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红豆杉愈伤组织的诱导培养及紫杉醇的产生
孙珺;胡正海
【期刊名称】《西北大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2000(030)001
【摘要】研究了红豆杉愈伤组织的诱导、培养及愈伤组织中紫杉醇的产生.结果表明:在以1/2 MS培养基为基本培养基的条件下,在一个较宽的生长素浓度范围内,均可诱导发生红豆杉的愈伤组织;不同类型的植物生长素IAA,IBA,NAA及2,4-D和6-BA的组合均可使红豆杉外植体30 d的愈伤组织发生率达60%以上;不同类型的激素组合以及激素的不同浓度对愈伤组织的生长及愈伤组织中紫杉醇的含量有一定影响.采用高效液相色谱法,在几组不同条件下所获得的愈伤组织中,均检测出了紫杉醇.紫杉醇的最高含量达500×10-6 mol/L,且愈伤组织中紫杉醇及三尖杉酯碱的含量均高于外植体中的含量.
【总页数】5页(P55-59)
【作者】孙珺;胡正海
【作者单位】西北大学,植物研究所,陕西,西安,710069;西北大学,植物研究所,陕西,西安,710069
【正文语种】中文
【中图分类】Q94-336
【相关文献】
1.几种氨基酸前体物对红豆杉愈伤组织的生长和紫杉醇含量的影响 [J], 翟雪霞;李友勇
2.高效液相色谱法测定东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量 [J], 张艳平;刘同祥
3.红豆杉植物和愈伤组织培养物中紫杉醇含量的检测 [J], 杜亚填;许建宇;卜晓英;于华忠;曹庸
4.植物生长调节剂对南方红豆杉愈伤组织培养和紫杉醇合成的影响 [J], 杜亚填;陈建华;许建宇;曹庸;周朴华
5.南方红豆杉外植体母株来源与培养基成分对愈伤组织生长和紫杉醇的影响 [J], 陈惠;王文科;卢英梅;白新生
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红豆杉细胞培养中紫杉醇高产细胞株的筛选及其稳定性分析李志良;李干雄;饶秋容;黄巧明;曾腾锋【期刊名称】《植物资源与环境学报》【年(卷),期】2007(16)1【摘要】对中国红豆杉 [Taxus chinensis (Pilger) Rehd.]、云南红豆杉(T. yunnanensis Cheng et L. K. Fu)和东北红豆杉(T. cuspidata Sieb. et Zucc.)不同部位的愈伤组织进行培养及分析比较.结果表明,中国红豆杉愈伤组织生长较快,其叶片诱导的愈伤组织紫杉醇含量较高,且紫杉醇含量与培养物的外观特征有明显相关性,颜色浅、块状或颗粒较明显的细胞团紫杉醇含量较高.运用细胞看护培养技术,从中国红豆杉愈伤组织中筛选出生长速率达0.52 g·L-1·d-1、紫杉醇含量超过0.01%的细胞优株,经20次继代培养,其生长和紫杉醇含量均较稳定.【总页数】4页(P62-65)【作者】李志良;李干雄;饶秋容;黄巧明;曾腾锋【作者单位】梅雁生物工程研究所,广东,梅州,514787;梅雁生物工程研究所,广东,梅州,514787;梅雁生物工程研究所,广东,梅州,514787;梅雁生物工程研究所,广东,梅州,514787;梅雁生物工程研究所,广东,梅州,514787【正文语种】中文【中图分类】S567.1+9;Q943.1【相关文献】1.红豆杉细胞培养物中紫杉醇的快速分离柱高效液相色谱法测定 [J], 朱慧贤;章新;王林;杨光宇;胡秋芬2.HPLC法检测红豆杉细胞培养物中的紫杉醇 [J], 柯铁;陈菁;周爱文;梅兴国;余广鳌3.诱导子在红豆杉细胞培养生产紫杉醇中的应用研究进展 [J], 仇燕;贾宁;王丽;王刚4.改进的HPLC法测定红豆杉植物和细胞培养物中紫杉醇的含量 [J], 黄巧明5.南方红豆杉细胞培养中紫杉醇代谢调节的研究 [J], 贾宁;仇燕;王丽;王刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
