虎杖白藜芦醇的提取工艺及检测方法的研究进展
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虎杖中白藜芦醇苷提取分离工艺研究虎杖中白藜芦醇苷是一种具有抗氧化、抗炎症、抗肿瘤等多种生物活性的天然产物。
本文通过对虎杖中白藜芦醇苷的提取分离工艺进行研究,旨在寻找一种高效、经济、环保的提取方法,为进一步开发利用虎杖资源提供科学依据。
我们需要选择适宜的提取溶剂。
根据文献报道,乙醇是一种常用的提取溶剂,具有良好的溶解性和萃取效果。
因此,我们选择乙醇作为虎杖中白藜芦醇苷的提取溶剂。
我们需要确定合适的提取方法。
常用的提取方法有浸提法、超声波提取法、微波提取法等。
经过比较,我们选择了浸提法进行实验。
具体操作步骤如下:取一定量的虎杖粉末,加入适量的乙醇溶液中,与溶剂充分接触,反复搅拌一段时间,使白藜芦醇苷充分溶解于乙醇中。
然后,用滤纸过滤得到提取液。
提取液中的乙醇可以通过旋转蒸发或冷冻浓缩等方法进行回收利用,以提高经济效益。
同时,为了进一步提高提取效果,可尝试不同浓度的乙醇溶剂、不同提取时间和不同提取温度等条件进行优化。
接下来,我们需要对提取液进行分离纯化。
常用的分离纯化方法有固相萃取、薄层色谱、高效液相色谱等。
根据白藜芦醇苷的理化性质,我们选择了高效液相色谱进行分离纯化。
通过调整流动相组成、流速和检测波长等参数,可以实现白藜芦醇苷的有效分离。
我们对提取得到的白藜芦醇苷进行结构鉴定和质量分析。
常用的鉴定方法有紫外-可见光谱、红外光谱、质谱等。
这些方法可以帮助我们确定白藜芦醇苷的化学结构和相对分子质量,从而确保提取分离的物质具有一定的纯度和活性。
虎杖中白藜芦醇苷的提取分离工艺研究是一项重要的科研课题。
通过选择合适的提取溶剂、优化提取条件,以及采用适当的分离纯化方法,可以获得高纯度、高活性的白藜芦醇苷制剂。
这对于虎杖资源的开发利用具有重要的意义,也为相关药物的研发提供了有力支持。
希望本研究能为虎杖资源的深度开发与利用提供一定的参考和指导。
微生物转化虎杖苷粗提物制备白藜芦醇的工艺研究的开题报告一、选题背景白藜芦醇是一种天然的多酚类化合物,拥有多种生物活性,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等。
近年来,随着人们对天然药物的需求不断增加,白藜芦醇逐渐成为研究的热点。
目前,白藜芦醇的制备方法主要分为化学合成和从天然植物中提取两类。
化学合成虽然可以规模化生产,但存在工艺复杂、成本高、环境污染等缺点。
而从天然植物中提取白藜芦醇,则需要大量原料,且存在着提取效率低、纯度不高等问题。
因此,开发新型的白藜芦醇制备工艺,具有很好的应用价值。
本次选题旨在利用微生物对虎杖苷粗提物进行转化,制备高纯度白藜芦醇。
二、选题意义1. 微生物转化制备白藜芦醇与传统提取技术相比具有简单、环保、高效等优点;2. 微生物转化可以利用一些不易提取的活性成分,并且可以适用于各种原材料,具有很好的可操作性和可控性;3. 白藜芦醇具有多种生物活性,可以用于食品、保健品、医药等领域;4. 开发新型的白藜芦醇制备工艺,对于提高生产效率、节约成本具有很好的价值。
三、研究内容1. 通过筛选,选定一种适宜转化虎杖苷粗提物制备白藜芦醇的微生物;2. 优化微生物转化的反应条件,探究菌种种类、培养基、反应时间、温度、pH等因素对反应效率的影响;3. 利用高效液相色谱技术对反应产物进行分离和纯化,分析其结构和纯度,并进行定量分析;4. 对制备的白藜芦醇进行生物活性评价。
四、研究方法1. 通过文献综述、实验筛选等方式,选定适宜转化虎杖苷粗提物制备白藜芦醇的微生物,包括细菌、真菌、酵母等;2. 对微生物转化的反应条件进行优化,包括培养条件、转化反应、提取及纯化等步骤的优化;3. 利用高效液相色谱技术对转化反应产物进行分离、纯化、定量和结构分析;4. 对制备的白藜芦醇进行单体/多体的生物活性评价。
