高效液相色谱常见问题及维修保养

高效液相色谱仪的常见故障种类及维护摘要：随着科学技术的不断创新和进步，液相色谱已广泛应用于食品安全、医药卫生、环境监测、科学研究等领域。

究其原因主要是由于液相色谱法具有分辨率高、选择性高、检测灵敏度高、分析速度快等优点。

虽然液相色谱仪已得到广泛应用，但在实际操作中仍存在一些问题。

关键词：高效液相色谱仪；故障；维护引言高效液相色谱是将典型的液相色谱当成前提，在高压背景下的液体为流相的色谱期间，排查液相色谱出现的故障，并落实好常规的维护保养工作是增加色谱运用期限的核心。

1高效液相色谱仪概述高效液相色谱仪一般由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和记录系统等五大系统组成。

工作时，由高压输液系统将流动相注入仪器，经过进样系统把样品注入仪器，流动相则把样品带入色谱柱（分离系统），样品内不同组分在通过色谱柱时进行分离，随后进入流通池和检测器（检测系统），最后和流动相一起作为废液排入废液桶。

当样品内的组分通过流通池时，检测器将各组分浓度转换成信号并进行放大，在记录系统中形成色谱图。

所得到的色谱图是定性、定量的依据。

①高压输液系统。

高压输液系统由流动相贮存器、泵、梯度洗脱装置和压力感应装置组成。

由于液相色谱仪使用的色谱柱孔径较细，颗粒较小，所以流动相阻力较大。

为达到快速分离的目的，需要高压泵对流动相进行加压。

为了满足越来越复杂的组分分离，添加了梯度洗脱装置，可以实现梯度洗脱，使目标物可以有效分离。

②进样系统。

进样系统一般包括注射器、进样针、进样阀、六元泵等，它们可以把待分析的样品和流动相进行混合，随后送入分离系统中。

③分离系统。

分离系统包括色谱柱、柱温箱等部件。

分离系统是液相色谱仪工作原理的核心，不同样品应使用不同的色谱柱，否则无法达到理想的分离效果。

色谱柱长为10～50cm，内径2～6mm，色谱柱内部固定相颗粒材质也各有不同，需根据样品进行合理选择。

④检测系统。

检测系统是液相色谱仪的关键部件之一，检测器要求灵敏度高、重复性好、线性范围宽等条件。

高效液相色谱仪常见故障及解决方法一、泵故障1. 故障现象：泵无法正常启动或启动后无法正常停止。

解决方法：检查泵头是否有污物堵塞，清除污物；检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好，如有松动，重新插紧。

2. 故障现象：泵的流量不稳定或无法调节。

解决方法：检查泵头是否有污物堵塞，清除污物；检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好，如有松动，重新插紧；检查泵头与柱塞之间的密封圈是否损坏，如损坏，更换密封圈。

二、流动相跑空1. 故障现象：流动相液位下降至最低液位以下，导致无法正常进样。

解决方法：检查流动相的储液瓶是否已空，如已空，重新更换储液瓶；检查流动相的流速设置是否正确，如不正确，重新设置流速；检查管路是否有泄漏点，如存在泄漏点，修复泄漏点。

2. 故障现象：流动相液位迅速下降，导致无法正常进样。

解决方法：检查废液瓶是否已满，如已满，倾倒废液；检查管路是否有堵塞或弯折，如有，更换管路或调整管路布局。

三、峰面积重复性差1. 故障现象：同一色谱条件下，每次运行同一色谱图时，峰面积重复性差。

解决方法：检查进样阀的切换次数是否过多，如过多，减少切换次数；检查进样针的清洗是否彻底，如不彻底，加强清洗；检查样品前处理的稳定性是否可靠，如不可靠，重新进行样品前处理。

2. 故障现象：不同色谱条件下，每次运行同一色谱图时，峰面积重复性差。

解决方法：检查流动相的组成是否恒定，如不恒定，重新配制流动相；检查色谱柱的稳定性是否可靠，如不可靠，更换色谱柱；检查检测器的波长是否准确，如不准确，重新调整波长。

