BCA蛋白浓度测定试剂盒

BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号产品名称包装价格P0012 BCA蛋白浓度测定试剂盒500次258.00 元O 碧云天生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单，高稳定性，高灵敏度和高兼容性。

O 灵敏度高，检测浓度下限达到25微克/毫升，最小检测蛋白量达到0.5微克，待测样品体积为1-20微升。

O 在50-2000微克/毫升浓度范围内有较好的线性关系。

O BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween20, 60, 80。

但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于1mM。

不适用BCA法时建议使用碧云天Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

O BCA蛋白浓度测定试剂盒对样品中各种物质详细的兼容性表，参见BCA蛋白浓度测定兼容性表。

O 每个试剂盒可以检测500个样品。

包装清单：BCA试剂A 100 mlBCA试剂B 3 ml蛋白标准（5mg/ml BSA） 1 ml说明书 1 份保存条件：BCA试剂A和B室温保存，蛋白标准请-20℃冻存。

本试剂盒自订购之日起一年注意事项：O 需酶标仪一台，测定波长为540-595nm之间，562nm最佳。

需96孔板。

如果没有酶标仪，也可以使用普通的分光光度计测定，但是测定蛋白浓度时，需根据测定吸光度的杯子的体积，按比例调整A液,B液和样品的体积。

使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。

O 如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

O 为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热，但是切勿过热。

O EDTA浓度必需小于10mM，不兼容EGTA。

不适用BCA法时，请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。

bca蛋白浓度测定试剂盒原理
BCA蛋白浓度测定试剂盒是一种常用于测定蛋白质浓度的试剂盒，原理主要基于蛋白质与试剂盒中的铜离子在碱性条件下形成紫色融合复合物。

试剂盒中的主要成分包括BCA试剂、BSA标准品和NaOH溶液。

具体操作步骤如下：
1. 准备待测蛋白样品和BSA标准品。

BSA标准品是已知浓度的蛋白质，可用于建立一个标准曲线。

待测蛋白样品和BSA 标准品需稀释至适宜的浓度范围。

2. 取一定量的待测蛋白样品和BSA标准品分别加入试管中。

3. 加入BCA试剂，BCA试剂中含有两个重要的成分：琼脂糖和胺基乙酸。

胺基乙酸能够稳定铜离子，而琼脂糖能够与蛋白质在碱性条件下形成紫色融合复合物。

4. 使用乙醇洗涤液洗涤玻璃坩埚，将洗净后的玻璃坩埚用于测定。

5. 加入NaOH溶液，NaOH溶液用于加强试剂与蛋白质之间的相互作用。

6. 将试管放入水浴中加热，使反应发生。

7. 反应完成后，测量吸光度。

BCA试剂与蛋白质形成的紫色产物在560 nm处具有吸光度。

8. 使用标准曲线计算待测蛋白样品的浓度。

总结：BCA蛋白浓度测定试剂盒的原理是利用蛋白质与试剂盒中的铜离子在碱性条件下形成紫色融合复合物，通过测量吸光度来计算蛋白质的浓度。

BCA蛋白定量试剂盒配制及内部操作SOP一、BCA试剂盒配制流程1、标准品配制：配制2mg/ml的BSA标准品，以50ml为例，各成分加入量如下表：原料浓度加入量（mg）厂家货号牛血清白蛋白（BSA）0.2%100北京（二楼生产部提供）YSCW2500氯化钠（NaCl）0.9%450国药集团化学试剂有限公司10019308叠氮化钠0.05%25成都金山化学试剂有限公司/注意：为了确保检测的准确性，应用微量天平精准称量100mg，然后定容至50ml，1ml/管分装，4℃保存。

2、工作液配制由于A液和B液加入比例为50:1，因此配制工作液时A液各成分加入量按照1000ml配制量加入，B液成分按照25ml配制量加入。

原料浓度加入量（g）厂家货号A液（1000ml）二喹啉甲酸（BCA）1％10aladdin B107658无水碳酸钠2％20天津博迪化工股份有限公司/碳酸氢钠0.95%9.5国药集团化学试剂有限公司10018960酒石酸钠0.16% 1.6国药集团化学试剂有限公司30169818氢氧化钠0.4％4国药集团化学试剂有限公司10019762B液（25ml）硫酸铜4％1国药集团化学试剂有限公司81005261备注：A液各成分混合之后，调节PH至11.25。

