检验科生化总胆红素测定的标准操作规程

血清总胆红素测定标准操作规程1检验原理：（钒酸盐法）pH 值接近3时，在钒酸盐和表面活性剂的作用下，胆红素被氧化成胆绿素。

此时，胆红素特有的黄色减少，在波长450nm 处通过测定钒酸作用前后的吸光度的差可以求得样品中总胆红素的浓度。

胆红素−−−−−→−表面活性剂钒酸盐/胆绿素 2.试剂主要组成成分3.样本要求 新鲜无溶血血清、勿使用肝素抗凝血浆。

22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6检验结果的解释6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V ）的氯化钠溶液稀释样本。

通常稀释2倍，当样本浓度较大时提高稀释倍数。

6.2单位换算：mg/dL=umol/L ×0.05857检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊或以水空白在450nm 处吸光度大于0.500时不能使用。

8.产品性能指标8.1线性范围：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，本世纪线性范围可达0-300umol/L 。

8.2试剂空白吸光度：在450nm 处，光径1cm 时，空白吸光度A ≤0.500，△A 空白/分钟≤0.002.8.3准确度：相对偏差≤10%。

8.4精密度8.4.1批内精密度CV≤3%8.4.2批间精密度：R≤10%8.5分析灵敏度：在给定的样本/试剂比例和条件下测定时，1umol/L的总胆红素对应的△A不低于1.5×3108.6干扰试验无明显干扰：添加干扰物后的测定值与初始测定值的相对偏差处于±10%以内。

8.7方法比较：本试剂盒与商品化试剂盒测定40个样本测定结果相关性如下：y=0.997x＋1.051；r=0.997。

9.临床意义：胆红素是红细胞正常或非正常降解后在内皮系统形成的有机复合物，检测胆红素有利于监测肝脏疾病以及发现溶血性贫血以及评估黄疸的程度。

检验科肝功能检验操作规程作业指导书
1.血清总胆红素TBIL和结合胆红素DBIL测定
2.改良JG法
3.试剂
1.参照书刊文献如《全国临床检验操作规程》第二
版自配配制标准液的胆红素应符合如下标准纯
胆红素的氯仿溶液在25℃当光径1000±0001Cm
波长453nm条件下其摩尔吸光系数应在60700±
1600范围内偶氮胆红素的摩尔吸光系数应在
74380±866范围内配制标准液的稀释剂须含白
蛋白可用牛血清白蛋白或人血清代替人血清白
蛋白标准液应贮於棕色瓶中避光保存在市售试
剂中以含碱性酒石酸的灵敏度特异性高。

操作规程临床化学检验目录一.葡萄糖测定二.总胆固醇测定三.甘油三酯测定四. 尿素测定五. 肌酐测定六. 高密度脂蛋白胆固醇测定七. 低密度脂蛋白胆固醇测定八．载脂蛋白A1测定九. 载脂蛋白B测定十．尿酸测定十一. 总胆红素测定十二. 间接胆红素测定十三. 总蛋白测定十四. 白蛋白测定十五．丙氨酸氨基转移酶测定十六. 天门冬氨酸氨基转移酶测定十七. 血清γ-谷氨酰转移酶测定十八. 碱性磷酸酶测定十九. 肌酸激酶测定二十. 乳酸脱氢酶测定二十一. 肌酸激酶同工酶测定二十二.胆碱酯酶测定二十三. α-L-岩藻糖苷酶测定二十四. 脂蛋白a测定二十五. 总胆汁酸测定二十六. α-淀粉酶测定二十七. 电解质(k\na\cl）测定总则为了使检验工作的顺利进行, 在任何时候，都能使各检验人员按照规定的操作程序准确进行检验，报告可靠结果。

保证临床医务人员和患者能快速得到准确、可靠的报告，制定本操作规程，依据是上海市临床检验中心有关规定和国家卫生部主编的《全国临床检验操作规程》（第二版），以及上海市卫生局和医学会主编的《实验室诊断与基础治疗常规》。