南方红豆杉悬浮细胞培养生产紫杉醇及其细胞培养物的化学成
分研究
南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei)又称美丽红豆杉,是特产于我国的一个变种红豆杉,广泛分布在我国大部分地区。
南方红豆杉的树皮、叶、根、枝等部位均含有紫杉醇。
为了保护、合理利用已有的南方红豆杉资源,自上个世纪90年代开始,我国就对南方红豆杉开展了人工栽培、植物组织培养等研究。
植物细胞培养因其繁殖速度快,培养条件易于优化,可以人工控制培养过程,实验过程不受时间、气候等因素的影响,同时提取纯化过程相对简单等优点,受到了人们越来越多的关注。
本论文对南方红豆杉的嫩茎进行愈伤组织的诱导,成功获得一株高产紫杉醇细胞株,并对其进行扩大培养。
为了提高紫杉醇的含量,我们在愈伤组织诱导试验中对外植体进行了选择,对诱导过程中的条件进行了优化,最终选定的条件为:B5基本培养基,添加1mg/L 2,4-D、0.1 mg/L 6-BA、100 mg/L Vc、0.2928 g/L谷氨酰胺与15 g/L蔗糖,p H调至5.8,黑暗下培养。
在此条件下,紫杉醇的含量最高达到了100 mg/L(鲜重);除主要目标产物紫杉醇,我们还对细胞培养物进行了系统的化学成分研究,并运用各种色谱手段从中分离得到了15个化合物,利用MS,UV,IR,NMR,单晶X-衍射等方法鉴定了其中13个化合物的结构,包括1个新化合物,4个首次从南方红豆杉细胞培养物中得到的化合物。
在此基础上,我们对该细胞培养物进行LC-MS色谱峰的指认,同时还对获得的部分化合物进行了体外抗肿瘤活性的初步研究。
南方红豆杉组织培养体系优化郄亚微【摘要】为建立南方红豆杉(Taxus chinensis)愈伤组织的高效诱导体系,提高红豆杉愈伤组织的诱导率和成活率,分别对南方红豆杉愈伤组织诱导的培养基、外植体接种方法、植物生长调节剂、pH 进行优化试验,结果得出：最适宜的培养基为B5改良型、最佳接种方法为无叶茎段正插入培养基、添加2.0 mg/L 2,4-D或1.0mg/LNAA、pH 控制在6左右,可以分别有效地提高红豆杉愈伤组织的诱导率和成活率。
【期刊名称】《长江大学学报（自然版）理工卷》【年(卷),期】2016(013)009【总页数】5页(P42-45,49)【关键词】南方红豆杉 (Taxus chinensis);组织培养;愈伤组织;优化【作者】郄亚微【作者单位】广安职业技术学院建筑与城市规划系，四川广安 638000【正文语种】中文【中图分类】Q813.1+2红豆杉(Taxus chinensis )是一种珍稀的裸子植物，具有非常重要的药用价值和经济价值，其富含的紫杉醇是有效的癌症治疗药物，近年来随着对紫杉醇的需求增加，传统的种植方式提供的紫杉醇已经无法满足目前药用的需要。
如何采用科学的方法对红豆杉组织进行快速培养和大量生产，以大量获得紫杉醇，满足药用需求，成为了目前医疗药材生产中急需解决的问题[1]。
植物组织培养技术是指在无菌的条件下，将植物组织置于培养基内，并将培养基放置到适宜的环境中进行连续的培养得到新的组织[2]，这种技术非常适合大批量的生产和培育特定的植物组织和幼苗，被广泛地应用于生物、农业和医药等科技领域的相关研究中。
早在20世纪中期美国就采用组织培养技术成功地取代了传统的种植繁殖培育出了芹菜幼苗[3]，并且在后续研究中成功地应用到多种植物的幼苗和组织培养中，给农业育种带来了革命性的变化[4]。
