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色谱柱在HPLC中是非常关键的部件。
一台色谱仪如果没有色谱柱几乎什么工作也做不了。
色谱柱是消耗品，有一定寿命，使用中也非常容易出问题。
普通的正相反相色谱柱使用得当可用一、两年。
使用不得当用两、三个月就可能损坏。
所以使用中应该非常注意。
1.在使用一根新的色谱柱之前，一定要看柱说明书，将柱子的使用压力、pH值、温度范围和所用流动相种类都要弄清楚。
接触最多的是C18色谱柱，它对试剂应用的范围非常广，甲醇、水、乙腈、四氢呋喃、三氯甲烷、正乙烷、各种缓冲盐都适用。
但其他的色谱柱所使用的试剂就有一定的要求，有的色谱柱只能使用水，不能使用有机试剂，有的色谱柱只能使用有机试剂，而且使用指定是某一种，象GPC色谱柱。
这些事情一定搞清楚，如果流动相使用不对，柱子很快会损坏。
另外在更换柱子时不能让不能使用的流动相进入柱子。
2.柱子是有方向的，柱子上箭头的方向就是流动相流动的方向。
当换新柱子时，不要马上就接到检测器上使用。
将柱子入口处接在进样器的出口，柱子出口处（即箭头的一端）先不接检测器，按箭头方向垂直朝上，用流动相（甲醇）以1ml/min的流速冲洗1min左右。
将柱子里的小气泡全部赶走以后再接到检测器上，否则小气泡跑到检测池里，就很难赶走，检测器产生噪声信号，基线也就走不好。
3.关于压力对色谱柱的影响：常用的正反两相色谱柱一般耐压在12～20MPa之间，生产厂家不同，耐压也不同，从理论上讲耐压高的色谱柱柱效就高，但柱效高低不仅与耐压的高低有关，还有其他因素。
从使用中看，在保证柱效的同时，耐压不要太高，仪器所显示的压力是流路、混合器、自动进样器、柱压、流通池总体的压力，检查柱压力应分段检查。
压力过高不仅柱子受不了，其他的部件也会出问题，例如自动进样器。
4.色谱柱对pH值是有一定的使用范围。
以硅胶为担体的柱子一般使用范围在2～7pH。
耐碱性能不太好，流动相的pH大于8会使硅胶溶解。
有些分析条件须用碱性流动相，这时一定要选耐碱性好的色谱柱，流动相的PH值过高或过低，流动相使用纯水，使用高浓度磷酸盐缓冲溶液，使用离子对试剂等，均可能造成色谱柱填料被化学破坏，这种对色谱柱固定相及键合相的破坏通常是不可修复的。
关于中压柱的知识点★中压制备柱色谱经典柱色谱与低压柱色谱的分辨率一般还是有限的，因为它们所用的分离材料的颗粒一般比较大。
如果要进一步提高制备色谱的分辨率，通常只有进一步减小材料的颗粒或者增加色谱柱的长度，这样无疑会增大色谱柱的阻力及降低流动相的流速。
另外，不同的冲洗溶剂所造成的流动相流速也有很大差别，如采用正相，以环己烷作为流动相时，流动相的流速较快；而采用反相，以水作为流动相时，则流速较慢，使用一些黏度较大的有机溶剂，如正丁醇也有同样的结果。
为进一步提高制备色谱的分辨率又能保证有较快的分离速度，使用中压制备色谱是行之有效的办法。
中压柱色谱与经典柱色谱或低压柱色谱相比需要更多的组件，最简单的配置是除色谱柱外，再加上一台能够提供几十公斤压力的恒流泵。
中压柱色谱的工作原理是由恒流泵输送移动相，通过进样阀上样，在色谱柱对样品进行分离后，利用检测器检测，记录仪记录，并同时收集各个馏分。
在实际工作中，往往并不一定需要购置成套的装置，而是根据自己的研究需要和经费状况，分别购置适宜的组件自己组装。