二、BCA法蛋白定量操作SOP1、标准品稀释按照下表制备一组蛋白质标准品。

将一安瓿的牛血清白蛋白标准品（BSA）稀释到几个干净的小瓶中，最好使用与待测样品相同的缓冲液。

每一个1mL安瓿的2mg/mL牛血清白蛋白标准品足够用于制备下表中所列出的任意一组稀释范围的标准品；每个稀释浓度的标准品的体积足够用于3次重复检测。

用于标准方案的稀释方法（检测范围=20-2,000ug/mL）如下：标准液编号稀释液体积（ul）标准品体积（ul）标准液终浓度（ug/ml）A03002000B125375ul的A1500C325325ul的A1000D175175ul的B750E325325ul的C500F325325ul的E250G325325ul的F125H400100ul的G25I40000用于试管增强方案的稀释方法如下（检测范围=5–250ug/mL）：标准液编号稀释液体积（ul）标准品体积（ul）标准液终浓度（ug/ml）A700100250B400400ul的A125C450300ul的B50D400400ul的C25E400100ul的D5F400002.样品稀释：根据需要，将样品用用PBS或者与待测样品缓冲液相同的溶液稀释至线性范围内（所用稀释液与标准品稀释液应保持一致）。

BCA蛋白定量试剂盒(Thermo)使用指南BCA蛋白定量试剂盒(Thermo)使用指南概要：BCA蛋白定量试剂盒是一种广泛应用于生物化学和分子生物学实验室中的试剂盒。

本文将提供BCA蛋白定量试剂盒的使用指南，以帮助研究人员准确、方便地进行蛋白质定量实验。

引言：蛋白质定量是生物化学和分子生物学研究中的关键步骤之一。

BCA 蛋白定量试剂盒是一种经典的蛋白质定量方法，利用铜离子在碱性条件下与蛋白质中的蛋白质氨基酸反应生成紫色络合物，这个络合物的吸光度与蛋白质的浓度呈线性关系，从而可以通过光谱测定吸收值来计算蛋白质的浓度。

材料与试剂：1. BCA蛋白定量试剂盒(Thermo)2. 蛋白质标准品3. 去离子水4. 96孔板5. 震荡器/离心机6. 吸光度计步骤：1. 首先使用去离子水清洗96孔板，并将其放置在震荡器或离心机中以除去潜在的污染物。

2. 根据需要，准备一系列不同浓度的蛋白质标准品，并分别添加到96孔板中的不同孔位中。

注意，至少应包括一个空白孔位作为背景对照。

推荐使用浓度范围为0-2000 μg/mL的标准品。

3. 使用BCA蛋白定量试剂盒中的试剂，按照提供的说明书中的配方将试剂稀释到适当的浓度。

4. 将BCA蛋白定量试剂加入到96孔板的所有孔位中，每孔100 μL。

确保试剂均匀覆盖样品。

5. 轻轻摇晃或轻轻震动96孔板，以确保试剂与样品充分混合。

6. 将96孔板放置在室温下孵育30分钟，使试剂与蛋白质反应。

7. 使用吸光度计在562 nm波长下测量各孔位的吸光度。

确保仪器进行基线校准，并将空白孔位的吸光度值设为零点。

8. 使用标准曲线法，根据吸光度测量值计算样品中的蛋白质浓度。

注意事项：1. 请遵循BCA蛋白定量试剂盒的说明书中的操作指南，确保准确性和可靠性的结果。

2. 避免使用异柠檬酸盐缓冲液，因为它会干扰试剂的反应。

3. 在使用吸光度计前，请确保对仪器进行基线校准。

4. 为了提高准确性，建议每个样品至少重复三次测量，然后取平均值。

BCA蛋白浓度测定试剂盒产品编号：SK1070保存条件：室温保存。

蛋白标准配制成溶液后-20℃冻存。

包装清单：组分编号产品组成SK1070-250T SK1070-500T SK1070-5000T SK1070-1A液50ml100ml8*125mlSK1070-2B液 1.5ml3ml30mlSK1070-3蛋白标准(5mg/ml BSA)0.5ml1ml10*1ml —说明书1份产品简介：BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据最常用的BCA蛋白浓度检测法研制而成，实现了蛋白浓度测定的简单化，稳定性高，灵敏度高和兼容性好。

最小检测浓度达到25µg/ml，最小检测蛋白量达到0.5µg，待测样品体积为1-20µl。

在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。

BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的TritonX-100，5%的Tween20,Tween60,Tween80。

但受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇低于1mM，β-巯基乙醇低于0.01%。

每个试剂盒可以检测500个样品。

使用说明：1.取适量5mg/ml蛋白标准，用0.9%NaCl或PBS稀释至终浓度为0.5mg/ml。

稀释后的0.5mg/ml蛋白标准也可以-20℃长期保存。

2.根据样品数量，按50体积A液加1体积B液配制适量BCA工作液，充分混匀。

例如5ml A液加100µl B液，混匀，配制成5.1ml工作液。

工作液室温24小时内稳定。

3.将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20µl加到96孔板的标准品孔中，加标准品稀释液，补足到20µl。

