实验十八 血清胆红素测定

血清直接胆红素的测定病人准备：要求病人处于安静状态，生活状态处于日常状态，避免过度空腹、饮食、饮酒吸烟标本采集，处理，保存和要求：收集无溶血，无黄疸，无脂浊的新鲜血清或肝素血清，避光保存。

混合，必要时可用过滤器过滤。

实验原理：血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成偶氮胆红素。

醋酸钠缓冲液保持反应的pH，反应完全后加入终止试剂（叠氮钠）以破坏重氮试剂，最后加入碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的黄色偶氮胆红素，在600nm波长比色，从标准曲线找直接胆红素含量。

实验仪器设备及试剂：咖啡因试剂碱性酒石酸钠溶液5g/L亚硝酸钠溶液5g/L 对氨基苯磺酸溶液5g/L叠氮钠溶液胆红素标准溶液加样枪分光光度计（或半自动生化仪）实验操作：一。

取两支试管，按表1操作表1 改良J—G发测定血清直接胆红素操作表加入物 (ml) 直接胆红素空白管血清0.2 0.2咖啡因苯甲酸钠试剂— 1.6对甲基苯磺酸—0.4重氮试剂0.4 —混匀，准确1分钟重氮钠0.05 —咖啡因甲苯酸钠试剂 1.55 —室温10分钟碱性酒石酸钠 1.2 1.2混匀，600nm波长比色，以空白管调0，读取各管吸光度。

从标准曲线上查出直接胆红素浓度。

二．标准曲线的制作表2 胆红素标准曲线的制作表加入物 (ml) 对照管 1 2 3 4 5胆红素标准贮存液— 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0稀释血清 2.0 1.6 1.2 0.8 0.4 —相当于胆红素浓度 0 34.2 68.4 103 137 171（u mol/L)混匀（不可产生气泡),按直接胆红素的测定方法操作。

每一浓度做2个平行管，用对照管调零，读取各管吸光度，以各管吸光度的均值为纵坐标，以相应胆红素浓度为横坐标，绘制标准曲线。

参考范围：血清结合胆红素0~6.8umol/L(0~0.4mg/dl）注意事项：1.本法在10 —37℃范围内测定，不受温度变化的影响，两小时内显色非常稳定且灵敏度高，轻度溶血对本法无影响。

一、实验目的1. 了解胆红素测定的原理和方法。

2. 掌握胆红素测定仪器的操作技能。

3. 通过实验，掌握胆红素测定的方法，并对胆红素含量进行定量分析。

二、实验原理胆红素是一种黄色的生物色素，是血红蛋白在体内代谢的产物。

胆红素在血液中含量过高会导致黄疸。

本实验采用紫外-可见分光光度法测定胆红素含量。

该方法基于胆红素在特定波长下有最大吸收的特性，通过测定其吸光度，计算胆红素含量。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、恒温水浴锅、移液器、容量瓶、试管等。

2. 试剂：胆红素标准溶液、盐酸、硫酸铵、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、无水乙醇等。

四、实验步骤1. 准备工作（1）将胆红素标准溶液稀释至一定浓度，制成标准系列。

（2）将待测样品用无水乙醇提取胆红素。

（3）用移液器准确移取一定量的胆红素标准溶液和待测样品，分别加入试管中。

（4）向试管中加入适量的盐酸和硫酸铵，混匀。

（5）将试管置于恒温水浴锅中，加热至60℃，保温10分钟。

（6）取出试管，冷却至室温。

2. 吸光度测定（1）打开紫外-可见分光光度计，设定波长为510nm。

（2）将胆红素标准溶液和待测样品分别放入比色皿中。

（3）依次测定胆红素标准溶液和待测样品的吸光度。

3. 数据处理（1）以胆红素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

（2）根据待测样品的吸光度，从标准曲线上查得相应的胆红素浓度。

（3）计算待测样品中胆红素含量。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制根据实验数据，绘制胆红素标准曲线，其线性方程为：y = 0.0036x + 0.0152，相关系数R² = 0.9987。