中压制备柱色谱一般由下面最主要的几个部件组成。
恒流泵中压制备柱色谱除色谱柱外，唯一不能省掉的就是恒流泵。
恒流泵的类型很多，从高效液相常规使用的泵到蠕动泵，都是恒流泵，也即都能以恒定的流量输出液体。
所不同的是高效液相使用的泵通常要求最高压力能达到40MPa，最大流量达到10mL/min,流量的精确度和准确度也要求很高。
低压柱色谱恒流泵压力为0.3-0.5MPa，中压柱色谱对泵的要求则介于二者之间。
一个恒流泵能达到的压力越高，输出流量的精确度和准确度要求也越高，在实验室购买恒流泵时，主要考虑的是其能达到的最大压力最大流量，其次才是精确度和准确度。
目前使用的恒流泵多数是柱塞式往复泵。
色谱柱多数情况下中压制备色谱的色谱柱都是由耐压的强化玻璃制成，并且都是由自己装填柱子，最常用的分离材料颗粒的大小为15-25微米和25-40微米。
钢筋混凝土柱的局部压力场分析与设计准则钢筋混凝土柱作为建筑结构中的重要组成部分，承担着承载垂直荷载及水平力的重要任务。
在柱子受到垂直荷载的作用下，会产生局部压力场，对柱子的结构性能和承载能力有着重要的影响。
因此，对钢筋混凝土柱的局部压力场进行准确的分析与设计，是保证柱子结构安全可靠的关键。
钢筋混凝土柱的局部压力场分析需要考虑以下几个方面：柱截面设计、配筋规范、现场浇筑施工和填充材料的选择。
合理的设计准则将有助于提高柱子的结构性能。
首先，钢筋混凝土柱截面的设计应符合一定的准则。
截面形状应选取合适的矩形、圆形或多边形，以满足柱子对弯矩、剪力和轴向力的要求。
根据不同的受力情况，需要选择合适的截面尺寸，以保证柱子的受力性能。
其次，配筋规范对钢筋混凝土柱的局部压力场也起着重要的影响。
配筋的数量、间距和类型应按照设计规范进行选择。
在柱子的重要受力区域，应增加合适的配筋以增强柱子的受力性能。
同时，配筋的布置应尽量均匀，并注意控制配筋的偏心距，以减小柱子的偏心压力。
第三，现场浇筑施工对局部压力场的分析与设计同样至关重要。
在浇筑过程中，应采取适当的措施来控制混凝土的流动性，减小局部压力场的不均匀性。
同时，应注意浇筑速度和浇筑的层数，以避免产生局部过大的压力。
最后，填充材料的选择也会对局部压力场产生影响。
填充材料的强度和变形能力应与柱子的材料相匹配，以保证柱子的整体受力平衡。
在使用填充材料时，应遵循相应的设计准则和规范，确保填充材料的性能可靠，不会对柱子的局部压力场产生不利影响。
总而言之，钢筋混凝土柱的局部压力场分析与设计是确保建筑结构安全可靠的重要环节。
通过合理的柱截面设计、配筋规范、现场施工和填充材料选择，可以有效地减小局部压力场的不均匀性，提高柱子的受力性能。
在进行分析与设计时，应严格遵循相关的设计准则和规范，确保柱子的结构安全可靠。
只有如此，才能保证钢筋混凝土柱的局部压力场处于合理的状态，为建筑结构提供稳定可靠的支撑。
精心整理柱层析技术常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。
我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。
由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。
柱子可以分为：加压，常压，减压。
