柠檬酸发酵生产概述
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解析玉米液化清液发酵生产柠檬酸工艺摘要:本文通过试验探究的方式,以玉米清液为原料,以黑曲霉作为发酵菌株。
通过单因素筛选的方式优化清液培养基,并根据产酸量、菌丝球形态等,对各项指标进行明确,实现柠檬酸产量最大化目标。
根据试验结果可知,将初糖浓度设定为18%、采用分段通风转速控制方式,在发酵超过48h后可使柠檬酸产量达到最大值,即18.33g/100mL,糖酸转化率达到101.8%。
与传统带渣发酵相比,产酸量与转化率得到显著提升。
关键词:玉米清液;柠檬酸;发酵生产引言:粗玉米中蕴含着丰富的蛋白质,直接用其生产柠檬酸会使菌体飞速生长,对产酸造成严重阻碍。
为避免这一情况,可将玉米粉液化后清楚残渣,液内蛋白质含量较低,利用清液发酵柠檬酸,不但可缩短发酵周期,还可提高转化率。
当前,国内许多工厂已经陆续普及此种工艺,为提高玉米资源利用率,应对发酵生产工艺进行细致分析。
1试验材料与方法1.1材料与仪器本试验的菌株为黑曲霉;主要试剂为酵母粉、无水葡萄糖、FeSO4、玉米浆、a-淀粉酶,剂量为40000U/mL,肌醇;培养基为马铃薯葡萄糖琼脂、种子基础与发酵基础培养基;主要仪器设备为光学显微镜,型号为OLYMPU719068;电子天平,型号为FA2004N;总糖计,型号为WYT-J;恒温振荡器,型号为HZQ-QX;发酵罐,剂量为30L。
1.2试验方法1.2.1初糖含量与柠檬酸产量关系将清液中初糖浓度分别设定为16%、18%和20%,按10%接种量,在36.5℃、转速为400r/min、罐压为0.1MPa、通风为400L/h环境下发酵。
在初始发酵时,每间隔8h分别从不同浓度罐体内取样,对液体PH值与柠檬酸产量进行测定,在放罐完毕后称取菌丝体净重,检测净重变化情况,并检测残还原糖值[1]。
1.2.2还原糖测定通过费林试剂热滴定方式,以亚甲基蓝作为指示剂进行测定。
在空白滴定方面,分别吸取甲乙液体各5ml,放入250ml的锥形瓶内,滴入19ml左右的葡萄糖标准液,加热至沸腾,沸腾时间为30s,每2s滴入1滴,直至溶液蓝色消失,测定葡萄糖溶液的总体积,反复操作3次,记录平均值。
柠檬酸发酵机制柠檬酸生产分发酵和提取两部分。
发酵有固态发酵、液态浅盘发酵和深层发酵3种方法。
固态发酵是以薯干粉、淀粉粕以及含淀粉的农副产品为原料,配好培养基后,在常压下蒸煮,冷却至接种温度,接入种曲,装入曲盘,在一定温度和湿度条件下发酵。
采用固态发酵生产柠檬酸,设备简单,操作容易。
液态浅盘发酵多以糖蜜为原料,其生产方法是将灭菌的培养液通过管道转入一个个发酵盘中,接入菌种,待菌体繁殖形成菌膜后添加糖液发酵。
发酵时要求在发酵室内通入无菌空气。
深层发酵生产柠檬酸的主体设备是发酵罐。
微生物在这个密闭容器内繁殖与发酵。
现多采用通用发酵罐。
它的主要部件包括罐体、搅拌器、冷却装置、空气分布装置、消泡器,轴封及其他附属装置。
发酵罐径高比例一般是1:2.5,应能承受一定的压力,并有良好的密封性。
除通用式发酵罐外,还可采用带升式发酵罐、塔式发酵罐和喷射自吸式发酵罐等。
为了得到产柠檬酸的优良菌种,通常是从不同地区采集的土壤或从腐烂的水果中分离筛选,然后通过物理和化学方法进行菌种选育。
例如薯干粉深层发酵柠檬酸的菌种就是通过不断变异和选育得到的。
菌种适合在高浓度下发酵,产酸水平较高。
柠檬酸的发酵因菌种、工艺、原料而异,但在发酵过程中还需要掌握一定的温度、通风量及pH值等条件。
一般认为,黑曲霉适合在28~30℃时产酸。