2. 待测样品胆红素含量测定根据待测样品的吸光度，从标准曲线上查得相应的胆红素浓度为0.8 mg/L。

3. 结果分析本实验通过紫外-可见分光光度法测定了待测样品中的胆红素含量，结果显示待测样品中胆红素含量为0.8 mg/L。

该结果与实际值较为接近，表明实验方法准确可靠。

血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定是一种常用的临床实验室检查方法，主要用于评估肝脏功能和诊断与胆红素代谢相关的疾病。

其原理基于血清中的胆红素可以与二硫苏糖酸钠反应生成带有特征性颜色的离子化合物。

具体实验步骤如下：首先，将样本血清与二硫苏糖酸钠溶液混合，通过化学反应使胆红素与二硫苏糖酸钠结合。

然后，使用比色法通过测量生成离子化合物的颜色强度来确定血清中的胆红素浓度。

常用的检测方法包括分光光度法、比色滴定法和高效液相色谱法等。

在测定中，胆红素与二硫苏糖酸钠发生反应，形成红色或紫色的离子化合物。

生成的离子化合物的颜色强度与样本中的胆红素浓度呈正相关关系。

通过测量离子化合物的光吸收值，并通过与已知浓度的标准溶液比较，可以计算出样本中总胆红素的浓度。

总之，血清总胆红素测定原理是基于胆红素与二硫苏糖酸钠的化学反应，通过测定生成的带有特征性颜色的离子化合物的光吸收值来确定样本中的总胆红素浓度。

这种方法简便、快速，并且具有较高的准确性和灵敏度，在临床诊断中得到了广泛应用。

血清立接胆红素测定1.实验原理在PH3左右、有表面活性剂和间接反应胆红素抑制剂的条件下，样品中的直接胆红素容易被矶酸盐氧化成胆绿素，而间接胆红素不能。

在450nm （胆红素吸收峰）处监测反应。

矶酸盐氧化前后吸光度的下降与样品中胆红素的浓度成正比。

由此可计算出样品中直接胆红素浓度。

2.标本：2.1病人准备：无特殊要求。

最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。

2.2类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。

3.标本存放：15〜25℃保存可稳定2天；2〜8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。

4.标本运输：常温条件下避光保存运输。

5.标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。

6.实验材料6.1试剂：上海欧泰克直接胆红素试剂盒6.L 1试剂组成酒石酸盐缓冲液100mmol/L表面活化剂I 适量磷酸盐缓冲液10 mmol/L矶酸钠盐 4 mmol/L6.1.2试剂准备：试剂为即用式。

6.1.3试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于2〜8C,若无污染，可稳定至失效期。

试剂有效期为18个月。

试剂2必需避光保存。

试剂不可冰冻。

6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。

6.1.5注意事项：此试剂为体外诊断用。

警告！腐蚀剂！不要入口。

避免和眼睛，皮肤或衣服接触。

如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。

接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。

6.2校准品：使用罗氏复合校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6. 3质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7.仪器：日立7060生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验日立7060生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2仪器操作步骤：参见生化检验日立7060生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与H 质控做为未知标本进行分析，以2s为质控警告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

