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虎杖中白藜芦醇苷提取分离工艺研究虎杖中白藜芦醇苷是一种具有抗氧化、抗炎症、抗肿瘤等多种生物活性的天然产物。
本文通过对虎杖中白藜芦醇苷的提取分离工艺进行研究，旨在寻找一种高效、经济、环保的提取方法，为进一步开发利用虎杖资源提供科学依据。
我们需要选择适宜的提取溶剂。
根据文献报道，乙醇是一种常用的提取溶剂，具有良好的溶解性和萃取效果。
因此，我们选择乙醇作为虎杖中白藜芦醇苷的提取溶剂。
我们需要确定合适的提取方法。
常用的提取方法有浸提法、超声波提取法、微波提取法等。
经过比较，我们选择了浸提法进行实验。
具体操作步骤如下：取一定量的虎杖粉末，加入适量的乙醇溶液中，与溶剂充分接触，反复搅拌一段时间，使白藜芦醇苷充分溶解于乙醇中。
然后，用滤纸过滤得到提取液。
提取液中的乙醇可以通过旋转蒸发或冷冻浓缩等方法进行回收利用，以提高经济效益。
同时，为了进一步提高提取效果，可尝试不同浓度的乙醇溶剂、不同提取时间和不同提取温度等条件进行优化。
接下来，我们需要对提取液进行分离纯化。
常用的分离纯化方法有固相萃取、薄层色谱、高效液相色谱等。
根据白藜芦醇苷的理化性质，我们选择了高效液相色谱进行分离纯化。
通过调整流动相组成、流速和检测波长等参数，可以实现白藜芦醇苷的有效分离。
我们对提取得到的白藜芦醇苷进行结构鉴定和质量分析。
常用的鉴定方法有紫外-可见光谱、红外光谱、质谱等。
这些方法可以帮助我们确定白藜芦醇苷的化学结构和相对分子质量，从而确保提取分离的物质具有一定的纯度和活性。
虎杖中白藜芦醇苷的提取分离工艺研究是一项重要的科研课题。
通过选择合适的提取溶剂、优化提取条件，以及采用适当的分离纯化方法，可以获得高纯度、高活性的白藜芦醇苷制剂。
这对于虎杖资源的开发利用具有重要的意义，也为相关药物的研发提供了有力支持。
希望本研究能为虎杖资源的深度开发与利用提供一定的参考和指导。
白藜芦醇质量标准
一、分子式与分子量
白藜芦醇（Resveratrol）的分子式为C14H12O3，分子量为
228.24。
二、质量标准（HPLC）
本质量标准采用高效液相色谱法（HPLC）作为主要分析方法，以确保白藜芦醇的纯度与准确性。
三、最低含量要求
按照此质量标准，白藜芦醇的纯度应不低于98.0%。
所有批次产品的含量均应在此标准之上。
四、有害物质残留限量
重金属（以Pb计）：不得过百万分之十。
砷盐：不得过百万分之二。
农药残留：应符合国家相关农药残留限量标准。
微生物限度：应符合国家药品微生物限度标准。
五、原料选用要求
原料应为符合质量标准的天然植物提取物，严禁使用任何形式的合成或半合成物质作为原料。
六、生产过程控制
生产过程应严格按照GMP标准进行，确保产品的纯净度与稳定性。
所有工艺环节应有明确的操作规范和质量监控措施。
七、质量检测要求
每一批次的产品都应进行质量检测，包括外观、色泽、气味、纯度等方面的检验。
所有检测结果应符合本质量标准的要求。
八、定性与定量检测
定性检测：采用适当的化学或物理方法，如紫外-可见光谱、红外光谱等，对白藜芦醇进行定性鉴别。
定量检测：采用HPLC等方法，对白藜芦醇的含量进行精确测定，确保产品含量符合最低含量要求。
本质量标准旨在为白藜芦醇的生产、质量控制和市场监管提供明确的技术依据，确保产品质量和患者用药安全。
所有相关企业和个人均应严格遵守本质量标准，以确保产品的质量和安全。
虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取及含量测定一、本文概述本文旨在探讨虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取方法及其含量测定技术。
