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细胞培养员个人工作总结作为一名细胞培养员，我在过去一年中取得了许多进展和成就。
通过我的努力和专业知识，我对细胞培养的技术和操作有了更深入的了解，也使我在实验室工作中变得更加熟练和有效率。
在这一年中，我参与了多个细胞培养实验项目的设计和实施。
我学会了如何选择合适的细胞培养基和添加剂，以及如何进行无菌操作和细胞传代。
我也积累了丰富的细胞培养实验经验，能够独立完成各种类型的培养细胞，包括肿瘤细胞、干细胞和原代细胞等。
除了实验室操作技能的提高，我还注重了实验室安全和环境卫生。
我始终保持实验室的整洁和无菌环境，定期进行设备消毒和清洁，确保实验过程的准确性和可靠性。
在日常工作中，我也注重团队合作。
我与实验室同事合作紧密，共同解决实验中出现的问题和挑战。
我积极分享自己的经验和见解，与大家一起不断提高工作效率和质量。
通过这一年的工作，我对细胞培养技术和实验室管理有了更深入的了解，也提升了我的综合实验能力和团队合作能力。
我将继续努力，不断学习和提高自己的专业水平，为细胞培养实验工作贡献力量。
作为一名细胞培养员，我深知自己的责任是保证实验室中的细胞培养工作顺利进行，以支持科学研究和生物医学领域的发展。
通过不断学习和实践，我逐步完善了自己的技能和知识体系，获得了丰富的实验经验和专业能力。
在实验室工作中，细胞培养技术是最基础也是最核心的技能之一。
我始终严格遵循无菌操作的标准，确保细胞培养过程中的无菌、洁净和可靠性。
我熟练掌握了细胞传代和培养基配制等操作技能，能够有效地处理不同类型细胞的培养需求。
在肿瘤细胞的培养中，我理解了细胞株的特性和应用，有效地控制了细胞培养的质量和稳定性。
除了技术和操作方面的提升，我也不断完善自己的理论知识，并一直关注行业动态和前沿技术。
我积极参加各类学术讲座和学术会议，结合实验室工作实际需求，不断学习和探究最新的细胞培养技术和方法。
我了解到了一系列先进的培养技术和细胞处理工具，如细胞冷冻和解冻技术、细胞分选技术等，这些技术的应用有助于提高细胞培养效率和保证细胞的生物学特性。
毕业实习报告总结：细胞培养首先，我要感谢我的导师和实验室的同事们，他们在我的实习期间给予了我无私的帮助和指导。
通过这次实习，我对细胞培养这一领域有了更深入的了解，也积累了宝贵的实践经验。
细胞培养是生物医学和生物技术领域中重要的实验技术，它通过模拟细胞在体内的生长环境，使细胞在体外继续生长和繁殖。
在实习期间，我学习了细胞培养的基本原理和操作技术，包括细胞的复苏、传代、胰蛋白酶消化、细胞计数、铺板等步骤。
我也了解了细胞培养中常用的仪器设备，如二氧化碳培养箱、显微镜、细胞计数仪等。
在实习过程中，我不仅掌握了细胞培养的基本技能，还参与了一些具体的实验项目。
我参与了一项关于细胞凋亡的研究，通过细胞培养技术，我成功地培养了所需细胞，并进行了凋亡实验。
通过观察细胞形态的变化和流式细胞术的分析，我得出了实验结果，并协助导师进行了数据分析和论文撰写。
这个过程中，我不仅学习了实验设计和数据分析的方法，还提高了自己的实验操作能力。
在实习期间，我也遇到了一些挑战和困难。
例如，细胞培养过程中细胞的生长速度较慢，有时需要耐心等待。
另外，细胞的复苏和传代过程中，也有一些技巧需要掌握。
通过请教导师和同事，我逐渐克服了这些困难，并取得了较好的实验结果。
通过这次实习，我不仅学到了专业知识和技能，还锻炼了自己的团队合作和沟通能力。
在实验室中，我与同事们共同合作，互相学习和帮助。
我们也定期进行实验室会议，分享实验进展和心得体会，这让我感受到了团队合作的重要性。
总之，这次细胞培养实习是一次非常宝贵的学习经历。
我不仅掌握了细胞培养的基本技能，还参与了一些具体的实验项目，并取得了较好的研究成果。