4.加适当体积样品到96孔板的样品孔中，加标准品稀释液到20µl。

BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明BCA法（bicinchoninic acid assay）是一种用于测定蛋白质含量的常用方法。

BCA法蛋白含量测定试剂盒使用说明如下：试剂盒组成：1.BCA试剂A：含有重铜离子和碱性溶液。

2.BCA试剂B：含有双咪唑试剂和碱性溶液。

3.蛋白标准溶液：一系列已知浓度的牛血清蛋白标准溶液。

4.BCA试剂C：含有特殊缓冲溶液。

注意事项：1.所有试剂和样品在使用前均需室温下静置至少30分钟。

2.打开试剂盒后，避免将试剂直接暴露于空气中，以免影响试剂稳定性。

3.在所有步骤中，使用干净且蛋白污染的工具可能会导致错误的结果。

步骤1：制备标准曲线1.准备一系列不同浓度的蛋白标准溶液，如0、20、40、60、80和100μg/mL。

2.取0.1mL蛋白标准溶液加入1.9mL去离子水，即配制出100μg/mL的稀释溶液。

3.以同样的方法依次配制出20、40、60和80μg/mL的稀释溶液。

4.将每个稀释溶液的0.2mL与2mLBCA试剂A混合，放置30分钟。

5.加入0.5mLBCA试剂B，再次混合均匀。

6.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。

7. 使用紫外-可见光谱仪测定吸光度，以280 nm为波长，绘制标准曲线。

步骤2：测定待测样品1.取待测样品，如细胞裂解液，加入BCA试剂C进行稀释，使得样品中的蛋白质浓度在标准曲线范围内。

2.取样品0.1mL加入1.9mL去离子水，配制出与标准曲线相同浓度的稀释液。

3.加入1mLBCA试剂A混合均匀，放置30分钟。

4.加入0.2mLBCA试剂B，再次混合均匀。

5.将混合液放置37°C加热反应30分钟后冷却至室温。

6. 使用280 nm波长的紫外-可见光谱仪测定吸光度。

步骤3：计算蛋白质含量1.将待测样品的吸光度值与标准曲线进行比较，根据吸光度值确定样品中蛋白质的含量。

2.通过线性拟合标准曲线计算待测样品中蛋白质的浓度。

BCA蛋白定量试剂盒使用说明书一、产品简介BCA 蛋白定量试剂盒是一种常用的蛋白质浓度测定方法，具有操作简便、灵敏度高、准确性好等优点。

本试剂盒适用于细胞裂解液、组织匀浆、血清、血浆等多种样品中总蛋白浓度的定量测定。

二、试剂盒组成1、 BCA 工作液：A 液与 B 液按 50:1 的比例混合而成，现配现用。

2、蛋白标准品（2mg/ml）：牛血清白蛋白（BSA）溶液。

3、 96 孔板三、所需设备1、酶标仪（波长 562nm）2、移液器（量程分别为20μl、200μl、1000μl）3、涡旋振荡器4、离心机四、操作步骤1、标准曲线的绘制（1）将蛋白标准品（2mg/ml）用 PBS 或生理盐水稀释成一系列浓度梯度，如0μg/ml、25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml、400μg/ml、600μg/ml、800μg/ml、1000μg/ml、1500μg/ml、2000μg/ml。

（2）在 96 孔板中，每个浓度梯度设置 2 个复孔。

分别向孔中加入25μl 不同浓度的标准品溶液。

（3）向每个孔中加入200μl BCA 工作液，轻轻振荡混匀，37℃孵育 30 分钟。

（4）使用酶标仪在 562nm 波长下测定吸光度值（OD 值）。

（5）以蛋白浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，绘制标准曲线。

2、样品测定（1）将待测样品用 PBS 或生理盐水适当稀释（若样品浓度过高，可能会超出标准曲线范围）。

（2）在 96 孔板中，设置样品孔和空白孔（仅加25μl 稀释液和200μl BCA 工作液）。

向样品孔中加入25μl 稀释后的样品。

（3）向每个孔中加入200μl BCA 工作液，轻轻振荡混匀，37℃孵育 30 分钟。

（4）使用酶标仪在 562nm 波长下测定样品孔和空白孔的吸光度值（OD 值）。

（5）样品的蛋白浓度可根据标准曲线计算得出。

五、注意事项1、 BCA 工作液应现配现用，避免长时间放置导致失效。

BCA蛋白浓度测定试剂盒说明23225蛋白质化验试剂盒：为500试管或5000微孔板的检测提供充足的试剂23227蛋白质化验试剂盒：为250试管或2500微孔板的检测提供充足的试剂试剂盒组分：BCA 试剂A，1000 mL (No. 23225产品中) 或500mL ( No. 23227产品中)，碳酸钠，碳酸氢钠，二喹啉甲酸，酒石酸钠溶于0.1 M氢氧化钠中。