虎杖作为一种具有广泛药用价值的天然植物，其中含有的白藜芦醇和白藜芦醇苷是其主要活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，研究虎杖中这两种成分的有效提取和准确测定方法对于深入理解虎杖的药理作用以及优化其临床应用具有重要意义。
本文将综述当前虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取技术，包括溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取等，并评价其优缺点。
本文还将介绍含量测定的常用方法，如高效液相色谱法、紫外可见分光光度法等，并探讨其准确性和可靠性。
通过本文的综述，旨在为虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的深入研究和应用提供有益的参考。
二、虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取方法虎杖，作为一种具有丰富生物活性的中草药，被广泛用于传统医学中。
其内含的白藜芦醇和白藜芦醇苷具有显著的抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生物活性，因此，对这两种成分的提取和含量测定具有重要的意义。
以下将详细介绍虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取方法。
我们需要新鲜的虎杖根茎，确保其来源清洁、无污染。
随后，将虎杖根茎进行清洗、干燥和粉碎，以便后续的提取操作。
由于白藜芦醇和白藜芦醇苷均具有一定的极性，因此，我们常选用极性溶剂如甲醇、乙醇等进行提取。
这些溶剂能够有效地溶解并提取出虎杖中的目标成分。
常用的提取方法包括浸泡提取、回流提取和超声波辅助提取等。
考虑到效率和提取效果，我们通常采用回流提取法。
具体操作如下：将粉碎后的虎杖粉末与提取溶剂混合，置于回流装置中，加热回流一定时间，使溶剂充分与原料接触，从而充分提取出白藜芦醇和白藜芦醇苷。
提取完成后，需要对提取液进行处理，以去除其中的杂质，提高目标成分的纯度。
常用的处理方法包括过滤、浓缩和干燥等。
通过以上步骤，我们可以有效地从虎杖中提取出白藜芦醇和白藜芦醇苷。
这为后续的含量测定和进一步研究提供了基础。
虎杖中白藜芦醇苷提取分离工艺研究虎杖中白藜芦醇苷是一种具有多种生物活性的天然化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种药理作用。
为了充分利用虎杖中的白藜芦醇苷并满足市场需求，研究人员进行了白藜芦醇苷的提取和分离工艺研究。
白藜芦醇苷是一种存在于植物中的多元醇类化合物，具有较低的溶解度，因而在提取和分离过程中需要采用适当的方法。
目前常用的提取方法有超声波辅助提取、浸泡提取、水蒸气蒸馏提取等。
其中，超声波辅助提取是一种较为高效的提取方法，它利用超声波的机械作用和热效应来破坏细胞壁，促进白藜芦醇苷的释放。
在超声波辅助提取过程中，首先需要将虎杖样品粉碎成适当的颗粒大小，以增加提取效率。
然后将虎杖样品与适量的溶剂（如乙醇、甲醇等）混合，放入超声波提取仪中进行提取。
超声波的作用下，虎杖中的白藜芦醇苷会逐渐释放到溶剂中。
提取时间和温度是影响提取效果的重要因素，一般来说，提取时间越长、温度越高，提取效果越好。
但是过长的提取时间和过高的温度可能会导致白藜芦醇苷的降解，因此需要找到适当的提取条件。
提取完成后，需要对提取液进行分离和纯化。
常用的分离方法有溶剂萃取、硅胶柱层析、凝胶渗透层析等。
其中，硅胶柱层析是一种常用的分离方法，它可以根据样品中化合物的亲疏水性来进行分离。
在硅胶柱层析过程中，首先需要将硅胶填料充分膨胀，然后将提取液加入硅胶柱中。