同时，我也学会了团队合作和沟通的能力。
我相信这次实习对我未来的学术研究和职业发展将产生积极的影响。
细胞培养技术员工作总结总结一细胞培养一.基本理论概论原代培养：也叫初代培养，指直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养。
传代培养：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。
细胞系：原代培养物成功传代后，则称之为细胞系。
（如细胞系的生存期有限，则称之为有限细胞系；已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系，称连续细胞系或无限细胞系。
）细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。
培养类型：细胞培养，组织培养，器官培养。
细胞生长的方式：贴附生长，悬浮生长培养细胞的形态（形态不一定，环境改变形态可能改变）：成纤维性型细胞，上皮型细胞（单层膜样生长），游走性细胞（游散生长，常有伪足跟突起）二.培养过程及要点（切记无菌操作）（一）工作环境的处理1.实验进行前，无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60分钟灭菌，以70%酒精擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10分钟后，才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。
实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%酒精擦拭无菌操作抬面。
操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。
2.实验用品以70%酒精擦拭后才带入无菌操作台内。
实验操作应在台面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。
无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。
3.小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。
勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。
容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45?角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
吸管口切勿碰到容器瓶口4.工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。
对于来自人类或是病毒感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台（至少Classll）。
细胞培养方法总结细胞培养是生物学研究中重要的实验技术之一，通过在体外人工创造和维持细胞生长环境，使细胞能够持续繁殖、生长和分化。
本文将对常用的细胞培养方法进行总结，并介绍其步骤和注意事项。
一、细胞培养基的配制细胞培养基是细胞生长所必需的营养物质和生长调节因子的混合物，根据细胞类型和实验需求的不同，培养基种类繁多。
在配制培养基时，应按照标准操作流程，确保成分准确无误并避免细菌和真菌的污染。
二、细胞的分离和传代1. 细胞的分离：将细胞从原来的培养皿中取出，并用消化酶、细胞分离酶等方法进行细胞的离散处理，以获得单细胞悬浮液或小团的细胞群。