到20世纪末，德国和日本就已经利用植物组织培养技术生产次生代谢物，这一技术后来被广泛应用于各种稀有植物类药物的生产，极大地降低了稀有药物的价格，有效地促进了医药生物技术的发展和进步[5]。
红豆杉中紫杉醇积累随生长部位和年龄的变化分析与评价张九东【摘要】@@%采用SPSS13.0对红豆杉中紫杉醇含量与其生长部位和生长年龄进行方差分析,评价不同生长部位和不同叶龄紫杉醇积累的变化.研究表明:在木质部、幼枝、叶及枝皮等这些部位中,除木质部与幼枝中紫杉醇含量无明显差异外,其它各部位间紫杉醇含量差异显著；一、二、三年生枝上叶中紫杉醇含量随着年龄的增加而增加,并且差异性十分显著,而且树皮与不同年龄枝上叶中紫杉醇含量之间的差异性也十分显著.【期刊名称】《陕西农业科学》【年(卷),期】2012(058)006【总页数】4页(P105-107,115)【关键词】紫杉醇含量;部位;年龄【作者】张九东【作者单位】西安文理学院生物技术学院,陕西西安710065【正文语种】中文紫杉醇（taxol）是最具抗癌活性的天然化合物［1］。
在治疗乳腺癌、肺癌、胃癌、黑色素肿瘤等方面疗效显著［2－6］。
天然的紫杉醇是从红豆杉属植物中提取出来的一种次生代谢产物，但其含量很低。
研究表明，在红豆杉属植物的不同部位中均含有紫杉醇［7－10］，但主要积累在叶和皮中［11］，一般认为紫杉醇含量在树皮中的含量高于叶、幼枝、木质部和假种皮［9］。
也有研究认为叶中紫杉醇含量高于树皮［12］。
同时，紫杉醇含量与植物的生长年龄密切相关，对于同一棵树，不同的组织部位，紫杉醇随年龄的变化也不尽相同。
叶子越老紫杉醇含量越高，而茎越嫩紫杉醇含量越高［13］。
目前，尽管化学合成紫杉醇已经成为可能，但此方法费用昂贵，没有经济效益［14－15］。
半合成法虽然获得了成功，但它还是依赖于植物资源［15］。
因此，深入研究叶和树皮中紫杉醇含量相互关系，尤其是对不同年龄枝上叶中紫杉醇的深入研究，为在今后进一步保护、种植、开发利用该植物资源具有非常重要的价值。
陕西省秦巴山区生长的主要是红豆杉（Taxus wallichiana Zucc.var.chinensis （Pilger）Florin.）。
浅谈诱导紫杉醇增量的南方红豆杉高产培育措施摘要：本文涉及一种诱导紫杉醇增量的南方红豆杉高产培育技术。
主要研究在传统的种植技术上对其进行改进。
本文主要从研究背景、技术原理等方面进行研究讨论，从而研究出一种产量更高，经济与技术效益更好的培育措施。
关键词：紫杉醇、南方红豆杉、碱含量一、背景南方红豆杉（Taxus Walichiana var. mairei），属于红豆杉科，红豆杉属植物，南方红豆杉幼林阶段属阴性树种。
从南方红豆杉中分离得到具有显著抗癌活性成分—紫杉醇用于治疗乳腺癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、结肠癌等多种癌症，疗效确切，副作用较小。
但由于南方红豆杉属于国家一级野生保护植物，资源稀少，对于巨大的市场需求，只能发展人工培植，而且笔者发现虽然目前社会上研究了很多种培养南方红豆杉的方法，但或多或少都存在一定缺陷，从而影响南方红豆杉的产量等问题，比如此前有介绍一种南方红豆杉盆景栽培方法，该方法介绍了利用盆景栽培南方红豆杉中土壤、种苗选育、土壤施肥、幼苗抚育、移栽等技术，该方法的优点是将大田种植的南方红豆杉移栽到了花盆中，降低了管理难度。
但是该发明只把南方红豆杉作为观赏植物，影响了南方红豆杉的正常生长，降低了生物量；介绍一种南方红豆杉种植方法，该方法主要介绍了南方红豆杉种植中播种育苗和栽培造林的技术问题，实现了南方红豆杉科学育苗、大面积快速栽培，提高了造林成活率，增加了南方红豆杉资源。