根据白藜芦醇苷和其他成分在硅胶上的亲疏水性差异，通过溶剂梯度洗脱的方法，将白藜芦醇苷从其他杂质中分离出来。
最后，通过溶剂的挥发或其他方法将白藜芦醇苷纯化得到。
还可以利用高效液相色谱（HPLC）等技术进一步提高白藜芦醇苷的纯度。
HPLC是一种基于溶液动力学的色谱技术，可以对复杂样品进行分离和检测。
在HPLC分离过程中，需要选择合适的色谱柱和流动相，通过控制流速和梯度洗脱的方法，将白藜芦醇苷从其他成分中分离出来。
最后，通过检测器对分离得到的白藜芦醇苷进行检测和定量。
虎杖中白藜芦醇苷的提取和分离工艺研究是为了充分利用这一天然药物资源并满足市场需求。
虎杖中白藜芦醇提取分离研究【摘要】目的考察虎杖中白藜芦醇苷的最佳提取分离工艺。
方法研究酶法提取虎杖中的白藜芦醇的工艺条件，从酶的种类、温度、pH值、酶解时间等方面分析。
结果最佳提取工艺为：采用植物水解酶，提取温度40℃，酶解pH值3.0，酶解时间7h，为最佳提取条件。
结论酶处理后，可显著提高虎杖中白藜芦醇的得率，且该提取工艺稳定性好且简便易行。
【关键词】虎杖；白藜芦醇；提取分离；研究虎杖为蓼科植物虎杖的根茎，主要含有[1]蒽醌类、二苯乙烯类、水溶性多糖和鞣质等成份。
白藜芦醇和白黎芦醇苷是虎杖的主要功效成分。
白藜芦醇作为一类亲脂性多酚物质，具有抗血小板凝聚，保护肝脏，抗肿瘤活性等药理作用，特别是对心脑血管系统具有较强的药理活性。
本实验采用酶法实验，对虎杖中的白藜芦醇进行提取分离，本研究旨在为虎杖开发利用提供科学依据。
1仪器与试药1.1仪器Agilent1100高效液相色谱仪；AG285分析天平；KS-600d超声清洗器；Delta320pH计；HHW420型三用恒温水箱。
1.2试药虎杖粉末，批号：20060829；纤维素酶，批号：F20071116；植物水解酶、植物提取酶；白藜芦醇对照品（中国药品生物制品检定所，批号：1535-200001，纯度：99.5%；甲醇、乙醇、磷酸、磷酸二氢钾（分析纯）；乙腈（色谱纯）；蒸馏水。
2方法与结果2.1白藜芦醇的测定方法色谱条件色谱柱ODSC18；流动相乙腈∶水（0.02%磷酸）30∶70；流速1ml/min；柱温30℃；检测波长303nm；20μl进样环。
理论塔板数不低于3000；分离度大于1.5。
精密称取干燥白藜芦醇对照品330μg，置10ml容量瓶中加甲醇制成浓度33μg/ml的溶液作为对照品溶液[2]。
2.2单因素考察①试样的制取：精密称取虎杖粉末若干份，每份约0.1g，再每份加入pH=5.0缓冲盐溶液5ml。
摇匀，在45℃酶解18h后，加入20ml95%乙醇超声提取30min，取出放冷，定容至25ml，摇匀，过滤，取续滤液。
虎杖提取物一、基本资料【植物名称】虎杖，又名斑根紫金龙、活血龙、阴阳莲。
【英文名】Giant Knolweed P.E.【来源】蓼科植物虎杖的根茎【资源分布】我国大部分地区均产，主产于江苏，江西、山东、四川等地。
【有效成分】根茎含游离蒽醌甙，主要为大黄素、大黄素-8-葡萄糖甙(polygonin)、大黄素甲醚-8-葡萄糖甙(rheochrysin)、大黄酚。
根含有利尿成分黄酮醇甙。
此外尚含白藜芦醇葡萄糖甙、白藜芦醇。
【功效】抗肿瘤、抗心血管疾病、降血糖、护肝、增强低氧耐受力等。
【质量标准】一些企业以白藜芦醇的含量为标准。
二、提取方法提取虎杖药材，多采用95%乙醇回流提取，其次是70%丙酮提取。
三、研究及应用状况近年来，对于虎杖及有效成分的药理研究主要在以下几个方面：1．对血液系统的作用以虎杖为原料，提取其有效成分总蒽醌精制而成的虎杖片，经实验证明可明显降低雄性SD大鼠血清TG（甘油三酯）、TC（总胆固醇）、LDL-C含量，提高HDL-G/TC和HDL-C/DLL-C比值等功效。