四、峰丢失1. 故障现象：在色谱图中看不到预期的峰。

解决方法：检查进样针是否堵塞或断裂，如堵塞或断裂，更换进样针；检查进样阀的切换次数是否过多，如过多，减少切换次数；检查样品前处理是否可靠，如不可靠，重新进行样品前处理。

2. 故障现象：在流动相中添加了某种物质后，出现了预期之外的峰。

解决方法：检查流动相中添加的物质是否稳定，如不稳定，重新配制流动相；检查检测器的灵敏度是否足够高，如不够高，调整灵敏度；检查色谱柱的类型是否正确，如不正确，更换色谱柱。

高效液相色谱常见故障及解决方案1.压力过高或过低-压力过高可能是由于柱堵塞或流动阻力增加所致。

解决方案包括更换柱、清洗柱或检查管路是否存在问题。

-压力过低可能是由于泵的磁力搅拌器不工作或进样器封堵所致。

解决方案包括检查泵的磁力搅拌器是否工作正常，清洗进样器。

2.峰形不对称-峰形不对称可能是由于进样量不均匀或柱温度过高所致。

解决方案包括确保进样量均匀和降低柱温度。

3.峰尾或前肩-峰尾可能是由于柱温度过高、流速过快或流动相pH值不合适所致。

解决方案包括降低柱温度、减慢流速或调整pH值。

-前肩可能是由于流动相中存在杂质或柱堵塞所致。

解决方案包括更换流动相或清洗柱。

4.杂峰或基线噪声-杂峰可能是由于样品纯度不高、固定相老化或试剂污染所致。

解决方案包括提高样品纯度、更换固定相或检查试剂是否污染。

-基线噪声可能是由于进样器密封不良、流动相气泡或电噪声所致。

解决方案包括检查进样器密封情况、减少流动相中的气泡或检查电子设备是否存在干扰。

5.柱寿命短-柱寿命短可能是由于样品预处理不彻底、柱收尾不当或流动相pH值不合适所致。

解决方案包括增加样品预处理步骤、正确收尾柱或选择合适的流动相pH值。

6.流量不稳定-流量不稳定可能是由于柱堵塞、进样器密封不良或流动相流速波动所致。

解决方案包括清洗柱、检查进样器密封情况或调整流动相流速稳定性。

7.进样量偏差-进样量偏差可能是由于进样器封堵、进样器针头磨损或进样器流速不稳定所致。

解决方案包括清洗进样器、更换进样器针头或调整进样器流速稳定性。

8.柱温度不稳定-柱温度不稳定可能是由于温控系统故障或环境温度变化所致。

解决方案包括检查温控系统是否工作正常或采取措施保持恒定环境温度。

这些是HPLC常见故障及其解决方案的例子。

在实际操作中，操作人员应该根据具体情况诊断和解决故障，并遵循相关的操作规程和安全操作指南。

高效液相色谱仪故障排除指南高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）作为一种常用的分析仪器，可以广泛应用于药物分析、环境检测、食品科学等领域。

