褪黑素对大鼠急性脊髓损伤内质网应激蛋白GADD153／CHOP表达的影响

骨髓间充质干细胞移植联用褪黑素对大鼠脊髓损伤修复的
影响的开题报告
一、研究背景
脊髓损伤（SCI）是一种严重的神经系统疾病，目前仍然缺乏有效治疗方法。

骨
髓间充质干细胞（BMSCs）移植是一种潜在的治疗方法，通过促进神经再生和减少炎
症反应来改善SCI。

然而，BMSCs的存活和分化可能受到周围环境的影响。

褪黑素（MT）是一种具有抗氧化和抗炎作用的分子，可以通过调节细胞凋亡和自由基清除而促进细胞生存。

因此，本研究旨在探讨BMSCs移植联用MT对大鼠SCI修复的影响。

二、研究目的
本研究旨在评估BMSCs移植联用MT对大鼠SCI的影响，包括行为学、电生理
学和生物化学指标方面的改变，以及对梅巴胺（MA）以及神经元和神经胶质细胞的影响。

三、研究方法与步骤
将72只雄性SD大鼠随机分为4组：对照组、SCI组、BMSCs移植组和BMSCs
移植联用MT组。

所有大鼠均进行SCI操作，在SCI后一周内分别接受不同的处理措施。

在SCI的第7天，通过行为学测试评估大鼠的运动和神经功能状况。

并在第14天、第28天、第42天和第56天进行电生理学和生物化学指标检测。

最后进行组织学检测，评估MA和神经元和神经胶质细胞的变化。

四、研究意义
本研究将进一步了解BMSCs移植联用MT对大鼠SCI的治疗效果和机制，为临
床SCI治疗提供理论和实验基础。

褪黑素对急性脊髓损伤大鼠血清及脊髓内神经生长因子表达的影响目的研究褪黑素（MT）对脊髓损伤大鼠血清及脊髓内神经生长因子（NGF）表达水平的影响。

方法84只健康成年雄性SD大鼠随机分为模型对照组（n = 36）、模型MT组（n = 36）及假手术组（n = 12）。

建立脊髓损伤模型后，模型对照组给予无水乙醇，模型MT组给予MT，均为腹腔注射。

对比术后12 h、3、5 d大鼠血清及脊髓组织中NGF的表达及Tarlov评分。

结果术后12 h模型对照组及模型MT组Tarlov评分显著低于假手术组（P 0.05）。

术后3、5 d模型MT组Tarlov评分均显著高于模型对照组（P 3 d则给药3 d，人工辅助排尿排便（4次/d）。

术后12 h模型对照组及模型MT组的A组再次进行神经功能评价后断头处死取材，模型对照组及模型MT组的B、C组分别于术后3、5 d进行神经功能评价后断头处死取材。

1.5 观察指标检测1.5.1 血清NGF检测大鼠断头取血2 mL室温静置30 min，3000 r/min离心15 min取血清储存于-20℃冰箱备用。

采用大鼠NGF检测酶联免疫吸附法试剂盒检测血清NGF水平，操作方法按试剂盒说明进行。

1.5.2 脊髓组织NGF免疫组化检测解剖患处，取以T12为中心的约1 cm脊髓生理盐水冲洗，均分为2段。

上段进行常规制片苏木精-伊红染色，厚度5 μm，各组按1∶5比例取5张切片，采用兔抗鼠NGF多克隆抗体按试剂盒说明进行染色标记，DAB显色，于显微镜下观察。

HPIAS-1000彩色病理图像报告分析系统对每张片随机5个400倍视野阳性神经细胞进行计数，取平均值。

神经细胞细胞质、细胞核均呈棕色或棕褐色为阳性。

1.5.3 脊髓组织NGF mRNA检测采用PCR扩增法。

脊髓标本下段于-80℃冻存，取冻存样品研碎后采用Trizol法提取总RNA并逆转录为cDNA，以GAPDH 为内参进行PCR扩增，引物序列见表1。

褪黑素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用周宏艳;赵洪波;杨军;逯强【期刊名称】《中国康复医学杂志》【年(卷),期】2007(022)009【摘要】目的:探讨褪黑素对大鼠急性脊髓损伤的作用.方法:将72只Wistar成熟健康大鼠随机分为褪黑素组、甲泼尼龙琥珀酸钠组、生理盐水组、无水乙醇组,采用改良Allen's技术(5g×10cm)以T9为中心制作急性脊髓损伤模型;损伤后10min分别予以褪黑素(100mg/kg)、甲泼尼龙琥珀酸钠(30mg/kg)、生理盐水及5%无水乙醇腹腔内注射,伤后2h、24h、72h分别观察各组BBB评分变化,取T8、T9、T10 3个脊髓节段,应用免疫组化对脊髓组织及P53阳性细胞进行标记,探讨褪黑素对急性脊髓损伤有无保护作用.结果:在急性脊髓损伤后,各观测时间点褪黑素组与甲泼尼龙琥珀酸钠组BBB评分均较生理盐水组及无水乙醇组明显升高(P＜0.01),褪黑素组与甲泼尼龙琥珀酸钠组之间差异无显著性(P＞0.05);P53阳性细胞的表达在脊髓损伤后各组均呈逐渐增高趋势,但褪黑素组与甲泼尼龙琥珀酸钠组较生理盐水组及无水乙醇组P53阳性细胞表达降低(P＜0.01),褪黑素组与甲泼尼龙琥珀酸钠组之间P53阳性细胞表达差异无显著性(P＞0.05),无水乙醇组与生理盐水组差异无显著性(P＞0.05).结论:褪黑素对大鼠急性脊髓损伤具有保护性治疗作用,其作用效果与甲泼尼龙琥珀酸钠相似.【总页数】4页(P799-801,插1)【作者】周宏艳;赵洪波;杨军;逯强【作者单位】唐山市第二医院,河北,063000;唐山市第二医院,河北,063000;中国医科大学附属第二医院;中国医科大学附属第二医院【正文语种】中文【中图分类】R683.2;R49【相关文献】1.褪黑素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用 [J], 逯强;杨军;赵洪波;吴秀荣;王青;杨政丹;宋柏2.缺血性脑卒中大鼠褪黑素及其受体改变及褪黑素预处理的保护作用 [J], 赵瑛;刘志民;刘颖3.褪黑素对大鼠急性脊髓损伤后HO-1因子表达的影响 [J], 徐玉生;理阳;汪鑫;朱海洋;钟斌;李鹏辉;苏一帆4.褪黑素对大鼠急性脊髓损伤保护作用的实验研究 [J], 赵洪波;周宏艳;杨军5.褪黑素对急性脊髓损伤大鼠脊髓组织丙二醛以及血清炎性因子水平的影响 [J], 吴群华;李文彦因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