2. 细胞的培养：将悬浮的细胞或细胞小团转移至新的培养皿中，添加适量的培养基，并静置于恒温培养箱中，创造适宜的生长环境，促进细胞的生长。
3. 细胞的传代：当原始细胞群生长至饱和状态时，需进行细胞的传代，即将部分细胞转移到新的培养皿中，以保持细胞的活力和增长。
传代过程中，注意维持传代比例和规律的同时，避免细胞超密植或过稀。
三、细胞冻存和解冻细胞冻存是将培养好的细胞保存在低温下，以延缓其代谢过程，以备后续使用。
具体步骤包括：1. 预处理：加入冻存保护剂，如二甲基亚砜(DMSO)或甘油，以降低冻存过程对细胞的伤害。
2. 储存管制备：将细胞转移到冻存管中，并标记相关信息，如细胞类型、培养时间等，以方便后续的识别。
3. 冷冻：将装有细胞的冻存管放置在低温环境中，逐渐降温至最终低温储存条件下，一般为液氮温度（-196°C）。
4. 解冻：将冻存管取出，快速置于37°C预热的培养基中解冻，然后将细胞转移至培养皿中，尽快恢复细胞活性。
四、细胞凋亡检测细胞凋亡是指细胞主动发生的自我死亡过程。
为了研究细胞凋亡的发生机制，需对细胞进行凋亡检测。
以下是常用的细胞凋亡检测方法之一：1. Annexin V/PI双染法：利用Annexin V亲和素与磷脂酰丝氨酸的结合，通过荧光检测乙酰胆碱酯酶的失活，以区分早期和晚期凋亡。
第1篇一、前言细胞实验作为生物学研究的重要手段，在揭示生命现象、探索疾病机制、开发新型药物等方面发挥着至关重要的作用。
本次实验报告针对我所参与的细胞实验进行反思总结，旨在提高实验技能、优化实验设计、提升实验结果的可信度。
二、实验目的本次实验旨在：1. 掌握细胞培养的基本操作技能，包括细胞传代、细胞接种、细胞计数等。
2. 熟悉细胞实验所需的器材和试剂，了解其作用和用途。
3. 分析实验结果，探讨实验现象背后的生物学机制。
三、实验过程1. 细胞传代：在实验过程中，我们严格按照细胞传代操作规程进行，确保细胞在适宜的培养条件下生长。
通过观察细胞生长状态、调整传代比例，保证了细胞的活力和数量。
2. 细胞接种：在细胞接种过程中，我们遵循无菌操作原则，确保细胞在无菌条件下生长。
同时，根据实验需求调整接种密度，为后续实验提供充足细胞资源。
3. 细胞计数：在细胞计数实验中，我们熟练运用血球计数板进行细胞计数，并对计数结果进行统计分析。
通过对比不同处理组的细胞数量，分析实验现象背后的生物学机制。
4. 实验数据分析：在实验数据分析过程中，我们运用统计学方法对实验数据进行分析，探讨实验现象背后的生物学机制。
同时，对实验结果进行合理的解释和推断。
四、实验反思1. 实验操作方面：（1）在细胞传代过程中，我们应严格按照操作规程进行，避免细胞污染和传代失败。
（2）在细胞接种过程中，应注意无菌操作，防止细胞污染。
（3）在细胞计数过程中，应保证计数准确，避免人为误差。
2. 实验设计方面：（1）在实验设计过程中，应充分考虑实验目的和实验条件，确保实验结果具有可重复性和可靠性。
（2）在实验过程中，应密切关注实验现象，及时调整实验参数，优化实验设计。
（3）在实验结果分析过程中，应运用多种统计学方法，提高实验结果的可信度。
3. 实验结果分析方面：（1）在实验结果分析过程中，应充分挖掘实验数据，探讨实验现象背后的生物学机制。
（2）在实验结果解释过程中，应结合相关文献，对实验结果进行合理的解释和推断。
细胞培养技术心得体会范文细胞培养技术是现代生物科学研究中非常重要的实验技术之一，它可以使科研人员对细胞进行体外培养和研究。
在我进行细胞培养技术学习的过程中，我深深感受到了它的重要性和应用的广泛性。
下面是我对细胞培养技术的一些心得体会。
首先，细胞培养技术是一门基础的实验技术。
在进行任何与生物学相关的实验研究时，细胞培养技术都是不可或缺的。