主要内容包括：1、项目名称、检验方法；2、方法学原理；3、试剂品牌、包装规格、内含物；4、仪器品牌、型号、主要参数；5、操作步骤；6、质控品使用方法、使用水平和频率、质控规则;7、操作性能概要；8、校准程序9、参考范围；10、临床意义；11、病人准备、标本要求；注意事项；12、参考文献；13、编写者和日期；14、科主任签字认可；一葡萄糖测定(一)项目名称：葡萄糖测定Glucose. 简写：GLU.检验方法：已糖激酶法(二)方法学原理：B-D-Glucose + O2+H2O2—GOD—→葡萄糖酸+ H2O24-氨基安替比林+色原+ H2O2—过氧化物酶→红色色素+ (三)试剂品牌，包装规格，内含物：品牌聚创科技代号包装规格R1：40ml*6R2：10ml*6 主要内含物磷酸盐缓冲液、葡萄糖氧化酶、4-氨基安替比林、色原、氯化镁、过氧化物酶(四)仪器品牌，型号：科华卓越450自动生化分析仪。

总胆红素操作程序1.目的规范总胆红素（TBIL）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。

2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。

3.术语4．测定原理4．1测定方法：钒酸盐法4．2 测定原理：在特定条件下（PH3.0），血清中胆红素与钒酸反应，生成胆绿素，其在450nm 处吸光度的下降与血清中总胆红素含量成正比。

5．标本5．1标本种类：新鲜无溶血血清。

5．2标本采集见生化标本采集程序。

6．试剂6．1试剂来源：和光试剂。

6．1．1组成包装规格：R1 540ml×4 R2 135ml×46．1．2试剂准备试剂为液体双试剂，无需配制,开瓶即可使用。

6．1．3试剂稳定性原装试剂在2～8℃避光保存，稳定期12个月。

试剂开瓶载机2～8℃稳定30天。

新打开试剂不宜与已用过的试剂混合在一起,否则易造成试剂稳定性下降。

7.仪器参数设定AU2700参数设定：和光试剂仪器参数设置具体参见试剂厂家提供的相关仪器的检测参数。

8．校准8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。

8.1.2仪器经过大保养后。

8.1.3挪动仪器的安装地点。

8.1.4更换试剂批号。

8.1.5室内质控失控。

8．2 AU2700和光试剂系统的校准：8.2.1 准备：和光配套胆红素校准物.8.2.2 保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存至有效期，1ml蒸馏水复溶，复溶后在2～8℃可保存7天。

8.2.3保存位置：低温冰箱-20℃。

8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的9号位置放和光配套胆红素定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。

9．室内质控及失控纠正：见临床生化室内质控程序9．1质控物来源：柏乐液体质控（批号:45612/45613）。

9．2质控物储存条件及准备：-15～-20℃保存至有效期，从低温冰箱取出后室温平衡30分钟。

沭阳县仁慈医院检验科生化室作业指导书文件编号：SYXRCYYLAB-SH –SOP第A版编制：路珊珊钱丽萍审核：李萍批准：侯波生效日期：2012年10月01日沭阳县仁慈医院检验科修订页血清总胆红素(T-BIL)测定一、目的保证总胆红素测定的结果准确、可靠。

二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。

三、适用范围钒酸盐氧化法测定总胆红素。

四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技股份有限公司生产的总胆红素测定试剂盒。

五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。

六、原理此方法基于样品中的总胆红素在pH3.0 环境中，在有机复合物氧化剂的作用下，可以被氧化成胆绿素，而胆红素特有的黄色也随即消失，在450nm 处测定吸光度的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。

七、试剂R1：硫磺酸缓冲液（pH2.9） 0.1mol/L表面活性剂R2：磷酸缓冲液（pH7.0） 10mmol/L有机钒酸盐 4mmol/L 不同批号试剂盒中各组份不能互换。