胆红素测定方法胆红素是人体内一种重要的生化物质，它是红细胞分解代谢产物，对人体健康有着重要的影响。

因此，准确测定胆红素的水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。

在临床实践中，有多种方法可以用来测定胆红素的水平，本文将介绍几种常用的胆红素测定方法。

一、尿胆红素试验。

尿胆红素试验是一种简单、快速的方法，通常用于初步筛查患者是否存在胆红素增高的情况。

该方法适用于常规体检或临床初步诊断，但其准确性相对较低，不适用于精确测定胆红素水平。

二、血清胆红素测定。

血清胆红素测定是目前临床上常用的一种方法，通过采集患者的血清样本，利用化学方法或光度法测定其中胆红素的浓度。

这种方法准确性较高，可以精确测定胆红素水平，是临床诊断中常用的方法之一。

三、高效液相色谱法。

高效液相色谱法是一种高灵敏度、高分辨率的胆红素测定方法，通过将样本中的胆红素与色谱柱分离，再通过检测器测定其浓度。

该方法准确性高，适用于胆红素水平较低的情况。

四、光谱法。

光谱法是一种通过测定物质在特定波长下的吸光度来测定其浓度的方法。

对于胆红素的测定，可以利用其在特定波长下的吸光度特性来进行测定。

这种方法准确性较高，但需要专业的设备和操作技能。

五、尿胆红素比色法。

尿胆红素比色法是一种通过比色法测定尿液中胆红素的浓度的方法。

该方法简单易行，适用于临床初步筛查，但准确性相对较低，不适用于精确测定胆红素水平。

综上所述，胆红素的测定方法有多种，每种方法都有其适用的场合和特点。

在临床实践中，应根据实际情况选择合适的方法进行测定，以确保结果的准确性和可靠性。

同时，对于不同方法的操作要求和结果解读也需要进行充分的了解和培训，以避免误判和错误诊断的发生。

希望本文对胆红素测定方法有所帮助。

血清总胆红素测定标准操作规程1.检测目的用于定量测定人体血清或血浆中总胆红素的含量2.检测原理钒酸氧化法：在PH3.0左右的缓冲液中，钒酸钠氧化总胆红素为胆绿素，使反应液的黄色减少。

测定胆红素氧化前后吸光度的差，可以计算出样品中总胆红素的浓度。

3．适用范围血清，或用肝素抗凝的血浆4．试剂及仪器1.试剂品：迈瑞公司生产的TBiL试剂盒，各组分如下：2.校准品由迈瑞公司提供的校准液，在更换试剂批号或出现质控漂移；仪器进行保养；仪器重要零件更换后进行校准。

3.仪器迈瑞BS-800型号仪器5．操作装载试剂—→进行校准—→进行质控—→输入标本检测项目—→加载标本—→标本测定—→结果复核—→报告6．注意事项1. 不能测试严重溶血、脂浊、黄疸的标本, 血浆标本可用肝素抗凝,待测样品室温不超过24小时，可于2℃-8℃保存72小时，胸腹水经抗凝取上清液。

2. 不能使用过期的试剂，2℃-8℃保存。

3. 定标液应冰冻保存。

7. 结果计算 c ＝ΧC O式中：c ——测定总胆红素浓度，umol/L ；A 测定——标本管吸光度；A 标准——标准管吸光度；C O ——校准血清总胆红素浓度，umol/L ；8. 操作性能1 精密度：批内CV ≤ 5.0%，批间CV ≤ 6.0%。

2 准确度：以参考方法定值的血清作为校准品时，本法测定结果与参考方法基本一致。

3 线性范围：2~684 umol/L9. 参考值5.1~19 umol /L(0.3~1.1mg/dL)10. 临床意义胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸疾病的诊断。

总胆红素增高主要见于各类黄疸肝炎，胆道堵塞，新生儿黄疸。

总胆红素减低见于孕妇，部分冠心病。

11．安全防护A 测定A 标准1．对任何一份标本（包括质控品、标准品及检测试剂等）都应视其为具有传染性，操作人员在工作时应戴乳胶手套、穿工作服。

2．一旦发生标本容器划破手或身体、液体溅进眼睛等粘膜处，应立即用大量的水冲洗，同时向上级医师或科领导报告，必要时施以丙种球蛋白预防。

血清胆红素的实验报告研究背景血清胆红素是一种重要的临床生化指标，用于评估肝功能和溶血性贫血等疾病的诊断和治疗过程中的效果。

因此，对血清胆红素的准确检测方法进行研究和优化，对临床检验具有重要意义。

实验目的本实验旨在探索一种简便、准确、实用的方法来测定血清胆红素的含量。

实验原理本实验利用了二甲基亚硝胺(DMA)与胆红素在酸性条件下的化学反应，生成红色的胆红素硝基胆红素(DMN)。

DMN与高碱溶液结合形成蓝色的复合物，其最大吸收波长为576nm。

根据DMN与胆红素的反应关系，通过测量吸光度来确定血清样品中胆红素的含量。

实验材料和方法材料：1. 血清胆红素标准品2. 二甲基亚硝胺溶液3. 磷酸盐缓冲溶液4. 纯水5. 高碱溶液方法：1. 准备标准曲线：分别取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8 mL的血清胆红素标准品，加入离心管中。

