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引言概述：胶体金试纸条是一种常用的分析试剂，广泛应用于生化分析、环境监测等领域。
它以胶体金作为指示剂的主要成分，结合纸条的吸附性能，通过改变颜色来检测目标物质的存在。
本文将详细介绍胶体金试纸条的制备方法和其在分析应用中的优势。
正文内容：一、胶体金试纸条的制备方法1.胶体金的制备1.1还原法制备胶体金1.2化学合成法制备胶体金1.3生物法制备胶体金2.纸条的处理2.1选用合适的纸质材料2.2纸条的预处理2.3纸条的涂覆二、胶体金试纸条的特点和优势1.高灵敏度1.1胶体金的特殊光学性质1.2微米级纳米颗粒的高表面积1.3足够的反应时间2.简单易用2.1操作步骤简单2.2结果直观可见2.3不需要专业设备3.高选择性3.1可调控的颗粒大小和形状3.2可调控的胶体金表面性质3.3可选择性修饰纸条反应区域4.低成本4.1胶体金制备成本低4.2纸条材料成本低4.3适用于大规模生产5.广泛应用5.1生化分析5.2环境监测5.3食品安全检测5.4临床诊断三、胶体金试纸条在生化分析中的应用案例1.蛋白质分析1.1检测蛋白质的存在及浓度1.2快速筛选蛋白质结构1.3监测酶活性变化2.DNA分析2.1单核苷酸多态性检测2.2基因突变检测2.3DNA序列鉴定3.药物检测3.1药物快速筛选3.2药物代谢产物检测3.3药物治疗监测四、胶体金试纸条在环境监测中的应用案例1.水质监测1.1水中重金属离子检测1.2水中有机物污染物检测1.3水中微生物检测2.大气监测2.1空气中有害气体检测2.2空气中颗粒物检测2.3气候变化指示剂监测3.土壤监测3.1土壤中有害物质检测3.2土壤中养分成分检测3.3土壤微生物检测五、结合与总结胶体金试纸条作为一种快速、简便、低成本的分析工具，在生化分析和环境监测等领域具有广泛的应用前景。
它不仅可以满足快速检测的需要，还能提供定量和定性的分析结果。
未来随着技术的不断创新和进步，胶体金试纸条将在更多领域展现其优势和应用价值。
犬瘟热病毒单克隆抗体的研制及胶体金试纸条检测方法的建立
张敏;李建;舒金秀;冯超林;石宝兰;郑良益;牟林琳;柏娇;胡玉立;徐松;刘国兴;闵娟娟;石瑛;顾素云;谢红玲
【期刊名称】《中国兽药杂志》
【年(卷),期】2022(56)12
【摘要】利用原核表达、纯化的犬瘟热病毒(Canine distemper virus, CDV)N蛋白免疫BALB/c小鼠,成功筛选到两株分泌CDV N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为D3、D6。
2株杂交瘤细胞分泌单克隆抗体敏感性、特异性良好,能识别不同来源的CDV株,单抗亚类均为IgG1。
以D3作为金标抗体,D6作为检测抗体,兔抗鼠IgG作为质控线抗体,制备CDV胶体金检测试纸条,检测CDV敏感性为1000 TCID50,能在CDV、犬细小病毒、犬腺病毒2型、狂犬病病毒中有效检测区分出CDV。
本研究建立的胶体金试纸条检测方法灵敏度高、特异性强,适用于CDV 临床快速诊断。
【总页数】9页(P16-24)
【作者】张敏;李建;舒金秀;冯超林;石宝兰;郑良益;牟林琳;柏娇;胡玉立;徐松;刘国兴;闵娟娟;石瑛;顾素云;谢红玲
【作者单位】国药集团动物保健股份有限公司;湖北省兽药监察所
【正文语种】中文
【中图分类】S852.65
【相关文献】
1.单增李斯特菌内化素A单克隆抗体制备及胶体金免疫层析试纸条的研制
2.出血性大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体制备及免疫胶体金试纸条的研制
3.检测犬瘟热病毒的单克隆抗体胶体金试纸条的制备
4.大肠杆菌O157∶H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制
5.犬轮状病毒单克隆抗体制备及胶体金试纸条检测方法的建立
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胶体金检测试纸生产工艺本项目主要从事犬、猫传染病抗体胶体金检测试纸的生产，以微孔滤膜为固相载体，膜上包被已知抗体，待加入检测样本后，经毛细管虹吸作用或微孔滤膜的渗滤作用，使标本中的抗体与膜上包被的抗体或抗原结合，再通过胶体金标记物与复合物反应，可形成肉眼可见的红色产物。