本试剂对光敏感，2～8℃密闭避光保存可以稳定18个月（勿冷冻）；首次开启试剂后，避光保存于2～8℃防污染环境中，可继续稳定至效期。

校准液： Randox 公司提供的系列校准品。

八、标本采血清总胆红素(T-BIL)测定血清、血浆。

样本2～8℃保存可以存放约3天，-20℃保存可以存放3个月，但只能冻融一次。

九、操作步骤1、标本编号，分离血清，依顺序置样品架上。

2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。

3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值测定符合要求即可应用。

一般每3～6个月校准一次，若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。

4、测定参数：血清量 7μl试剂Ⅰ 200μl试剂Ⅱ 50μl主波长 444nm次波长 548nm反应类型终点法；负反应测定时间 10分钟温度 37℃报告单位μmol/L5、结果计算：ΔA 样品样本中总胆红素的含量 = ------- ×标准液浓度ΔA 标准单位换算：mg/dl×17.1=μmol/L十、正常参考值5.1-20μmol/L血清总胆红素(T-BIL)测定十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控品，共三组。

血清总胆红素测定标准操作规程1.检测目的用于定量测定人体血清或血浆中总胆红素的含量2.检测原理钒酸氧化法：在PH3.0左右的缓冲液中，钒酸钠氧化总胆红素为胆绿素，使反应液的黄色减少。

测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中总胆红素的浓度。

3．适用范围血清，或用肝素抗凝的血浆4．试剂及仪器1.试剂品：迈瑞公司生产的TBiL试剂盒，各组分如下：2.校准品由迈瑞公司提供的校准液，在更换试剂批号或出现质控漂移；仪器进行保养；仪器重要零件更换后进行校准。

3.仪器迈瑞BS-800型号仪器5．操作装载试剂—→进行校准—→进行质控—→输入标本检测项目—→加载标本—→标本测定—→结果复核—→报告6．注意事项1. 不能测试严重溶血、脂浊、黄疸的标本, 血浆标本可用肝素抗凝,待测样品室温不超过24小时，可于2℃-8℃保存72小时，胸腹水经抗凝取上清液。

2. 不能使用过期的试剂，2℃-8℃保存。

3. 定标液应冰冻保存。

7. 结果计算 c ＝ΧC O式中：c ——测定总胆红素浓度，umol/L ；A 测定——标本管吸光度；A 标准——标准管吸光度；C O ——校准血清总胆红素浓度，umol/L ；8. 操作性能1 精密度：批内CV ≤ 5.0%，批间CV ≤ 6.0%。

2 准确度：以参考方法定值的血清作为校准品时，本法测定结果与参考方法基本一致。

3 线性范围：2~684 umol/L9. 参考值5.1~19 umol /L(0.3~1.1mg/dL)10. 临床意义胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸疾病的诊断。

总胆红素增高主要见于各类黄疸肝炎，胆道堵塞，新生儿黄疸。

总胆红素减低见于孕妇，部分冠心病。

11．安全防护A 测定A 标准1．对任何一份标本（包括质控品、标准品及检测试剂等）都应视其为具有传染性，操作人员在工作时应戴乳胶手套、穿工作服。

2．一旦发生标本容器划破手或身体、液体溅进眼睛等粘膜处，应立即用大量的水冲洗，同时向上级医师或科领导报告，必要时施以丙种球蛋白预防。

胆红素的测定方法操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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总胆红素(钒酸盐氧化法)试剂盒标准操作程序1.摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清样本中总接胆红素的含量。

2.适用范围程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清样本中总接胆红素的含量。

3.职责使用AU5811自动生化分析仪进行测定总接胆红素浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行，室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的总接胆红素（钒酸盐氧化法）试剂盒采用的是钒酸盐氧化法。

