穿一细线备用。
用眼科剪在靠近结扎处动脉壁上剪一“V ”字形切口,将动脉插管向心方向插入颈总动脉内,结扎导管以备取血。
1.4.3取8支试管,按下表准备不同的实验条件
表1-1 血液凝固和影响血液凝固的因素
1.4.4取血
试管
编号 实验条件 凝血时间(秒)
每管加血2ml 1 NaCl 0.1 ml (室温24)
2 放棉花少许 3
石蜡油涂管内壁 4
冰浴 5
肝素1ml 6
2﹪草酸钾0.1ml 7 肺组织浸液0.1ml
开动脉夹,每管加入血液2 ml 。
1.4.5记录凝血时间
每个试管加血2 ml 后,即刻开始计时,每隔壁15 s 倾斜一次,观察血液是否凝固,至血液成为凝胶状不再流动为止,记录所经历的时间。
5、6、7号试管加入血液后,用拇指盖住试管口将试管颠倒两次,使血液与药物混合。
2. 结果
3. 讨论
血液凝固过程是由许多凝血因子参加的酶促反应。
根据血液凝固过程中凝血酶原激活途径不同,可将血液凝固分为内源性激活途径和外源性激活途径。
内源性凝血是指参与血液凝固的凝血因子全部存在于血浆中;外源性凝血是指在组织因子参与下的血凝过程。
本实验采用动物颈动脉放血取血,血液几乎未与组织因子接触。
因此,凝血过程主要是内源性凝血系统的作用。
肺组织浸液中含丰富的组织因子,加入试管观察外源性凝血系统的作用。
(1)内源性凝血途径:内源性凝血途径是指参与凝血的因子全部来自血液,通常因血液与带负电荷的异物表面(如玻璃、白陶土、硫酸酯、胶原等)接触而启动。
当血液与带负电荷的异物表面接触时,首先是F Ⅻ结合到异物表面,并被激活为F Ⅻa 。
F Ⅻa 的主要功能是激活F Ⅺ成为F Ⅺa ,从而启动内源性凝血途径。
(2)外源性凝血途径:由来自于血液之外的组织因子暴露于血液而启动的凝血过程,成为外源性凝血途径,又称组织因子途径。
组织因子是一种跨膜糖蛋白,存在于大多数组织细胞。
在生理情况下,直接与循环血液接触的血细胞和内皮细胞不表达组织因子,但约有0.5%的F Ⅶ处于活化状态(F Ⅶa )。
当血管损伤时,暴露出组织因
子,后者与F Ⅶa 结合而形成F Ⅶa —组织因子复合物,后者在磷脂和Ca 2+存在的情况
下迅速激活F Ⅹ生成F Ⅹa 。
试管
编号 实验条件 凝血时间(秒)
每管加血2ml 1 NaCl 0.1 ml (室温24) 1184
2 放棉花少许 97
3 石蜡油涂管内壁 在2252秒之内不凝
固
4 冰浴 在2252秒之内不凝
固
5 肝素1ml 在2252秒之内不凝
固
6 2﹪草酸钾0.1ml 在2252秒之内不凝
固
7 肺组织浸液0.1ml 61
由内源性和外源性凝血途径所生成的FⅩa,在Ca2+存在的情况下可与FVa在磷脂膜表面形成FXa—FVa—Ca2+—磷脂复合物,即凝血酶原复合物,进而激活凝血酶原。
凝血酶原的激活和纤维蛋白的生成凝血酶原在凝血酶原复合物的作用下激活成为凝血酶。
1、加入生理盐水稀释了血液,使凝血酶的浓度降低,延长了血液凝固的时间
2、棉花给血液凝固提供了一个粗糙的表面,容易使血小板发生黏着、聚集,然后发生解体,释放许多凝血因子和血小板因子;另外棉花含许多带负电荷的植物纤维,也能激活凝血因子XⅡ,启动内源性凝血途径。
因此放有棉花的试管血液凝固加快。
3、由于石蜡油表面光滑,不易引起血小板黏着,即不易使血小板发挥促进凝血的作用。
另外石蜡油为绝缘体,其把试管表面所带的负电荷覆盖,不利于凝血因子XⅡ的激活,因此血液凝固比放有棉花的试管慢,也比正常对照组慢。
4、血液凝固的过程由许多蛋白质酶的参与,所以当温度降低时,酶的活性减弱,因此放置于冰水中的试管血液长时间不凝固,此即低温影响了凝血酶的活性有关。
5、抗凝血酶Ⅲ和肝素是机体内重要的抗凝物质。
抗凝血酶与凝血酶等多种凝血因子的活性中心——丝氨酸残基结合,是这些凝血因子的活性受到抑制或失活,从而达到抗凝的作用。
肝素则主要通过与血浆中的的一些抗凝蛋白,如抗凝血酶Ⅲ结合,加强后者的抗凝作用。
此外肝素还能使血管内壁细胞释放凝血抑制物和纤溶酶原激活物,增强纤溶作用。
因此在试管内放入肝素时血液不会发生凝固。
6、凝血过程中Ca2﹢是重要的凝血因子,其参与了血液凝固的许多环节,当血液中没有Ca2﹢时血液就不会发生凝固。
在试管中加入草酸钾之,由于草酸钾与Ca2﹢发生反应,生成草酸钙沉淀,是血液中没有Ca2﹢,故血液不会发生凝固。
7、肺组织浸出液中含有丰富的凝血因子Ⅲ,易通过外源性哪些途径迅速发生凝血反应,因此加肺组织浸出液的试管血液凝固发生最快。
4.结论
加了肝素、草酸钾等抗凝剂的试管,在规定的时间内没有发生凝血现象。
温度对血液凝固也有影响,放置于冰水中的试管血液凝固也明显减慢,在规定的时间内没有发生凝血现象。
棉花和石蜡油是观察血液接触面的粗糙程度对血液凝固的影响,结果显示血液中有棉花使血液凝固时间明显并涂石蜡油润滑是试管壁的快。
加肺组织浸液的试管血凝最快,加生理盐水的试管比正常血凝稍微加快,但差别不是很大。
5.参考文献
[1]朱大年.生理学.第七版.北京:人民卫生出版社,2009,63-69。