BCA 试剂B , 25 mL, 包括4%硫酸铜一次性标准白蛋白, 2mg/ mL, 10 × 1 mL 安瓿, 包含2 mg/ mL牛血清白蛋白(BSA) 存在于0.9% 盐和0.05%叠氮化钠中。

储存：以上试剂保持在室温下储存和装运注意：如果试剂A 或试剂B 在低温下运输或长期储存时出现沉淀现象，可以通过缓慢加温或轻轻搅拌溶液使沉淀物溶解。

当试剂变色或确定微生物污染时请丢球试剂盒。

目录介绍 (1)准备标准试剂和工作试剂 (2)准备试管 (3)准备微型版 (3)故障检修 (4)有关美国热电其他产品 (5)附加信息 (5)参考文献 (6)介绍美国热电（Thermo）公司的BCA蛋白浓度测定试剂盒是基于二喹啉甲酸(BCA)通过比色检测和定量测定总蛋白的洗涤剂兼容配方。

该方法通过碱性介质中的一种蛋白结合了Cu2使其显著减少转变为Cu1 （缩二脲反应）。

用一种含二奎琳甲酸的试剂选择性的比色法高敏感的比色杯中的Cu1. 这种测定方法的紫色色反应产物是通过BCA的两个分子和亚铜离子螯合作用形成的。

这种水溶性复合物在562nm 处有强吸收峰。

在大的活性范围内(20-2000µg / mL）几乎同蛋白浓度增加呈线性关系。

BCA 法不是真正的终点的方法；也就是说，最终颜色继续发展。

孵化之后, 继续的颜色发展速度是足够慢以允许一起进行测定大量样本。

大分子结构的蛋白质,肽键的数量和存在的四个特定氨基酸(半胱氨酸,胱氨酸，色氨酸和酪氨酸)据说是与BCA形成颜色产物的原因。

BCA蛋白定量试剂盒(Thermo)使用指南BCA蛋白定量试剂盒(Thermo)使用指南1.简介BCA蛋白定量试剂盒是一种用于测定蛋白质浓度的试剂盒。

该试剂盒采用双硫键还原法，可以通过比色法快速、准确地测定样品中的蛋白质浓度。

本使用指南将详细介绍BCA蛋白定量试剂盒的使用方法和相关注意事项。

2.实验前准备2.1 试剂准备根据试剂盒的说明书，准备好所需的试剂物品，包括BCA试剂、标准品、还原缓冲液、洗涤缓冲液等。

2.2 样品准备将需要测定的样品进行处理和提取，并根据实验要求进行稀释。

确保样品无杂质和干扰物，以免影响测定结果。

3.样品处理3.1 样品加标准曲线制备将已知浓度的标准品按照一定比例加入到已处理好的样品中，制备出一系列浓度梯度的样品。

3.2 样品处理步骤按照试剂盒说明书的要求，逐步进行样品处理，包括样品还原、洗涤等步骤。

确保每个步骤的操作正确，以获得准确的测定结果。

4.比色测定4.1 样品吸光度测定使用紫外-可见分光光度计测定各个标准品和待测样品的吸光度值。

记录吸光度值，以备后续计算使用。

4.2 绘制标准曲线将各个标准品的浓度与吸光度值进行统计和计算，绘制出标准曲线。

通过标准曲线，可以计算出待测样品的蛋白质浓度。

5.结果分析根据标准曲线计算出待测样品的蛋白质浓度，并进行结果统计和分析。

6.结论根据实验结果得出结论，并对实验过程中出现的问题进行总结和改进。

附件：1.BCA蛋白定量试剂盒说明书2.实验记录表格法律名词及注释：1.BCA蛋白定量试剂盒：BCA全称为Bicinchoninic Acid，是一种常用于蛋白质浓度测定的试剂盒。

2.双硫键还原法：一种用于将蛋白质中的二硫键还原为巯基的方法，常用于蛋白质结构研究和蛋白质定量实验中。

3.比色法：一种通过物质吸收或散射光线的特性，根据吸光度或透过率的变化来测定物质浓度的方法。

全文结束 \。