褪黑素对急性睡眠剥夺大鼠行为的影响及机制【关键词】褪黑素Effect of melatonin on behavior of rats of acute sleep deprivation and its working mechanismLIU FangE1，LIU LiBing1，CHEN JianKang1，CHEN ZhiYang1，YANG Fang1，HUA QianZhen2，QU Ping11Center of Basic Medicine Teaching Experiment， School of Basic Medicine， 2School of Nursing， Fourth Military Medicine University，Xian 710033， China【Abstract】 AIM: To explore the effect of melatonin (MT) on the behavior of rats with acute sleep deprivation (SD) and the related biomechanism. METHODS: Twentyfour Sprague Dawley rats were pided into 3 groups: control group (SD + sodium chloride)， experimental group 1 (SD + MT， 5 mg/ kg) and experimental group 2 (SD + MT， 15 mg/ kg). Therats were injected intraperitoneally with MT or sodium chloride one time a day for 1 week. SD was induced in the rats housed on small platform over water. After 72 h SD， the rats behavior was measured by "openfield test" and then malondialdehyde (MDA) and nitric oxide (NO) contents in cerebral cortex and hippocampus of the rats were measured by TBA and Griess method respectively. RESULTS: The excitability and explorative behavior of the 2 experimental groups in the "open field" significantly decreased compared with those of the control group(P<0.05， P<0.01). There was a doseeffect relationship in the experimental groups. The contents of NO or MDA in cerebral cortex and hippocampus of the experimental groups were lower than those of the control group（P<0.01）. CONCLUSION: Melatonin depresses theexcitability in the rats of acute sleep deprivation， possibly by inhibiting the increase of NO and MDA in cerebral cortex and hippocampus of the rats.【Keywords】 melatonin; sleep deprivation; behavior; NO; MDA【摘要】目的：探讨褪黑素对急性睡眠剥夺（SD）大鼠行为的影响及可能的作用机制. 方法：将Sprague Dawley 24只大鼠随机分为3组，对照组给予SD和生理盐水腹腔注射，2个实验组分别给予SD和褪黑素5 mg/kg和15 mg/kg腹腔注射，连续给药7 d后，采用小平台水环境法建立大鼠SD模型，SD 72 h用旷场反应箱测试大鼠的行为，用试剂盒检测大鼠大脑皮层和海马中一氧化氮（NO）和丙二醛（MDA）含量. 结果：实验组旷场反应测试大鼠兴奋性和探索性行为均明显小于对照组（P<0.05， P<0.01），有量效关系. 实验组大鼠大脑皮层和海马组织中NO和MDA含量明显低于对照组（P<0.01）. 结论：褪黑素对睡眠剥夺大鼠行为障碍有改善作用，这种作用可能与抑制睡眠剥夺大鼠大脑皮层和海马中NO及MDA 的升高有关.【关键词】褪黑素；睡眠剥夺；行为；一氧化氮；丙二醛0引言睡眠剥夺（sleep deprivation，SD）不但可引起动物或人产生疲劳、情绪不良、思维紊乱、甚至抵抗力低下、而且能引起学习记忆受损和行为的改变. 随着社会的发展，人们的生活节奏越来越快，睡眠剥夺现象日益常见. 因此，探讨减少睡眠剥夺对机体不良影响的措施具有十分重要的意义. 本实验拟研究褪黑素对睡眠剥夺大鼠行为的影响及可能的作用机制，为睡眠剥夺引起的行为障碍的防治提供理论依据.1材料和方法1.1材料1.1.1实验动物上海产Sprague Dawley大鼠24只，成年、雄性、健康，体质量(180±15) g(第四军医大学实验动物中心提供). 将24只大鼠随机分为3组，每组8只. 对照组：睡眠剥夺+生理盐水；实验1组：睡眠剥夺+小剂量褪黑素；实验2组：睡眠剥夺+大剂量褪黑素.1.1.2药品和仪器睡眠剥夺装置参照文献［1］自制，旷场反应箱，秒表，褪黑素（Sigma公司，使用前需少量乙醇助溶，以生理盐水配制成所需浓度，终溶液中乙醇量<50 mL/L），MDA试剂盒，NO试剂盒，离心机，721分光光度计，恒温水浴箱等. 所有试剂盒均购自南京建成生物工程研究所.1.2方法1.2.1给药实验1组和实验2组于每日17：00腹腔注射褪黑素，剂量分别为5 mg/kg和15 mg/kg配制成2 mL溶液，给药，对照组在相同时间腹腔注射生理盐水2 mL，连续7 d，然后给予睡眠剥夺3 d. 睡眠剥夺期间，依然按分组每日给予褪黑素或生理盐水.1.2.2建立睡眠剥夺模型采用小平台水环境法（flower pot）建立大鼠SD 模型. 制作30 cm×30 cm×30 cm的鼠箱，其中有一直径为6.3 cm，高8.0 cm的平台，在平台周边注满水，水温保持在20℃左右，水面距平台面约1.0 cm. 鼠在平台上可自行进食饮水. 若其睡眠，则由于肌肉张力松弛而落入水中，大鼠只能重振精神爬上平台，如此反复达到SD的效果. 大鼠活动空间内持续40 W日光灯照射，室内温度控制在18℃～22℃. 睡眠剥夺前，让大鼠熟悉适应环境7 d，即在给予大鼠褪黑素或生理盐水腹腔注射的同时，将大鼠放在没有注水的睡眠剥夺箱内，让其熟悉睡眠剥夺环境. 而后进行睡眠剥夺72 h.1.2.3行为学测试用旷场反应箱测试大鼠的行为变化和情绪兴奋性. 将旷场反应箱放置在一个较封闭的屋内，有照明装置可调节光线强弱. 旷场反应箱为一个底部面积100 cm×100 cm，上口面积120 cm×120 cm，高30 cm的方形容器，底面小上口大，便于观察大鼠在箱内的活动，旷场反应箱正上方有一个摄像头监视大鼠的活动，并可将实验数据和图像信息输入计算机. 