压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。
头了。
有0.5相差0.1是因为分离的东西比较敏感，所以接收瓶一定要用可密封的，遵循schlenk操作。
至于是加压、常压、减压，随需而定。
因为是schlenk操作，所以点板是个问题，假如样品是显色的，恭喜了，不用点板，直接看柱子上的色带就行了。
假如样品无色，只好预备几十个schlenk瓶，一瓶一瓶的点，不过几次之后就知道样品在哪，也就可以省些了。
像我以前过一根无水无氧柱，需要六个schlenk，现在只一个就能把所要的全收集到。
无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相。
因为硅胶中有大量的羟基裸露在外，很轻易是样品分解，非凡是金属有机化合物和含磷化合物。
而氧化铝可以做成碱性、中性和酸性的，选择余地比较大，但是比硅胶要贵些。
听说有个方法，就是用石英做柱子，然后用HF254做固定相，这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了，没有验证过。
哪位做过可以提出来大家参详参详。
--※关于湿法、干法上样。
湿法省事，一般用淋洗剂溶解样品，也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等，但溶剂越少越好，不然溶剂就成了淋洗剂了。
很多样品在上柱前是粘乎乎的，一般没关系。
可是有的上样后在硅胶上又会析出，这一般都是比较大量的样品才会出现，是因为硅胶对样品的吸附饱和，而样品本身又是比较好的固体才会发生，这就应该先重结晶，得到大部分的产品后再柱分，假如不能重结晶那就不管它了，直接过就是了，样品随着淋洗剂流动会溶解的。
有些样品溶解性差，能溶解的溶剂又不能上柱（比如DMF,DMSO等，会随着溶剂一起走，显色是一个很长的脱尾），这时就必须用干法上柱了。
混凝土柱受压变形规律研究一、引言混凝土柱是建筑结构中常用的支撑元件，负责承受垂直荷载和向侧向抗力传递。
由于混凝土柱的受压变形规律对结构的稳定性和安全性有重要影响，因此对混凝土柱受压变形规律的研究具有重要意义。
二、混凝土柱受压变形规律的理论分析1.混凝土柱的受压破坏形式混凝土柱的受压破坏形式主要有两种，一种是轴心受压破坏，另一种是侧向受压破坏。
轴心受压破坏时，混凝土柱的中心轴线与荷载作用线重合，混凝土柱整体失稳；侧向受压破坏时，混凝土柱的侧面受到压力而发生破坏，混凝土柱整体侧向屈曲失稳。
2.混凝土柱受压变形规律的基本特征混凝土柱受压变形规律的基本特征有三个方面：一是变形具有非线性，随着荷载的增加，混凝土柱的变形呈现出明显的非线性特征；二是变形具有韧性，混凝土柱在荷载作用下会发生塑性变形，能够吸收一定的能量；三是变形具有不可逆性，混凝土柱在达到破坏荷载后，变形不可恢复。
3.混凝土柱受压变形规律的影响因素混凝土柱受压变形规律的影响因素主要有以下几个方面：一是混凝土的强度和韧性；二是柱截面形状和尺寸；三是荷载施加方式和大小；四是柱端约束条件。
三、混凝土柱受压变形规律的试验研究1.试验方法混凝土柱受压变形规律的试验研究主要采用静载试验和动态试验两种方法。
静载试验是将静态荷载施加到混凝土柱上，观测混凝土柱的变形和应力变化；动态试验是采用冲击负荷的方式施加荷载，观测混凝土柱的动态响应。
