水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验

化学农药环境安全评价试验准则第14部分：藻类生长抑制试验1 范围本文件规定了化学农药藻类生长抑制试验的试验条件、试剂或材料、仪器设备、样品、试验步骤、试验数据处理、质量控制以及试验报告等的基本要求。

本文件适用于为化学农药登记而进行的藻类生长抑制试验。

2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。

其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

NY/T 3273 难处理农药水生生物毒性试验指南NY/T 4195.6 农药登记环境影响试验生物试材培养第6部分：近头状尖胞藻3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。

3.1半效应浓度median effective concentration在生长抑制试验中，与对照相比，引起受试藻生物量增长或者平均生长速率下降50％时的被试物浓度，用EC50表示。

在本文件中，通过藻类生物量增长的抑制率计算而得到的EC50用E y C50表示，通过藻类平均生长速率的抑制率计算而得的EC50用E r C50表示。

注：单位为毫克每升（mg/L）。

3.2平均生长速率average growth rate （average specific growth rate）特定暴露时段内的平均生长速率，即暴露结束与暴露开始时受试藻生物量的自然对数值之差除以时长（如3 d），用μ表示。

3.3生物量增长量yield特定暴露时段内的生物量增长量，即暴露结束时的生物量减去暴露开始时的生物量，用Y表示。

4 原理用被试物及藻类培养基配制一系列不同浓度的试验药液，将试验药液与藻液混合后，连续染毒72 h。

试验期间观察受试藻的生长抑制情况，求出半效应浓度72 h- EC50（E y C50、E r C50）及其95％置信区间。

5 试验条件试验期间应满足以下条件：a) 环境温度21 ℃～24 ℃，但单次试验应控制在±1 ℃；b) 连续均匀光照，光源为400 nm～700 nm波长的冷白灯或日光灯，光照强度4440 lux～8880 lux，不同位点光照强度差异应控制在15%范围内；c) 空白对照pH变化范围不超过1.5；d) 以一定转速持续振荡或搅拌藻液，例如每分钟（100±20）转。

《水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验》（征求意见稿）编 制 说 明《水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验》标准编制组二○一一年六月项 目 名 称：水质 用绿藻类栅薄属的Subspicatus和月牙藻属的capricornutum做淡水藻类生长抑制试验项目统一编号：1207.24承 担 单 位：广东出入境检验检疫局编制组主要成员：许崇辉、温巧玲、谢建军、潘芳、刘慧智标准所技术管理负责人：黄翠芳、周羽化标准处项目负责人：谷雪景目 录1项目背景 (1)1.1 任务来源 (1)1.2 工作过程 (1)2标准制订的必要性分析 (2)3国内外相关分析方法研究 (2)4标准制订的基本原则和技术路线 (3)4.1 标准制订的基本原则 (3)4.2 标准制订的技术路线 (3)5标准技术内容说明 (4)5.1 适用范围 (4)5.2 规范性引用文件 (4)5.3 术语和定义 (5)5.4 方法原理 (5)5.5 试剂和材料 (5)5.6 仪器和设备 (5)5.7 分析步骤 (5)5.8 质量保证和质量控制 (5)5.9 结果计算与表示 (5)5.10 精密度 (5)5.11 试验报告 (6)5.12 附录 (6)《水质 用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验》编制说明1项目背景1.1任务来源2007年，国家质量监督检验检疫总局以《关于下达2007年第一批国家标准制修订项目经费的通知》（国质检财函[2007]971号），下达了国家环保标准《水质用绿藻类栅薄属的subspicatus和月牙藻属的capricornutum做淡水藻类生长抑制试验》的编制任务（项目编号为20070882-T-467），项目承担单位为广东出入境检验检疫局和原国家环境保护总局化学品登记中心，项目统一编号为：1207.24。

1.2工作过程1.2.1 成立标准编制小组2007年，广东出入境检验检疫局在接到《水质—用单细胞绿藻进行淡水藻类生长抑制性试验》标准任务后，立即成立标准编制组。

试验准备——藻类生长抑制试验（B）藻类是水体中的初级生产者，也是水生食物链的基础环节。

在光的作用下它们汲取水中的无机养分盐类和，创造有机物。

它们的存在无论是对水体生产力还是水体污染的自净作用均具有非常重要的意义。

因此，在讨论毒物或废水对水环境的影响时，都把藻类测试作为一项重要内容。

藻类生长抑制实验的目的是确定受试物对单细胞藻类生长的影响，可用于受试物对藻类短期裸露效应的初评。

当裸露使藻类的生长率低于未经裸露的对比组时，称为藻类生长抑制。

单细胞藻类个体小，世代时光以小时计算，采纳本办法可以在较短时光内得到受试物（化学品或环境样品）对藻类许多世代及在种群水平上的影响。

所得结果可反映受试物对水体中初级生产养分级的影响。

将不同浓度的受试物加处处于对数生长久的藻培养物中，在规定的条件下举行培养，每隔24h测定藻类种群浓度或生物量（分量）。

实验时光不少于96h。

与对比相比较可确定生长抑制状况。

1.受试化学品的必备资料水溶解度水溶液中的定量分析办法蒸汽压在水中和光中的化学稳定性结构式正辛醇/水的分配系数纯度迅速生物降解实验结果 2.仪器设备①普通的藻类试验室设备。