五、预期结果1. 筛选出一种适宜转化虎杖苷粗提物制备白藜芦醇的微生物;2. 优化反应条件,探究不同因素对反应效率的影响;3. 制备出高纯度的白藜芦醇,并进行结构分析和定量分析;4. 对制备的白藜芦醇进行生物活性评价。
虎杖中白藜芦醇的分离纯化研究本研究通过详细的资料调研,以具有抗癌、抗心血管疾病等重要生理活性并具广阔市场前景的白藜芦醇为研究对象,以湖南湘西丰富而价廉的虎杖资源为原料,对虎杖中白藜芦醇的提取、分离纯化工艺进行了深入而系统的研究,确定了工艺流程、分析方法和分离纯化条件;本着开发高效的天然产物分离方法的原则,对分子印迹技术应用于白藜芦醇的分离纯化做了研究。
具体内容摘要如下: 1.研究了虎杖中药用活性成分的分析方法及稳定性。
建立了以甲醇-水为体系等度洗脱,同时测定虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇甙的HPLC分析方法及快速、准确测定大黄素的HPLC法;确定了定性分析虎杖中活性成分的TLC法,避免了使用氯仿等有毒试剂,方法简便,为后续实验研究提供了快速定性检测手段;对白藜芦醇的稳定性进行了研究,得出了具有指导意义的结果。
2.对虎杖中药用活性成分的提取工艺进行了研究。
建立了同时提取虎杖中白藜芦醇甙、白藜芦醇及大黄素三种活性成分的常规溶剂提取工艺,有利于虎杖资源的开发利用;针对活性成分的结构特点,筛选出一种植物精提复合酶,建立了酶法提取虎杖中白藜芦醇的工艺,与常规溶剂提取法相比,酶法提取使白藜芦醇得率由2.40mg/g提高到12.13mg/g,得率提高了5倍左右,且反应时间仅1.5h,较文献报道的方法具有酶解效率高、反应时间短等特点;对酶解后的工艺进行优化,同时考虑了白藜芦醇和大黄素的提取,结果表明,优化后的工艺具有省时、省能等特点,且产品在收率和质量上同时得到提高,从而进一步证明了酶法较常规溶剂提取法的优越性,这一研究对其它中草药的酶法提取具有一定的参考价值;探讨了酶解机制,建立了酶解动力学。
3.分离纯化虎杖提取液中白藜芦醇和大黄素的工艺研究。
对酶解-乙醇提取液通过预处理分离得到大黄素溶液,并采用硅胶柱层析技术进一步纯化,得到了纯度达95%的大黄素产品,确定了工艺条件;全面而系统地研究了采用大孔吸附树脂技术分离纯化白藜芦醇的工艺条件。
微波辅助提取虎杖中白藜芦醇的工艺研究【摘要】目的:优选微波辅助提取虎杖中白藜芦醇的最佳工艺。
方法:用紫外分光光度法测定白藜芦醇的含量,并以白藜芦醇的提取率为参考指标,通过单因素实验及正交实验方法对微波辅助提取法(MAE)提取虎杖中白藜芦醇的最佳工艺进行研究。
结果:经过正交实验得到从虎杖白藜芦醇的最佳工艺为:微波辅助作用时间15 min以70%的乙醇为提取剂,料液比1:30,微波辅助功率为500W。
结论:该实验确定的最佳提取工艺简便、快速、准确,灵敏度高和重现性好等优点。
【关键词】虎杖白藜芦醇微波辅助提取正交实验紫外分光光度法虎杖别名花斑竹、酸筒杆、酸桶笋、酸汤梗、川筋龙、斑杖根,为蓼科植物虎杖Polygonum cuspidatum,的干燥根茎和根。
多生于山谷、溪旁或岸边,分布在我国中部及南部。
产于江西、福建、云南、四川、贵州等地。
药理作用:(1)对心血管系统的影响:强心扩血管作用;抑制血小板聚集、抗血栓;改善微循环、抗休克作用;降血脂;(2)对呼吸系统的影响:镇咳、平喘作用;(3)对消化系统的影响:胃肠道作用、保肝用;(4)止血抗炎作用;(5)镇静作用;(6)修复损伤的DNA及保护大脑皮层神经元功能、对酶活性抑制作用、对内分泌的影响、对基因表达的影响、利尿作用等[1]。
研究结果表明虎杖含有如下多种化学成分:含有大黄素、大黄素-6-甲醚、大黄素-8-单甲醚、大黄酚、大黄酸及蒽苷大黄素-6-甲醚-8-β-D-葡萄糖苷和大黄素-8-β-D-葡萄糖苷等[2];含有白藜芦醇和白藜芦醇苷(虎杖苷).其中白藜芦醇和白藜芦醇苷为主要药用成分。