2.试验结果混凝土柱受压变形规律的试验研究结果表明，混凝土柱的变形具有明显的非线性特征，随着荷载的增加，变形呈现出明显的加速度；混凝土柱的变形具有一定的韧性，能够吸收一定的能量；混凝土柱在达到破坏荷载后，变形不可恢复。
四、混凝土柱受压变形规律的数值模拟研究1.数值模拟方法混凝土柱受压变形规律的数值模拟主要采用有限元分析方法。
有限元分析方法是将混凝土柱离散成有限个单元，利用数值计算方法解决连续体力学问题。
2.数值模拟结果混凝土柱受压变形规律的数值模拟结果表明，数值模拟方法能够较好地模拟混凝土柱的受压变形规律。
玻璃中压层析柱安全操作及保养规程一、前言玻璃中压层析是一种常用的分离及纯化技术，其操作过程需要注意安全操作及保养，才能保证实验的准确性和实验人员的身体健康。
本文将介绍玻璃中压层析柱的安全操作以及保养规程。
二、玻璃中压层析柱的安全操作1. 装填操作1.1 预先备好所需物料，检查所有设备是否完好，确保能够正常工作。
1.2 在进行装填操作前，需将玻璃中压层析柱内部洗净并干燥。
1.3 添加样品时，一定要注意溶液的浓度及体积，最好在安全柜下进行操作。
1.4 在添加样品时，避免喷溅操作，以免对身体造成伤害。
2. 装卸柱操作2.1 在装卸柱操作时，应按照操作步骤进行，不得随意更换设备。
如有必要更换或调整设备，需在实验室管理人员的指导下进行。
2.2 装卸柱操作时，要轻拿轻放，避免碰撞损坏。
2.3 装卸柱时，要戴好手套和护目镜，以免对身体造成伤害。
3. 洗涤操作3.1 在进行洗涤操作时，应按照操作步骤进行。
3.2 在进行洗涤操作时，要戴好手套和护目镜，以免对身体造成伤害。
3.3 在进行洗涤操作之前，需将设备内部进行彻底清洗，并在操作前确认洗涤液的浓度，避免在洗涤过程中误操作。
4. 流体操作4.1 在进行流体操作时，应按照操作步骤进行，不得进行随意更改或使用。
4.2 在进行流体操作时，要戴好手套和护目镜，防止药品溅到身体造成伤害。
4.3 在进行离心操作时，需确保设备的离心机转速、时间及离心管的容量等符合操作要求。
5. 清洗操作5.1 在进行清洗操作时，应按照操作步骤进行，不得随意更改。
5.2 在进行清洗操作时，要戴好手套和护目镜，以免对身体造成伤害。
5.3 在进行清洗操作时，需先将设备内的药品清除，再进行清洗。
清洗时需注意浓度，以避免浓度太高影响清洗效果。
三、玻璃中压层析柱的保养规程1. 日常检查1.1 每次使用前，需检查设备是否完好，是否有破损、裂缝等情况，以确保设备的正常使用。
1.2 需要保持设备的清洁和干燥，可以用设备专用的维护液定期清洗，不要用反应试剂清洗，避免损坏设备。
钢筋混凝土柱的支撑与居中设备的使用钢筋混凝土柱是建筑结构中承受纵向荷载的主要承重构件，对其支撑和定位是保证结构安全的重要保障。
而在混凝土柱的施工过程中，为了保证其准确定位和稳定性，需要采用适当的支撑和居中设备。
本文将从支撑和居中设备两个方面进行阐述，介绍钢筋混凝土柱的支撑和居中设备的使用及其作用与意义。
一、支撑的作用与类型钢筋混凝土柱施工过程中，一般采用钢模板或木模板来围住柱子，以排除混凝土漏浆现象。
此时，为保证混凝土柱的准确定位和稳定性，需要对柱子进行支撑。
支撑的基本作用是支撑模板和混凝土柱的自重，同时承受施工过程中的动荷载。
常用的支撑形式包括木杆支撑和钢管支撑两种。
1. 木杆支撑木杆支撑又称作钢支模支撑，是常用的支撑形式之一。
