间断性屈膝缺血预适应对小鼠缺氧耐力的影响
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412
Chin J Appl Physiol，2016，32（ 5）
观察［J］． 中国药房，2013，24（ 48） ： 4559-4561． ［10］ 曹 晋，高云芳，刘 坤． 川芎及两种主要药效成分
对废用性肌萎缩的影响［J］． 中国应用生理学杂志， 2010，26（ 1） ： 109-113． ［11］ 贾旭广，石 璐，王万铁，等． 低氧高二氧化碳性肺 动脉高压时大鼠肺组织硫化氢体系的变化及川芎嗪
1 材料和方法
1． 1 材料 实验动物成年雄性昆明种小鼠，体重 35 ～ 40 g，购自华
* 【收稿日期】2015-12-28【修回日期】2016-05-19 △【通讯作者】 Tel： 18971625286； E-mail： yshaojian@ sina． com
中科技 大 学 同 济 医 学 院 实 验 动 物 中 心 （ 动 物 合 格 证 号 42009800001335） 。 1． 2 方法 1． 2． 1 动物分组 在缺血预适应阶段将 96 只小鼠随机分 成 3 组（ n = 32） ： 即对照组、束缚大腿组和屈膝固定组； 预适 应后再将每组小鼠分成 3 种不同处理组： 即常压耐缺氧组（ n = 14） ，亚硝酸钠组和心脑缺血耐受组（ n = 9） 。 1． 2． 2 小鼠后肢缺血预适应 采用两种方法使后肢缺血实 施预适应，每天 1 次，共 7 d。束缚大腿组： 以粗棉线缠绕一 侧大腿中部 两 圈 后 用 止 血 钳 夹 紧，强 度 能 阻 断 股 动 脉 血 流 （ 足背动脉无搏动） ，5 min 后放松棉线让小鼠活动 5 min，重 复 2 次，共计 30 min 完成一次预适应； 屈膝固定组： 将小鼠一 侧膝关节弯曲使大腿小腿紧紧相贴（ 阻断月国动脉血流） ，并用 粗棉线缠绕后止血钳固定使不会松开即可，5 min 后松开棉 线让小鼠活动 5 min，重复 2 次为 1 次预适应。两种缺血法 均在左右后腿交叉进行。对照组小鼠以限制活动代替阻断 血流过程。 1． 2． 3 常压耐缺氧试验 将小鼠放入内置 20 g 钠石灰和滤 纸的 250 ml 广口瓶中，瓶盖涂以凡士林防止漏气。计时广口 瓶密闭至小鼠呼吸停止所需的时间为常压耐缺氧时间。 1． 2． 4 亚硝酸钠中毒试验 以 240 mg / kg 剂量腹腔注射亚 硝酸钠溶液，计时注射至小鼠死亡时间。 1． 2． 5 断头后心、脑耐缺血时间 参照文献方法［4］，用剪刀 将小鼠自耳后迅速断头，观察并计时鼠头张口呼吸时间； 剪 开胸腔暴露心脏，观察左心室继续有规律跳动持续时间。
【KEY WOＲDS】 limb ischemia preconocition； hypoxia tolerance； mice
【中图分类号】Ｒ363
【文献标识码】A
【文章编号】1000-6834（ 2016） 05-412-02
【DOI】10． 13459 / j． cnki． cja，32（ 5）
413
1． 3 统计学处理 数据以均数 ± 标准差（ x珋± s） 表示，采用组间 Student’s t
检验。
2 结果
2． 1 常压耐缺氧试验
与对照组相比，束缚大腿组和屈膝固定组小鼠的常压耐 缺氧时间均显著延长（ P ＜ 0． 01，表 1） 。 Tab． 1 Effects of limb ＲIPC on hypoxia tolerance （ HT） in