白藜芦醇(3,4,5,-三羟基二苯乙烯;trans-resveratrol)是一种活性多酚物质,在虎杖、葡萄、花生、毛穗藜芦、毛脉酸模等植物中存在[3]。
白藜芦醇的功能作用:首先,具有抗癌作用,可用于预防与治疗慢性炎症和癌症。
对肿瘤的起始、促进、发展三个阶段均有抑制作用,可作为天然的化学防癌剂。
响应面法优化虎杖中反式白藜芦醇的提取工艺及抑菌活性
响应面法优化虎杖中反式白藜芦醇的提取工艺及抑菌活性
采用响应面分析法优化了虎杖中反式白藜芦醇的提取工艺,其最优提取工艺条件为:以体积分数79%乙醇为溶剂,53℃回流提取1.1 h;此条件下白藜芦醇提取量为5.912mg/g,与理论值5.918 mg/g接近.产物经红外和质谱鉴定为反式白藜芦醇(纯度99.8%).考察了经分离纯化后的反式白藜芦醇对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用,结果表明所得反式白藜芦醇具有抑菌活性,10h后质量浓度为0.125mg/mL的反式白藜芦醇对金黄色葡萄球菌的抑菌率为80%,而质量浓度为1.00mg/mL的反式白藜芦醇对大肠杆菌的抑菌率为40%.
作者:蔡杨柳陈劲春 CAI YangLiu CHEN JinChun 作者单位:北京化工大学生命科学与技术学院,北京,100029 刊名:北京化工大学学报(自然科学版)ISTIC PKU英文刊名:JOURNAL OF BEIJING UNIVERSITY OF CHEMICAL TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期):2010 37(4) 分类号:Q946 关键词:反式白藜芦醇虎杖响应面抑菌活性。
虎杖中白藜芦醇的提取及分析检测技术研究进展宋海南;钱善军;刘玮【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2014(000)021【摘要】Resveratrol was a natural antioxidant and free radical clearance agent. From 18 articles was reviewed, extract and detection technology of resveratrol from Polygonum cuspidatum are summarized. The advantages and disadvantages of various extraction and analyze technology was comprised on the resveratrol yield, process complexity, operational safety, extraction time and reproducibility etc, an important reference for the further research and application of resveratrol was provided.%白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂和自由基廓清剂。
通过查阅近期发表的18篇文献,本文对近年来虎杖中白藜芦醇的提取、分析检测技术等方面的研究进展进行了综述,以白藜芦醇得率、工艺复杂性,操作安全性、提取时间、重现性等为指标,比较各种提取、分析检测技术的优缺点,为白藜芦醇的进一步研究和应用提供了非常重要的参考。