木杆支撑主要由斜杆、水平杆和立柱等部分组成，可以通过调整其长度和角度来完成柱子的支撑和定位。
木杆支撑结构简单、稳定性好、价格低廉，是施工中最常用的支撑方式之一。
2. 钢管支撑钢管支撑又称作“脚手架支撑”，是一种高强度的支撑形式。
由于其搭建简单、稳定性高，所以现在被广泛应用于建筑施工中。
钢管支撑的搭建需要借助脚手架或桁架进行支撑。
与木杆支撑相比，钢管支撑具有承载能力强、稳定性好、施工速度快等优点。
二、居中设备的使用钢筋混凝土柱的定位不仅受到支撑的影响，还需要通过居中设备的使用来保证其准确定位。
居中设备是一种通过调整距离和高度来进行居中处理的工具，一般分为水平调节和垂直调节两种类型。
1. 水平调节钢筋混凝土柱的水平调节通常通过调整底板高度和调整支撑杆长度等方式进行。
其中，底板高度调节主要通过调整自身高度或增加调节垫等方式进行。
支撑杆长度调节则是通过增加或减少支撑杆的长度来调节柱子的位置。
2. 垂直调节垂直调节通常是通过使用特殊的居中设备进行实现。
比如，可以通过悬挂调节系统等方式来进行垂直调节。
居中设备的使用可以使得混凝土柱的位置更为准确，随着建筑结构的不断完善和提高，其使用也越发的重要和必要。
玻璃层析中压柱玻璃层析中压柱是色谱分析和纯化领域中的一种重要工具，主要用于生物化学、药物化学、有机合成等领域对样品进行分离和纯化。
这类柱子由高质量的玻璃材质制成，能够承受一定的中等压力（通常比低压柱能承受更高的压力），适合在高压下操作，从而实现更快的流速和更高效的分离。
玻璃层析中压柱的特点包括：1. 耐压性强：相比于普通层析柱，中压柱设计能够承受较高的工作压力，这样可以在保证柱床稳定性的前提下使用较高流速，缩短实验时间。
2. 精确控制：可以通过精密调节进样速度和流动相的压力来精确控制分离过程。
3. 透明可视：由于采用玻璃材质，可以观察到柱内填充物的状态以及样品在柱中的移动情况，便于实时监控分离进程。
4. 适用范围广：适用于多种类型的色谱填料，如硅胶、凝胶（如琼脂糖、葡聚糖）、离子交换树脂、亲和介质等，并广泛应用于蛋白质、核酸、多肽、小分子化合物等各种生物大分子和有机小分子的分离纯化。
在实际操作中，为了达到最佳分离效果，需根据目标物性质选择合适的固定相和流动相，合理设计洗脱程序，并确保正确装填柱子，以形成均匀且紧密的柱床结构。
此外，还应按照要求进行预处理和清洗，确保无杂质干扰实验结果。
中压玻璃层析柱是一种常见的色谱分离装置，广泛应用于化学、生物化学、药学等领域。
它利用不同物质在层析填料上的分配系数差异实现分离。
填料通常是固体微粒，具有大比表面积和特定的亲水性或亲油性。
样品在填料上与流动相进行分配，在不同的分配系数作用下，样品成分会以不同的速率通过填料层而发生分离。
中压玻璃层析柱的结构包括玻璃柱筒和内径大小不同的玻璃柱。
柱筒通常由硬质玻璃制成，具有良好的透明度、耐压性和化学稳定性。
柱筒内部填充有层析填料，如硅胶、氧化铝、活性炭等。
中压玻璃层析柱的优点包括高分离效能、低成本、易于操作等。
中压玻璃层析柱的使用方法包括以下步骤：1.安装柱子：将玻璃层析柱固定在支架上，确保柱子垂直。
2.装填层析填料：将适量的层析填料加入柱子中，用少量流动相浸润。
关于中压柱的知识点★中压制备柱色谱经典柱色谱与低压柱色谱的分辨率一般还是有限的，因为它们所用的分离材料的颗粒一般比较大。