温度过高会导致菌体大量繁殖,糖被大量消耗以致产酸降低,同时还生成较多的草酸和葡萄糖酸;温度过低则发酵时间延长。
微生物生成柠檬酸要求低pH,最适pH为2~4,这不仅有利于生成柠檬酸,减少草酸等杂酸的形成,同时可避免杂菌的污染。
柠檬酸发酵要求较强的通风条件,有利于在发酵液中维持一定的溶解氧量。
通风和搅拌是增加培养基内溶解氧的主要方法。
随着菌体生成,发酵液中的溶解氧会逐渐降低,从而抑制了柠檬酸的合成。
采用增加空气流速及搅拌速度的方法,使培养液中溶解氧达到60%饱和度对产酸有利。
柠檬酸生成和菌体形态有密切关系,若发酵后期形成正常的菌球体,有利于降低发酵液粘度而增加溶解氧,因而产酸就高;若出现异状菌丝体,而且菌体大量繁殖,造成溶解氧降低,使产酸迅速下降。
柠檬酸制备
柠檬酸是一种重要的有机弱酸,广泛应用于食品、医药和化工等领域。
其制备过程主要包括以下几个步骤:
1. 原料准备:以薯干粉为主要原料,这是我国80%以上柠檬酸生产的基础原料。
2. 调制浆料:将薯干粉调制成浓度为18%~22%的浆料,以适合发酵过程的需要。
3. 灭菌发酵:将调制好的浆料送入已经经过蒸汽灭菌(0.2MPa,40~60分钟)的发酵罐中,进行黑曲霉深层发酵。
4. 中和处理:发酵结束后,使用碳酸钙对发酵液进行中和处理,以得到柠檬酸钙。
5. 酸解精制:通过硫酸酸解将柠檬酸钙转化为柠檬酸,然后进行精制,以去除杂质。
6. 浓缩结晶:将精制后的柠檬酸溶液进行浓缩,随后通过结晶过程得到柠檬酸晶体。
7. 干燥包装:最后将结晶出的柠檬酸进行干燥处理,并包装储存。
总的来说,整个制备过程需要严格控制各个环节的条件,以确保产品质量和生产效率。
柠檬酸作为一种无色晶体,无臭,易溶于水,其溶液显酸性。
在生物化学中,它是柠檬酸循环(三羧酸循环)的中间体,这一循环发生在所有需氧生物的新陈代谢中。
因此,柠檬酸不仅是工业上的重要化学品,也是生命科学中的关键物质。
柠檬酸简介范文柠檬酸是一种常见的有机酸,化学式为C6H8O7,是无色结晶性固体。
它是柠檬和其他柑橘类水果中主要的酸性成分,也存在于一些蔬菜和其他天然食物中。
柠檬酸不仅在食品工业中广泛使用,还有许多其他的应用领域。
柠檬酸的生产主要是通过微生物发酵过程进行的。
首先,选择适宜的微生物菌株,如柠檬酸杆菌,然后将其培养在适当的营养液中。
在发酵过程中,微生物将糖转化为柠檬酸,并释放出二氧化碳。
发酵通常在温度控制下进行,以便维持最佳生长条件。
完成发酵后,通过提纯和结晶等步骤,可以得到纯度较高的柠檬酸。
柠檬酸是一种味道酸酸甜甜的有机酸,常用作食品酸味剂和调味剂。
它可以增加食品和饮料的酸味,改善食品的口感和风味。
柠檬酸还可以作为抗氧化剂和螯合剂,延长食品的保质期。
在饮料中,柠檬酸可以增加口感和清爽度,使饮料更加可口。
此外,柠檬酸在糖果、果酱、果冻、冰淇淋和沙拉酱等食品中也被广泛使用。
除了食品工业,柠檬酸还有许多其他的应用。
由于它具有良好的清洁性能,柠檬酸被广泛用于清洁剂和洗涤剂中。
它可以去除水垢和污渍,使衣物、家具和器具更加清洁。
柠檬酸还可以用于金属清洗,去除金属表面的氧化物和污渍,使其恢复光亮。
此外,柠檬酸还用于制造染料、化妆品和药品等。
柠檬酸不仅有广泛的应用,而且还具有一些其他的特点。
首先,柠檬酸是一种可生物降解的有机酸,对环境友好。
它可以被微生物降解,不会对环境造成污染。
其次,柠檬酸具有酸度适中的特点,不会对人体造成危害。
因此,它被广泛应用于食品和药品等领域。
此外,柠檬酸还具有一定的抗菌作用,能够抑制细菌的生长。
虽然柠檬酸有许多优点,但也有一些注意事项需要注意。
首先,过量的柠檬酸摄入可能对牙齿造成损害。