5.原理pH3.0左右，在起加速剂作用的表面活性剂的条件下，能够增进未结合胆红素的溶解度，样本中的总胆红素被钒酸盐氧化成胆绿素。

与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。

所以通过测定胆红素氧化前后吸光度的变化，就可以计算出样本中的总胆红素的浓度。

−−→胆红素钒酸盐−胆绿素6.仪器AU5811自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：R1：枸橼酸盐缓冲液（pH2.6）、表面活性剂；R2：磷酸盐缓冲液、偏钒酸盐7.3试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用科华公司的校准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品：罗氏公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。

每日在测定前做一次质控加试剂后做一次质控。

该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。

8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。

8.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》8.5室间质评：分别参加河北省室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。

医院检验科检验技术操作规程目录第一节全自动血液细胞分析仪操作规程第二节尿液分析仪使用规程第三节自动凝血仪操作规程第四节半自动生化分析仪操作规程第五节血常规检验操作规程第六节尿常规检验操作规程第七节肝功能检验操作规程第八节肾功能检验操作规程第九节血脂检验操作规程第十节血液葡萄糖测定技术操作规程第十一节凝血四项检验操作规程第十二节AB0 血型正、反血型鉴定技术操作规程第一节全自动血液细胞分析仪操作规程1、样品分析前准备1.1 开机前的检查、准备在开启分析仪电源之前，操作者须按以下要求进行检查:1.1.1 检查稀释液、清洗液、溶血素是否充足，有无过期; 试剂管路是否弯折，连接是否可靠。

1.1.2 电源线是否正确连接。

1.1.3 废液桶是否清空。

1.1.4 UPS 电是否足够，打印纸安装是否正确，是否足够。

1.1.5 确保键盘正确连接到键盘接口上。

1.2.开机1.2.1打开分析仪后面的电源开关,电源指示灯亮，屏幕上显示“Initializing…”.1.2.2 分析仪进行初始化，整个初始化过程持续约4~7 分钟。

1.2.3 初始化过程结束后，系统自动进入“计数”界面。

1.3 动物类型选择1.3.1 按[菜单]键，挪移光标，选择“动物”，按[确认]进入“动物”界面。

1.3.2 操作者根据测量的动物类型，选择需要分析的动物类型。

2.1.1 按[菜单]键，选择“计数”，进入“计数”界面。

再按[模式]键，将当前模式设置为“全血”模式。

2.1.2 确认状态指示区的计数状态为“就绪”，工作模式为“全血”。

头与容器底保持一定距离。

2.1.4 按计数键，启动样本分析过程。

此时，状态指示区的计数状态为“运行”。

2.1.5 采样针自动吸取13ul 的样本后蜂鸣器响，在采样针抬起后，移开样本。

2.1.6 分析完成后，按[F4]键进入“样本信息编辑”界面。

按[F9]键进入汉字状态。

在汉字状态下，按[F8]键在全拼和五笔输入法之间进行切换，输入样本信息，输入完成后，点击“确认”，保存输入的内容并返回到“计数”界面。

总胆红素（TBIL）测定的标准操作程序【应用范围】体外检测血清、血浆总胆红素浓度测定。

【适用仪器】Olympus AU-2700全自动生化分析仪。

【程序改变】严格遵循仪器、试剂说明书及校准品使用说明。

【方法学原理】在PH2.9环境中,表面活性剂和偏钒酸盐与胆红素作用形成胆绿素，胆红素的减少引起在波长450nm处吸光度的下降,吸光度的变化与总胆红素的含量成正比。

【试剂】1.在测定时各组分和浓度试剂1（R1）：L-丙氨酸、LDH（乳酸脱氢酶）试剂2（R2）：α-酮戊二酸、NADH试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂不可冰冻。