观察大鼠在旷场反应箱中5 min内的运动，并观察动物情绪变化、修饰行为（如洗脸行为、抓挠行为）和大小便次数. 每只大鼠在睡眠剥夺72 h后测量1次，每次测试后，用稀硫酸溶液清洗旷场周壁及底面，以免上次动物余留的信息（如大鼠的大、小便、气味）影响下次测试结果.1.2.4海马、大脑皮层内NO，MDA测定取上述各组睡眠剥夺结束后大鼠立即处死，于冰浴中取出海马与大脑皮层. 分析天平称质量，按质量海马加冰冷的100 mL/L PBS溶液(pH 7.0) 稀释至10%，大脑皮层加冰冷的生理盐水稀释至10%，并以玻璃匀浆器匀浆， 1000 r/min，离心5 min后沉淀，取上清液均置于冰箱中待测. 根据试剂盒的操作步骤，采用硝酸还原法检测NO，硫代巴比妥酸法检测MDA. 由专人一次检测完成.统计学处理：所有数据以x±s表示，结果采用SPSS 10.0软件包进行方差分析，均数间的多重比较用LSDt进行显著性检验.2结果2.1大鼠兴奋性和探索性褪黑素对大鼠行为的影响测试显示，随给药剂量不同，大鼠的情绪状况有一定差异：2个实验组比对照组，小剂量组比大剂量组，大鼠的修饰行为和大小便次数均明显减少，实验组更易受激惹. 在旷场反应箱中，运动总距离（total distance，TD）表示大鼠在旷场反应箱中5 min内运动的总路程，较快运动距离（quick speed distance， QSD）表示大鼠速度大于5 cm/s时运动的总路程. 实验中用运动总距离和较快运动距离表示大鼠的行为兴奋性，运动总距离和较快运动距离越大，说明大鼠的兴奋性越高.离开边界总距离(leave border distance，LBD)表示大鼠不沿边界运动时的总路程，即离开边界15 cm时运动的距离；内环内距离（inner toriod distance，ITD）表示大鼠在内环内部运动的总路程，内环是指以旷场中心点为圆心，以44 cm为半径的圆. 用离开边界总距离和内环内距离表示大鼠的探索性行为，离开边界总距离和内环内距离越大，说明大鼠的探索性行为越多(表1).表1褪黑素对睡眠剥夺大鼠的行为的影响(略)2.2睡眠剥夺大鼠大脑皮层和海马NO和MDA含量褪黑素对睡眠剥夺大鼠大脑皮层和海马NO和MDA含量的影响（表2）.表2褪黑素对睡眠剥夺大鼠大脑皮层和海马NO和MDA的影响(略)3讨论SD是一种特殊的生理心理状态，它可引起机体生理、心理功能的改变. 已有动物实验表明［2］SD 24 h和48 h时动物表现最为活跃，而12，72和96 h 时兴奋性较弱，说明若睡眠剥夺时间短，情绪状态表现为兴奋，72 h以后则有抑制趋势. 本实验结果与上述结果有所不同，SD 72 h后，对照组大鼠比实验组大鼠大小便次数增多，修饰行为或“洗脸”行为增多，对于给它的刺激敏感、易怒，实验后将它放入饲养笼中，对其他鼠进攻行为也增多. 这说明，大鼠仍处于较兴奋的状态. 这与Youngblood等［3］的报道结果较一致，他的研究认为在48和72 h睡眠剥夺后大鼠游泳行为增加. 据报道［4］修饰行为常发生于产生矛盾或害怕的情境中，大鼠SD后精神行为表现出一定的兴奋性，修饰行为增多，说明SD环境使大鼠情绪非常紧张恐惧，攻击行为增多. 本实验结果提示褪黑素对睡眠剥夺引起的情绪兴奋有抑制作用.本研究在旷场试验中用运动总距离和较快运动距离指标考察大鼠的兴奋性状态. 大鼠在旷场反应箱中，由于环境陌生，常表现为恐惧、紧张、好奇等，基本上处于运动状态. 运动速度大于5 cm/s时，大鼠处于行走或跑步的状态；运动速度小于5 cm/s时，大鼠在缓慢移动，即处于相对“静止”状态. 因此，用运动总距离和较快运动距离表示大鼠的运动量，代表其兴奋性状态. 实验结果显示，实验1组和实验2组与对照组相比，运动总距离和较快运动距离都显著减少，说明褪黑素对睡眠剥夺大鼠的行为兴奋性有明显的抑制作用，而且褪黑素的剂量越大，抑制作用越强. 实验用离开边界总距离和内环内距离两个指标考察大鼠的探索性行为. 人或动物在情绪兴奋或烦躁时，就会导致行为的目的性减弱，注意力不集中，对安全的考虑减少，对危险的防范意识降低. 因此，大鼠在72 h睡眠剥夺后，行为兴奋，注意涣散，违背本能，离开边界运动的总距离和内环内运动总距离明显增多. 本实验结果显示，两个实验组与对照组比较离开边界总距离和内环内距离明显减少，表明褪黑素对睡眠剥夺大鼠的探索性行为也有抑制作用，但是大、小剂量之间无统计学意义.研究发现［5］，睡眠剥夺组大鼠脑组织NO含量升高，其中额叶及海马NO含量升高更明显. 而且随着SD时间的延长，NO含量升高越明显. 丙二醛（MDA）是体内脂质过氧化的产物，其含量高低间接反映自由基对生物大分子的损伤程度. 褪黑素是一种内分泌激素，为体内抗自由基、抗氧化作用很强的活性物质. 褪黑素在预防皮层功能紊乱，如运动、感觉、记忆和心理损伤方面是非常有用的［6］. 我们研究表明，2个褪黑素实验组大鼠大脑皮层和海马NO和MDA的含量明显低于对照组，提示褪黑素对睡眠剥夺大鼠大脑皮层和海马组织中NO 和MDA的含量的升高有显著的抑制作用. 据报道［7］，褪黑素对中枢神经兴奋性的抑制机制可能通过抑制一氧化氮合酶，使谷氨酸受体激活产生NO水平下降而起作用. 说明MT抑制NO及MDA的升高作用，即抗自由基和抗过氧化损伤作用，可能是其发挥改善睡眠剥夺大鼠行为障碍的重要作用机制之一.参考文献［1］ Youngblood BD，Zhou J， Smagin GN， et al. Sleep deprivation by the "Flower Pot" technique and spatial reference memory［J］. Physiol Behav， 1997，61(2):249-256.［2］宋国萍，皇甫恩，苗丹民，等. 睡眠剥夺对大鼠学习和行为的影响［J］.第四军医大学学报， 2000，21(6):663-666.［3］ Youngblood BD，Smagin GN，Elins PD，et al．The effects of paradoxical sleep deprivation and valine on spatial learning and brain 5HT metabolism［J］．Phsiol Behav， 1999，67(5)：643-649．［4］ Brady K， Brown JW，Thurmond JB. Behavioral and neurochemical effects of dietary tyrosine in young and aged mice following coldswim stress［J］. Pharmacol Biochem Behav， 1980，12(5):667-674.［5］吴兴曲，杨来启，王晓峰，等. 睡眠剥夺对大鼠一氧化氮和一氧化氮合酶的影响［J］. 中国临床心理学杂志，2002，10(2): 106-107.［6］ Takashi Kondoh，Hisayuki Uneyama，Hitoo Nishino， et al. Melatonin reducea cerebral edema formation caused by transient forebrain ischemia in rats［J］. Life Sci，2002，72:583-590.［7］汤业磊，潘以正. 褪黑素对FeCl3致痫大鼠行为及脑电图的影响［J］.中国临床神经科学，2003，11(1):42-45.。