柠檬酸可以溶解牙齿上的矿物质,导致牙齿变得敏感和容易受损。
因此,在摄入柠檬酸时应保持适量。
其次,柠檬酸会与一些药物和化学物质发生反应,影响其功效。
因此,在使用柠檬酸的同时需要注意与其他物质的相容性。
总之,柠檬酸是一种常见的有机酸,具有广泛的应用。
柠檬酸生产工艺介绍摘要:柠檬酸应用广泛,在食品、医药等方面都占有重要位置。
制取所用材料价格低廉,条件要求适中,且采用的深层发酵法具有普遍、经济的特点。
关键词:柠檬酸发酵1.柠檬酸简介柠檬酸又名枸橼酸,学名2-羟基丙烷-1,2,3-三羧酸。
柠檬酸是无色透明或半透明晶体,或粒状、微粒状粉末,无臭,虽有强烈酸味,但令人愉快,稍有后涩味。
柠檬酸是生物体主要代谢产物之一,它在植物体内常与酒石酸、苹果酸、草酸等有机酸共存,在动物组织中柠檬酸以游离状态或以金属盐的形式存在。
商品柠檬酸主要有一水化合物和无水物。
柠檬酸用途极其广泛,在食品工业广泛用于酸味剂、增溶剂、抗氧化剂、缓冲剂、除腥脱臭剂等。
在其他工业中,可作金属净化剂、去垢剂、分散剂、电镀缓冲剂和配位剂、胶粘剂,并可用于治理工业废气、废水、回收金属等。
在药物中可产生泡腾,使药物中活性配料迅速溶解并提高味觉能力。
制取柠檬酸可以从水果中提取、化学合成法和生物发酵。
其中发酵是最常用和最有经济价值的方法。
2.柠檬酸发酵菌种及原材料。
2.1菌种及原材料柠檬酸发酵工艺中,具有工业生产价值的微生物有黑曲霉、棒曲霉、文氏曲霉、芬曲霉、丁烯二酸曲霉、橘青霉、解脂假丝酵母等,其中黑曲霉和文氏曲霉在深层液态发酵生产柠檬酸最具有商品竞争优势。
凡能通过微生物代谢而产生柠檬酸的物质,都可以作为柠檬酸的发酵原料。
如乙醇、木质素、纤维素、淀粉、蔗糖、乳糖、正烷烃和脂肪等。
黑曲霉生产菌可以在薯干粉、玉米粉、可溶性淀粉、乳糖、葡萄糖、麦芽糖、糖蜜等多种培养基中生长、产酸,而且产量在微生物中最高。
2.2黑曲霉在米曲汁或麦芽汁培养基上菌丝白色,不是绒球状,凸起。
边缘整齐,菌落较小,带皱折。
在麦芽汁培养基上生长4d成熟的孢子呈黑褐色。
在察氏培养基上生长较慢,菌落边缘整齐,分生孢子梗短,分生孢子着生较密。
菌丝顶端着生稀疏的大型的黑褐色孢子德,成熟后呈开花状而崩裂。
分生孢子是串珠状着生,黑褐色,表面粗糙且有明显的刺状突起,4.7-5.2µm,成熟后遇振动易散落。
1997年第2期高等函授学报(自然科学版
)
柠檬酸发酵生产概述王旭禹邦超贺
占
魁
(华中师大生命科学学院
)
柠檬酸又称拘椽酸(citri。acid)为一般生物代谢产物在自然界中分布极广它不仅存在于柠檬柑桔等植物果实的汁液中也广泛存在于动物及人的器官中[l]柠檬酸的制取可由柠檬汁柑桔
汁等分离制取1984年Schele氏首次从柠檬汁中提取并制成了结晶柠檬酸[2]也可由微生物发酵或化学合成法制得1891年德国Wehme氏首次发现青霉能够生成柠檬酸但因污染及发酵工艺等间题未能工业化生产1916年美国Thom发现黑曲霉可产生柠檬酸同年Currie利用黑曲霉进行
浅盘发酵法工业化生产柠檬酸并在比利时建立了首家工厂直接提取法由于成本很高不能满足工业消费的需要现仅有很少的厂家用此法生产柠檬酸产量仅占世界总产量的1%;化学合成法则由于种种问题至今尚未实现工业化生产图这样利用微生物发酵法生产的柠檬酸就成为当今产
量最大的有机酸发酵产品1柠橄酸的化学性质及应用
柠檬酸是一种含经基的三元梭酸其化学式为:HOOCCH:COH(COOH)CHZCOO
H学名为
3
一轻基一3梭基戊二酸为无色半透明晶体或白色颗粒或白色结晶粉末它的结晶形态因结晶条
件不同而不同虽有强烈酸味但令人愉快稍有一点后涩味商品柠檬酸主要有无水柠檬酸C‘H
SO?