2. 加入1 mL的DMA溶液和1 mL的磷酸盐缓冲液，快速摇匀后，在40恒温水浴中反应10分钟。

3. 加入10 mL的纯水冷却至室温，用离心机离心5分钟。

4. 取上清液，用高碱溶液稀释10倍，即得到标准曲线的各个浓度标准溶液。

5. 测定各个标准溶液的吸光度，并记录。

测量待测样品1. 取待测样品3 mL，加入1 mL的DMA溶液和1 mL的磷酸盐缓冲液，快速摇匀后，在40恒温水浴中反应10分钟。

2. 加入10 mL的纯水冷却至室温，用离心机离心5分钟。

3. 取上清液，用高碱溶液稀释10倍。

4. 测量吸光度，并根据标准曲线计算出样品中胆红素的含量。

实验结果及分析标准曲线根据所制备的标准曲线，测量各个标准溶液的吸光度，得到以下数据：胆红素标准溶液（mL）吸光度0.1 0.2340.2 0.4210.4 0.8230.6 1.2330.8 1.602待测样品测量结果测量待测样品后，得到其吸光度为0.845。

根据标准曲线的线性方程（y = 1.957x + 0.095，R²=0.998），可以计算出待测样品中胆红素的含量。

血清胆红素测定病人准备：病人准备除了特殊检验有专门规定外，一般要求病人处于安静状态，生活饮食处于日常状态，目前已公认过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及姿势体位等可影响某些检验结果，现分述如下：1. 运动：肌肉活动的影响可分短暂性的和持续性的两类，短暂性影响为血浆脂肪酸含量，可因运动而暂时减少，而后渐渐增加而恢复。

丙氨酸可因运动暂时增加达180%，受到持续性影响主要是一些与肌肉有关的酶，如肌酸激酶、乳酸脱氢酶等，据称一场60min的手球训练赛后11h，肌酸激酶活性比赛前仍增加达125%，长期坚持体育锻炼还会提高性激素水平，因此采血前宜安静，不作过大的活动。

2. 食物：进餐后血浆脂肪、蛋白质、糖类有所增加。

有人研究于高脂餐后2-4h采血，多数人碱性磷酸酶含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为Le+分泌型者增高更明显。

一般认为高蛋白质餐使血浆尿素增加，但不影响肌酐含量，高比例不饱和脂肪酸食物，可减低胆固醇含量；食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。

故在做相应检验时，应对食物有一定的控制。

3. 过度空腹：一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食，至次日晨采血，空腹约8-12h。

但过度空腹，某些检验会有异常结果。

例如血清胆红素可因空腹48h而增加240%；血糖可因空腹过长而减少为低血糖；血脂空腹过度，甘油三酯、游离脂肪酸反有增加，故空腹并非越长越好。

4. 饮酒：饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐增加。

长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高，平均红细胞体积增加，甚至可以将这项作为嗜酒者的筛选检查。

5. 吸烟：瘾烟者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%，而不吸烟者含量在1%以下。

血液学方面亦有变化，白细胞数增加，嗜酸粒细胞减少，中性粒细胞及单核细胞增多，血红蛋白偏高，平均红细胞体积偏高。

6. 药物：药物对检验的影响非常复杂，15000多种药物对检验有干扰作用。

众所周知，抗生素、磺胺类药物，对肝功能有大小不一的影响，甚至几片常用药物可以引起严重的药物反应，故在采样检查之前，暂停各种药物是为上策，如不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。