·66· E-mail:zgqkyx@［7］郑桁，张伟，王康. MicroRNA-199a通过缺氧诱导因子1α抑制胃癌细胞上皮间充质转化［J］. 重庆医学，2016，45（35）：4914-4916.［8］杜静，孙保存，刘易欣. 缺氧诱导因子-1在肿瘤学中的研究进展［J］. 临床与实验病理学杂志，2013，29（5）：548-551. ［9］蔡逊，马丹丹，金炜东，等. 缺氧诱导因子1α通过上调Snail促进HepG2肝癌细胞上皮-间充质化［J］. 华南国防医学杂志，2013，27（7）：459-463.［10］郭晓川，石燕，陈丽，等. 缺氧诱导因子对肿瘤细胞上皮-间质转化的诱导机制［J］. 解放军医学院学报，2015，36（1）：90-93.［11］金炜东，马丹丹，蔡逊，等. 缺氧诱导因子1α在肝癌细胞上皮-间充质化中的作用［J］. 中国普通外科杂志，2013，22（7）：885-889.［12］WANG Q，WANG H，ZHANG Y，et al. Activation of uPAR is required for cigarette smoke extract-induced epithelial-mesenchymal transition in lung epithelial cells［J］. Oncol Res，2013，21（6）：295-305.［13］WANG P，MA M，ZHANG S，et al. EGF-induced urokinase plasminogen activator receptor promotes epithelial to mesenchymal transition in human gastric cancer cells［J］. Oncol Rep，2017，38（4）：2325-2334.［14］HUANG C，XIE D，CUI J，et al. FOXM1c promotes pancreatic cancer epithelial-to-mesenchymal transition and metastasis via upregulation of expression of the urokinase plasminogen activator system［J］. Clin Cancer Res，2014，20（6）：1477-1488. ［15］BAO Y N，CAO X，LUO D H，et al. Urokinase-type plasminogen activator receptor signaling is critical in nasopharyngeal carcinoma cell growth and metastasis［J］. Cell Cycle，2014，13（12）：1958-1969.（本文编辑：崔莎）·论著·褪黑素在大鼠急性肺损伤中对P-选择素表达抑制作用的影响胡青青，金克，周恩敏，黄丽密，钱燕，张玲玲*【摘要】 目的 探讨褪黑素在大鼠急性肺损伤中对P-选择素表达抑制作用的影响。