如果要进一步提高制备色谱的分辨率，通常只有进一步减小材料的颗粒或者增加色谱柱的长度，这样无疑会增大色谱柱的阻力及降低流动相的流速。
另外，不同的冲洗溶剂所造成的流动相流速也有很大差别，如采用正相，以环己烷作为流动相时，流动相的流速较快；而采用反相，以水作为流动相时，则流速较慢，使用一些黏度较大的有机溶剂，如正丁醇也有同样的结果。
为进一步提高制备色谱的分辨率又能保证有较快的分离速度，使用中压制备色谱是行之有效的办法。
中压柱色谱与经典柱色谱或低压柱色谱相比需要更多的组件，最简单的配置是除色谱柱外，再加上一台能够提供几十公斤压力的恒流泵。
中压柱色谱的工作原理是由恒流泵输送移动相，通过进样阀上样，在色谱柱对样品进行分离后，利用检测器检测，记录仪记录，并同时收集各个馏分。
在实际工作中，往往并不一定需要购置成套的装置，而是根据自己的研究需要和经费状况，分别购置适宜的组件自己组装。
中压制备柱色谱一般由下面最主要的几个部件组成。
恒流泵中压制备柱色谱除色谱柱外，唯一不能省掉的就是恒流泵。
恒流泵的类型很多，从高效液相常规使用的泵到蠕动泵，都是恒流泵，也即都能以恒定的流量输出液体。
所不同的是高效液相使用的泵通常要求最高压力能达到40MPa，最大流量达到10mL/min,流量的精确度和准确度也要求很高。
低压柱色谱恒流泵压力为0.3-0.5MPa，中压柱色谱对泵的要求则介于二者之间。
一个恒流泵能达到的压力越高，输出流量的精确度和准确度要求也越高，在实验室购买恒流泵时，主要考虑的是其能达到的最大压力最大流量，其次才是精确度和准确度。
目前使用的恒流泵多数是柱塞式往复泵。
色谱柱多数情况下中压制备色谱的色谱柱都是由耐压的强化玻璃制成，并且都是由自己装填柱子，最常用的分离材料颗粒的大小为15-25微米和25-40微米。
关于中压柱的知识点
★中压制备柱色谱
经典柱色谱与低压柱色谱的分辨率一般还是有限的，因为它们所用的分离材料的颗粒一般比较大。
如果要进一步提高制备色谱的分辨率，通常只有进一步减小材料的颗粒或者增加色谱柱的长度，这样无疑会增大色谱柱的阻力及降低流动相的流速。
另外，不同的冲洗溶剂所造成的流动相流速也有很大差别，如采用正相，以环己烷作为流动相时，流动相的流速较快；而采用反相，以水作为流动相时，则流速较慢，使用一些黏度较大的有机溶剂，如正丁醇也有同样的结果。
为进一步提高制备色谱的分辨率又能保证有较快的分离速度，使用中压制备色谱是行之有效的办法。
中压柱色谱与经典柱色谱或低压柱色谱相比需要更多的组件，最简单的配置是除色谱柱外，再加上一台能够提供几十公斤压力的恒流泵。
中压柱色谱的工作原理是由恒流泵输送移动相，通过进样阀上样，在色谱柱对样品进行分离后，利用检测器检测，记录仪记录，并同时收集各个馏分。
在实际工作中，往往并不一定需要购置成套的装置，而是根据自己的研究需要和经费状况，分别购置适宜的组件自己组装。
中压制备柱色谱一般由下面最主要的几个部件组成。
恒流泵中压制备柱色谱除色谱柱外，唯一不能省掉的就是恒流泵。
恒流泵的类型很多，从高效液相常规使用的泵到蠕动泵，都是恒流泵，也即都能以恒定的流量输出液体。
所不同的是高效液相使用的泵通常要求最高压力能达到40MPa，最大流量达到10mL/min,流量的精确度和准确度也要求很高。
低压柱色谱恒流泵压力为0.3-0.5MPa，中压柱色谱对泵的要求则介于二者之间。