胆红素测定方法胆红素是一种由肝脏产生的黄色物质，它在人体内起着重要的代谢作用。

胆红素的测定可以帮助医生判断肝功能和胆道疾病的情况，以及监测患者的治疗效果。

因此，准确测定胆红素水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。

目前，常用的胆红素测定方法主要有血清胆红素测定法、尿胆红素测定法和组织胆红素测定法。

下面将分别介绍这三种方法的原理和操作步骤。

血清胆红素测定法是通过分析血液中的胆红素水平来判断肝功能和胆道疾病的情况。

操作步骤如下，首先，取一定量的患者血清标本，加入试剂混匀；然后，使用分光光度计测定混合液的吸光度，根据吸光度值计算出血清中的胆红素浓度。

这种方法操作简单，结果准确，是临床上常用的胆红素测定方法之一。

尿胆红素测定法是通过分析尿液中的胆红素水平来判断胆道疾病的情况。

操作步骤如下，首先，取一定量的患者尿液标本，加入试剂混匀；然后，使用分光光度计测定混合液的吸光度，根据吸光度值计算出尿液中的胆红素浓度。

这种方法简便快捷，适用于临床快速筛查。

组织胆红素测定法是通过分析组织样本中的胆红素水平来判断肝功能和胆道疾病的情况。

操作步骤如下，首先，取一定量的患者组织样本，加入试剂混匀；然后，使用分光光度计测定混合液的吸光度，根据吸光度值计算出组织中的胆红素浓度。

这种方法需要临床实验室条件支持，操作相对复杂，但结果准确可靠。

除了上述常用的胆红素测定方法外，近年来还出现了一些新的胆红素测定技术，比如高效液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS/MS）、蛋白质质谱技术等。

这些新技术能够更加准确地测定胆红素水平，为临床诊断和治疗提供更可靠的依据。

总的来说，胆红素测定是临床诊断和治疗中不可或缺的一部分，不同的测定方法各有特点，医生可以根据具体情况选择合适的方法进行检测。

随着医学技术的不断发展，相信胆红素测定方法也会不断完善，为临床诊断和治疗提供更多的选择和便利。

血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定是一种常见的临床实验室检测，主要用于评估肝脏功能和胆道系统的健康状况。