通过细胞培养技术，科研人员可以获得大量的特定类型细胞，并对其进行后续的实验操作。
比如，通过细胞培养技术，可以获得肝细胞、肺细胞等特定细胞，然后可以对这些细胞进行药物检测、基因转染等实验，从而研究细胞的生命活动和相关机制。
因此，细胞培养技术是生物学等学科的基础。
其次，细胞培养技术对实验操作的要求非常高。
在进行细胞培养的过程中，需要严格控制培养液的成分、温度、湿度、CO2浓度等多个参数，以保证细胞能够正常生长和繁殖。
同时，需要注意培养器具的消毒和无菌操作，以避免培养过程中的细菌和真菌污染。
因此，细胞培养技术对科研人员的实验技术和操作规范要求非常高，这也是我在学习过程中深受启发的地方。
另外，细胞培养技术需要耐心和细心。
由于细胞生长和繁殖的周期相对较长，所以在进行细胞培养实验时，需要耐心等待细胞的生长和繁殖。
此外，由于细胞对环境的变化非常敏感，稍有不慎可能导致细胞的死亡或繁殖异常。
因此，细胞培养技术需要科研人员具备细心和耐心的品质，随时观察和调整培养条件，以保证实验的顺利进行。
此外，细胞培养技术也存在一定的风险。
细胞培养液中的成分和培养条件可能会对细胞产生毒性影响，导致细胞的死亡或繁殖异常。
此外，细胞也可能会被真菌、细菌等微生物污染，从而影响实验结果。
因此，在进行细胞培养实验时，需要对培养液和培养条件进行严格控制和检测，以降低实验风险。
细胞培养技术不仅在科研领域中有广泛应用，在医学领域也有重要的应用价值。
通过细胞培养技术，可以获得人体细胞，并进行药物筛选和毒理学评价等实验。
细胞培养个人工作总结范文细胞培养是生物学实验中非常重要的一个环节，我在进行细胞培养工作中取得了一些经验和收获，现做以下总结：首先，在进行细胞培养实验时，我要保证实验室环境的洁净，经常对实验设备进行消毒和清洁，以防止细菌或其他有害物质的污染。
同时，在进行细胞培养时，要注意无菌操作，避免外界微生物的污染。
其次，我在培养细胞过程中，掌握了种植细胞的最佳条件和方法。
比如，在细胞培养的过程中，我严格控制培养基的pH值、营养物质的添加和细胞密度的控制，以保证细胞的健康生长和增殖。
另外，在细胞培养过程中，我也注意到了细胞的形态学变化和生长速度等指标的监测和记录，及时发现细胞的异常情况，以便及时调整培养条件。
最后，我在细胞培养实验中，还积累了大量的实践经验和技能，这些都将对我今后的科研工作产生积极的影响。
总而言之，通过细胞培养的个人工作总结，我进一步加深了对细胞培养工作的理解，提高了细胞培养技能，为今后的科研工作奠定了更加扎实的基础。
希望在今后的科研工作中，我能够不断积累经验，提高专业素养，为科学研究做出更多的贡献。
在细胞培养的工作实践中，我还学会了如何选择合适的细胞培养基和添加剂，以促进细胞的健康生长。
同时，我也学会了如何判断细胞的状态和纯度，并且掌握了一些常见的检测方法和技术，如细胞计数、细胞鉴定、细胞凋亡检测等。
这些技能不仅为我日常的细胞培养工作提供了坚实的保障，也为我未来的科研探索和学术研究奠定了基础。
在进行细胞培养的工作中，我还注意到了实验中的一些常见问题和解决方法。
比如，细胞在培养过程中出现的感染、细胞质纺锤体形成异常、细胞黏附不良等情况，这些都需要我们认真研究问题的根源，并采取相应的措施解决。
通过对实验过程中遇到的问题进行分析和总结，我得以不断提高自己的动手能力和解决问题的能力，使得我在工作中更加得心应手。
在实验的过程中，我发现了培养过程中一些可能的改进点。
比如，改进培养基的配方、优化培养条件、探索新的细胞培养技术等，这些都是我在细胞培养工作中不断努力的方向。
细胞培养训练小结引言细胞培养是生物科学中一项重要的实验技术，它对于研究细胞的生理、生化特性以及细胞的生长和分裂机制具有重要意义。
