复方丹参注射液对大鼠急性脊髓损伤的保护作用
- 格式:pdf
- 大小:259.49 KB
- 文档页数:3
丹参注射液论文:丹参注射液丹参酮脊髓再灌注损伤细胞间粘附分【中文摘要】通过研究丹参注射液及丹参酮对大鼠脊髓缺血再灌注损伤脊髓组织细胞间粘附分子-1(ICAM-1)表达以及白细胞介素-1β(IL-1β)、髓过氧化物酶(MPO)活性的影响,探讨丹参改善脊髓缺血再灌注损伤的作用机制。
方法:总共140只清洁级SD大鼠(体重250±10g,雌雄各半),随机分为假手术、脊髓缺血再灌注组、丹参注射液组和丹参酮组。
在造模前30min,丹参注射液组大鼠腹腔注射丹参注射液,丹参酮组大鼠腹腔注射丹参酮。
脊髓缺血再灌注组、丹参注射液组和丹参酮组大鼠采用Zivin改进法制作脊髓缺血再灌注损伤模型。
假手术组采用与脊髓缺血再灌注损伤组相同的手术方法,但不夹闭腹主动脉。
各组大鼠按分组需要在再灌注后(0.5h、1h、4h、8h和12 h)再次麻醉动物,取材检测脊髓组织中的ICAM-1、IL-1β及MPO。
结果:1、假手术组IL-1β、ICAM-1、MPO 12小时内没有明显变化,光镜下未见ICAM-1阳性表达血管。
2、脊髓缺血再灌注组、丹参注射液组与丹参酮组IL-1β均于再灌注后0.5 h开始上升,并在12h内持续升高,其中丹参注射液组与丹参酮组IL-1β活性在再灌注4h、8h、12h较脊髓缺血再灌注组明显降低(p0.05)。
结论:1、Zivin改进法制作脊髓缺血再灌注损伤模型稳定性高,可操作性强,可重复性好。
2、丹参注射液及丹参酮可以降低脊髓缺血再灌注损伤中脊髓组织的IL-1β活性及ICAM-1的表达,减少中性粒细胞的浸润,减轻炎症反应。
其中丹参酮降低脊髓缺血再灌注损伤中脊髓组织的IL-1β活性及ICAM-1表达的作用优于丹参注射液。
3、丹参可改善脊髓缺血再灌注损伤。
【英文摘要】:To investigate the effect of Salvia miltiorrhiza on the expression of intercellular adhesion molecule-1 and the activity of interleukin-1β、myeloperoxidase during Spinal Cord Ischemic/Reperfusion Injury and explore the protective mechanism of Salvia miltiorrhiza on the Spinal Cord Ischemic/Reperfusion Injury.Methods:A total of 140 Sprague Dawley rats,aged 60 days,weighing(250±10)g,of clean grade and either gender were randomly divied into four groups:sham-surgery(n=35),model(n=35), Salvia miltiorrhiza(n=35),and Tanshinone(n=35) groups. Prior to I/R model establishment, rats of the Salvia miltiorrhiza group rats were intraperitoneally injected with Salvia miltiorrhiza and rats of the Tanshinone group were intraperitoneally injected with sulfotanshinone sodium.Rats in the model, Salvia miltiorrhiza and Tanshinone group were established the spinal I/R injury model according to a modified version of Zivin method.Rats in the sham-surgery were treated with the same operation, but the abdominal aorta were not ligated.Samles from all group were harvested,respectively,at 30-minute post-ischemia,and 0.5,1,4,8,12-hourpost-reperfusion,and take out the spinal cord,then observed the expression of ICAM-1 and the activity of IL-1β、MPO.Results:1、In the sham-surgery group, IL-1β、ICAM-1、MPO were not significantly change in 12 hours, and there were not ICAM-1-positive blood vessels.2、In the model,Salvia miltiorrhiza