和一水柠檬酸CoH80,H:O柠檬酸易溶于水能溶于乙醉而不溶于醚苯甲茱氯仿等有机溶剂柠檬酸主要应用于食品工业约占总产量的60%〔幻作为食品添加剂中的调味剂酸化剂
和
防腐剂用于饮料果酱水果酒水果糖冰琪琳等品种中;在烘烤面包时加入柠檬酸可使面团变
酸
和松软;在人造黄油香肠和酱油中加入柠檬酸可加强色香味和保护维生素,此外它还能够用于乳制品或作为保藏食品的缓冲剂制备未纯化的屠宰血血液保藏以及使牛奶酸化变浓用于饲料中可减少小牛仔猪发生腹泻改善对钙铁的吸收防止青贮饲料中杂菌发酵应于医药工业上的柠檬酸约占总产量的12肠主要作为许多药品的合成原料如用柠檬酸制造的柠素酸就是制造抗结
核病的重要药剂异烟酸酞麟INH的重要原料还有抗丝虫病药柠檬酸乙胺嗓驱蛔虫药柠檬酸浦嚓抗凝血药柠檬酸钠低血钾治疗药柠檬酸钾抗贫血药柠檬酸铁钱镇咳药柠檬酸维静宁胃药柠檬酸秘钾等;用作糖浆片剂的调味剂防腐剂油膏的缓冲剂以及与其它药剂联合使用例如用于柠檬芬(Citrophen)头痛粉等[3j应于化学工业上的柠檬酸约占总产量的20%作为许多化学产
品
的合成原料如柠檬酸的酷类包括柠檬酸三丁醋乙酞柠檬酸三丁醋柠檬酸三乙醋三辛醋等等这些无毒增塑剂可作用于PVC等塑料用来制造食品包装物玩具等柠檬酸盐类如柠檬酸钠用作洗涤的助剂以代替造成公害的三聚磷酸钠;用于冶铜废气脱硫以免除公害;用于清洗锅炉和各种热交换器清除水垢;以及工业上废水处理和设备清洗剂;柠檬酸按盐除了用作防腐剂外还应用于
染料工业其它方面:如在混凝土中加入适量柠檬酸可作缓凝剂;在电镀工业中可代替山蔡(氰化
钾)实现无毒电镀,在皮革工业上用于脱灰;以及用于印染油墨晒图和化妆品生产等各个方面约占总产量的
8
肠[2]
收稿日期
1997一03一121997年第2期高等函授学报(自然科学
版
)
2柠橄酸发酵所用微生物及原料
可形成柠檬酸的微生物种类很多如真菌类有:梨形毛霉(MucorPiriformis)淡黄青霉(Penieilliumlu〔eum)桔青霉(P。itrinum)二歧拟青霉(Paeeilomyeesdivarieatum)黑曲霉(A
niger)棒曲霉(A。lavatus)温氏曲霉(Awentii)泡盛曲霉(Aawamori)芬曲霉(Afenieis)T
烯二酸曲霉(Afumarieus)斋藤曲霉(Asaitoi)及宇佐美曲霉(Au
samii)
还有绿色木霉
(Triehldermaviride)及普通黑粉菌(Ustilagovulgaris)等品种[,]然而真正具有工业生产价值即
产酸率较高并且能够利用多种搪类作为霉菌生长时所需碳源的品种仅有黑曲霉泡盛曲霉和斋藤曲霉我国目前柠檬酸生产厂家所用的菌株均为黑曲霉都经过诱变育种处理已不是野生菌株
不
但产酸能力强而且适应用粗放发酵原料及生产条件有利于降低成本如目前柠檬酸厂普遍使用的co827co860了一14y一14一131w,等均为经过诱变育种得到的突变菌株我国柠檬酸生产
中使用的部分菌株其选育时间选育单位及适用原料详见下表一所示:
表一我国柠植酸部分生产菌株选育进程一览衰菌种名称选育时间间选育单位位选育方法法适用原料
沪轻研2号1960上海市工业徽生物研究所所Coy一射线诱变变
薯粉
N5581965
上海市工业徽生物研究所氮芥诱变变薯
干
D3531974上海市工业徽生物研究所所酸性平板分离及Coy一射线诱变变薯干
506111977上海市工业徽生物研究所筛选薯干
30081979上海市工业徽生物研究所筛选薯干
Co82719822
上海市工业徽生物研究所筛选淀粉及薯
干
C8601990
上海市工业徽生物研究所筛选精
淀粉粉
了一14441978天津工业微生物研究所了射线诱变变薯
干