在细胞培养训练中，我们通过培养真核细胞系，掌握了细胞培养的基本理论和实践操作技巧。
本文档旨在对细胞培养训练进行小结和总结。
实验目的1. 掌握细胞培养的基本原理和操作技巧；2. 研究如何进行细胞传代和培养细胞系；3. 了解细胞培养的常见问题及其解决方法。
实验过程1. 细胞分离和传代：在细胞培养的过程中，首先需要将组织样本进行细胞分离。
我们选择合适的细胞培养基，添加适当的酶或酸碱溶液将组织样本分散成单个的细胞。
接下来，将细胞悬液转移到含有培养基的离心管中，并通过离心操作将细胞沉淀。
最后，将细胞加入新的培养皿中，加入培养基，供其继续生长和传代。
2. 细胞培养：细胞培养的关键在于提供合适的培养环境，使细胞能够正常生长和繁殖。
我们通过恒温培养箱和CO2培养箱来维持适宜的温度和气体环境。
此外，需要定期更换培养基，以满足细胞的营养需求。
同时，还需要注意细胞密度的控制，避免细胞过度增长导致细胞死亡。
3. 检测和分析：在细胞培养训练中，我们研究了如何对细胞进行检测和分析。
例如，通过细胞计数器可以快速准确地统计细胞的数量和存活率。
此外，还研究了细胞染色和显微镜观察技术，用于观察细胞的形态和结构变化。
通过这些方法，我们可以及时了解细胞培养的情况，发现并解决潜在的问题。
实验结果与讨论通过本次细胞培养训练，我逐渐掌握了细胞培养的基本原理和实验技巧。
在实验过程中，遇到了一些常见问题，例如细胞污染和培养基变质等。
通过及时观察和处理，我成功解决了这些问题，并保证了细胞的正常生长和传代。
此外，我还研究了如何进行细胞染色和显微镜观察。
这些技术可以帮助我们更全面地了解细胞的形态和结构特征。
在细胞染色过程中，我发现染料浓度和染色时间对结果影响较大，需要仔细控制。
通过显微镜观察，我成功发现了细胞的异常形态和结构变化，并及时采取了措施进行纠正。
细胞培养员的工作总结
作为一名细胞培养员，我深知这项工作的重要性和复杂性。
在细胞培养领域，
我们的工作是至关重要的，因为细胞培养是许多生物医学研究和药物开发的基础。
在这篇文章中，我将总结一下作为一名细胞培养员的工作内容和重要性。
首先，作为一名细胞培养员，我们的主要工作是负责培养和维护各种类型的细胞。
这包括从动物组织中分离细胞、培养细胞、检测细胞的健康状况以及进行细胞传代。
这些工作需要高度的技术和实验操作技能，因为细胞的生长和健康状况对于后续的实验结果至关重要。
其次，细胞培养员需要严格遵守实验室的操作规程和安全标准。
在细胞培养实
验室中，我们需要确保实验室的清洁和无菌操作，以防止细胞培养过程中的污染。
此外，我们还需要定期检查和维护实验室设备，确保其正常运行。
另外，作为一名细胞培养员，我们还需要与其他研究人员密切合作。
我们需要
根据研究项目的需求，为科研人员提供高质量的细胞培养服务，并确保实验结果的准确性和可重复性。
因此，良好的沟通和团队合作能力也是我们工作中的重要素质。
最后，作为一名细胞培养员，我们需要不断学习和更新自己的知识和技能。
细
胞培养技术是一个不断发展和更新的领域，我们需要及时了解最新的实验方法和技术，以提高我们的工作效率和实验质量。
总的来说，作为一名细胞培养员，我们的工作是非常重要和复杂的。
我们需要
具备扎实的实验操作技能、严格的实验室管理能力、良好的沟通和团队合作能力，以及不断学习和更新自己的知识和技能。
只有这样，我们才能为生物医学研究和药物开发做出更大的贡献。
细胞培养员的工作总结
作为一名细胞培养员，我的工作职责是负责细胞培养和细胞实验室的日常管理。
在这个岗位上，我需要具备一定的细胞生物学知识和实验操作技能，同时要有耐心和细致的工作态度。
在这篇文章中，我将分享一下我在这个岗位上的工作总结和体会。
首先，作为细胞培养员，我需要负责细胞培养的日常操作。
这包括细胞的传代、培养基的配制、培养条件的控制等。