and Tanshinone group, IL-1βbegan were increased at 0.5-hour post-reperfusion, and keep increasing in 12 hours.IL-1βactivity of the Salvia miltiorrhiza and Tanshinone group were significantly less than the model group at 4,8,and 12-hours post-reperfusion(p0.05).Conclusions:1、Making spinal cord ischemic reperfusion injury model with Zivin’method have the characters of stability,and esay to operating and repeating.2、Salvia miltiorrhiza and Tanshinone can reduce activity of IL-1β、expression of ICAM-1 and neutrophil infiltration of spinal cord in spinal cordischemia-reperfusion injury. The function of Tanshinone reducing IL-1βactivity and the expression of ICAM-1 in spinal cord ischemia-reperfusion injury was better than Salvia miltiorrhiza.3、Salvia miltiorrhiza can improve Spinal Cord Ischemic/Reperfusion Injury.【关键词】丹参注射液丹参酮脊髓再灌注损伤细胞间粘附分子-1 白细胞介素-1β中性粒细胞髓过氧化物酶【英文关键词】Salvia miltiorrhiza Tanshinonespinal cord ischemia/reperfusion injuryintercellular adhesion molecule-1 nterleukin-1βeutrophilicgranulocyte myeloperoxidase【目录】丹参对脊髓缺血再灌注损伤炎性通路IL-1β、ICAM-1、MPO的作用及机制研究中文摘要4-6英文摘要6-7前言8-10实验材料10-11实验方法11-16结果16-18分析与讨论18-24结论24-25参考文献25-29附图29-30致谢30-31综述31-37参考文献34-37个人简历37【采买全文】1.3.9.9.38.8.4.8 1.3.8.1.13.7.2.1 同时提供论文写作一对一辅导和论文发表服务.保过包发.【说明】本文仅为中国学术文献总库合作提供,无涉版权。
丹参对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响的开题报告
一、研究背景:
中风是全球主要的致残和死亡原因之一。
在许多中风病例中,中风后的脊髓缺血再灌注(I/R)损伤是一种常见的并发症,导致缺血性损伤、神经元坏死和炎症反应加剧。
因此,寻找有效的治疗方法来缓解脊髓I/R损伤至关重要。
丹参作为一种中草药在中医药学中被广泛使用。
已有的研究表明,丹参具有抗氧化、降血压、抗损伤和抗炎症等多种药理作用。
然而,丹参对脊髓I/R损伤的影响尚未被充分研究和证实。
二、研究目的:
本研究的目的是研究丹参对大鼠脊髓I/R损伤的影响,并探讨其作用机制,以期为治疗脊髓I/R损伤提供新的治疗方法。
三、研究方法:
本研究将使用大鼠脊髓I/R模型。
将大鼠随机分为4组:假手术组、I/R组、低剂量丹参组和高剂量丹参组。
在手术前一周开始给予丹参高剂量组和低剂量组不同剂量的丹参水提取物。
手术后24小时评估大鼠的神经功能和脊髓水肿程度,并测定脊髓的氧化应激反应、炎症反应和细胞凋亡程度。
四、研究意义:
本研究可探讨丹参对脊髓IR损伤的保护作用,揭示其作用机制,为寻找治疗脊髓IR损伤的有效方法提供了实验依据,也为丹参的临床应用提供了科学依据。
复方丹参注射液与甲基强地松龙联合应用对大鼠急性脊髓损伤的影响宋勇;刘德明【期刊名称】《江西科学》【年(卷),期】2003(021)004【摘要】观察丹参Salvia Milltiorrhiza(SM)与甲基强地松龙Methylprednisolne(MP)的联合应用对急性脊髓损伤产生的影响及其超微结构变化.用50只成年SD大白鼠随机分为:正常对照组、损伤对照组、丹参组、激素组、联合用药组.除正常组外,其他4组均按改良Allen打击法致伤脊髓,造成大鼠不完全的瘫痪.每天观察各组大鼠的行为变化,从3个不同角度的神经功能试验给予评分.第4天经心一主动脉插管灌注固定液处死各组大白鼠,取出损伤段脊髓,制作冰冻切片HE染色进行光镜观察及电镜超薄切片进行观察.结果显示:斜板试验损伤对照组功能恢复最慢,其次为丹参组、激素组,联合用药组恢复功能最快.