然而，在使用过程中，不可避免地会出现一些故障情况。

本文将介绍一些常见的HPLC故障，并提供相应的排除方法。

一、进样器故障1. 进样器漏液若观察到进样口出现漏液现象，首先可以检查密封件是否完好，如若密封件损坏应及时更换。

若密封件完好，还可以检查进样器盖上是否存在污垢，若有，则可清洗并重新安装。

2. 进样器堵塞如果在进样过程中发现进样器堵塞，可以先使用无机溶液进行冲洗，以清除可能存在的样品残留物。

如果仍然无法解决堵塞问题，可以采取拆卸进样器进行彻底清洗的方法。

二、柱温箱故障1. 温度控制不稳定若柱温箱的温度控制不稳定，可能会导致分离信号的漂移，影响分析结果的准确性。

这时，可以首先检查温度控制仪是否设置正确，如有必要，可以重新设置。

另外，也可以检查柱温箱是否存在漏气现象，若存在，应及时修复。

2. 柱温箱泄漏柱温箱泄漏可能会导致温度失控，因而影响分析结果。

检测到泄漏时，应首先检查柱温箱的密封性能，如有必要，可以更换密封圈，确保密封良好。

三、流动相泵故障1. 流量不稳定如果在使用流动相泵时，发现流量不稳定，可能是由于空气进入了系统，导致气泡形成。

这时，可以检查胶管连接是否松动，以及胶管中是否有积气现象。

如果检查后仍然无法解决问题，可以考虑更换胶管或检修流动相泵。

2. 压力异常如果HPLC系统在运行过程中压力异常，可能是由于流动相泵的压力传感器出现问题。

此时，应检查压力传感器是否损坏，如有必要，可以进行维修或更换。

四、检测器故障1. 检测器信号异常如果在分析过程中，检测器的信号异常，可能是由于光源出现故障导致。

这时，可以检查光源是否正常工作，如有必要，可以更换光源。

另外，也可以尝试调整检测器的增益或灵敏度，以改善信号异常问题。

液相色谱法常见故障排出指南液相色谱维护和修理保养高效液相色谱（ HPLC）广泛应用于医药卫生、食品安全、环境化学等各个领域。

在使用过程中难免会碰到各种各样的问题，从而影响正常工作，如何快速发觉故障、排出故障，并做好防备维护措施及其紧要，本文列举了常见故障的排出及解决方法，仅供大家参考。

故障排出原则在仪器序列运行过程中发生故障时按发觉故障、停止仪器序列运行、故障信息登记、确认故障来源、解除故障、故障维护和修理登记、做好防备维护措施等步骤进行故障排查及解除故障，在故障排出过程中可遵奉并服从以下原则：原则一：从简单因素入手；原则二：一次只变化一个因素，利于确认因素与问题之间的关系；原则三：记录仪器正常状态的参数及异常状态信息，完整的记录是故障排出的关键步骤；原则四：做好防备措施，加强仪器操作培训，正确的、良好的操作习惯是降低仪器故障率的首要条件。

常见故障排出1、压力高压力偏高或超过压力上限一般是由方法问题、误操作、系统堵塞、压力传感器故障等问题引起。

方法问题：在方法建立时柱温、流速等参数建立不当，当使用小粒径色谱柱或背压大的色谱柱时，可降低流速或上升柱温（如35～40℃），以降低系统压力，该问题多发生在建立方法时。

误操作：当压力高于平常压力时首先检查柱温是否设置错误、流动相溶剂是否使用错误（如错将甲醇用成了粘度高的乙腈）、色谱柱是否拿错等误操作。

系统堵塞：排出方法问题及误操作后，排查是否系统堵塞，进行分段排查，可依次松开管路接头，从HPLC出口端开始，向上游泵逐个检查，这是发觉堵塞部位简单的方法，确定堵塞部位后可进行直接更换或超声清洗或反冲（如六通阀、进样针、针座、管路等部位），如超声清洗或反冲无效则需更换，经排查是保护柱或色谱柱堵塞时按相关方法冲洗。

压力传感器故障：上述排查后未发觉压力高原因，则需要更换压力传感器，联系仪器客服咨询。

2、压力低压力偏低或无压力一般是由误操作、漏夜、泵不输液等问题引起。

高效液相色谱使用中常见问题及对策
高效液相色谱（High-Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的分离和分
析技术。