2．对心血管作用的研究对虎杖苷（PD）深入的研究发现PD对细胞内钙pH有双向调节作用，正常情况下PD增加细胞内游离钙及升高pH以提高血管张力，休克时PD降低细胞内钙浓度及降低细胞内pH以降低血管张力，使血管扩张；PD可通过细胞外钙内流来增加细胞内游离钙浓度；并促进细胞外销高于内流而导致细胞去极化；认为PD能直接降低白细胞对血管内皮的粘附性而改善微循环。
3．抗病毒、抗炎、抗菌作用对虎杖蒽醌化合物晶Ⅰ、晶Ⅳ抗CVB3病毒的药效，虎杖大黄素抗HSV-2、CVB3病毒的作用，虎杖-黄芪联用抗Ⅰ型疮疹病毒药效，虎杖中蒽醌化合物部分分离晶体抗Ⅰ型人疱疹病毒的实验研究.结果提示晶Ⅰ、晶Ⅳ的抗CVB3方面有一定优势；大黄素对HSV-2333株的治疗指数目（TI）为ACV的4.0、2.4、3.9倍，对CVB3的TI为病毒唑的4.7、1.0、2.9倍。
第41卷第2期2007年3月生 物 质 化 学 工 程B iomass Che m ical Eng i n eeringV o.l 41N o .2M a r .2007用不同方法提取虎杖中白藜芦醇的比较收稿日期:2006-08-20基金项目:湖南省发改委基金项目([2004]951)作者简介:谢磊(1982-),男,湖南郴州人,硕士,研究方向:植物功能成分纯化与应用 *通讯作者:李志光,男,教授,博士生导师;E -m ai:l a -08888@163.co m 。
谢磊,李志光*,周军,黄琼(湖南农业大学理学院,湖南长沙410128)摘 要:以虎杖为原料用乙醇浸提法、碱提酸沉法、超声波萃取法、CO 2超临界萃取法4种方法提取白藜芦醇,采用高效液相色谱法检验虎杖中白藜芦醇含量。
以白藜芦醇收率为考察标准,进行提取方法的比较。
综合比较分析得出超声波萃取法是以上4种方法中最好的。
关键词:虎杖;白藜芦醇;提取方法;高效液相色谱中图分类号:TQ91 文献标识码:A 文章编号:1673-5854(2007)02-0028-03Co mpari son of D ifferentM et hods f or ResveratrolExtracti on fro m Polygonu m c us p i dat u mX I E Le,i LI Zh-i guang ,ZHOU Jun ,HUANG Q i o ng(Co llege o f Sc ience Instit u te ,H unan A g ricu lt ura lU n i versity ,Chang sha 410128,Ch i na)Abstrac t :Four m ethods such as ethano l extrac tion ,alka li ne ex trac ti on ,u ltrasonic ex tracti on and SFE -CO 2we re used f o r ex trac -ti on of resveratro l from Polygonu m cusp idatu m .The content o f resve ratro l i n Po l ygonu m cusp i dat um was deter m i ned by HPLC .T he extraction m et hods we re co m pared based on the y i e l d of resve ratro.l T he results show ed that the u ltrason ic ex trac ti on w as the bestm ethod f o r ex tracti on of resve ratro.lK ey word s :P olygonum cusp i dat um ;resveratro;l ex tracti on m e t hod ;H PLC虎杖(P olygonum cus p i d atum S ieb .et Zucc)为蓼科蓼属小灌木,为传统中药,被历版《中国药典》收载[1]。
虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取及含量测定刘仁旺，滕增辉，张邦乐，宦梦蕾，杨茜，周四元【摘要】目的：成立同时测定白藜芦醇和白藜芦醇苷含量的高效液相色谱法，优化虎杖中有效成份白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取工艺. 方式：采纳梯度法成立同时测定白藜芦醇和白藜芦醇苷的高效液相色谱方式，以白藜芦醇和白藜芦醇苷总量为考察指标，设计以乙醇浓度、溶剂倍数及醇提温度等为阻碍因素的4因素3水平的正交实验，确信虎杖中上述有效成份的最正确提取工艺. 结果：在选定的色谱条件下，虎杖提取物中白藜芦醇和白藜芦醇苷能够达到基线分离. 检测白藜芦醇及其苷的线性回归方程别离为Y=0.0006X-0.183 （r=0.9996），Y=0.0011X-0.478（r=0.9993）；线性范围别离为0.48～38.4 mg/L和0.47～38.2 mg/L. 日内、日间周密度都小于5%，回收率在90%～105%之间，样品分析时刻小于7 min. 虎杖中有效成份白藜芦醇和白藜芦醇苷的最正确提取工艺为乙醇浓度80％，溶剂倍数15，醇提温度70℃，提取时刻2 h. 结论：成立了准确靠得住、分析速度快可同时检测虎杖提取物中白藜芦醇和白藜芦醇苷的分析方式，优化了质量可控的提取工艺.【关键词】虎杖；白藜芦醇；白藜芦醇苷；高效液相色谱0引言虎杖(polygonum cuspidtum sieb)为蓼科蓼属连年生草本植物虎杖的干燥根茎，要紧含有蒽醌类、二苯乙烯类、水溶性多糖和鞣质等成份［1］. 白藜芦醇(3,4′,5三羟基二苯乙烯)和白黎芦醇苷是虎杖的要紧功效成份，具有爱惜心脏、抗血栓、降血脂［2］等药理作用. 白藜芦醇及白藜芦醇苷的药理作用相近，但其极性却相差较大. 本研究探讨一种兼顾白藜芦醇及白藜芦醇苷的提取工艺，并成立同时测定白藜芦醇和白藜芦醇苷含量的高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC），旨在为虎杖的药理作用研究和科学合理利用提供实验依据.1材料和方式1.1材料白藜芦醇苷和白藜芦醇的对照品均由中国药品生物制品检定所提供；虎杖的干药材购自西安市胡家庙药材市场. 2695型高效液相色谱仪，2996型二极管阵列检测器(美国Waters公司)；调温式电热套(北京科伟永兴仪器)；色谱纯乙腈，甲醇(美国TEDIA公司)，其他试剂均为国产分析纯.1.2.1工作曲线的成立别离周密称取白藜芦醇苷及白藜芦醇对照品10 mg置100 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成100 mg/L的白藜芦醇苷和白藜芦醇对照品混合储蓄液，备用. 别离周密吸取两对照品储蓄溶液0.05，0.2，1，2, 4 mL 配制成浓度为0.5，2，10，20, 40 mg/L的混合对照品的标准溶液，依次取20 μL进样. 色谱条件为：色谱分析柱：C18(250 mm×4.6 mm，5 μm，美国Phenomenix 公司)；流动相：乙腈和水，梯度洗脱如表1所示. 检测波长：315 nm；流速：1 mL/min；柱温为30℃. 按上述色谱条件测定峰面积积分值，以峰面积积分值为纵坐标，对照品浓度值为横坐标绘制工作曲线，应用Excel软件采纳最小二乘法计算回归方程.表1HPLC流动相梯度表时刻(min)〖〗乙腈(％)〖〗水(％)〖〗流速(mL/min)〖〗梯度类型0〖〗28〖〗72〖〗1.0〖〗67〖〗72〖〗28〖〗1.0〖〗69〖〗72〖〗28〖〗1.0〖〗620〖〗28〖〗72〖〗1.0〖〗11.2.2周密度和准确度测定别离周密吸取白藜芦醇及白藜芦醇苷储蓄液0.1，0.5，3 mL，配成浓度为1，5，30 mg/L混合对照品的标准溶液. 