联合用药组与激素组、丹参组比较均有显著性差异(p<0.05),BBB评分方差分析显示联合用药组与激素组、丹参组有统计学差异(p<0.05),与损伤对照组比较有非常显著性差异(p<0.01).5组中灰质和白质均有不同程度出血、神经元水肿、变性、坏死,显示不出明显的差异,损伤对照组中髓鞘有较严重的披裂,轴索残存或内有碎处,大多数轴索极度损伤,突触小泡明显减少.激素组及丹参组的情况与损伤对照组大致类似,只是程度稍轻,联合用药组髓鞘及轴索、线粒体、毛细血管、突触小泡等损伤改变最轻,有些结构接近正常,突触小泡数与其他组相比有显著差异.甲基强地松龙与丹参联合应用对大鼠急性脊髓损伤(SCI)后的后肢运动功能恢复有促进作用;可以减轻脊髓水肿、髓鞘和轴索的变性,从而保护神经传导功能,稳定线粒体结构、维护神经元的正常形态及其功能;减少SCI的继发损伤;同时也说明在激素使用的同时,早期应用丹参,并不会增加出血,而能减少出血,为临床上早期应用丹参提供了依据.【总页数】6页(P311-316)【作者】宋勇;刘德明【作者单位】江西省奉新县人民医院,江西,奉新,33700;江西医学院,江西,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】TP393.08【相关文献】1.嗅成鞘细胞移植与甲基强的松龙联合应用对急性脊髓损伤大鼠功能恢复和Nogo-A表达的影响 [J], 王锋;王玮2.甲基强地松龙治疗急性脊髓损伤 [J], 郝跃峰;李军;王恒龙;姜振国;史勇;孙润芳;孙晓震3.早期手术减压及甲基强地松龙冲击治疗急性脊髓损伤围手术期的护理 [J], 潘丽华;姜秀珍;段亚丽4.大剂量甲基强地松龙对大鼠脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响 [J], 敖强;吕德成;姜长明;关凤林5.复方丹参注射液和甲基强的松龙治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究 [J], 蒋赞利;吴小涛;王长松;茅祖斌因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
复方丹参注射液和甲基强的松龙治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究蒋赞利;吴小涛;王长松;茅祖斌【期刊名称】《中国中西医结合杂志》【年(卷),期】2003(0)S1【摘要】目的:探讨复方丹参注射液和甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤的治疗作用。
方法:采用 Allen法将64只 SD 大鼠制成脊髓中度损伤模型,分别给予复方丹参注射液(丹参组)、甲基强的松龙(西药组)、两药联合应用(联合组)及生理盐水(对照组)治疗,观察比较治疗前后动物不同时间的神经功能评分、斜板试验及体感诱发电位。
结果:从伤后3周起,治疗组各项指标与对照组比较差异均有显著性(P<0.01),联合组与丹参组及西药组比较差异有显著性(P<0.05)。
结论:复方丹参注射液与甲基强的松龙联合应用治疗脊髓损伤具有协同作用。
【总页数】3页(P165-167)【关键词】复方丹参注射液;甲基强的松龙;脊髓损伤;治疗【作者】蒋赞利;吴小涛;王长松;茅祖斌【作者单位】东南大学附属中大医院骨科;中大医院中医内科【正文语种】中文【中图分类】R651.2【相关文献】1.夹脊电针联合甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡表达的实验研究[J], 李晓宁;梁雪松;迟蕾;刘双岭;臧召霞;李诺;梅继林2.甲基强的松龙联合褪黑素治疗大鼠急性脊髓损伤论著的实验研究 [J], 段大志;刘勇;张治国3.麦考酚酸脂联合甲基强的松龙治疗大鼠急性脊髓损伤的研究 [J], 赵雁伟;韩树峰4.大剂量甲基强的松龙联合MK-801治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究 [J], 王军;韩树峰5.夹脊电针联合甲基强的松龙对急性脊髓损伤模型大鼠NMDA-NR1、 Calpain-2和cleaved caspase-3表达影响的实验研究 [J], 付豪; 李诺; 李晓宁因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
复方丹参注射液对大鼠脊髓损伤后肢体运动功能的影响刘德明;刘曾旭;王文敏;刘德伍;杨宝林【期刊名称】《中药药理与临床》【年(卷),期】2002(018)002【摘要】目的:观察复方丹参注射液治疗脊髓损伤后肢体运动功能的变化,探讨丹参对大鼠脊髓损伤的保护和促进修复作用及其作用机理.方法:大鼠按Allen改良法制备脊髓损伤动物模型,分别在术前和术后用复方丹参注射液腹腔注射.用斜板试验法和BBB(Bosso,Beattie and Bresnahan )评分法观察大鼠脊髓损伤后运动功能的变化.结果:用药组大鼠脊髓损伤后肢体运动功能恢复较快,术前与术后用药组动物的运动功能恢复程度无显著性差异.结论:丹参对大鼠实验性急性脊髓损伤后运动功能的恢复有促进作用.