褪黑素对大鼠脊髓损伤后iNOS表达的影响李东;武永刚;赵尔曼;杨秀玲;段力军【期刊名称】《包头医学院学报》【年(卷),期】2008(024)003【摘要】目的:探讨褪黑素对大鼠脊髓损伤后诱生型一氧化氮合酶 (iNOS)表达的影响.方法:采用改良 Allen's撞击法制备脊髓损伤模型;成年SD大鼠110只随机分为假损伤组、损伤组和药物治疗组3组,其中损伤组和药物治疗组各50只,分5个时间点(8小时、24小时、72小时、7天、14天)处死;假损伤组10只,于手术后14天处死,采用HE染色和免疫组化检测脊髓损伤后脊髓组织中 iNOS蛋白的表达.结果:与损伤组比较,药物治疗组大鼠损伤后脊髓组织 iNOS表达明显降低,差异有统计学意义 (P＜0.05).结论:褪黑素可通过抑制 iNOS蛋白表达对大鼠脊髓损伤起保护作用.【总页数】3页(P233-235)【作者】李东;武永刚;赵尔曼;杨秀玲;段力军【作者单位】包头医学院,内蒙古包头,014010;巴彦淖尔市医院;巴彦淖尔市医院;巴彦淖尔市医院;巴彦淖尔市医院【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.褪黑素对缺血再灌注后大鼠肝脏NF-κB表达及iNOS的影响 [J], 张楷;吴浩荣2.三七总皂甙对大鼠脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响 [J], 赵玉鑫;王洪;杨述华;袁文旗;李艳军3.二甲胺四环素对大鼠脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响 [J], 陈钢;梁群;陈安民;郭风劲;李江林4.环孢素A对大鼠急性脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响 [J], 郑竑;许卫红;曾清东5.大剂量甲基强地松龙对大鼠脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡的影响 [J], 敖强;吕德成;姜长明;关凤林因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