该方法只是实现了大面积培育，没涉及南方红豆杉速生丰产，属于南方红豆杉资源培育阶段，也没有涉及提高紫杉醇含量的问题；介绍一种提高栽培红豆杉中紫杉醇含量的方法，该方法是在红豆杉根部的土壤中施入含镧化合物作为肥料添加剂以提高紫杉醇含量。
该方法只注重了紫杉醇含量，没有关注红豆杉的生物量，因此也不能提高紫杉醇的产量，本方法是应用化学方法提高紫杉醇含量的，不是应用生物技术来提高紫杉醇的含量；介绍一种红豆杉的人工栽培方法，该方法重点介绍了红豆杉种植中土壤中肥料、含水量及移栽等事项，该方法的优点是可以大量培植红豆杉，解决资源濒危的问题，但红豆杉是一种有巨大药用价值的珍惜濒危植物，该方法没有解决增加单位面积红豆杉生物量，提高紫杉醇产量的问题；介绍一种红豆杉的种植方法，该方法介绍了种子采集、选择育苗地、整地施肥、种子催芽、田间管理和越冬保护的过程，并介绍了扦插育苗方法，该方法解决了红豆杉的人工种植方法问题，也属于红豆杉资源培育的问题，没有涉及提高生物量和紫杉醇产量范畴。
文章标题：红豆杉的愈伤组织提取紫杉醇的研究与应用一、引言红豆杉作为一种重要的天然植物资源，其愈伤组织作为提取紫杉醇的重要来源，一直备受关注。
本文将从红豆杉的愈伤组织性质、紫杉醇的提取方法和应用研究三个方面展开讨论。
二、红豆杉的愈伤组织性质1. 红豆杉的愈伤组织特点红豆杉的愈伤组织在组织结构、生长特性和代谢活性等方面具有独特性，为紫杉醇的提取提供了重要的基础条件。
2. 愈伤组织的培养条件对红豆杉愈伤组织的培养条件进行详细介绍，并探讨对紫杉醇含量和生长速率的影响。
三、紫杉醇的提取方法1. 传统提取方法介绍传统的红豆杉愈伤组织提取紫杉醇的方法，并对其优缺点进行分析和评价。
2. 新技术的应用介绍目前在红豆杉紫杉醇提取中使用的新技术，如超临界流体萃取、微波辅助提取等，并对其效果进行评估。
4. 紫杉醇的应用研究1. 化学成分和药理作用对紫杉醇的化学成分、药理作用进行详细阐述，从分子水平和整体作用机制上揭示其多功能性。
2. 临床应用和前景展望介绍紫杉醇在临床上的应用情况和治疗效果，并展望其在肿瘤治疗、抗癌药物开发方面的前景。
五、个人观点和总结红豆杉的愈伤组织提取紫杉醇作为一种重要的研究领域，具有广阔的应用前景和深远的意义。
在未来的研究中，应充分利用现代生物技术和化学技术，不断提升紫杉醇的提取效率和纯度，以更好地发挥其药用价值。
通过深入研究红豆杉的愈伤组织提取紫杉醇，我们对该过程的原理和应用有了全面的认识和了解。
这样的了解对于我个人来说具有非常重要的意义。
希望通过文章的阐述能够让更多的人了解并重视这一研究领域，从而推动相关科研工作的进展。
结束语通过本文的详细介绍和讨论，相信读者对红豆杉的愈伤组织提取紫杉醇的研究与应用有了更深入的了解。
同时也希望本文的内容能够对您的学术研究和实践工作有所帮助。
期待更多的科研人员和爱好者能够加入到这一领域的研究和探讨中，共同推动红豆杉愈伤组织提取紫杉醇领域的发展与进步。
红豆杉作为一种重要的天然植物资源，其愈伤组织提取紫杉醇的研究和应用正在逐渐受到人们的关注。
南方红豆杉愈伤组织诱导研究
王德强;王晓玲
【期刊名称】《合肥工业大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2005(028)004
【摘要】文章研究了从南方红豆杉的幼叶及幼茎,在MS、B5、N6及SH4种培养基上的诱导愈伤组织的情况,并对愈伤组织的诱导条件进行优化,结果表明以幼叶及幼茎作为外植体在MS培养基上产生愈伤组织的速度较快,7 d即有愈伤组织发生,但愈伤组织也容易褐化;而B5和N6培养基愈伤组织机构紧密,褐化少.不同部位外植体诱导愈伤组织有差异,茎、叶容易诱导愈伤组织,根的诱导率差.外植体大小对于愈伤组织影响显著,带有部分叶的茎段不能够形成愈伤组织,带有根的茎段则可以诱导愈伤组织.