【总页数】3页(P6-8)【作者】刘德明;刘曾旭;王文敏;刘德伍;杨宝林【作者单位】江西医学院解剖学教研室,南昌,330006;江西医学院解剖学教研室,南昌,330006;江西医学院解剖学教研室,南昌,330006;江西医学院第一附属医院烧伤研究所;江西医学院解剖学教研室,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.夹脊电针联合甲强龙对急性脊髓损伤大鼠肢体运动功能及尼氏小体影响的实验研究 [J], 李晓宁;吴磊;梅继林;李诺;单筱淳;梁雪松2.复方丹参注射液对大鼠急性脊髓损伤后神经再生的影响 [J], 刘德明;郑红;王文敏;刘曾旭;宋勇;马学强;戴江华3.复方丹参注射液对大鼠急性脊髓损伤后神经再生的影响 [J], 刘德明;王文敏;刘曾旭;宋勇4.复方丹参注射液对大鼠急性脊髓损伤后神经再生的影响(英文) [J], 刘德明;郑红;王文敏;刘曾旭;宋勇;马学强;戴江华5.损伤散对急性脊髓损伤大鼠肢体运动功能及Fas,FasL表达的影响 [J], 李元贞;任学通;刘保健因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
273经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)的表达水平。
因此,本研究通过腹腔注射方法给予SCI大鼠丹参注射液治疗,观察其脊髓组织中BDNF和IGF-1的表达变化,从而对丹参注射液的脊髓神经保护作用机制进行探讨。
1材料与方法1.1 材料1.1.1实验动物清洁级雄性SD大鼠30只,体质量(200±20) g,合格证号SCXK(京)2014-0013,购自中国食品药品检定研究院。
经1周适应性饲养后,随机分为正常对照组、模型组和治疗组,每组10只。
实验过程中,实验室保持恒温恒湿[温度(23±1)℃,湿度(48±4) %],自然光照;术前及术后大鼠自由进食、饮水及活动;术后定时按摩大鼠膀胱以减轻排尿障碍,并每日给予8万单位青霉素以预防感染。
实验结束后,采用戊巴比妥钠注射法处死动物(以动物呼吸、心跳停止作为死亡标准)。
所有操作符合动物伦理规范。
1.1.2主要试剂丹参注射液购自四川升和药业公司(批号Z51021303),BDNF单克隆抗体、IGF-1单克隆抗体、β-actin单克隆抗体均购自Santa Cruz公司(货号sc-65514、sc-271822、sc-47778),免疫组化试剂盒、DAB显色试剂盒均购自ZSGB-BIO公司(货号SP9001、PAB180021),组织细胞裂解液、HRP-标记IgG、BCA 试剂盒均购自Bioswamp公司(货号P AB180006、P AB160013、PAB180007),其他相关生化试剂或耗材均购自ZSGB-BIO 公司。
1.2 方法1.2.1建模和分组处理正常对照组大鼠仅常规饲养14 d。
模型组和治疗组大鼠参照文献[6]的方法建立Allens’重力打击SCI模型:采用3%戊巴比妥钠按30 mg/kg的剂量腹腔注射麻醉大鼠,手术暴露T12~L1节段硬脊膜;采用5 g冲击杆沿垂直冲击通道自10 cm高度以自由落体方式打击大鼠T13节段脊髓;打击后大鼠立刻出现躯干及尾巴痉挛性摆动、双下肢回缩样扑动,苏醒后肢体呈弛缓性瘫痪,并伴有排尿功能障碍。
复方丹参对脊髓损伤大鼠一氧化氮合酶神经元的影响刘曾旭;刘德明;王文敏;杨宝林;龙飞【期刊名称】《解剖学杂志》【年(卷),期】2004(027)004【摘要】目的:探讨丹参治疗脊髓损伤的机制.方法:大鼠按Allen's法制备脊髓损伤动物模型.用复方丹参注射液腹腔注射治疗;用NADPH-d组化方法测定NOS神经元变化,并做图像分析.结果:脊髓损伤大鼠用复方丹参注射液治疗后,脊髓前角内的NOS阳性细胞增多,表达升高;而后角内几乎未见阳性细胞.结论:脊髓损伤大鼠经过复方丹参注射液治疗后,脊髓前角内NO的合成增加,但后角内NO合成下降.【总页数】3页(P401-403)【作者】刘曾旭;刘德明;王文敏;杨宝林;龙飞【作者单位】江西医学院解剖学教研室,南昌,330006;江西医学院解剖学教研室,南昌,330006;江西医学院解剖学教研室,南昌,330006;江西医学院解剖学教研室,南昌,330006;江西医学院形态中心实验室,南昌,330006【正文语种】中文【中图分类】R651.2【相关文献】1.神经生长因子和蝮蛇抗栓酶对脑梗死大鼠海马神经元一氧化氮合酶阳性神经元的影响 [J], 张晔;周郦楠2.神经生长因子和蝮蛇抗栓酶对脑梗死大鼠海马神经元一氧化氮合酶阳性神经元的影响 [J], 张晔;周郦楠3.染料木素对去卵巢大鼠基底前脑神经元型一氧化氮合酶神经元影响的体内研究[J], 董玉林;张志军;郁晓燕;何志贤;胡燕;杨学峰;倪衡建4.急性等容性血液稀释联合控制性降压对大鼠神经元形态学及神经元型一氧化氮合酶表达的影响 [J], 葛亚丽;冯善武;宋娟;邵芹;杨建军;金毅;周志强;段满林5.牛磺酸对染铅大鼠海马神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的影响 [J], 杨烽;李积胜;刘亚华;王大宁因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