褪黑素对应激大鼠大脑核团c-fos表达的影响苏建军;李华丽;黄民;赵华【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2009(29)7【摘要】目的实验观察了褪黑素(MT)对应激性高血压大鼠大脑外侧缰核(LHb)、室旁核(PVN)和中央杏仁核(CeA)fos蛋白样免疫反应及γ-氨基丁酸A(GABA)受体阻断剂荷包牡丹碱(bicuculline,Bic)对褪黑素所引起的c-fos表达变化的影响.方法SD大鼠30只,随机分为正常对照组,应激1 h组,应激1 h+MT组,应激1h+Bic+MT组,应激1 h+Bic组.采用电击足底方法制备应激大鼠模型.结果与对照组相比,应激1 h组大鼠大脑LHb、PVN和CeA的FLI神经元显著增加,如果在应激前腹腔注射 MT,可抑制上述反应,而腹腔注射Bic 5 min后注射MT并再应激1 h,可抑制MT减少FLI神经元数量的效应.结论 MT可抑制电击足底应激所导致的c-fos表达的增加,其作用机制可能是通过GABA受体发生作用.【总页数】2页(P843-844)【作者】苏建军;李华丽;黄民;赵华【作者单位】吉林大学基础医学院生理教研室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院生理教研室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院生理教研室,吉林,长春,130021;吉林大学基础医学院生理教研室,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R363【相关文献】1.丙泊酚对大鼠大脑睡眠-觉醒相关核团c-fos蛋白表达的影响 [J], 薛兴;范坤;张晓兰2.慢性心理应激大鼠下丘脑环核苷酸和不同脑区核团c-fos蛋白表达及加味四逆散的影响 [J], 严灿;徐志伟;吴丽丽;王文竹;敖海清3.应激致高血压大鼠神经核团c-fos蛋白表达及细胞凋亡的研究 [J], 寇正涌;郝锡联4.褪黑素对大鼠视交叉上核中c-fos表达的影响 [J], 徐军;童建5.褪黑素对大鼠视交叉上核中c-fos表达的影响 [J], 徐军;童建因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