不14413119899天津工业徽生物研究所丫射线诱变精淀粉
许多微生物能由长链正烷烃形成柠檬酸例如石蜡节杆菌(Arthrobacterparaffineus)棒状杆
菌(Corynebaeteriun)的种局限青霉(Penieilliumrestriefum)以及念珠霉目的种特别是酵母类的
解脂假丝酵母(Canelidalipolytiea)解脂复膜抱酵母(Saeeharomyeopsislipolytiea)和季也蒙假
丝
酵
母(Candidaguilliermondil)都已用于工业上发酵生产柠檬酸
[,][,]
柠檬酸发酵生产可使用的原料品种很多但共可划分为表二柠橄酸生产原
料
的处理〔,]
二类即糖质原料和石油原料糖质原料包括薯干薯渣淀
粉淀粉渣及玉米粉各种粗制糖(粗蔗搪怡糖等)甘蔗
糖
蜜甜菜糖蜜葡萄糖母液等石油原料主要包括
C10一C20
的正烷烃以石油为原料柠檬酸发酵的研究以日本美国的研究报道占多数[Z]虽然用于柠檬酸生产的菌种可采用多种碳源但以蔗糖和葡萄糖为佳许多原料需进行纯化因为有些微量元素会影响柠檬酸的产生[4]具体处理见表二:
a含淀粉物质用酶糖化
b.亦可用于浅盘发酵工艺
原料纯化工
艺
纯蔗糖阳离子交换剂
纯淀粉“阳离子交换剂剂纯葡萄搪阳离子交换剂剂粗糖铁氛化钾澄清糖蜜铁抓化钾橙清粗淀粉“化学处理1997年第2期高等函授学报(
自然科学版
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3柠橡酸生产发酵机理和发酵工艺
31种稼酸发哮机理柠檬酸的发酵机理可概括为:大量的胞内NH才和呼吸活性提高使通过
糖酵解途径的代谢得到加强葡萄糖经EMP通路分解成为丙酮酸进入三梭酸循环在丙酮酸脱
氢酶复合物作用下氧化成为乙酞CoA及CO:然后在柠檬酸合成酶作用下与草酞乙酸缩合而形成
柠檬酸而异柠檬酸脱氢酶乌头酸酶因受到抑制而使柠檬酸得以积累具体步骤见图1:
葡萄糖三竺里竺兰‘
丙酮
酸
丙酮酸脱氢酶复合物一一卜C02咔乙酸CoA草酸乙酸
一-一卜
柠檬酸合成酶
柠檬酸
图1柠檬酸生物合成示意图
32柠檬酸发肆生产方法柠檬酸发酵生产方法有三种即:传统的固态发酵法液态浅盘发酵法
和深层通风发酵法现代工业化大生产主要采用深层通风发酵法日本约1/5的柠檬酸产品是利用固态发酵法生产的[5J浅盘发酵法在前苏联印度捷克波兰保加利亚阿根廷等国家主要使用而我国美国及西欧共同体国家则主要采用液体深层发酵法进行生产
[z][a]
闭
321固态发酵法生产工艺采用固态发酵法由薯渣(甘薯制淀粉的下脚料)制造柠檬酸设备简
单投资小又可节约大量粮食曲渣可作为猪的饲料有利于薯类的综合利用固体发酵法生产工艺流
程见图2:
罕笼互画卜区困笼亘渔到
-侄红到
牌奥二
黯一一匣巫到一便画因一谭困一匡呵
州
亘亘速
图2固体发酵生产柠檬酸工艺流程
322
浅盘液体表面发酵生产工艺在本世纪50年代此种工艺用于柠檬酸生产采用甘蔗与甜
菜糖蜜将含量的80一85肠(重量)糖转化为柠檬酸但需大量不锈钢或纯铝制的浅盘占地面积太大故不适宜工厂大规模生产液体浅盘发酵生产工艺流程见图3:}搪蜜原料卜币画一侄因一币环爵司一冲蔽蔽司一诬困
l匣于侄画虱耳画画牙一巨巫]
万
笼囱
杏粤卿
涵
气画
州画弓
-匣回一-一
画于诬画
巨工
{一侄困
一
柠檬酸成“
图3浅盘发酵法生产柠檬酸流程图323深层液体通风发酵生产工艺本世纪60年代各国开始采用深层液体通风发
酵工艺生产柠
檬酸是采用机械搅拌通风发酵罐罐材质为不锈钢或搪瓷或涂树脂的碳钢深层液体通风发酵的特点是:微生物菌体均匀分散在液相中均匀利用溶解氧发酵时不产生分生抱子全部菌体细胞都参与合成柠檬酸的代谢发酵速度高设备占地面积小生产规模大完全实现机械自动化操作和控