【总页数】4页(P394-397)
【作者】王德强;王晓玲
【作者单位】安徽工业大学,化学工程学院,安徽,马鞍山,243002;安徽工业大学,化学工程学院,安徽,马鞍山,243002
【正文语种】中文
【中图分类】Q943.1
【相关文献】
1.南方红豆杉愈伤组织诱导的研究 [J], 赵冬;肖颖;刘占荣;王刚
2.不同因素对南方红豆杉愈伤组织诱导的初步研究 [J], 王荣明;陈秋良;王烨;吴红
梅;刘人菁
3.南方红豆杉愈伤组织的诱导、生长及培养条件的研究 [J], 俞利红
4.硅对南方红豆杉愈伤组织诱导及增殖培养的影响 [J], 袁云香
5.南方红豆杉组织培养研究Ⅰ.愈伤组织诱导和培养条件优化 [J], 赵芳;倪良;耿征;刘谦光
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·药材与资源·南方红豆杉愈伤组织培养条件的优化及紫杉醇积累的基因表达效应分析张芳芳,王 鹏,姬丹丹,向凤宁＊(山东大学生命科学学院细胞工程及种质创新教育部重点实验室,山东济南 250100)摘 要:目的 优化南方红豆杉愈伤组织诱导与继代培养条件,获得含紫杉醇量高的红豆杉愈伤组织,明确紫杉醇合成相关基因的表达模式与紫杉醇量的关系。
方法 探讨了适合南方红豆杉的愈伤组织诱导及继代培养的激素组成及浓度。
比较了南方红豆杉(种胚、幼茎、幼芽)、曼地亚红豆杉(种胚)和太平洋红豆杉(种胚)不同外植体来源的愈伤组织的生长特点和紫杉醇的量,分析了不同愈伤组织紫杉醇合成相关基因的表达差异。
结果 添加3.0mg/L2,4-D的M urashige&Skoog(M S)培养基有利于南方红豆杉的诱导,诱导率高于92%。
添加2.0mg/L2,4-D与1.0mg/L6-苄基腺嘌呤(6-BA)的继代培养基有利于南方红豆杉的紫杉醇积累。
同一培养条件下,南方红豆杉种胚来源的愈伤组织紫杉醇量最高,达到干质量的0.027%。
含紫杉醇量高的愈伤组织,其紫杉醇合成途径中的牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(G GP PS)、紫杉二烯合成酶(T A SY)、紫杉烷-10β-羟化酶(T10βH)、10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-β-O-乙酰转移酶(DBA T)、苯丙氨酸氨基变位酶基因(P A M)、去苯甲酰紫杉-N-苯甲酰转移酶(DBT N BT)等酶基因的表达水平高。
结论 从南方红豆杉的种胚为外植体源获得了含紫杉醇量高的愈伤组织,提高G G PPS、T A SY、T10βH、DBA T、P AM、DBT N BT的表达水平将促进紫杉醇的合成。
关键词:红豆杉属;愈伤组织诱导;紫杉醇;基因表达中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:02532670(2010)12205805Optimization of callus culture conditions for Taxus chinensis var.mairei and effectof gene expression of Taxol accumulationZHANG Fang-fang,WANG Peng,JI Dan-dan,XIANG Feng-ning(K ey L abo ra to ry of P lant Ce ll Enginee ring and G ermpla sm Innova tion,M inistry of Educatio n,Co lleg e of Life Science,Sha ndong Univ ersity,Jinan250100,China)A bstract:Objective The callus induction and subculture condition of Ta xus chinensis var.mairei were optimized in the ex periment.Hig h Tax ol-yielding callus w as o btained,and the co rrelation betw een e xpre ssion patterns of Taxol biosy nthesis related genes and Tax ol content w as defined.Methods Optimal ho rmo ne composition and concentration for induction and subculture of callus derived from T.chinensis var.m airei w ere briefly studied.The g row th characteristics and Tax ol content of calli derived from T. chinensis var.mairei(including vitro embry os,juvenile stem s,and juvenile buds),T.med ia(vitro em-bry os)and T.brev i folia(vitro embryo s)w ere compared.Ex pression of Taxol bio synthesis related genes in the above different calli w as analyzed.Results M S Medium supplem ented w ith3.0mg/L2,4-D w as suitable for callus induction o f T.chinensis v ar.mairei,the