褪黑素对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡及锌转运体1的影响刘欣伟;柳云恩;张玉彪;訾英;安舒;周大鹏;项良碧;侯明晓【期刊名称】《创伤与急危重病医学》【年(卷),期】2015(3)5【摘要】目的研究褪黑素对大鼠急性脊髓损伤后脊髓细胞凋亡及锌转运体1(ZnT1)表达的影响.方法取SD大鼠54只,随机分为3组:假手术组、损伤组、褪黑素组,每组18只.术后12、24、48 h各组分别随机抽取6只大鼠,对脊髓标本进行HE染色、DNA断裂的原位末端标记法(Tunel法)检测细胞凋亡、免疫组化(IHC)及蛋白质印迹法(WB)检测ZnT1表达情况.结果损伤组HE染色显示部分神经元受损,存在细胞胞体膨大,结构不清晰,组织间隙充血,核缩且结构不清,凋亡小体存在.褪黑素组病理组织结构及细胞形态得到一定程度改善.假手术组凋亡较少.损伤组Tunel染色结果可见细胞凋亡率高于假手术组和褪黑素组;在12、24、48 h损伤组的凋亡率较假手术组明显增高,差异有统计学意义(P＜0.05);褪黑素组的细胞凋亡率较损伤组则明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);术后48 h在各组中均发现ZnT1表达,其中在褪黑素组中表达最明显,损伤组中的表达较假手术组增加不明显;WB检测结果可见添加褪黑素干预后,ZnT1表达较对照组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论褪黑素干预可以减轻受损脊髓的损伤程度并使ZnT1的表达上调,褪黑素为临床上治疗急性脊髓损伤提供了新思路.【总页数】5页(P287-291)【作者】刘欣伟;柳云恩;张玉彪;訾英;安舒;周大鹏;项良碧;侯明晓【作者单位】沈阳军区总医院骨科,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院全军重症战创伤实验室,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院全军重症战创伤实验室,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院全军重症战创伤实验室,辽宁沈阳110016;解放军第463医院急诊科,辽宁沈阳110042;沈阳军区兴城疗养院医务部,辽宁兴城125100;沈阳军区总医院骨科,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院骨科,辽宁沈阳110016;沈阳军区总医院全军重症战创伤实验室,辽宁沈阳110016【正文语种】中文【中图分类】R651.2【相关文献】1.运动训练对脊髓损伤后痉挛大鼠脊髓内钾-氯离子协同转运体2表达的影响 [J], 方露;李向哲;王红星;谢财忠;丁洁;王彤2.褪黑素对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响 [J], 魏福堂;夏春林;张洪涛3.褪黑素对大鼠脊髓损伤后肿瘤坏死因子-α表达的影响 [J], 徐玉生;张松;金伟林;李星晨;崔浩;王培松;文建国4.褪黑素对大鼠慢性压迫脊髓损伤Caspase-3表达及细胞凋亡的影响 [J], 潘文杰;汪玉良;王栓科;夏亚一;贺艳;李延宏;王景5.褪黑素对大鼠急性脊髓损伤后HO-1因子表达的影响 [J], 徐玉生;理阳;汪鑫;朱海洋;钟斌;李鹏辉;苏一帆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