【总页数】3页(P18-19,82)【作者】宋海南;钱善军;刘玮【作者单位】安徽医学高等专科学校,安徽合肥230601;安徽医学高等专科学校,安徽合肥 230601;安徽医学高等专科学校,安徽合肥 230601【正文语种】中文【中图分类】O65【相关文献】1.虎杖中白藜芦醇、白藜芦醇苷提取工艺的研究 [J], 庄彦;袁经权;周小雷;王硕;樊溪源;缪剑华2.虎杖中白藜芦醇提取工艺的研究进展 [J], 袁敏;王平;张贞丽3.响应面法优化虎杖中虎杖苷和白藜芦醇的匀浆提取 [J], 周军;徐雷涛;熊曼;董兰改;李湘洲;;;;;;4.响应面法优化虎杖中虎杖苷和白藜芦醇的匀浆提取 [J], 周军;徐雷涛;熊曼;董兰改;李湘洲5.虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的提取工艺研究 [J], 张玉千;张宇;龚赛男;许瑾;杨阳春因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取及含量测定一、本文概述本文旨在探讨虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取方法及其含量测定技术。
虎杖作为一种具有广泛药用价值的天然植物,其中含有的白藜芦醇和白藜芦醇苷是其主要活性成分,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此,研究虎杖中这两种成分的有效提取和准确测定方法对于深入理解虎杖的药理作用以及优化其临床应用具有重要意义。
本文将综述当前虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取技术,包括溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取等,并评价其优缺点。
本文还将介绍含量测定的常用方法,如高效液相色谱法、紫外可见分光光度法等,并探讨其准确性和可靠性。
通过本文的综述,旨在为虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的深入研究和应用提供有益的参考。
二、虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取方法虎杖,作为一种具有丰富生物活性的中草药,被广泛用于传统医学中。
其内含的白藜芦醇和白藜芦醇苷具有显著的抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生物活性,因此,对这两种成分的提取和含量测定具有重要的意义。
以下将详细介绍虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取方法。
我们需要新鲜的虎杖根茎,确保其来源清洁、无污染。
随后,将虎杖根茎进行清洗、干燥和粉碎,以便后续的提取操作。
由于白藜芦醇和白藜芦醇苷均具有一定的极性,因此,我们常选用极性溶剂如甲醇、乙醇等进行提取。
这些溶剂能够有效地溶解并提取出虎杖中的目标成分。
常用的提取方法包括浸泡提取、回流提取和超声波辅助提取等。
考虑到效率和提取效果,我们通常采用回流提取法。
具体操作如下:将粉碎后的虎杖粉末与提取溶剂混合,置于回流装置中,加热回流一定时间,使溶剂充分与原料接触,从而充分提取出白藜芦醇和白藜芦醇苷。
提取完成后,需要对提取液进行处理,以去除其中的杂质,提高目标成分的纯度。
常用的处理方法包括过滤、浓缩和干燥等。
通过以上步骤,我们可以有效地从虎杖中提取出白藜芦醇和白藜芦醇苷。
这为后续的含量测定和进一步研究提供了基础。
虎杖中白藜芦醇苷提取分离工艺研究虎杖中白藜芦醇苷是一种具有多种生物活性的天然化合物,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。
为了充分利用虎杖中的白藜芦醇苷并满足市场需求,研究人员进行了白藜芦醇苷的提取和分离工艺研究。
白藜芦醇苷是一种存在于植物中的多元醇类化合物,具有较低的溶解度,因而在提取和分离过程中需要采用适当的方法。
目前常用的提取方法有超声波辅助提取、浸泡提取、水蒸气蒸馏提取等。
其中,超声波辅助提取是一种较为高效的提取方法,它利用超声波的机械作用和热效应来破坏细胞壁,促进白藜芦醇苷的释放。