缺血预适应（ ischemic preconditioning） 指预先对某组织 或器官反复实施短期缺血再灌注后，在随后经历较长时间缺 血并复灌后，其损伤程度显著减轻的现象［1］。近年来提出的 远程缺 血 预 适 应 （ remote ischemic preconditioning，ＲIPC） 理 论［2］，认为在整体动物实施某部位缺血预适应时，这种保护 作用实际上是全身性的反应，也即不仅被实施缺血的部位能 得到保护，身体其他的器官同样能产生对长期缺血的保护作 用。因此通过 四 肢 等 容 易 实 施 的 部 位 进 行 缺 血 预 适 应，为 心、脑、肾等重要 器 官 预 防 性 缺 血 保 护 作 用 提 供 了 可 能 。 通 常使用的方法是采用止血带或血压带束缚上肢或下肢阻断 血流 5 min 后恢复血流 5 min 作为一个循环，一次连续进行 3 ～ 4 个循环即为实施一次缺血预适应［3］。人类取跪坐姿势 时可以造成月国动脉血流严重减少甚至阻断，间断进行应该也 可以起到缺血预适应效果。间断屈膝法阻断小鼠后肢血流 可以模拟人体的跪坐法缺血预适应。整体小鼠耐缺氧试验 可用于观察机体对于缺氧环境的承受能力，能综合反映心脑 肺等重要生命器官功能的变化。本实验通过两种不同方法 造成后肢缺血，观察其对耐缺氧能力的影响，比较两种缺血 方法的效果。
叶少剑△ ，曾 媛，宁明敏，王煜晨，陈晓清，李慧霞，冷碧清，杨鑫壁，翁小艹 凡，胡嘉英，朱泽琪，方 宇
（ 江汉大学医学院，湖北 武汉 430056）
【摘要】 目的： 观察和比较两种后肢缺血法产生的缺血预适应对小鼠耐受缺氧能力的影响。方法： 昆明小鼠 96 只，分成对照
组、间断屈膝固定组（ KF） 或束缚大腿组（ TT） 进行缺血预适应。每天预适应 1 次，7 d 后各组小鼠再分为 3 组分别进行常压耐缺氧
的干预［J］． 中国病理生理杂志，2010，26（ 3） ： 524528． ［12］ 许益笑，王园园，王万铁，等． 内源性硫化氢体系与 低 O2 高 CO2 性肺动脉高压的相关性研究［J］． 中国 应用生理学杂志，2011，27（ 3） ： 300-304．
间断性屈膝缺血预适应对小鼠缺氧耐力的影响*
实验、亚硝酸钠中毒实验和断头后心、脑耐缺血实验。结果： 两种后肢缺血法小鼠常压耐缺氧时间均显著延长（ P ＜ 0． 01） ，断头后
张口呼吸时间显著高于对照组（ P ＜ 0． 05） 。但对亚硝酸钠中毒生存时间和心脏跳动时间没有明显影响。结论： 肢体缺血预适应
能显著增强小鼠缺氧耐力。
【关键词】肢体缺血预适应； 耐缺氧； 小鼠
Chin J Appl Physiol，2016，32（ 5）
观察［J］． 中国药房，2013，24（ 48） ： 4559-4561． ［10］ 曹 晋，高云芳，刘 坤． 川芎及两种主要药效成分
对废用性肌萎缩的影响［J］． 中国应用生理学杂志， 2010，26（ 1） ： 109-113． ［11］ 贾旭广，石 璐，王万铁，等． 低氧高二氧化碳性肺 动脉高压时大鼠肺组织硫化氢体系的变化及川芎嗪
1 材料和方法
1． 1 材料 实验动物成年雄性昆明种小鼠，体重 35 ～ 40 g，购自华
* 【收稿日期】2015-12-28【修回日期】2016-05-19 △【通讯作者】 Tel： 18971625286； E-mail： yshaojian@ sina． com
中科技 大 学 同 济 医 学 院 实 验 动 物 中 心 （ 动 物 合 格 证 号 42009800001335） 。 1． 2 方法 1． 2． 1 动物分组 在缺血预适应阶段将 96 只小鼠随机分 成 3 组（ n = 32） ： 即对照组、束缚大腿组和屈膝固定组； 预适 应后再将每组小鼠分成 3 种不同处理组： 即常压耐缺氧组（ n = 14） ，亚硝酸钠组和心脑缺血耐受组（ n = 9） 。 1． 2． 2 小鼠后肢缺血预适应 采用两种方法使后肢缺血实 施预适应，每天 1 次，共 7 d。束缚大腿组： 以粗棉线缠绕一 侧大腿中部 两 圈 后 用 止 血 钳 夹 紧，强 度 能 阻 断 股 动 脉 血 流 （ 足背动脉无搏动） ，5 min 后放松棉线让小鼠活动 5 min，重 复 2 次，共计 30 min 完成一次预适应； 屈膝固定组： 将小鼠一 侧膝关节弯曲使大腿小腿紧紧相贴（ 阻断月国动脉血流） ，并用 粗棉线缠绕后止血钳固定使不会松开即可，5 min 后松开棉 线让小鼠活动 5 min，重复 2 次为 1 次预适应。