②实验容器：如三角瓶等，按照需要可挑选一定容量的实验容器，同一批实验的容器应规格全都。

为保证CO2的交换，要有一定的表面积一体积比。

125ml的三角瓶中测试液体积应为40-60ml,250ml三角瓶中为70-100ml,500ml三角瓶中为100-150m1。

③照度计：球面照度计和一般照度计。

④培养设备：建议用法温度范围为21-25℃±2℃且延续匀称光照，光谱范围为400-700nm，光通量为0.72×1020光子／（m2·s）的培养箱（用球面测量计测定可产生光强为80001ux的光），光照周期，即光暗比为12：12或14：10。

⑤机械振荡器100±10次/min或定时人工摇动若干次。

⑥培养容器应用棉塞、海绵塞、滤纸、纱布（(2-3层）、锡箔纸封闭。

姓名：刘金鑫学号：201428006037073 培养单位：地理所生态毒理学实验设计一.【实验题目】：砷对两种淡水藻类的毒性作用。

二.【实验设计思想】：砷在环境中是一种普遍存在的污染物，它来源于人为源和自然源的释放，通过一定的途径进入地表、土壤和饮用水体中。

通过目前的研究已经发现进入水体的砷对水中的生物存在影响，我们有必要研究水体中砷对水生生物的毒性作用，在这些研究中要数藻类的研究较多。

我准备通过使用72小时生长速率——一种抑制生物检测方法，来判定五价砷和三价砷对两种在无外来干扰的热带的淡水藻类（绿藻和单针藻）的毒性。

这个实验的意义在于，看砷对藻类的毒害作用是否很强，如果藻类对于砷的耐性较强，可以指导后面的藻类用于砷污染水体修复的研究。

三.【实验目的】：1、掌握藻类的室内无菌培养。

2、学会藻类生长速率测定的方法。

3、掌握72小时生长速率的检测方法。

4、判定砷对两种藻类的毒害作用。

四.【实验原理】：1、藻类的选取：由于不同种类的藻对砷毒性的反应不同，有的藻对砷比较敏感，而有的对砷的耐性较好，所以我选择了一种敏感性的单针藻和一种耐性较好的绿藻。

2、培养液的选择：为了排除自然水体和纯净水体的影响，我用人工合成的软水（内部成分以及含量都是已知的）来进行实验。

3、培养瓶的选择：为了防止砷在普通瓶体上的吸附，我选择250ml 的硼硅酸盐的锥形瓶。

4、检测前处理：将处于指数生长阶段（5-6天）的细胞通过离心（2500rpm，7min），超纯水洗涤三次确保培养液除去后，再用于生物检测。

5、培养条件：将培养瓶放在培养架上进行培养。

培养架周围的环境条件：27±1℃、12：12h的光照和无光、每天用手摇晃两次锥形瓶使其进行充分的气体交换。

6、通过多功能计数仪测定结果。

7、数据分析：通过线性插值法计算72hIC50。

8、藻对砷和磷的吸收具有竞争性。

五.【实验材料】：绿藻、单针藻、玻璃烧杯、天平、硼硅酸盐锥形瓶、镊子、酒精灯、量筒、真空过滤器、滤膜、试管、无菌操作台、吸管、多功能计数器、移液枪、PH试纸（PH5.4—9）、牛角匙、牛皮纸、棉花、纱绳、高压蒸汽灭菌锅、培养架、温度计、恒温室、冷光源、NaHCO3、CaSO4·2H2O、MgSO4、KCl、CaCO3、10%HNO3、超纯水、Na2AsO4·7H2O、NaAsO2、NaNO3、KH2PO4等。

UV-C辐照抑制典型藻类生长的效果研究的开题报告选题背景及研究意义：随着气候变化和环境污染的加剧，微生物生态系统的稳定性受到了威胁。

其中，藻类的快速生长和代谢可引起水体富营养化和藻华暴发等环境问题，给生态系统和人类健康带来极大的威胁。

现代科技提供了多种方法和手段来控制水体中藻类生长，其中UV-C辐照作为一种环保、高效的方法被广泛应用。

然而，在不同的光照强度、水质等条件下，对藻类的抑制效果存在巨大的差异。

因此，探究UV-C辐照对典型藻类生长的影响，对于提高环境保护和水资源优化利用具有重要的价值。

研究目的：本文旨在研究UV-C辐照对典型藻类生长的抑制效果，并探究其抑制机制。

希望能够为水体藻类控制方案的制定和优化提供一些科学依据。

研究内容：1. 确定实验所用藻种，并制备培养基；2. 构建光照强度、UV-C辐照剂量等因素的试验方案，进行试验；3. 通过藻生长速率、荧光素含量等指标分析UV-C辐照的抑制效果；4. 利用qPCR等方法分析UV-C辐照对藻细胞DNA等分子水平的影响；5. 结合试验结果，探究UV-C辐照对藻类的抑制机制。