在超声波辅助提取过程中,首先需要将虎杖样品粉碎成适当的颗粒大小,以增加提取效率。
然后将虎杖样品与适量的溶剂(如乙醇、甲醇等)混合,放入超声波提取仪中进行提取。
超声波的作用下,虎杖中的白藜芦醇苷会逐渐释放到溶剂中。
提取时间和温度是影响提取效果的重要因素,一般来说,提取时间越长、温度越高,提取效果越好。
但是过长的提取时间和过高的温度可能会导致白藜芦醇苷的降解,因此需要找到适当的提取条件。
提取完成后,需要对提取液进行分离和纯化。
常用的分离方法有溶剂萃取、硅胶柱层析、凝胶渗透层析等。
其中,硅胶柱层析是一种常用的分离方法,它可以根据样品中化合物的亲疏水性来进行分离。
在硅胶柱层析过程中,首先需要将硅胶填料充分膨胀,然后将提取液加入硅胶柱中。
根据白藜芦醇苷和其他成分在硅胶上的亲疏水性差异,通过溶剂梯度洗脱的方法,将白藜芦醇苷从其他杂质中分离出来。
最后,通过溶剂的挥发或其他方法将白藜芦醇苷纯化得到。
还可以利用高效液相色谱(HPLC)等技术进一步提高白藜芦醇苷的纯度。
HPLC是一种基于溶液动力学的色谱技术,可以对复杂样品进行分离和检测。
在HPLC分离过程中,需要选择合适的色谱柱和流动相,通过控制流速和梯度洗脱的方法,将白藜芦醇苷从其他成分中分离出来。
最后,通过检测器对分离得到的白藜芦醇苷进行检测和定量。
虎杖中白藜芦醇苷的提取和分离工艺研究是为了充分利用这一天然药物资源并满足市场需求。
虎杖白藜芦醇的提取工艺及检测方法的研究进展【摘要】介绍了虎杖中白藜芦醇的提取以及检测方法的研究进展,为进一步开发利用提供了依据。
【关键词】虎杖白藜芦醇提取工艺检测方法Abstract:In this paper,the advances in the research of extraction technology and determination of resveratrol from Polygonum cuspidatum were introduced,which provided references for more exploitation in the future.Key words:polygonum cuspidatum; Resveratrol; Extraction technology; Determination白藜芦醇(3,4,5,-三羟基二苯乙烯;trans-resveratrol)是一种活性多酚物质,在虎杖、葡萄、花生、毛穗藜芦、毛脉酸模等植物中存在。
白藜芦醇被认为是一种植物抗毒素,在植物受到病原性进攻和环境恶化时产生的。
其药理作用为:抗菌、抗氧化、预防心脏病、抗癌、抗血小板凝聚、保护肝脏、雌激素作用、防辐射、免疫调节、抗艾滋病活性等[1~3]。
白藜芦醇已被喻为继紫杉醇之后又一新的绿色抗癌药物,它在食品、医药等方面应用也越来越广。
在日本,已将含白藜芦醇植物提取物作为食品添加剂使用;在我国,也有将白藜芦醇植物提取物制成降脂、美容、减肥和抗癌天然保健食品及胶囊[4]。
本文回顾了近年来虎杖白藜芦醇的提取工艺以及检测方法的研究进展。
1 提取方法1.1 酶提取法虎杖中除了含有白藜芦醇外,还含有白藜芦醇苷、蒽醌类、二苯乙烯类、多糖、氨基酸等物质,白藜芦醇苷在一定的条件下可以通过酶解脱去葡萄糖基而转化为白藜芦醇,酶解可以通过加入生物酶或利用植物内微生物进行,采用酶法从虎杖中提取白藜芦醇已有专利报道[5~8],向海艳等[9]用纤维素酶酶解后提取,虎杖中白藜芦醇苷在纤维素酶作用下,转化成白藜芦醇,使白藜芦醇得率大大提高。
其白藜芦醇得率比直接醇提法提高近5倍。
但这些方法存在转化率不高、成本较高、需时较长等不足。
1.2 微波提取法李核等[10]用微波辅助萃取法,研究了溶剂类型及萃取时间和温度、微波功率、虎杖颗粒大小和水分等主要操作参数对虎杖中白藜芦醇产率的影响,得到最佳萃取条件为:甲醇和丙酮为最佳萃取剂,温度80℃,时间15min,微波功率800~900W,虎杖颗粒大小为0.45~0.30 mm,水分含量为20%,白藜芦醇的得率为0.55%。