在这个过程中，我需要严格按照操作规程进行操作，保证细胞的健康生长和稳定性。
同时，我也需要及时检测细胞的纯度和活力，确保细胞的质量符合实验要求。
其次，我还需要负责细胞实验室的日常管理工作。
这包括实验室设备的维护和
保养、实验材料的采购和管理、实验室的清洁和卫生等。
在这个过程中，我需要与实验室的其他工作人员密切合作，确保实验室的正常运转和实验工作的顺利进行。
除了日常的操作和管理工作，作为细胞培养员，我还需要不断学习和提升自己
的专业知识和实验技能。
随着科学技术的不断发展，细胞培养领域也在不断更新和变化，我需要不断关注最新的研究进展和实验技术，不断提高自己的专业水平，以更好地适应工作的需要。
总的来说，作为一名细胞培养员，我的工作需要具备严谨的工作态度、扎实的
专业知识和技能，以及良好的团队合作精神。
通过不断的努力和学习，我相信我可以更好地发挥自己的作用，为科研工作做出更大的贡献。
一、细胞培养技术的概念？在体外对细胞培养并进行研究的技术, 也叫细胞克隆技术. 细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的技术。
二、细胞培养技术的优缺点？优点：1.得到的是活细胞：能长时间、直接观察、研究活细胞的形态、结构、生命活动2.可控制：可控制-选择对象：类型：上皮？间质？性质：正常？肿瘤？可控制-调节条件：各种因素如物理、化学、生物等因素3、应用广学科多；对象广：各种动物：低等动物--高等动物--人类一种动物：不同年龄不同组织: 正常或异常（肿瘤）4、较经济花钱较少但可得到大量、同时、重复性好的生物学性状相似的实验对象5、不易污染环境缺点：1. 现人工无法完全模拟体内环境a. 失去彼邻关系b.失去神经体液的调节和细胞相互间的影响2. 细胞趋向单一化3.失去原有组织结构和细胞形态4.分化减弱或不显要正确认识体外培养细胞是一种特定条件下生长的细胞群体。
5. 某些类型细胞还很难培养6.大规模培养难度大三、体外细胞培养的方式及特点？1、粘附型培养: 附着在某一固相支持物表面才能生长的细胞。
粘附是大多数有机体细胞在体内外生存和生长发育的基本存在方式2.悬浮型培养: 不必附着于固相支持物表面，而在悬浮状态下即可生长的细胞。
来源：来自血，脾或骨髓，尤以血中白细胞多见，癌肿细胞也可以。
特点：在悬浮中生长良好,细胞圆形，单个或小细胞团。
优点：生存空间大，提供数量大，传代方便(不需消化)，易于收获可获得稳定状态.缺点：观察不方便, 很多细胞不能悬浮生长(尤以正常细胞)四、体外培养细胞的生长形态分类？1、上皮样细胞来源：来源于外胚层，内胚层细胞如：皮肤及其衍生物, 消化道，乳腺，肺泡, 上皮性肿瘤形态：类似体内的上皮细胞扁平，不规则多角形，中有圆形核易相连成片相靠—紧密相连—成薄层—铺石状2、成纤维细胞样细胞培养中形态与成纤维细胞类似来源：中胚层间充质组织起源的组织如：真正的成纤维细胞，心肌，平滑肌，成骨细胞，血管内皮形态：似体内成纤维细胞的形态胞体梭形或不规则三角形胞质向外伸出2—3个长短不等的突起中有卵圆形核3、其他，不定型样细胞五、解释下列常用术语：1).细胞系（cell line）：2).细胞株：3).原代培养：4).传代培养：5).转染（transfection）：6).lipofection：细胞系（cell line）：原代培养物首次传代后，就可以称细胞系。
不能或有限传代下去称有限细胞系。
能连续传代的称连续细胞系。
2.细胞株：某类细胞经传代克隆并保持了该类细胞理化特征的细胞群体。
3.原代培养：直接取自生物体的组织细胞并进行培养。
4.传代培养：将细胞从一个培养物内分散到另一个培养物的过程。
5.转染（transfection）：将某个基因转移到培养细胞核内。