・研究报告・丹参注射液对急性脊髓损伤大鼠突触体素和突触素的作用及机制韦理1,张俐2(1广西中医药大学,南宁 530001;2福建中医药大学,福州 350108)摘要:目的:观察丹参注射液对急性脊髓损伤(S C I )大鼠的脊髓灰质突触相关蛋白突触体素(synaptophysin)、突触素(synapsin)的作用,并探讨其机制。
方法:将144只SD雄性大鼠制作成SCI模型,随机分为观察组、对照组及SCI组,其中观察组给予丹参注射液,对照组给予甲基强的松龙,SCI组不予干预,运用原位杂交技术,观察伤后1d、3d、7d和14d脊髓灰质synaptophysin和synapsin变化。
结果:观察组在伤后1d、3d,脊髓灰质synaptophysin和synapsin吸光度值与对照组和SCI组比较无显著性差异,在伤后7d、14d高于SCI组(P <0.01),与对照组比较无显著性差异。
结论:丹参可以减轻SCI继发性损伤,是SCI早期理想的治疗药物。
关键词:丹参注射液;急性脊髓损伤;突触体素;突触素 基金资助:广西自然科学基金面上项目(No.2011GXNSFA018305)Effect of Salvia Miltiorrhiza on synaptophysin and synapsin of spinal cord injury in rat and its mechanismWEI Li 1, ZHANG Li 2( 1Guangxi University of Chinese Medicine, Nanning 530001, China; 2Fujian University of Chinese Medicine, Fuzhou 350108, China )Abstract: Objective: To observe the effect of Salvia Miltiorrhiza on synaptophysin and synapsin of acute spinal cordinjury in the gray matter of rats and discuss its mechanism. Methods: 144 male SD rats were made SCI models and randomly divided into three groups including the observation group, control group and SCI group. The observation group was treated with Salvia miltiorrhiza injection. The control group was treated with methylprednisolone. SCI group was treated with nothing. Changes of synaptophysin and synapsin were observed on the fi rst day, the third day, the 7th day and the 14th day after SCI. Results: There was no signi fi cant difference on the density of synaptophysin immunoreactivity and synapsin immunoreactivity in the gray matter in the observation group, control group and SCI group on the fi rst day and the third day after SCI. And There was no signi fi cant difference on on the 7th day and the14th day after SCI in the observation group and control group. But compared with SCI group, the observation group signi fi cantly increased on the 7th day and the 14th day (P <0.01), but there was no signi fi cant difference compred with the control group. Conclusion: Salvia Miltiorrhiza could reduce the insecondary injury of SCI, which was the effective medicine in early stage of SCI.Key words: Salvia Miltiorrhiza; Acute spinal cord injury; Synaptophysin; SynapsinFund assistance: Natural Science Foundation of Guangxi Province (No.2011GXNSFA018305)通讯作者:韦理,广西南宁市明秀东路179号广西中医药大学,邮编:530001,E -mail:weilimen@急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI )的原发性损害是不可逆的,脊髓创伤后出血、水肿、微循环障碍以及局部自由基改变等继发损伤阶段是可调控的,如何减轻其继发性损伤,是目前研究热点。