1.3 超声波提取法刘树兴等[11]以虎杖为原料,比较了热水浸提、回流提取、超声波提取、索式提取、常温磁力搅拌5种方式的白藜芦醇提取效果,结果见表1。
表1 不同提取方法比较(略)由表1可知,超声波提取法的提取效果最好,而且提取时间最短。
刘树兴等[12]用超声波提取虎杖中的白藜芦醇和大黄素,确定了最佳的工艺条件:超声波功率250W,pH 4.0,料液比1∶20,温度40℃,超声波时间30 min,80%乙醇和80%丙酮(1∶1),白藜芦醇的提取率分别为3.34%。
曾里等[13]用超声波辅助提取虎杖中白藜芦醇,探讨超声波的占空比的改变对白藜芦醇含量的影响,结果发现占空比较小的超声波辅助提取有利于保持较高的白藜芦醇相对含量。
江曙等[14]采用了回流提取、CO2超临界流体萃取、超声波提取方法对虎杖中的白藜芦醇进行提取研究,结果表明超声波的提取效果最好。
最佳提取条件为:15倍75%乙醇超声波浸提60 min,白藜芦醇提取率达0.03 mg/g。
该方法工艺简单,可提高提取效率、缩短提取时间、低温条件下以超声波提取有效成分还有利于维持原药中有效成分的性质。
1.4 碱溶酸沉提取法由于白藜芦醇酚羟基较少,在水中溶解度较小,在一定条件下它可与某些无机碱、碱性盐形成酚盐而增加其在体系中溶解度。
通过调节体系pH值,白藜芦醇将重新沉淀出来,故可通过碱溶酸沉方法富集提取白藜芦醇。
苏文强等[15]采用碱性水溶液提取、调节溶液pH沉降方法,从虎杖中提取白藜芦醇,并考察碱的种类、用量及酸的种类、用量对提取效果影响,确立白藜芦醇碱溶酸沉最佳提取条件为:用NaOH调节提取溶剂的pH值为10,在恒速、均匀搅拌下,加热煮沸1 h,滤液用1 mol/L的盐酸调节pH为3,放置沉淀,真空过滤。
该法与有机溶剂提取法相比,具有工艺简单易行,操作安全方便,成本低,选择性强的特点。
1.5 CO2超临界萃取法周锦珂等[16]采用超临界CO2萃取虎杖中的白藜芦醇,获得最佳的实验条件为:萃取温度50℃,萃取压力25 MPa,萃取时间90 min,萃取物中白藜芦醇的含量高达33%;曹庸等[17]采用超临界CO2流体技术对虎杖中白藜芦醇进行萃取,获得初步萃取条件:萃取釜压力25 MPa,温度50℃;解析釜压力5.7 MPa,温度46℃,用无水乙醇及CY(自制)作为改性剂,同时用HPLC对萃取物进行白藜芦醇含量测定。
超临界二氧化碳具有性质稳定、不易燃、无毒、不污染环境等优点,但有一定的局限性:它主要适用低极性物质萃取,压力温度选择也较小,在生产应用上存在设备一次性投资大,维护费用高[18]等不足。
2 检测分析2.1 HPLC周建军等[19]采用色谱柱为EclipseXDBC8柱,流动相为乙腈-水,流速为1 ml/min,检测波长为303nm。
测出汉中地区虎杖中白藜芦醇的含量;周春山等[20]选用自填装ODS-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μm),以甲醇-水(41:59)为流动相,流速为0.6 ml・min-1,紫外检测波长为303 nm。
白藜芦醇在0.06~0.30 μg范围内呈良好的线性关系。
朱鸿津[21]采用HPLC法测定虎杖中白藜芦醇含量,其间以聚酰胺柱对样品进行预处理,获得较好分离度和高回收率。
测定条件:ODS-C18柱,流动相为甲醇-水(35∶65),检测波长为300nm。
白藜芦醇在0.420μg范围内具良好的线性关系,曹庸等[22]采用色谱柱:岛津Shim-park CLC-ODS(150 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-水(体积比为41∶59)溶液为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长306 nm。