两种缺血法 均在左右后腿交叉进行。对照组小鼠以限制活动代替阻断 血流过程。 1． 2． 3 常压耐缺氧试验 将小鼠放入内置 20 g 钠石灰和滤 纸的 250 ml 广口瓶中，瓶盖涂以凡士林防止漏气。计时广口 瓶密闭至小鼠呼吸停止所需的时间为常压耐缺氧时间。 1． 2． 4 亚硝酸钠中毒试验 以 240 mg / kg 剂量腹腔注射亚 硝酸钠溶液，计时注射至小鼠死亡时间。 1． 2． 5 断头后心、脑耐缺血时间 参照文献方法［4］，用剪刀 将小鼠自耳后迅速断头，观察并计时鼠头张口呼吸时间； 剪 开胸腔暴露心脏，观察左心室继续有规律跳动持续时间。
【KEY WOＲDS】 limb ischemia preconocition； hypoxia tolerance； mice
【中图分类号】Ｒ363
【文献标识码】A
【文章编号】1000-6834（ 2016） 05-412-02
【DOI】10． 13459 / j． cnki． cja，32（ 5）
413
1． 3 统计学处理 数据以均数 ± 标准差（ x珋± s） 表示，采用组间 Student’s t
检验。
2 结果
2． 1 常压耐缺氧试验
与对照组相比，束缚大腿组和屈膝固定组小鼠的常压耐 缺氧时间均显著延长（ P ＜ 0． 01，表 1） 。 Tab． 1 Effects of limb ＲIPC on hypoxia tolerance （ HT） in
缺血预适应（ ischemic preconditioning） 指预先对某组织 或器官反复实施短期缺血再灌注后，在随后经历较长时间缺 血并复灌后，其损伤程度显著减轻的现象［1］。近年来提出的 远程缺 血 预 适 应 （ remote ischemic preconditioning，ＲIPC） 理 论［2］，认为在整体动物实施某部位缺血预适应时，这种保护 作用实际上是全身性的反应，也即不仅被实施缺血的部位能 得到保护，身体其他的器官同样能产生对长期缺血的保护作 用。因此通过 四 肢 等 容 易 实 施 的 部 位 进 行 缺 血 预 适 应，为 心、脑、肾等重要 器 官 预 防 性 缺 血 保 护 作 用 提 供 了 可 能 。 通 常使用的方法是采用止血带或血压带束缚上肢或下肢阻断 血流 5 min 后恢复血流 5 min 作为一个循环，一次连续进行 3 ～ 4 个循环即为实施一次缺血预适应［3］。人类取跪坐姿势 时可以造成月国动脉血流严重减少甚至阻断，间断进行应该也 可以起到缺血预适应效果。间断屈膝法阻断小鼠后肢血流 可以模拟人体的跪坐法缺血预适应。整体小鼠耐缺氧试验 可用于观察机体对于缺氧环境的承受能力，能综合反映心脑 肺等重要生命器官功能的变化。本实验通过两种不同方法 造成后肢缺血，观察其对耐缺氧能力的影响，比较两种缺血 方法的效果。
叶少剑△ ，曾 媛，宁明敏，王煜晨，陈晓清，李慧霞，冷碧清，杨鑫壁，翁小艹 凡，胡嘉英，朱泽琪，方 宇
（ 江汉大学医学院，湖北 武汉 430056）
【摘要】 目的： 观察和比较两种后肢缺血法产生的缺血预适应对小鼠耐受缺氧能力的影响。方法： 昆明小鼠 96 只，分成对照
组、间断屈膝固定组（ KF） 或束缚大腿组（ TT） 进行缺血预适应。每天预适应 1 次，7 d 后各组小鼠再分为 3 组分别进行常压耐缺氧
的干预［J］． 中国病理生理杂志，2010，26（ 3） ： 524528． ［12］ 许益笑，王园园，王万铁，等． 内源性硫化氢体系与 低 O2 高 CO2 性肺动脉高压的相关性研究［J］． 中国 应用生理学杂志，2011，27（ 3） ： 300-304．
间断性屈膝缺血预适应对小鼠缺氧耐力的影响*
实验、亚硝酸钠中毒实验和断头后心、脑耐缺血实验。结果： 两种后肢缺血法小鼠常压耐缺氧时间均显著延长（ P ＜ 0． 01） ，断头后
张口呼吸时间显著高于对照组（ P ＜ 0． 05） 。但对亚硝酸钠中毒生存时间和心脏跳动时间没有明显影响。结论： 肢体缺血预适应
能显著增强小鼠缺氧耐力。
【关键词】肢体缺血预适应； 耐缺氧； 小鼠