丹参注射液对脑损伤大鼠神经元的影响及其与Persephin 表达的关糸!黄微",王莹$>,吴键"(1.昆明医科大学海源学院,云南昆明650106;2•云南省第二人民医院神经外科,云南昆明650000)中图分类号R932;R96 文献标志码A文章编号1672-2124(2019)12-1448-04DOI10.14009/j.issn.1672-2124.2019.12.009摘要目的:探讨丹参注射液对脑损伤大鼠神经元的影响及其与Persephin表达的关系。
方法:选取100只健康的SD大鼠,分为健康对照组、空白对照组和丹参组(低剂量组、中剂量组及高剂量组),每组20只。
对空白对照组、丹参组大鼠进行脑损伤造模。
造模完成后,空白对照组大鼠给予0.9%氯化钠注射液,低剂量组、中剂量组及高剂量组大鼠分别给予低、中及高剂量的丹参注射液,给药方式均为腹腔注射。
于给药7d后采集各组大鼠的静脉血,分离处理得到血清样本后检测大鼠的神经元特异性烯醇化酶(NSE)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶"SOD)、B淋巴细胞瘤-2基因"Bel-2)蛋白及Persephin水平;并采用Pearson相关性检验对NSE、MDA、SOD及Bcl-2蛋白与Persephin水平的相关性进行分析。
结果:与健康对照组大鼠相比,空白对照组、丹参组大鼠的NSE、MDA及SOD水平明显升高,Bcl-2蛋白水平明显降低;且丹参组大鼠NSE、MDA及SOD水平明显低于空白对照组,Bcl-2蛋白水平明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)$随着丹参注射液剂量的升高,丹参组大鼠NSE、MDA及SOD水平依次降低,Bcl-2蛋白水平依次升高,组间比较的差异均有统计学意义(!<0.05)。
空白对照组、丹参组大鼠Persephin水平明显低于健康对照组,丹参组大鼠Persephin水平明显高于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);随着丹参注射液剂量的升高,丹参组大鼠Persephin水平依次升高,组间比较差异均有统计学意义"P<0.05)$经Pearson相关性检验分析,Persephin与NSE、MDA、SOD呈负相关性,与Bcl-2蛋白呈正相关性。
丹参注射液对大鼠急性脊髓损伤后运动功能的作用及机制摘要:目的:本研究旨在探讨丹参注射液对大鼠急性脊髓损伤后运动功能的影响及其可能的机制。
方法:将36只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组以及丹参注射液组,其中丹参注射液组每日注射0.3ml/100g丹参注射液,模型组和对照组注射等体积的生理盐水。
在建立急性脊髓损伤大鼠模型后,记录各组大鼠的运动功能评分以及神经元生存率、神经元轴突长出率、炎症反应、胶质细胞数量等指标,并进行相关性分析。
结果:与模型组相比,丹参注射液组大鼠的运动功能评分明显提高(P<0.05);同时丹参注射液组大鼠的神经元生存率、神经元轴突长出率明显提高(P<0.05),炎症反应及胶质细胞数量显著减少(P<0.05)。
结论:丹参注射液能够改善大鼠急性脊髓损伤后的运动功能,同时促进神经元生存和神经元轴突长出,并抑制炎症反应及胶质细胞数量增加。
关键词:丹参注射液,急性脊髓损伤,运动功能,神经元,炎症反应,胶质细胞丹参注射液对大鼠急性脊髓损伤后运动功能的作用及机制Introduction:急性脊髓损伤(SCI)是一种常见、严重并且难以治愈的神经系统疾病。
SCI主要是由于外伤性创伤、负重过重或缺血性事件等原因引起。
SCI患者通常会出现不同程度的运动和感觉障碍、自主神经功能失调等症状。
尽管有多种治疗方法已被采用,但是SCI的治疗并没有实质性突破。
丹参注射液(DSL)是一种从丹参中提取的中药制剂,具有止血、降压、抗炎、抗氧化等多种药理作用。
近年来,DSL在神经系统疾病的治疗中也被广泛应用。
为了探究DSL在SCI治疗中的作用及其可能的机制,本研究进行了大鼠实验。
Materials and Methods:将36只健康雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组以及丹参注射液组,其中丹参注射液组每日注射0.3ml/100g丹参注射液,模型组和对照组注射等体积的生理盐水。
在建立急性脊髓损伤大鼠模型后,记录各组大鼠的运动功能评分以及神经元生存率、神经元轴突长出率、炎症反应、胶质细胞数量等指标,并进行相关性分析。