每一个浓度6个样本，持续测定3 d，与标准曲线的成立同时进行. 代入当日的回归方程计算标准溶液的浓度，将结果进行方差分析，即取得本方式的周密度. 将1，5，30 mg/L三个浓度标准溶液的白藜芦醇和白藜芦醇苷的测定浓度值与标准溶液的标示浓度相较，即得方式回收率.1.2.3虎杖有效成份提取工艺的优化在本生产工艺研究中，依照药物有效成份、药理作用及理化性质特点，选择醇提法进行正交实验，以提取时刻（A 1,2,3 h），乙醇浓度（B 70%,80%,90%），醇提温度（C 50,60,70 ℃）和溶剂倍数(D 10,15,20)作为考察因素，选择3个水平，综合评判提取工艺, 选用L9(34)正交表，安排正交实验.取虎杖10 g，按L9(34)正交表设计的顺序，各加入设定的乙醇量，加热煎煮规按时刻和次数，滤过，归并滤液，将滤液用甲醇稀释10倍后取样20 μL，用HPLC法测定白藜芦醇及白藜芦醇苷的峰面积，带入回归方程中，计算出白藜芦醇和白藜芦醇苷的总量.2结果2.1HPLC检测方式的特异性在本实验选定的洗脱及检测条件下，白藜芦醇和白藜芦醇苷的保留时刻别离为6.8 min和4.7 min. 白藜芦醇及白藜芦醇苷峰和杂质峰能实现基线分离，样品峰的测定不受杂质峰的干扰（图1）..478（r=0.9993）. 结果说明，白藜芦醇及其苷别离在0.48～38.4 mg/L和0.47～38.2 mg/L范围内呈良好的线性关系. 2.3周密度和准确度测定1，5，30 mg/L浓度的白藜芦醇苷的日内周密度别离为4.0%，2.6%和2.0%；日间周密度别离为4.2%，4.3%和2.6%；方式回收率别离为（101±3.4）%，（94±2.3）%和（95±1.3）%.白藜芦醇的日内周密度别离为5.0%,3.0%和2.0%；日间周密度别离为4.8%，3.9%和1.1%；方式回收率别离为（96±5.1）%，（95±2.6）%和（95±1.6）%. 结果显示本方式准确、重复性好.2.4虎杖有效成份提取工艺的优化将测得值进行方差分析（表2），因素B不同具有统计学意义（P<0.01 ). 由表3中进行直观分析可知，A 因素中各水平实验结果的和比较为：K2>K1>K3，平均含量以第2水平为高；B 因素中各水平实验结果的和比较为：K1>K2>K3，平均含量以第1水平为高；C 因素中各水平实验结果的和比较为：K3>K1>K2，平均含量以第3水平为高；D 因素中各水平实验结果的和比较为：K2>K1>K3，平均含量以第2水平为高. 选择最正确的提取工艺为提取时刻2 h，乙醇浓度为70%，醇提温度为70℃3讨论最近几年来有较多关于虎杖有效成份白藜芦醇和白藜芦醇苷提取及含量研究的报导，多采纳单因素、正交实验及大孔吸附树脂吸附法研究白藜芦醇的提取条件［3-4］；正交实验法及乙醇回流法优选白藜芦醇提取工艺［5-7］；以白藜芦醇苷为指标，研究虎杖的提取条件等［8］，这些方式均以白藜芦醇或白藜芦醇苷单个成份为指标. 由于虎杖中的活性成份白藜芦醇和白藜芦醇苷都具有爱惜心脏、抗血栓、降血脂等药理作用，因此咱们在本实验中测定样品中的白藜芦醇和白藜芦醇苷的总量并以此作为评判指标是合理可行的. 咱们的实验结果说明，正交实验及方差分析结果虎杖醇提取工艺最大阻碍因素为乙醇浓度B，第二为溶剂倍数D，再次为醇提温度C和提取时刻A. 最正确工艺乙醇浓度为80％，溶剂倍数为15，醇提温度为70℃，提取时刻为2 h.目前对虎杖中白藜芦醇或白藜芦醇苷的测定方式很多［9-10］，可是同时对白藜芦醇及其苷测定的报导较少［11］，要紧存在诸如样品处置方式复杂、分析时刻较长等问题. 本研究成立的同时测定虎杖中白藜芦醇及其苷的方式选用315 nm作为检测波长，使检测方式取得了较高的灵敏度. 