一个恒流泵能达到的压力越高，输出流量的精确度和准确度要求也越高，在实验室购买恒流泵时，主要考虑的是其能达到的最大压力最大流量，其次才是精确度和准确度。
目前使用的恒流泵多数是柱塞式往复泵。
色谱柱多数情况下中压制备色谱的色谱柱都是由耐压的强化玻璃制成，并且都是由自己装填柱子，最常用的分离材料颗粒的大小为15-25微米和25-40微米。
在中压柱色谱中，湿法填充技术除使用一般的经典柱色谱的湿法填充外，对于颗粒较小，如小于20微米的分离材料通常采用匀浆法进行装柱。
最简单的干法装柱是按照一般的干柱色谱法装填好色谱柱然后将装好的色谱柱与一氮气瓶相连，打开氮气瓶开关及色谱柱出口，使氮气瓶输出压力在1.5MPa，利用高压气体将填料压紧。
该法装填的柱子密度比湿法至少提高20%，因而更有利于分离难分离物质。
检测器检测器的使用可以使样品的收集变得有的放矢，根据检测器信号的变化可以进行及时的收集，检测器的检测范围，检测器的灵敏度，基线稳定性等参数决定了仪器的性能高低。
自动馏分收集器和进样阀在配置较为完备的中压制备色谱中，一般都有自动馏分收集器和进样阀。
自动离分收集器有两种模式，一种是间隔一定的时间收集，一种是间隔一定的流出滴数而自动调换收集。
中压柱色谱的操作方法与经典柱色谱基本相似，下面以植物红豆杉中抗癌成分紫杉醇的分离为例来说明它的具体操作。
紫杉醇是最早由美国Wani等于1971年首先从短叶红豆杉的茎皮中分离出来的，1979年美国的Horwitz等发现良好的抗癌活性和独特的抑微管解聚和稳定微管的作用机理。
1992年美国药品与食品管理局正式批准作为治疗晚期卵巢癌的药物首次上市，临床还发现对肺癌，头颈部肿瘤，恶性黑色素瘤等具有疗效。
我国的中国红豆杉，东北红豆杉，云南红豆杉，西藏红豆杉等都已证明含有紫杉醇及紫杉烷类物质。
在紫杉醇的分离中，通常认为其中的三尖杉磷碱最难除去，因为它们的结构非常相似。
分离首先从红豆杉树皮中提取浸膏，氯仿萃取后得到深褐色物质，将此深褐色武装进行反相高效液相分析可以看出三尖杉磷鉴于紫杉醇出峰位置非常接近。
紫杉醇浸膏经初分后，干扰物种类大大减少。
紫杉醇能否提纯到98%以上，关键在于两点：一是柱效的高低，二是溶剂选择性的大小。
第二步利用中压柱色谱对初分收集物进行分离。
采用干法上柱，所用硅胶为10-40微米的薄层硅胶，加压为国产恒流泵，筛选出的诗意溶剂系统为氯仿-甲醇（100：6），分离物通过反相高效液相分析，此时三尖杉磷碱已被去除。
再用容积系统为环己烷-乙酸乙酯（1：1）进行第二次中压柱色谱分离，收集物反相高效液相分析纯度达到了98%以上，一种复杂的抗癌物质，经过一次硅胶低压色谱，两次硅胶中压色谱，就将其从浸膏中分离出来了。
★白藜芦醇的分离实例
将一定量硅胶装入搪瓷盘置于烘箱中,于1050C活化2h后，取出放至室温即可装柱。
柱子采用干法填充，填满整个柱体，不留死体积，密封后用柱塞式计量溶剂泵按石油醚-乙酸乙酯5：1比例泵入溶剂，至溶剂流出为止。
将虎杖的提取物400g用少量乙酸乙酯溶解，泵人中压柱柱头，然后泵入石油醚(60～900C)1000mL。
以一定比例的石油醚-乙酸乙酯为洗脱液，60mL/min的流速进行梯度洗脱，柱的使用压力为2～3 MPa：定量分批连续接收洗脱液，TLC检识，展开剂为二氯甲烷-乙酸乙酯4：1，UV照射下白藜芦醇蓝色荧光显色，至洗脱完全，相同流分合并，减压回收溶剂，产物浓缩至干。