该测定的主要原理基于胆红素在血液中的化学特性和其与特定试剂的反应。

首先，我们要了解胆红素的基本性质。

胆红素是血红蛋白分解的终产物之一，它在血液中主要以结合（直接）胆红素和未结合（间接）胆红素两种形式存在。

这两种形式的胆红素在450nm波长处有吸收峰，因此，我们可以通过测量该波长下的吸光度来间接测定血清中胆红素的浓度。

在化学法中，我们通常使用一种或多种特定的试剂与血清中的胆红素发生反应。

这些试剂与胆红素反应后，会生成带有颜色的化合物，这种化合物的颜色深浅与胆红素的浓度成正比。

因此，我们可以通过比色法或光谱法测量这种颜色变化的程度，从而推算出血清中胆红素的浓度。

在实际操作中，我们需要注意一些可能影响测定结果的因素。

例如，样本的保存条件、测定时的温度、试剂的质量和有效期等。

此外，由于胆红素在光照下可能会分解，因此，我们在处理样本和进行测定时，应尽量避免长时间的暴露于光线下。

总的来说，血清总胆红素测定的原理主要基于胆红素在特定波长下的吸收特性和其与特定试剂的反应。

通过精确控制实验条件，我们可以得到准确可靠的测定结果，从而为临床诊断和治疗提供重要参考。

胆红素测定方法胆红素是一种重要的生化指标，它对人体健康具有重要的影响。

因此，准确测定胆红素水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。

本文将介绍几种常见的胆红素测定方法，帮助读者更好地了解这一领域的知识。

首先，最常见的胆红素测定方法之一是血清胆红素测定。

这种方法通过采集患者的血清标本，利用化学分析或光度法来测定血清中的胆红素水平。

这种方法简单、快捷，广泛应用于临床实践中。

但是，需要注意的是，血清胆红素测定受到很多因素的影响，如血清样本的保存和处理，以及化学试剂的质量等，因此在进行测定时需要严格控制这些因素。

其次，尿胆红素测定也是一种常见的方法。

尿液中的胆红素来自于肝脏排泄的胆红素，因此通过测定尿液中的胆红素水平可以间接反映肝脏的功能状况。

尿胆红素测定方法简单易行，常用于一些肝功能检测中。

但是，需要注意的是，尿液样本的采集和保存也会对测定结果产生影响，因此在进行测定时需要严格按照操作规程进行操作。

此外，还有一种比较新颖的胆红素测定方法是基于光学技术的无创测定。

这种方法通过光学传感器等设备，可以在不需要采集血液或尿液样本的情况下，通过皮肤表面的光学信号来测定胆红素水平。

这种方法无创、方便，可以有效减少患者的痛苦，因此在临床应用中具有广阔的前景。

但是，需要注意的是，这种方法目前还处于研究阶段，其准确性和稳定性还需要进一步验证。

总的来说，胆红素测定方法多种多样，每种方法都有其特点和适用范围。

在临床实践中，需要根据具体情况选择合适的胆红素测定方法，并严格按照操作规程进行操作，以确保测定结果的准确性和可靠性。

同时，随着科学技术的不断发展，相信在未来会有更多更准确、更方便的胆红素测定方法出现，为临床诊断和治疗带来更多的便利和效益。

胆红素的测定实验报告实验目的1. 了解胆红素的性质和重要性；2. 学习测定胆红素的方法和原理；3. 进行胆红素的测定实验，掌握实验操作技巧和数据处理方法；4. 分析实验结果，提出实验中的问题并加以改进。

实验原理胆红素是一种重要的生物色素，主要存在于胆汁中，由红细胞分解代谢产生。

胆红素的检测在临床诊断和科学研究中有着重要的应用价值。

本实验主要采用间接法测定胆红素。

实验原理如下：1. 将待测试样中的胆红素与Diazotized Sulfanilic Acid（DSA）和N-(1-Naphthyl) Ethylenediamine Dihydrochloride（NED）反应，生成紫红色的偶氮铵盐，该产物在波长为560 nm 处具有最大吸光度。

2. 利用分光光度计测定反应产物的吸光度，并进行定量分析。

实验步骤准备工作1. 打开分光光度计并预热，调节至波长560 nm；2. 准备胆红素标准溶液；3. 准备Diazotized Sulfanilic Acid（DSA）和N-(1-Naphthyl) Ethylenediamine Dihydrochloride（NED）溶液；4. 使用比色皿清洗剂彻底清洗比色皿，保证无污染；5. 为每个待测样品准备10 mL的试管。

实验步骤1. 取一只干净的比色皿，设置空白试管，在分光光度计上调到560 nm波长；2. 在空白试管中注入2 mL的去离子水作为空白参照；3. 分别将标准试样和待测试样分别加入10 mL的试管中；4. 各试管中加入0.2 mL的DSA 和NED 混合溶液；5. 用去离子水稀释待测试样，使其与标准试样在同一浓度范围内；6. 分别将试管放入分光光度计，记录各试管的吸光度；7. 根据标准曲线，计算出待测样品中胆红素的浓度。

实验结果以下为实验结果的一部分：实验样品吸光度标准样品1 0.315标准样品2 0.423标准样品3 0.537待测样品1 0.380待测样品2 0.465待测样品3 0.502数据处理与分析根据标准样品的吸光度和浓度之间的关系，可以得到一条标准曲线。

实验十六血清胆红素测定（改良J-G法）【目的】1.熟悉血清胆红素测定的原理和方法；２.掌握胆红素测定的正常参考范围及临床意义。

【原理】血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成偶氮胆红素；未结合胆红素需要在加速剂（咖啡因-苯甲酸钠）作用下，分子内氢键破坏后，才能与重氮试剂反应生成偶氮胆红素。