在使用HPLC的过程中，可能会遇到一些常见问题，以下是一些可能的问题及对策：
1. 峰形不对称或分离不良：可能是由于柱问题引起的。

可以尝试更换柱，确保柱的性能良好，
并尽量避免超出柱的最大推荐压力。

2. 峰形峭度低：这可能意味着分离不充分。

可以尝试调整流动相的组成、pH值或流速来改善
分离。

3. 噪音较大：可能是由于进样器或检测器的问题引起的。

可以检查进样器和检测器的状态，并
确保它们正常运行。

4. 色谱柱寿命较短：这可能是由于样品中的杂质或试剂导致的。

可以尝试优化样品的准备方法，如前处理或过滤样品，以减少对柱的损害。

5. 流动相配制错误：这可能导致峰错位或分离不良。

可以仔细检查流动相的配制方法和溶剂的
纯度，确保配制正确。

6. 峰定量不准确：可能是由于进样量不准确或方法参数设置不合适引起的。

可以检查进样量的
准确性，并根据实际情况调整仪器参数。

7. 泵压过高：可能是由于管路堵塞或柱封堵引起的。

可以检查管路是否通畅，并根据需要更换
柱或清洗柱。

8. 柱渗漏：可能是由于柱端部密封不良或柱老化引起的。

可以检查柱端部的密封情况，并确保
柱处于良好状态。

针对以上问题，及时检查、调整和维护HPLC设备，并根据具体情况进行修复或更换，可以提
高HPLC分析的效果和结果的准确性。

高效液相色谱法一．仪器的维护与常见问题处理若液相出现规律性基线波动，长时间不平稳可能原因是什么？快速解决方法：一般为仪器系统出现气泡，最好使用纯甲醇长时间冲洗系统（不少于3小时，特殊情况要12小时左右）柱压逐渐升高可能原因是什么？快速判断①色谱柱出现堵塞②针座堵塞③进样针出现堵塞④系统管路中有未冲洗干净的盐⑤滤芯脏了解决方法①色谱柱出现堵塞：一种是将堵塞了色谱柱的位置拆卸，取出里面的筛网用水或甲醇超解（不建议采用，除非没有其他方法）另一种是将堵塞一头色谱柱链接在仪器上另一头不要链接，先用10%甲醇根据色谱柱柱压调节流速冲洗一小时左右，然后换成纯甲醇再以此方法继续冲洗，根据其柱压随时调整流速。

②针座堵塞与进样针出现堵塞：情况不严重则将它们拆卸后用水超解几分钟就可以了，若堵塞严重只有更换新的（堵塞不代表不能用，若无明显的质量损坏如：变形，滑口，开裂等，后续修好后还能做备件使用）③系统管路中有未冲洗干净的盐：用水或10%异丙醇对系统冲洗，冲洗后柱压正常，则可正常使用。

（注意不建议对系统反冲洗，会造成管路中的残留盐类物质重新回到系统中造成二次堵塞。

）④滤芯脏了：更换滤芯若出现保留时间飘移可能原因是什么？快速判断原因：①流动相混合不均匀②柱温不稳③压力不稳④密封圈松动⑤对于是四元泵的液相，其比例阀区域有堵塞情况（流动相是按比例配置，若比例阀区域堵塞，进样第一针时，可能有一个阀只进入25%另一个阀则是75%，进样第二针时则会变成一个阀进入20%，另一个阀80%）快速解决方法：①流动相重新配置，并按要求混匀②保证环境温度与仪器设定温度相差不大并稳定③系统冲洗平衡后方能实验④更换或调整密封圈⑤将出现堵塞区域的设备进行超声清洗。