6.lipofection：常用细胞转染剂（脂质体），它搭载基因（DNA）后形成复合物可转染到动物细胞。
六、细胞培养的条件及设备？1、细胞培养室2、常用设备（超净台、纯水装置、抽气泵、消毒装置、CO2培养箱、干燥装置、液氮生物容器、冰箱、离心机、显微镜、天平、过滤装置、空调、酸度计）3、常用消耗器材培养瓶、各种相关玻璃用品、塑料用品、棉制品、手术器材4、培养用液天然培养基（液）：血清、鸡胚浸出液、鼠尾胶人工合成培养液：合成培养基、平衡盐溶液、缓冲液、蒸馏水、消化液和抗菌素等七、原代培养技术的过程？1、取材超净台外酒精消毒乳鼠（用镊子夹住乳鼠尾巴，在酒精里旋转3s）——乳鼠进入超净台，固定乳鼠——消毒皮肤（碘酒消毒一次，酒精消毒两次，一次比一次范围小，从中间向周围打圈消毒）——撕开皮肤，暴露胸廓（第一套器械，两把镊子）——消毒胸廓（酒精消毒两次）——开胸（第二套器械，一把剪刀，一把镊子）——取心肺组织（第三套器械，一把镊子）2、漂洗Hanks漂洗（三块组织一起漂洗）3、剪切粗剪（第三套器械，一把剪刀）——Hanks液漂洗——细剪——Hanks漂洗4、接种加全培1mL，吸管吸取接种接种后，从培养瓶的侧面加入适量全培，接种面朝上，放入孵箱，30min后，翻瓶培养。
八、传代培养技术过程？换液：贴壁细胞悬浮细胞半换液用吸管吸取一半培养液再加离心，弃去一半培养液，再加入等体积新入等体积新的培养液培养液全换液直接倒掉培养液，加入新培养液离心，弃去所有上清，加入新培养液传代：1、倒去原培养液，用1mL Hanks漂洗一遍；2、消化。
倒去Hanks液，向培养瓶无细胞面加入0.5mL胰蛋白酶液，翻转培养瓶，使消化液浸泡细胞面，立即倒去消化液，再加入0.5mL的胰蛋白酶液，在显微镜下观察细胞消化变化。
当观察到大部分细胞出现胞质回缩、细胞趋向圆球形、细胞间隙增大时，立即终止消化。
终止消化的方法是：加基础培养液或Hanks 1mL，用吸管头轻轻地、有序地吹打瓶壁细胞，细胞从支持物上脱落，并彼此分离悬浮于水中，液体混浊。
将消化下来的细胞归入离心管中，离心去上清液。
3、分瓶扩大培养。
离心沉淀细胞加少量完全培养液，混匀，分别接种到两个新的培养瓶中。
每瓶再补加一些全培，轻轻吹打混匀，放入孵箱中培养。
九、每代细胞基本的生长过程？游离期：细胞接种后最初一段时间, 细胞在培养基中呈悬浮状, 胞体圆形.贴壁期：细胞附着于支持物上离心：促进附着；流动：培养液流动可阻止细胞附着；低温：可抑制附着潜伏期：细胞活着但无分裂.细胞株6—24h原代24—96h指数增长期：细胞增殖旺盛, 数量成倍增多, 最适合实验研究. 3—5d以后来到.停止期(衰退期)细胞长满瓶壁, 有活力, 不增殖, 能存活一段时间. 如传代进入下一循环.十、细胞培养技术的应用？1细胞遗传学2细胞内蛋白、酶及其它物质的定性、定量分析（细胞化学、免疫组化和荧光定量等）3分子生物学.DNA分离、分析基因导入基因表达的原位检测4、生物技术疫苗的制备细胞工程抗体5、药物开发药理、毒力和药效试验6、细胞分化如干细胞研究7、肿瘤学研究发生、发展、浸润、转移和转化等8、细胞衰老、凋亡9、其他密度抑制：细胞接触汇合成片后，虽发生接触抑制，只要营养充分，细胞仍然能够进行增殖分裂，因此细胞数量仍在增多。
但当细胞密度进一步增大，培养液中营养成分减少，代谢产物增多时，细胞因营养的枯竭和代谢物的影响，则发生密度抑制（Density Inhibition），导致细胞分裂停止。
胆固醇基酯转移蛋白（CETP）抑制剂，因CETP基因分子缺陷使得CETP不足者其血浆HDL-C水平显著增高，从而导致了抑制CETP可能是增高HDL-C水平新方法的理论。