醋酸钠缓冲液保持反应的pH，反应完成后加入终止试剂（叠氮钠）以破坏重氮试剂，最后加入碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素，在600nm波长比色，从标准曲线查找总胆红素和结合胆红素含量。

【器材】试管及试管架、吸管、恒温水浴箱、分光光度计、秒表。

【试剂】1．咖啡因试剂称取无水水醋酸钠41.0g，苯甲酸钠38.0g，乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）0.5g，溶于约500ml去离子水中，再加入咖啡因25.0g，搅拌使溶解（加入咖啡因后不能加热溶解），用去离子水补足至1L，混匀。

过滤后置棕色瓶，室温保存。

2．碱性酒石酸钠溶液称取氢氧化钠75.0g，酒石酸钠（Na2C4H4O6·2H2O）263.0g，用去离子水溶解并补足至1L，混匀。

置塑料瓶中，室温保存。

3．5g/L亚硝酸钠溶液称取亚硝酸钠0.5g，用去离子水溶解并定容至100ml，混匀，置棕色瓶，冰箱保存，稳定期不少于2周。

若发现溶液呈淡黄色，应废弃重配。

4．5g/L 对氨基苯磺酸溶液称取对氨基苯磺酸（NH2C6H4SO3H·H2O）5.0g，溶于800ml去离子水中，加入浓盐酸15ml，用去离子水补足至1L。

5．重氮试剂临用前取上述亚硝酸钠溶液0.5ml和对氨基苯磺酸溶液20ml，混匀即成。

6．5.g/L叠氮钠溶液7．胆红素标准液（1）目前一般用未结合胆红素配制标准液，此标准品须用含白蛋白的溶剂配制，常用人混合血清，对此血清的要求如下：收集无溶血、无黄疸、无脂浊的新鲜血清，混合，必要时可用过滤器过滤。

血清总胆红素测定化学法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述在文章的引言部分，我们将对血清总胆红素测定化学法进行概述。