目前应用最为广泛的胶体金免疫技术有侧向横流模式，又称金标免疫层析法（ImmUnOgoIdChrOmatograPhyASsay,GICA ）O金标免疫层析法试纸条主要是通过毛细管虹吸作用反应,它由以下几部分组成:样品垫、胶体金垫、NC 膜（硝酸纤维素膜）、吸水滤纸、以及PVC 底板，NC 膜（硝酸纤维素膜）上包括一条检测线（T 线）和一条质控线（C 线）一次层叠起来，如下图所示：图3 金标免疫层析法示意图在吸水材料的牵引下，待测抗原在试条上向上走，首先与金标抗体结合成抗原抗体复合物，抗原抗体复合物上行到检测线时，被测抗原的另一结合位点与包被在此处的单抗结合，形成两个抗体结合一个抗原（双抗体夹心）的金标复合物，因有金颗粒在此沉积，故T 线显红色。
未结合抗原的金标抗体上行到C 线时，与“抗金标抗体”结合，所以C 线也显红色。
检测结果判定：T 线与C 线均显线，表明检测结果为阳性；C 线显线，T 线不显，表明结果为阴性。
若C 线不显线，则检测结果无效。
工艺流程如下所示：NC«（跚咬纤假素膜）PVC 底板 测试线（TtK 1）M 析方向样品稀释液噪声：N ；一般固体废物：不合格品(S1)；废防粘纸(S2)；边角料(S3)；废包装物(S4)；危险废物：废一次性滴管(S5)玻璃器具清洗废水(S6)；玻璃器具淋洗废水(S7)；超声波清洗废水(S8)、超声波冲洗废水(S9)o图4胶体金检测试纸生产过程示意图工艺流程简述： (1)检测：外购硝酸纤维素膜、金结合垫、吸水垫、样品垫均人工目视进行检验。
①硝酸纤维素膜：人工目视干燥后的包被膜表面应洁净、无污染、破损等，如有，需用笔标出。
犬瘟热金标快速检测试纸条（CDV-Ag）简介犬瘟热，俗称狗瘟，是由犬瘟热病毒引起的一种烈性传染病。
临床特征为双相热型、消化道、呼吸道炎症，眼、鼻流出脓样分泌物，少数病例可发生非化脓性脑炎。
多发生于3-6个月龄幼犬，青年犬也有感染，潜伏期为3-6天。
病毒单独感染症状轻微，若继发细菌感染症状加重，病死率较高。
检测原理本试纸为免疫层析法对病毒进行双抗体夹心检测。
检测样品为眼部及结膜分泌物，鼻液，唾液。
产品组分1．20份CDV Ag 试纸卡2．20份样品稀释液3．20份消毒棉签4．一份产品说明书保存及有效期限室温保存，不可冷冻。
生产日期起18个月有效。
样品收集及准备1、用生理盐水沾湿的棉签收集狗眼部及结膜分泌物，鼻液，唾液；2、采集样品时注意多部位同时收集新鲜及有效样品，充分在试管中搅拌稀释；；3、静置5分钟，用一次性滴管取上清液；4、样品一般须当即进行检测，否则应冷藏保存，超过24小时的，应该冷冻保存。
检测步骤1、试纸条恢复室温；2、取出试纸，开封后平放在桌面，从滴管中缓慢而准确地逐滴加入3-5滴混合液。
3、加样品液后，红色的液体从靠样品孔的观察窗边缘涌出，朝另一方向流动。
4、5-10分钟后判断结果。
结果判定阳性（+）：当位置C显示出红色线条，而位置T同时显示出红色线条时，判为阳性。
阴性（-）：当位置C显示出红色线条，而位置T不显色时，判为阴性。
无效：当位置C不显示出红色线条，则无论位置T显示出红色线条与否，该试剂盒判为无效。
阳性阴性注意事项1．仅用作体外诊断。
2．注意样品具有潜在传染性，注意防止交叉感染。
3．该试纸及配套试管、棉签均为一次性产品，不可交叉及重复使用。
4．包装袋破损或产品过期请勿使用。
Canine Distemper Virus Rapid Test CardIntroduceCanine distemper is caused by the canine distemper virus (CDV).It is a contagious, incurable, often fatal, multisystemic viral disease that affects the respiratory, gastrointestinal, and central nervous systems. Infected dogs shed the virus through bodily secretions and excretions, especially respiratory secretions. Young puppies between 3 and 6 months old are most susceptible to infection and disease and are more likely to die than infected adults. PrincipleThe test card is based on immunochromatography of double-antibody sandwich. Testing sample is the eye and conjunctival secretions,nasal fluid.Content1 CDV diagnostic Card: 20 pcs2 Dilution Buffer: 20 pcs3 Swab: 20 pcs4 Instruction: 1 