2012年11月第9卷第33期·药理与毒理·CHINA MEDICAL HERALD 中国医药导报随着交通业和建筑业的发展,临床中急性脊髓损伤(a -cute spinal cord injury )逐渐增加。
急性脊髓损伤具有较高的致残率,研究表明急性脊髓损伤后二次脊髓打击程度远远大于原发损伤[1]。
临床中如何避免继发性脊髓二次打击成为治疗急性脊髓损伤的关键。
虽然文献中多有报道急性脊髓损伤后即刻大剂量甲强龙治疗方法,但研究发现甲强龙虽能改善急性脊髓损伤发展结果,但有增加相关并发症的可能。
近年来有学者尝试使用丹参治疗急性脊髓损伤的报道。
本文通过实验初步探讨丹参对急性脊髓损伤的神经保护作用。
现报道如下:1材料与方法1.1材料Wistar 大鼠,42只,体重0.20~0.25kg ,雌雄不限,由湖北医药学院实验动物中心提供,动物合格证号:SYXK (鄂)2005-0031。
丹参注射液(上海中西医制药有限公司);甲基强的松龙琥珀酸钠(美国Upjohn 公司);细胞凋亡检检测试剂盒(POD 武汉博士德生物工程有限公司);异氟烷和脂肪乳(黑龙江省集成医药实业有限公司)。
1.2急性脊髓损伤模型制备将42只Wistar 大鼠随机分为三组,每组14例:生理盐水组、丹参组、甲强龙组。
将把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷。
制备方法:用30%脂肪乳为载体,室温下(20℃)应用玻璃瓶法,配制8%乳化异氟烷,即将1.2mL 的液态异氟烷和21.3mL 的30%脂肪乳加入至一个气密性良好的25~30mL 玻璃容器内,振荡器上以2000r/min 的速度剧烈震荡30s ,静置30s ,然后以2000r/min 速度剧烈震荡50min ,达到平衡后置于4℃冰箱中备用。
后以0.51~0.64mL/kg 腹腔注射,麻醉后采用改良Allen WD 打击法制备ASCI 模型。
剔除大鼠背部正中毛发,选择后正中切口显露T8-T10椎板,切除椎板过程中注意保护硬脊膜完整性。
将预备的铜片制成曲度直径与椎管相似圆形垫片,将垫片放置于硬脊膜表面。
将两头相通的玻璃试管垂直放置与显露创面上方,选择重7.5g 铜锤从高10cm 处通过玻璃试管自由下落,打击垫片,造成急性脊髓损伤模型,关闭手术切口。
术后采用人工挤压膀胱方法辅助排尿,每日6次。
1.3给药方法大鼠造成急性脊髓损伤后,复方丹参注射液1.08mg/kg 体重,给予腹腔注射,每日1次,共连续注射7d ;甲强龙15min 内按照30mg/kg 给予腹腔注射,伤后1h 开始,以5.4mg/(kg ·h )腹腔注射,共23h ,平均分4次使用。
生理盐水组伤后按照丹参组方法腹腔注射生理盐水。
复方丹参注射液对大鼠急性脊髓损伤的保护作用兰鸿陈鸿梅▲湖北医药学院附属太和医院药学部,湖北十堰442000[摘要]目的观察复方丹参注射液对急性脊髓损伤大鼠的保护作用。
方法采用改良Allen weight dropping (Allen WD )打击法将42只Wistar 大鼠制成脊髓中度损伤模型,分别给予复方丹参注射液、甲基强的松龙及生理盐水治疗,观察动物不同时间的神经功能评分、斜板试验及脊髓细胞凋亡率的变化。
结果从伤后2周起,丹参组的神经功能评分和斜板最大角度分别与生理盐水组比较,差异均有统计学意义(均P <0.05)。
从伤后12h 起,丹参组细胞凋亡率与生理盐水组比较,差异有统计学意义(P <0.05),丹参组与甲强龙组比较差异无统计学意义(P >0.05)。
结论复方丹参注射液对大鼠脊髓损伤细胞凋亡具有保护作用,能够达到治疗急性脊髓损伤的作用。
[关键词]丹参;急性脊髓损伤;大鼠;细胞凋亡[中图分类号]R683.2[文献标识码]A [文章编号]1673-7210(2012)11(c )-0111-03Protective affect of Compound Danshen Injection for rats with acute spinal cord injuryLAN Hong CHEN Hongmei ▲Department of Pharmacy,Taihe Hospital Affiliated to Hubei University of Medicine,Hubei Province,Shiyan 442000,China [Abstract]Objective To observe the protective affect of Compound Danshen Injection for rats with acute spinal cord in -jury.Methods The rats were established the model of moderate spinal cord injury by a modification of Allen weight drop -ping(Allen WD)method and treated with Compound Danshen Injection,Methylprednisolone and physiological saline,re -spectively,as treatment.Neurological