采纳乙腈和水作为流动相，白藜芦醇和白藜芦醇苷与其他化合物达到基线分离. 白藜芦醇和白藜芦醇苷别离在6.8 min和4.7 min出峰，快速有效地实现了分离检测.综上所述，本研究成立的虎杖提取液中白藜芦醇和白藜芦醇苷的HPLC检测方式具有灵敏、准确、迅速和工艺稳固、经济等特点，可用于虎杖提取液中白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量测定和有效成份提取的质量操纵.【参考文献】［1］肖凯,宣利江,徐亚明,等. 虎杖的化学成份研究［J］. 中国药学杂志，2003,38(1):12-15.［2］黄永洪,史假设飞. 虎杖的活性成份及其在心血管方面的研究进展［J］.牡丹江医学院学报，2006,27(1):58-60.［3］朱立贤金征宇.虎杖中白藜芦醇提取分离工艺的研究［J］. 安徽农业科学,2005,33(1):77-78.［4］许汉林,付宜和,高鹏,等. 虎杖中白藜芦醇的提取与分离工艺研究［J］. 时珍国医国药,2006,17(8):1424-1425.［5］余淑娴，郑湘娟，余祖兵，等. 正交实验法优选虎杖中自藜芦醇的提取工艺［J］. 时珍国医国药,2006,17(4):594-595.［6］江曙，朱蓉蓉，张芳,等.虎杖中白藜芦醇提取方式及工艺的优化［J］. 南京中医药大学学报, 2006,22(3):197-199.［7］耿艳辉，李梦青，刘桂敏,等. 从虎杖中提取白藜芦醇的工艺研究［J］. 应用化工,2005,34(11):708-710.［8］许汉林，孙芸，邵继征,等. 正交法优化虎杖中白藜芦醇苷提取工艺的研究［J］. 湖北中医学院学报,2006,8(2):29-30.［9］曾建国，候团章，张胜.高效液相色谱法测定虎杖提取物中白藜芦醇的含量［J］.中国中医药科技，2000,7(3):175-177.［10］朱鸿津. HPLC法测定虎杖中白藜芦醇的含量［J］.药学进展,2001,25(1):110.［11］周春山,向海燕,肖建波,等.高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇及其苷的含量［J］.药物分析杂志,2005,25(5):534-536.。
专利名称：虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取与纯化方法专利类型：发明专利
发明人：缪剑华,袁经权,王硕,周小雷,龚小妹,周雅琴
申请号：CN201110452519.X
申请日：20111229
公开号：CN102531851A
公开日：
20120704
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开虎杖中白藜芦醇和白藜芦醇苷的提取与纯化方法，它主要包括以下步骤：1)浸膏的制备：称取虎杖药材粗粉，用8-12倍重量的体积浓度为70-85％的乙醇提取1-2次，每次1-2小时，过滤，合并滤液，浓缩至膏状，浸膏水分散，备用；2)化合物的分离纯化：将浸膏水分散液过大孔树脂，先用蒸馏水洗脱，至洗下的洗脱液澄清无色，弃去水洗部分，再用体积浓度为40-60％的乙醇洗脱，收集洗脱液至颜色淡为止，此部分为白藜芦醇和虎杖苷富集部位，将乙醇洗脱液浓缩至干备用；将大孔树脂富集部位通过半制备型高效液相色谱分离纯化，得到白藜芦醇、白藜芦醇苷。
采用本发明方法可制取中药材对照品白藜芦醇和白藜芦醇苷，而且效率高、成本低。
申请人：广西壮族自治区药用植物园
地址：530023 广西壮族自治区南宁市长堽路189号
国籍：CN
代理机构：广西南宁公平专利事务所有限责任公司
代理人：刘小萍
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虎杖白藜芦醇