①细胞生长有密度抑制②血清可降低密度抑制③转化细胞可降低密度抑制物品清洗：1、玻璃制品旧：煮沸10min——刷洗——振荡冲洗15-20遍——烤干——泡酸——振荡冲洗15-20遍——蒸馏水浸泡两次（每次24h）——烤干——包装新：5%盐酸过夜——振荡冲洗15-20遍——蒸馏水浸泡两次（每次24h）——烤干——包装2、橡胶制品新：0.5M NaOH浸泡过夜——流水冲洗15-20遍——0.5M HCL浸泡15min——流水冲洗15-20遍——自来水煮沸2次——蒸馏水煮沸5-10min——50℃烤干旧：煮沸10min——刷洗——流水冲洗15-20遍——蒸馏水煮沸5-10min——50℃烤干3、塑料制品刷洗——流水冲洗15-20遍——蒸馏水浸泡2次（24h/换水）——烤干备用细胞冻存：基本原则——慢冻快融细胞冻存液配方：全培：血清：DMSO=7:2:1或血清：DMSO=9:11、准备10%细胞冻存液和待冻细胞。
2、消化后的细胞悬液离心去上清，沉淀加细胞冻存液，轻轻吹打，将细胞悬液分装于2ml 冻存管中（分装时，使用有胶垫的冻存管），每管1mL，拧紧，标记冻存的细胞名称和日期。
3、梯度降温冻存（1）程序冷冻：细胞冷冻仪每分钟下降1℃，—30℃，或—40℃时，每分钟5~10℃的速度下降，—70℃时投入液氮中。
（2）手工方法：4℃，30min→冰水（0℃）10min→—20℃，30min→—70℃，过夜→次晨投入液氮。
消化——离心——冻存液重悬——分装1mL/支——梯度降温（4℃，30min→冰水（0℃）10min →—20℃，30min→—70℃，过夜→次晨投入液氮）爬片传代：六孔板1个盖玻片/孔——消化并收集细胞（离心）——重悬细胞制备单细胞悬液（1mL 全培）——接种细胞（每孔约300uL/盖玻片），静置5min——加全培（1）胰酶消化细胞离心后重悬细胞于完全培养基（1mL）中。
（2）将盖玻片放入六孔板中，每孔一片盖玻片，将1mL单细胞悬液分成三份滴加在盖玻片的中心（尽量接种在盖玻片的中心），静置5min。
整个过程注意无菌操作。
（4）待细胞贴壁后，可于四周的壁测加入些许全培。
（5）标记六孔板，放入孵箱中。
细胞复苏：方法一：从液氮中取出的冷冻管，迅速投入37-38℃水浴中充分摇动，使其快速融化（1左右）——复苏细胞直接加全培，直接培养（24h内换液）方法二：从液氮中取出的冷冻管，迅速投入37-38℃水浴中充分摇动，使其快速融化（1左右）——离心——去上清，加入全培，混匀，接种培养方法三：从液氮中取出的冷冻管，迅速投入37-38℃水浴中充分摇动，使其快速融化（1左右）——加4倍全培——离心（低速离心：300rpm离心5min;500rpm离心3min），去上清，加全培培养细胞离心，一半选用800-1000rpm，5-10分钟消毒方法（5种）：1、高压蒸汽消毒（玻璃器皿、金属器材等物品消毒）2、紫外线消毒适用于无菌室及操作台等消毒3、滤过消毒不可加热的液体通过0.22um滤膜过滤消毒4、化学消毒酒精、新洁尔灭等适用于操作台面和手等消毒，无菌室常用过氧乙酸消毒5、火焰消毒器材使用面常用火焰消毒。
吸管，瓶口和瓶塞消毒吉姆萨染色：爬片上的细胞常用甲醇冰醋酸固定后，吉姆萨染色（Giemsa）观察。
甲醇冰醋酸固定液：3份甲醇和1份冰醋酸混合，临用前配制。
1、吸去原培养液，用PBS轻轻漂洗玻璃片4遍；2、标本未完全干燥时，用甲醇冰醋酸固定液固定10min，中间换一次固定液；3、固定后玻片未完全干燥时，加Giemsa染液15min；4、吸去染色液，流水冲洗5min；5、玻片未完全干燥时，将玻片细胞生长面覆盖在载玻片上，显微镜下观察。
细胞Giemsa染色的结果与瑞氏染色基本相同，细胞核紫红色，胞浆呈灰蓝、蓝、红、或多色性，核仁染深蓝色。
吉姆萨（Giemsa）染色法：吉姆萨染液由天青，伊红组成。
嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性物质。