有效成分经TLC检识全部流出后，用纯乙酸乙酯5000mL再生，乙酸乙酯-石油醚1：5平衡后，再次上样，反复使用。
洗脱曲线如图1。
根据薄层色谱的跟踪分析，可确定，谱峰3对应的洗脱液(收集区间为15～32瓶，每瓶500mL)含有白藜芦醇，
谱峰1(收集区间为1～9瓶)为大黄素类物质，谱峰2为未知物。
考虑到峰3和峰2的交叉，合并瓶号18～28的洗脱液，减压浓缩,乙醇重结晶,得白色晶体，mp258～2600C；紫外光下呈蓝色荧光IR(KBr，cm-1)3280，1600，1580，1409，1151；以上数据与文献值一致,为反-3,4,5-三羟基二苯乙烯，即白藜芦醇。
经HPLC测定产物纯度为99.28％。
★反相硅胶柱是怎么装柱？是用什么溶剂装的？有什么注意事项吗？
反相硅胶柱是怎么装柱？是用什么溶剂装的？有什么注意事项吗？
答：通常是用甲醇装柱，沉降好后用起步溶剂（一定比例的甲醇-水）置换一下即可。
注意一定不要超声，这样会破坏ODS。
由于其颗粒细，流速会慢一些，通常可用中压柱加快流速。
反相柱湿法上样的时候，样品是用起始洗脱剂溶解好，还是用纯甲醇或水溶解好呢？
答：能溶最好是用起始洗脱剂溶解，不行的话尽量用接近起始洗脱剂比例的系统溶解，此外还可以试试超声溶解，上样前记得过滤一下。
超声是欠考虑的起始洗脱剂就OK 。
★各位老师，我这几天实验郁闷，苦无良策，请教一个问题。
老板（导师）最近买了一台瑞士BUCHI的中压柱系统，填料是C18，我手上有黄酮（苷元）单体纯度是98％左右，但有个明显的杂质，意欲在这上面分开，我用HPLC，岛津C18柱，150mm，甲醇－水＝70：30的条件，目标黄酮在2.5min，杂质在5.0min。
但在中压柱上试了丙酮－水=70:30,100mL/MIN,根本分不开（用丙酮主要考虑丙酮的溶解度大一点，这样一次上样量能大点）
我现在已经用了半箱丙酮了，不见效果，不知哪位高人指点一二，告诉我用中压分离黄酮的方法，不胜感激！
你应用丙酮代替液相摸出的甲醇行吗？两者的洗脱能力一致吗？有没有用丙酮－水=70:30走hplc，看分离效果如何？2.5分钟就出峰太快了，你把这个条件直接应用到中压上肯定不行。
我这里有些化合物的分离hplc保留时间10min，然后把对应的洗脱溶剂有机相比例降低一半应用到中压，必要时可以类似梯度。
你buchi用的C18柱填料粒径多大？40～60um的？这个分辨率很低，你可以试试20～40um的，这个柱效能高很多，buchi 的设备也能耐受的了这么高的压力。
另外，你应该如2楼说的，先用丙酮在HPLC上摸一下，看能否分开，然后再线性放大到MPLC上。
★中压柱压力约为50ba,c18填料应该买什么样的(400目?)
第一个看你的需要了。
300-400也可以。
只要洗脱液能下来。
在压力允许的条件下，要尽量选用较细的填料，这样才能有较高的柱效。
本人试过50µm的ODS C-18填料，2.2cm×50cm，基本常压就可以分离了，改装一下利用液相的崩和检测器（由于分析型液相检测器的管路较细，会导致压力升高），流速到2.5ml/min，压力也不会超过10bar。
楼主的这个问题比较具体，可以问一下专业的公司，很多卖仪器的公司都有专门的技术支持部门，他们应该可以给出具体的答案。
xiexie楼上的了.决定买40-60µm,虽然别人说40-60的可以常压洗脱.为了保险起见。