insertProcedure1. Recover the dipstick to room temperature. remove as many of the test devices from the foil pouches as needed for testing.ing the disposable sample collection swab take a portion of secretion of eye mucus,nasal fluid.insert the collection swab into specimen tube containing the sample diluent.3.Mix the swab until the sample has been dissolved into the sample diluent.Discard the swab and repeat procedure for each sample. Adding 4 drops containing the sample diluent into the sample-well on the card.4. Read results after 10 minutes.ResultsPositive:The test zone and control zone have a pink/purple band visible.This indicates that the presence of canine distemper virus antigens.Negative:Only the control zone has a pink/purple band visible.The sample do not contains canine distemper virus antigens.Void:No color reaction on C line.Positive NegativePrecautions− Handle all biological materials as though capable of transmitting CDV.− Do not eat, drink, smoke or prepare foods, or apply cosmetics within the designated work area.− Do not use components past expiration date.− Optimal results will be obtained by strict adherence to this protocol. Careful washing and pipetting throughout this procedure are necessary to maintain precision and accuracy.− Do not use components past expiration date.− Only for veterinary use.The entire risk as to the performance of these products is assumed by the purchaser. We shall not be liable for indirect,special or consequential damages of any kind resulting from use of the products。
犬瘟热摘要：犬瘟热给犬等养殖业带来很大的灾难，本文将介绍其相关知识，使我们对其有一定的了解，对其预防起到积极地作用。
关键词：犬瘟热;机制;症状;治疗;防制犬瘟热(canine distemper,CD)是由犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)引起的一种急性、高度接触性传染病。
以早期双相热型、急性鼻卡他及随后的支气管炎、卡他性肺炎、严重的胃肠炎和神经症状为特征，有些患病动物的鼻和足垫还表现过度角化。
该病传染性强，发病率高，临床症状多样，容易继发其他细菌、病毒的混合感染或继发感染，死亡率可高达80%。
患病动物在康复后还易留有麻痹、抽搐、癫痫样发作等后遗症。
本病分布于全世界各地，中国各地亦时有发生。
该病不仅能感染犬科动物中的犬、狐狸、豺、狼等，还能感染鼬科动物中的貂、雪貂、黄鼬、白鼬等及浣熊科和猫科等多种动物，其中以雪貂的易感性最高，发病率高达100%。
近年来，包括大熊猫、小熊猫以及狮、虎、豹等食肉目8个科、偶蹄目猪科、灵长目的猕猴属和鳍足目海豹科等多种动物，均有CD自然发病的报道。