研究方法：本研究将选用蓝藻、绿藻等典型藻类做为研究对象，采用静态培养法、荧光素含量检测法、qPCR分析法等综合手段进行实验研究，结合数学统计方法对得到的数据进行分析。

预期结果：通过本研究，预期能够深入了解UV-C辐照对藻类生长的影响及其机制，为水体藻类控制提供一些科学依据和数据支持。

研究意义：本研究可为提高水体环境质量、减少藻类污染提供一些新思路和科学依据。

此外，研究成果还可为植物生长、环境保护等领域提供相关数据和参考经验。

临床实验室纯水系统藻类滋生的防治王军;顾光煜【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2012(030)005【总页数】1页(P394)【关键词】临床实验室;纯水;藻类;防治【作者】王军;顾光煜【作者单位】南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京210008【正文语种】中文【中图分类】R446分析用纯水是一种特殊的实验试剂，其质量与临床检验的质量密切相关。

临床实验室大多配备纯水系统。

在工作中我们发现纯水系统的滤芯、碳棒及储水桶等常有藻类滋生现象，经参阅有关资料，采取了一些针对性的措施加强纯水系统的保养与维护[1]，有效地解决了藻类滋生现象，保证了纯水的质量。

1 纯水系统藻类的滋生与防治纯水系统藻类的滋生，以春、夏季最为突出。

藻类、细菌在生长过程中产生的离子、酶、内毒素等及自身代谢产物可能污染纯水系统，影响纯水质量。

藻类在自然界分布极为广泛，空气、水中都可能存在藻类孢子。

在合适的环境下，孢子将大量生长并繁殖。

藻类滋生必须具备一定的条件，即孢子、营养(水、矿物质及氧气等)、光照和适宜的温度。

纯水的水质受其来源——自来水的影响。

理论上，自来水的生产过程可清除藻类，但可能会有微量孢子遗留；另外，空气中的孢子也会污染纯水系统。

因此，完全清除孢子是不可能的，但可通过控制藻类的生长条件来抑制藻类生长。

水纯化过程中的“去离子”环节去除了氯化物，使藻类在纯水中因不受抑制而极易生长，因此，相对于自来水，纯水更易滋生藻类。

纯水系统的活性炭和滤芯容易吸附水及空气中的藻类孢子，被认为是藻类滋生的温床。

理论上，密闭的储水桶无藻类孢子污染，不应该滋生藻类。

本实验室的纯水系统因条件限制，常年受到日光的照射。

日光不仅促进了藻类滋生的光合作用还提供了温度条件。

因此，我们采取了一系列的针对措施，安装加厚窗帘以避免阳光直射、降低环境温度；定期清洗储水桶，检查储水桶的密封性，更换密封性好的桶盖，避免孢子进入纯水系统；定期清洗、更换碳棒和滤芯等，有效地控制了藻类滋生。

绿水抑制鱼生长的原理
绿水是一种含有大量悬浮物质和绿藻的水体，对于一些鱼类的生长来说可能具有抑制作用。

绿水抑制鱼生长的原理主要有以下几点：
1. 绿水浑浊度高：绿水中含有大量悬浮物质，包括藻类的细胞、有机物质和无机颗粒等。

这些悬浮物质会使水体变得浑浊，降低透光率，限制光线的穿透能力。

鱼类对光照的需求较高，光照不足会影响鱼类的视觉和食欲，从而抑制其生长。

2. 水体氧气供应不足：绿水中的藻类繁殖较快，消耗水体中的氧气。

当藻类数量过多时，夜晚或阴天藻类通过呼吸过程会消耗更多的氧气，导致水体中的溶氧含量下降。

鱼类需要充足的氧气进行呼吸和新陈代谢，氧气供应不足会导致鱼类活动力下降，食欲不振，从而影响生长。

3. 绿水中的有害物质：绿水中的藻类在光合作用过程中产生氨氮、硝酸盐等代谢产物，同时也会释放出有毒的代谢产物，如硫化氢等。

这些有害物质会对鱼类的健康产生不利影响，抑制其生长。

总结起来，绿水抑制鱼生长的原理主要包括水体浑浊度高，光照不足，氧气供应不足以及有害物质的存在等多个方面，这些因素会影响鱼类的食欲、新陈代谢和健康状况，从而抑制其正常的生长和发育。