Huzhang Baililuchun
Resveratrol from Polygonum Cuspidatum
本品为以蓼科虎杖属植物虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.的干燥根茎或根为原料提取得到的50%白藜芦醇含量的虎杖提取物为原料，用乙醇或甲醇和水一定比例混合溶液溶解，经树脂等纯化，重结晶得到的含量≥98%的反式白藜芦醇。
【性状】本品为白色至类白色的粉末；气特异，味淡。
本品难溶于水，易溶于甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂。
【鉴别】HPLC鉴别照高效液相色谱法（通则Y04）测定
对照品溶液取反式白藜芦醇对照品适量，精密称定，置100mL棕色容量瓶中，加甲醇制成每1mL约含0.1mg的溶液。
供试品溶液取供试品适量，精密称定，置100mL棕色容量瓶中，加甲醇制成每1mL 约含0.1mg的溶液。
色谱系统十八烷基键合硅胶填充柱（4.6⨯250mm，5µm）或同类型柱；以乙腈:水（27:73，v/v）为流动相；检测波长为303nm，柱温为30℃。
理论塔板数按反式白藜芦醇峰计算应不低于7000。
测定吸取对照品溶液、供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。
供试品图谱中应呈现与对照品白藜芦醇色谱峰保留时间相同的色谱峰。
峰S
对照溶液液相图谱
【含量测定】照高效液相色谱法（通则Y04）测定
对照品溶液 同HPLC 鉴别项下。
供试品溶液 同HPLC 鉴别项下。
色谱系统 同HPLC 鉴别项下。
测定 分别精密吸取照品溶液、供试品溶液各10μL 分别注入液相色谱仪，并记录色谱图。
按外标法计算出被测定供试品溶液中反式白藜芦醇组分浓度C ，供试品中待测组分含量以质量分数w 计，数值以%表示，按公式E.1计算。
%100⨯⨯=m
V C w …………………………………（E.1） 式中：w ——供试品中反式白藜芦醇组分的质量分数（%）；
C ——供试品溶液中反式白藜芦醇组分浓度（mg/mL ）；
V ——供试品溶液A 的稀释体积（mL ）；
m ——供试品的称样量（mg ）。
按干燥品计算，本品含反式白藜芦醇（C 14H 12O 3）不少于98.0%。
【检查】
水分 按照水分测定法（通则Y08）测定，不得过0.5%。
灰分 按照灰分测定法（通则Y09）测定，不得过0.5%。
残留溶剂 按照残留溶剂测定法（通则Y10）进行测定，甲醇残留含量不得过500mg/kg ，乙醇残留含量不得过1500mg/kg 。
重金属 按照重金属检查法（通则Y11）测定，重金属不得过10mg/kg 。
有害元素 按照铅、镉、砷、汞、铜测定法（通则Y12）测定，铅不得过0.5mg/kg ；镉不得过1.0mg/kg ；砷不得过1.0mg/kg ；汞不得过0.1mg/kg 。
微生物 按照微生物测定法（通则G09、G14、G10、G12）测定，细菌总数不得过1000cfu/g ；霉菌及酵母菌数不得过100cfu/g ；大肠埃希氏菌不得检出；沙门氏菌不得检出。
【包装】
包装材料应符合GB 9685食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准的要求。
【贮存】
产品应贮存于阴凉、干燥的仓库中。
避免与有毒、有害、易腐、易污染等物品一起堆放。
【保质期】
在符合规定的贮运条件、包装完整、未经开启封口的情况下，保质期为24个月。
【起草单位和起草人声明】
本标准由天津市尖峰天然产物研究开发有限公司、湖南绿蔓生物科技股份有限公司、绵竹市恒诚生物科技有限公司、天津市益倍建生物技术有限公司负责起草。
本标准主要起草人：吴巍、王会文、龚利琼、李赫宇等。