1.气相检验化学残留：对照品重复性必须符合要求，但供试品重复性不做要求（上海海尼是对照品重复性必须符合要求，但配置两个供试品，各进一针不计算重复性。

目前海陵是对照品与供试品都要计算重复性）液相进样针无法正常采集?解决方法：一般为仪器机械故障，若进样器显示信号一直为红色，可能是进样针损坏或机械臂故障。

高效液相色谱仪的日常维护保养及常见故障处理方法摘要：高效液相色谱是以高压液体为流动相，采用经典液相色谱法的色谱过程。

高效液相色谱作为一种高灵敏度、高选择性的快速分离色谱，在医疗保健、食品安全、环境化学等领域得到了广泛的应用。

仪器在使用过程中不可避免地会遇到一系列问题，影响仪器的正常工作。

保证仪器的正常运行，保证分析人员能够准确可靠地分析数据。

仪器操作人员如果能够按时进行日常维护工作，了解常见故障的预防和排除方法，就能最大限度地发挥仪器的性能。

根据实践经验和有关资料，本文简要介绍了高效液相色谱仪的科学维护和故障排除。

关键词：高效液相色谱；故障诊断；排除；方法1、高效液相色谱概述高效液相色谱是19世纪60年代末发展起来的一种分析方法。

近年来被广泛应用于活性成分、营养强化剂和保健食品中。

高效液相色谱法可用于分析世界上大约80%的有机物。

高效液相色谱由输液系统(含储液罐、高压泵等)、分离系统(含采样器、高压泵等)、色谱柱、检测系统(含试验等)、采集系统(含馏分采集器、，自动采集装置）等，这些系统就象人的脉络一样相互依赖，每个环节的故障都会影响检测结果的可靠性和真实性。

因此，液相色谱仪的故障排除和日常维护对延长色谱仪的使用寿命至关重要。

2、高效液相色谱仪常见故障及处理方法2.1输液泵常见故障及处理2.1.1止回阀的故障及处理球阀和阀座的密封不严密，即使球阀和阀座粘在一起，也会导致液体回流和压力不稳定。

处理方式，应当立即打开排气阀，用高流速溶液冲洗泵，直到排放呈线性。

如果泵进口处有气泡，也可以排出泵头上的气泡，具体方法是:用扳手握住进气泡的泵头，松开出口管的压力盖，用手泵送液体，然后将看到气泡从孔中挤出，直到气泡流出并拧紧压力盖。

如果压力仍然不稳定，可以认为止回阀磨损，球体不光滑，需要更换零件。

2.1.2泵垫圈故障泵密封的常见问题是系统密封泄漏和污染。

严禁采用强酸和强碱溶液进行冲洗，溶液的pH值一般调整为中性。

高效液相色谱法常见故障排除所长办公室文毅日前，本人参加了高效液相色谱维修、维护及常见故障排除的培训班，现将培训内容总结如下，希望对大家的实际工作有所帮助！一、检测器常见故障排除1、基线噪声·检测池窗口污染：用强溶剂冲洗检测池；卸下检测池，拆开清洗或更换池窗石英片。

·样品池中有气泡：突然加大流量赶出气泡；在检测池出口端加一反压（0.2-0.3MPa）连一个0.3mm×1～2m的不锈钢管，以增大池内压（增加压力不要过大，防止检测池石英片碎裂）。

·检测器或数据采集系统接地不良：拆去原来的接地线，重新连接。

·检测器光源故障：检查氘灯或钨灯设定状态；检查灯使用时间、灯能量、开启次数；更换氘灯或钨灯。

·液体泄露：拧紧或更换连接件。

·很小的气泡通过检测池：流动相要仔细脱气；加大检测池的背压；系统检漏；有微粒通过检测池，清洗检测池；检查色谱柱出口筛板。

2、基线漂移·检测池窗口污染：同基线噪声描述。

·色谱柱污染或固定相流失：更换色谱柱或使用保护柱。

·检测器温度变化：系统恒温。

·光源故障：更换氘灯或钨灯。

·原先的流动相没有完全除去。

·溶剂储液瓶污染：清洗溶剂瓶，用新流动相平衡系统。

·强吸附组分从色谱柱中洗脱：在下一次分离之前用强洗脱能力的溶剂冲洗色谱柱；使用溶剂梯度。

3、工作站上出现大的尖峰·检测池内有气泡通过：溶剂脱气并彻底冲洗系统；检查连接系统是否漏液。

·记录仪或检测器接地不良：消除噪声来源；确保良好接地。

·样品溶解不彻底。

4、负峰·检测器输出信号的极性相反。

·样品的吸收小于流动相，流动相不纯。

·样品溶剂干扰。

·示差折光检测器中样品的折射率较低。

·进样中带入气泡。

5、鬼峰或假峰·进样阀或注射器污染·样品溶剂与流动相不同·样品中有空气·流动相中杂质引起·在线过滤器或过滤沉子污染·溶剂储液瓶污染6、工作站不回零⑴记录仪或工作站信号阶梯式上升·检测器的输出范围设定不当：重新设定检测器的输出范围。