2.校准品：DiaSys TruCal U。

3. 质控品：Randox Assayed Multiseral Level 1 and Level 2。

【标本收集与准备】1.血清或血浆标本根据实验室标准采集程序采集标本，适用标本为血清或肝素抗凝血浆（肝素钠抗凝结果高0.5mmol/l），不可从正在静脉滴注手臂上采血，上机标本不能有凝块，样品采集后2天内离心标本，分离血清，血清或血浆标本室温保存4天，冷藏7天，冷冻保存6个月。

血清或血浆钠结果高于线性不建议稀释。

【操作步骤】1.仪器测定参数设置Test Name:Sample: Volume L Dilutio LL Dilutio L Min OD Max ODLSec. ODMethod: First LLast LReaction Slope:Measuring Last LMeasuring LastLinearity ANo-Lag-Time:2.试剂准备：将准备好的试剂置仪器试剂盘中（8℃）。

3.校准校准物的准备：将校准物从冰箱取出，冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。

校准物的选择尽可能选择配套仪器厂家校准品。

深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司总胆红素酶测定方法
2、适用范围
适用于血清总胆红素的测定
3、试剂仪器
3.1试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒
3.2未开启的试剂盒避光保存于2℃—8℃有效期一年。

试剂不可以冰冻。

4、操作程序
4.1方法原理
总胆红素在P H3.0附近，以及钒酸盐和表面活性物剂存在下，可以被氧化成胆绿素。

与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。

测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中总胆红素的浓度。

4.2样本要求
新鲜血清或肝素血浆，样本收集后应尽快测定，必须避光保存，避免使用溶血样本。

4.3上机操作
4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-220全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》”
4.3.2校准“
4.3.2.1 标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱取出，复溶到室温后上机检测。

4.3.2.2校准程序：每30天需要定标一次。

当有以下情况时需重新定标：
1）换试剂批号或出现质控漂移时；
2）当仪器做完保养后；
3）仪器进行零件更换时。

每次试验前用准备好的校准品进行定标，定标通过后进行检测。

总胆红素重氮法检测操作规程产品注册号：国食药监械（准）字2004第3400400号产品执行标准：YZB/国2221-2003原理：总胆红素在二甲亚砜等加速剂作用下，在酸性溶液中与重氮苯磺酸作用生成紫色的偶氮胆红素，与经过同样处理的校准液比较，即可计算出样品中总胆红素的含量。

样品准备：样品为新鲜空腹无溶血的血清或血浆。

样品应在低温条件下运输保存，样品中总胆红素2-8℃密闭避光保存可稳定3天，冰冻保存可稳定3个月。

测定步骤：1.基本参数：方法：终点法波长：560nm 反应温度：37℃光径：10mm 反应时间：5min2.操作：根据测定所需试剂量，取R1和R2按50：1比例混合，即为工作液。

根据以上参数按下表操计算：1. 因素法：用本试剂盒操作，测得偶氮胆红素参考摩尔吸光系数为74290（波长=560nm，光径=10mm，样品/试剂=1/15），其相应的F值为215.经严格检定标化的仪器，可按以下公式计算结果：样品Tbil含量（umol/L）=(Au-AuB)×215例：Au=0.080 AuB=0.040 则样品Tbil含量（umol/L）=（0.080-0.040）×215=8.62. 比例终点法：样品Tbil含量（umol/L）=Au-AuB/Ac-AcB×Cc例：Au=0.040 Ac=1.095 AcB=0.030 Cc=230umol/L则样品Tbil含量（umol/L）=【（0.090-0.040）÷（1.095-0.030）】×230=10.8校准及质控：1.建议使用本公司的胆红素校准血清进行校准。

2.推荐使用本公司的生化质控血清进行室内质控。

性能指标：1.线性范围：0.4～342.0umol/L,r≥0.992.精密度：批内CV≤3.8%、批间相对极差≤5.8%。

3.准确度：不准确度≤10%。

4.空白吸光度：空白管在560nm波长处，10mm光径下，以蒸馏水调零，吸光度值≤0.150，注意事项：1.如果样品中Tbil含量超过342.0umol/L，则用蒸馏水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。