本病在临床诊治中，治疗费用高，治愈率低，对养犬业、经济动物养殖业、动物园观赏业、野生动物保护业及实验动物等危害极大。
近年来其感染范围不断扩大，已经延伸至西湍、日本猕猴和人。
Mee等还从患Pagrts疾病的病人组织中检测出CDV核酸。
因此，该病引起了动物医学界和医学界的广泛关注。
1 病原CDV属于单股不分节段的RNA病毒，在分类学上属于副粘病毒科麻疹病毒属。
同属的病毒有麻疹病毒(MV)、牛瘟病毒(RPV)、小反刍兽瘟疫病毒(PPRV)、海豹瘟病毒(PDV)、海豚瘟病毒(DMV)。
同属病毒部分抗原间有交叉。
该属的病毒都有特定的哺乳动物作为宿主，多通过呼吸道感染，对上、下呼吸道产生的影响有差异。
病毒会通过感染性的淋巴细胞和单核巨噬细胞散播到中枢神经系统。
CDV具有淋巴亲细胞嗜性和神经侵蚀性，会引发易感动物的持续性感染。
检测犬瘟热病毒的单克隆抗体胶体金试纸条的制备房超;张泉;易海华;吴萍兰;徐波;吴亚力【摘要】将从水貂中分离的犬瘟热病毒（Canine distemper virus,CDV）HB株经培养和纯化后免疫小鼠,制备分泌抗CDV-HB的杂交瘤细胞株,分别命名为2E1和7F3,ELISA测定腹水效价均大于107。
亚类鉴定结果表明单抗2E1的分子亚类为IgM,7F3的分子亚类为IgG1,间接免疫荧光试验表明,这两株单抗均可以与CDV-HB特异性结合。
采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒并标记2E1单克隆抗体,获得检测貂犬瘟热病毒抗原的胶体金免疫层析试纸,且鉴定证明制备的检测CDV的胶体金试纸条具有良好的的特异%The canine distemper virus（CDV-HB） isolated from mink was cultured and purified.The splenocytes from mice immunized with purified CDV-HB were fused with SP2/0 myeloma cells.Positive hybridoma was screened by indirect ELISA,and two monoclonal antibodies against CDV-HB were generated and designated as 2E1 and 7F3.The ELISA titers of the two antibodies in ascites were more than 107.The subtype identification of the antibodies demonstrated that the 2E1 belonged to IgM,and the 7F3 was IgG1.The specific interaction between CDV-HB virus and monoclonal antibodies was certified by indirect IFA.The MAb of 2E1 was purified and labeled with gold particles,which was prepared by sodium citrate method,to develop a colloidal gold immuno-chromatographic test strip for CDV detection,and the results indicated that the strip had the good specificity for CDV detection.【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2011(019)002【总页数】5页(P26-30)【关键词】犬瘟热病毒;单抗;胶体金试纸条【作者】房超;张泉;易海华;吴萍兰;徐波;吴亚力【作者单位】徐州出入境检验检疫局,徐州221006;扬州大学兽医学院,扬州225009;徐州出入境检验检疫局,徐州221006;徐州出入境检验检疫局,徐州221006;徐州出入境检验检疫局,徐州221006;徐州出入境检验检疫局,徐州221006【正文语种】中文【中图分类】S858.292.265.96犬瘟热（canine distemper, CD）是由传染性犬瘟热病毒（Canine distemper virus, CDV）引起的急性、高度接触性传染病，目前已成为危害我国乃至全世界养犬业、皮毛动物养殖业和野生动物保护业最严重的疫病之一[1]。
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