在此条件下,样品溶液进样质量浓度范围在500~1000 μg/ml时,白藜芦醇含量与峰面积呈良好的线性关系。
朱立贤等[23]测定虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量。
色谱柱为LichrospherC18,流动相为甲醇-水-醋酸,梯度洗脱,流速0.3ml・min-1,柱温30℃,检测波长305 nm,线性范围为:0.039 6~0.356 4 μg。
该法准确、简便,重现性好,适用于虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的定量分析。
2.2 TLC周国海等[24]用薄层扫描分析测定虎杖白藜芦醇含量:以硅胶G 为薄层吸附剂,氯仿∶丙酮∶醋酸∶水(4∶4∶0.5∶0.2)为展开剂,在紫外灯(365 nm)下观察荧光斑点,在365nm处并进行扫描测定,并对虎杖茎、根、叶进行了含量测定,虎杖鲜根茎中含量达0.548%。
傅红等[25]建立一种虎杖中白藜芦醇的含量测定方法,以石油醚-醋酸丁酯-甲醇-冰醋酸(4∶1∶0.7∶0.02)为展开剂,293 mm紫外光为扫描波长,测定其含量,该方法简单易行,准确度高和重现性良好,可用于虎杖的质量控制。
2.3 毛细管电泳法(CE)毛细管电泳法(CE)是一种分离分析技术,以其高效、高速、微量和低消耗等优点在分析领域中有着重要的应用和发展前景。
陈宪等[26]采用毛细管电泳-电化学检测技术(CE-ECD)对白藜芦醇及虎杖苷进行分离检测。
采用柱端喷壁式安培检测方式,在最佳分离条件下,2待测物在12 min以内完全分离。
白藜芦醇和虎杖苷分别在1.2×10-6~1.0×10-4mol/L与6.0×10-7~5.0×10-5mol/L浓度范围内与峰电流成良好的线性关系,检测下限分别为1.6×10-7和2.3×10-7mol/L。
将该体系用于中药虎杖、中成药护肝宁片及市售红葡萄酒的分析和回收实验,测定结果令人满意。
郑妍鹏等[27]用非水毛细管电泳采用甲醇为分离介质,三(羟甲基)氨基甲烷-硼酸为支持电解质,采用负高压,使用电导检测对虎杖中白藜芦醇进行分析,发现该方法分离度和灵敏度高。
2.4 化学发光法化学发光分析法具有仪器设备简单,测定快速,灵敏度高,线性范围宽等优点。
姚型军等[28]基于在碱性介质中,白藜芦醇对I-增强N-氯代丁二酰亚胺-鲁米诺化学发光体系的阻抑作用,建立了测定白藜芦醇的流动注射化学发光分析新方法。
优化了流动注射化学发光的分析条件和探讨了反应的可能机理。
测定白藜芦醇的线性响应质量浓度范围为2.5×10-9~8.0×10-8g・ml-1,检出限为6.3×10-10g・ml-1,用5.0×10-8g・ml-1的白藜芦醇标准溶液进行11次测定,相对标准偏差(RSD)为2.2%。
应用本法测定了虎杖、葡萄酒、葡萄皮样品中的白藜芦醇含量,结果满意。
姚型军等[29]在选定的实验条件下。
即2.0×10-6 mol/L鲁米诺1.0×10-3 mol/L NaOH。
3.0×10-5mol/L N-溴代丁二酞亚胺,白藜芦醇的浓度在6.0×10-7~1.0×10-5mg/ml范围内变化。
其浓度与体系的化学发光强度△I呈良好的线性关系,用浓度为5.0×10-6 mg/ml的白藜芦醇标准溶液进行11次测定,相对标准偏差( RSD)为0.35%。
方法检出限(3s/k)为8.15×10-8mg/ml。
3 结语近年来,随着对白藜芦醇的研究不断深入,对白藜芦醇的提取和分析检测的研究已取得了一定的进展,一些新的技术和手段不断应用于这一领域,并显示出诸多优势和良好前景,但HPLC仍将发挥着主要作用。
今后的研究主要方向:①进一步挖掘富含白藜芦醇的植物品种,并且通过人工栽培和育种手段获得高含量白藜芦醇的品种;②通过植物细胞培养法来生产白藜芦醇和提高其含量,解决资源短缺的问题。
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