functions were evaluated by using Basso-Beattie-Bresnahan (BBB)scores,and the angle of clivus test and cell apoptosis were performed at 12h after injury.Results There were significant differences (all P <0.05)in BBB scores and angle of clivus test between Danshen group and control group from the second week.There were significant differences (P <0.05)in cell apoptosis between Danshen group and control group from the lst hour.There was no significant differences between Danshen group and Methylprednisolone grorp (P >0.05).Conclusion Compound Dan -shen Injection has a protective effect on cell apoplosis of rats with acute spinal cord injury.[Key words]Danshen;Acute spinal cord injury;Rats;Cell apoptosis▲通讯作者111·药理与毒理·2012年11月第9卷第33期中国医药导报CHINA MEDICAL HERALD1.4细胞凋亡检测随机取4只大鼠,于造模后24h 、2、4、6周,开胸经心脏先以生理盐水灌注,观察液体变清后,以5%多聚甲醛磷酸液行脊髓灌注,脊髓固定后,通过原切口显露脊髓并切取损伤阶段约5mm ,再次以5%多聚甲醛磷酸液浸泡24h ,采用脱水石蜡常规包埋,连续切取厚度5μm 切片10张,随机选取4张切片放入细胞凋亡检测试剂盒检测,凋亡细胞核显微镜下观察呈黄色。
经计算机分析处理系分别检测出每张切片凋亡细胞数和总细胞数,以凋亡细胞数/总细胞数计算凋亡指数。
1.5观察指标分别于术后2、4、6周测量大鼠斜板试验度数和大鼠运动功能评分(BBB 评分)。
斜板试验[2]:将斜板与大鼠长轴呈垂直放置,缓慢抬高斜板,每次抬高5°,观察大鼠能够在斜板上停留5s 的最大度数,反复测量3次,取平均值,计算大鼠斜板试验功能值。
BBB 评分以Basso 等[3]描述的方法为准,采用盲法原则,有其他人员观察测量。
1.6统计学方法采用统计软件SPSS 16.0对实验数据进行分析,计量资料数据以均数±标准差(x ±s )表示,采用方差分析,两两比较采用LSD-t 检验。
以P <0.05为差异有统计学意义。
2结果2.1细胞凋亡检测结果结果显示,丹参组和甲强龙组细胞凋亡指数均低于生理盐水组,差异有统计学意义(P <0.05)。
丹参组与甲强龙组细胞凋亡指数比较,差异无统计学意义(P >0.05)。
见表1。
表1细胞凋亡检测结果(x ±s )注:与生理盐水组比较,*P <0.052.2斜板试验结果结果显示,丹参组和甲强龙组大鼠斜板试验功能值均高于生理盐水组,差异有统计学意义(P <0.05)。
见表2。
表2斜板试验比较(x ±s ,°)注:与生理盐水组比较,*P <0.052.3BBB 评分结果结果显示,丹参组和甲强龙组大鼠运动功能评分(BBB 评分)均高于生理盐水组,差异有统计学意义(P <0.05)。
见表3。
3讨论研究表明急性脊髓损伤后脊髓受到双重打击,首先如外伤导致直接的脊髓压迫,致使压迫部位出血、坏死;其次压迫后若不能及时解除压迫脊髓出现、缺血水肿,局部吞噬细胞、组织因子等炎症介质渗出,缺血等因素激活谷氨酸受体,致具有细胞毒性物质溢出,使脊髓遭受二次打击,引起细胞凋亡。
二次脊髓打击是持续过程,且其过程是可逆的,若临床中能够及时阻断脊髓二次打击,可有效阻止神经细胞凋亡和功能退变,保护神经细胞,促进神经细胞和轴突生长,有助于脊髓功能恢复。
丹参有效成分为丹参酮,研究表明丹参酮可抑制炎症一期反应中组织胺对毛细血管的作用,降低毛细血管通透性,同时可以抑制二期炎症反应中白细胞通过毛细血管向组织游走,达到抑制炎症反应。
最近研究表明核因子-κB (NF-κB )通过逆转录参与多核细胞的炎症反应,在炎症反应中起到重要作用[4],汪吉明等[5]研究表明急性创伤性脊髓损伤后,复方丹参可以抑制NF-κB 的活性表达,对减轻NF-κB 介导的炎症反应,降低炎症介质对脊髓神经细胞的毒性作用。
急性脊髓损伤后数小时内可激发血液系统的凝血功能,血液处于高凝状态[6],丹参酮可扩张微循环,增加受损部位神经细胞血供,减缓或抑制细胞凋亡。
余永桂等[7]将急性脊髓损伤模型分为丹参治疗组和生理盐水治疗组,结果显示丹参组细胞凋亡数低于生理盐水治疗组,丹参组bcl-2表达增高,他们认为丹参可能通过“抑制氧自由基脂质过氧化、减少细胞钙内流、调节细胞因子和上调bcl-2”的作用达到抑制细胞凋亡的作用。