induced rate is up to92%.Subculture medi-um supplemented with2.0mg/L2,4-D and1.0mg/L6-BA w as suitable for Tax ol biosy nthesis of T. chinensis v ar.mairei.Under the same culture conditio ns,Taxol content of calli de rived fro m vitro embry-o s of T.chinensis var.mairei w as the highest and had reached0.027%of callus dry w eight.The genes of Tax ol biosy nthesis related enzy mes—g eranylg erany l diphosphate synthase(GGPPS),taxadiene sy nthase (TAS Y),taxane-10β-hy dro xylase(T10βH),10-deacety lbaccatinⅢ-β-10-O-acetyltransferase(DBA T), pheny lalanine aminom utase(PAM),and3′-N-debenzoy ltax ol N-benzoyltransferase(DBTNBT),w ere ex-pressed at the hig h level in the high Tax ol-pro ducing callus.Conclusion Vitro em bry os can be used as the first choice explant source to obtain hig h Taxo l-yielding callus.To im pro ve gene expression level of GG-PPS,TASY,T10βH,DBA T,PAM,and DBTNBT w o uld prom ote Tax ol biosynthesis.Key words:Tax us L.;callus induction;Taxo l(paclitaxel);gene expressio n收稿日期:2010-05-07基金项目:国家自然科学基金资助项目(30771116,30970243),山东省杰出青年基金(QJ200810)作者简介:张芳芳(1986—),女,江西上饶人,硕士,主要从事药用植物细胞工程和基因工程研究。
E-m ail:Zhangfangfang010@ ＊通讯作者 向凤宁,教授,博士生导师,主要从事药用植物细胞工程和基因工程研究。
Tel:(0531)88363639 E-mail:xfn0990@ 紫杉醇(Taxol)是存在于红豆杉属植物中的一种四环二萜酰胺类化合物,是国际公认的广谱、强活性天然抗癌药物之一[1-3]。
目前紫杉醇主要从红豆杉树皮中提取或通过半合成途径获得[4]。
但由于红豆杉生长缓慢,因而原料供应极度匮乏。
目前红豆杉组织培养已成为生产紫杉醇的一条重要途径[5-7]。
红豆杉属植物全世界共有11种,主要分布在北半球。
曼地亚红豆杉Tax us media Rehd.是东北红豆杉与欧洲红豆杉的天然杂交种,太平洋红豆杉T.brevi folia Nutt.又称短叶红豆杉,这两种红豆杉均分布在北半球。
在中国分布的红豆杉属植物共有4种和1变种,其中南方红豆杉Ta xus chinensis (Pilge r)Rehd.var.mairei(Lemee et Lév l.) Cheng e t L.K.Fu是中国红豆杉的一个重要变种[8],其树皮中含紫杉醇的量为0.0178%[9]。
有关南方红豆杉愈伤组织诱导的外植体研究也有较多报道[10],主要集中在1～2年生的枝条、叶、幼嫩茎段[11-16],但从种胚来源的愈伤组织诱导及继代培养报道甚少[17-19]。
紫杉醇的骨架合成是从二萜共同前体牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸(g erany lgerany l pyro phosphate, GGPP)开始,从GGPP到紫杉醇需要19个酶促步骤。
首先GGPP在紫杉二烯合酶的催化下生成紫杉二烯;接着,通过下游的8步细胞色素P450介导的氧合反应,3步CoA依赖的酰化反应,C9位上的一步氧化反应,以及C5位上的氧环化反应,形成了中间产物巴卡亭Ⅲ,最后通过5步侧链合成途径形成紫杉醇[20]。
本实验以南方红豆杉种胚、嫩茎和幼茎为材料,进行了南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养的条件优化。
分析了南方红豆杉、曼地亚红豆杉和太平洋红豆杉愈伤组织生长、紫杉醇合成相关基因表达与紫杉醇量的相关性,为大规模生产紫杉醇及揭示紫杉醇代谢的分子调控机制提供了依据。
1 材料与方法1.1 试验材料:南方红豆杉当年生的嫩茎、幼茎和成熟种子于秋季采自江西修水县黄港镇垅港,海拔430m山谷林中的野生南方红豆杉植株。
材料由九江森林植物标本馆(JJF)谭策铭鉴定。
曼地亚红豆杉、太平洋红豆杉种子由茂县春回农业科技产业开发有限责任公司提供。
紫杉醇对照品购自Sigma 公司,甲醇为色谱级。
高效液相为岛津LC—10AT 型高效液相色谱系统。
1.2 外植体的处理:取南方红豆杉外植体,用洗衣粉清洗干净,流动的自来水下冲洗2h,再用体积分数为75%乙醇浸泡30s,然后在质量分数为0.1%的升汞溶液中处理10min,最后用无菌水冲洗3～4次。
外植体分为3种类型:(1)去外种皮的成熟种子,在无菌滤纸上将胚剥离;(2)茎段,切成0.5～1.5cm长的小段;(3)侧芽,剥去少数外鳞后,用剪刀稍剪碎。