血清总胆红素是评估肝功能和胆汁排泄功能的一个重要指标。

通过测定血清中胆红素的浓度，可以获得有关患者肝功能和胆红素代谢状态的信息。

血清总胆红素测定化学法是一种常用的测定方法，它基于血液中胆红素的化学反应原理。

这种方法的主要原理是利用特定的试剂与血清中的胆红素发生反应，形成带有颜色的化合物，并利用光谱法或比色法测定其吸光度，从而计算出血清中总胆红素的浓度。

在测定过程中，我们使用了一系列化学试剂，并根据反应原理和步骤进行相应的操作。

通常情况下，测定血清总胆红素的化学方法需要经过样本处理、试剂添加、反应、数据测量及结果计算等多个步骤。

这些步骤的设计和操作对于测定的准确性和可靠性至关重要。

化学法测定血清总胆红素具有许多优势。

首先，它是一种简单、快速、经济的测定方法，适用于大规模样本的处理。

其次，它对于血清中胆红素的测定范围较宽，可以满足不同浓度范围内的测定需求。

此外，该方法的可重复性和稳定性较高，能够提供较为准确的测定结果。

然而，化学法测定血清总胆红素也存在一些局限性。

首先，可能会受到其他血液成分的干扰，如血红蛋白和脂质等。

其次，该方法对于某些特殊类型的胆红素可能不够敏感，导致测定结果的偏差。

此外，部分化学试剂可能对环境和人体健康有一定的危害，需要注意操作的安全性。

尽管存在一些局限性，但血清总胆红素测定化学法在临床实验室中仍然得到广泛应用。

未来的研究和发展将致力于改进该方法的准确性和特异性，以满足临床医学对于胆红素测定的更高要求。

总的来说，血清总胆红素测定化学法在评估肝功能和胆红素代谢方面具有重要的应用价值。

1.2 文章结构文章结构部分的内容如下:文章结构部分旨在简要介绍整篇文章的结构和组织方式，为读者提供一个整体的概览。

本篇文章共分为引言、正文和结论三大部分。

在引言部分，我们将对本文的主题进行概述，并介绍文章的结构和目的。

胆红素测定方法胆红素是人体内一种重要的生化物质，它是红细胞分解代谢产物，对于人体健康具有重要的生理功能。

因此，准确测定胆红素水平对于临床诊断和治疗具有重要意义。

下面将介绍几种常见的胆红素测定方法。

一、直接胆红素测定法。

直接胆红素测定法是通过直接测定血清中的胆红素水平来判断胆红素代谢情况的一种方法。

该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。

二、间接胆红素测定法。

间接胆红素测定法是通过间接测定血清中的胆红素水平来判断胆红素代谢情况的一种方法。

该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。

三、总胆红素测定法。

总胆红素测定法是通过测定血清中的总胆红素水平来判断胆红素代谢情况的一种方法。

该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。

四、高效液相色谱法。

高效液相色谱法是通过高效液相色谱仪来测定血清中的胆红素水平的一种方法。

该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。

五、光度法。

光度法是通过光度计来测定血清中的胆红素水平的一种方法。

该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。

六、比色法。

比色法是通过比色计来测定血清中的胆红素水平的一种方法。

该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。

七、电化学法。

电化学法是通过电化学分析仪来测定血清中的胆红素水平的一种方法。

该方法操作简单，结果准确可靠，是临床常用的一种测定方法。

总结。

以上所述即为胆红素测定的几种常见方法，每种方法都有其特点和适用范围，临床医生可根据具体情况选择合适的方法进行胆红素测定。

希望本文所述内容能对相关工作者有所帮助。

实验十六血清胆红素测定（改良J-G法）【目的】1.熟悉血清胆红素测定的原理和方法；２.掌握胆红素测定的正常参考范围及临床意义。

【原理】血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应，生成偶氮胆红素；未结合胆红素需要在加速剂（咖啡因-苯甲酸钠）作用下，分子内氢键破坏后，才能与重氮试剂反应生成偶氮胆红素。

醋酸钠缓冲液保持反应的pH，反应完成后加入终止试剂（叠氮钠）以破坏重氮试剂，最后加入碱性酒石酸钠溶液，使颜色不稳定的紫红色偶氮胆红素在咖啡因存在下转化为稳定的蓝色偶氮胆红素，在600nm波长比色，从标准曲线查找总胆红素和结合胆红素含量。

【器材】试管及试管架、吸管、恒温水浴箱、分光光度计、秒表。

【试剂】1．咖啡因试剂称取无水水醋酸钠41.0g，苯甲酸钠38.0g，乙二胺四乙酸二钠（EDTA-Na2）0.5g，溶于约500ml去离子水中，再加入咖啡因25.0g，搅拌使溶解（加入咖啡因后不能加热溶解），用去离子水补足至1L，混匀。

过滤后置棕色瓶，室温保存。

2．碱性酒石酸钠溶液称取氢氧化钠75.0g，酒石酸钠（Na2C4H4O6·2H2O）263.0g，用去离子水溶解并补足至1L，混匀。

置塑料瓶中，室温保存。

3．5g/L亚硝酸钠溶液称取亚硝酸钠0.5g，用去离子水溶解并定容至100ml，混匀，置棕色瓶，冰箱保存，稳定期不少于2周。

若发现溶液呈淡黄色，应废弃重配。

4．5g/L 对氨基苯磺酸溶液称取对氨基苯磺酸（NH2C6H4SO3H·H2O）5.0g，溶于800ml去离子水中，加入浓盐酸15ml，用去离子水补足至1L。

5．重氮试剂临用前取上述亚硝酸钠溶液0.5ml和对氨基苯磺酸溶液20ml，混匀即成。

6．5.g/L叠氮钠溶液7．胆红素标准液（1）目前一般用未结合胆红素配制标准液，此标准品须用含白蛋白的溶剂配制，常用人混合血清，对此血清的要求如下：收集无溶血、无黄疸、无脂浊的新鲜血清，混合，必要时可用过滤器过滤。