褪黑素对脊髓损伤早期大鼠神经生长因子表达的影响徐玉生;马玉斐;李星晨;曾冠楠【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2012(047)003【摘要】目的:通过观察褪黑素(MT)对脊髓损伤(SCI)早期大鼠体内神经生长因子(NGF)表达的影响,探讨MT治疗SCI的机制.方法:60只成年SD大鼠随机分为3组:模型组、MT组和假手术组,每组20只.前2组以改良的Allen's WD法建立脊髓T12水平损伤模型,假手术组仅行椎板切除不损伤脊髓.MT组于术后10 min腹腔注射MT 100 mg/kg,模型组则腹腔注射等体积无水乙醇.术后12 h对3组大鼠进行BBB运动功能评分后处死,取血液检测NGF水平;取脊髓标本进行病理观察,RT-PCR法检测NGF mRNA,免疫组化SP法检测NGF蛋白.结果:模型组和MT组大鼠于术后均出现了严重的下肢神经功能障碍,2组的BBB运动功能评分差异无统计学意义(P>0.05).MT组脊髓组织病理变化较模型组减轻.3组大鼠脊髓内NGF mRNA、NGF蛋白表达水平和血清NGF水平差异均有统计学意义(F=336.819,321.762和122.707,P均<0.001),3者均在MT组中最高,SCI组次之,假手术组最低(P<0.01).结论:MT可通过提高SCI大鼠体内NGF的表达减轻SCI.%Aim: To investigate the potential mechanism of melatonin(MT) against spinal cord injury(SCI)by detecting the levels of nerve growth factor(NGF) at early stage of SCI in rats.Methods:A total of 60 SD rats were divided into 3 groups randomly:rats in SCI group and MT group were to make the SCI model by using modified Allen's WD method at T12 level,and receive intraperitoneal injection of MT or dehydrated alcohol,respectively;sham group was forlaminectomy only.12 h later, the function of the spinal cord was assessed by Basso Beattie Bresnahan locomotor rating scale (BBB scale),then the blood samples were taken to measure the serum levels of NGF,and the spinal cord was taken,histological examination was undertaken using HE,and NGF protein and mRNA were detected by immunohistochemical SP staining method and RT-PCR,respectively.Results:Severe lower limbs neurological dysfunction was observed in MT group and model group, but the difference between them in BBB scale had no statisticaldifference(P>0.05).The histopathological changes of MT group were improved compared with model group.The differences in NGF mRNA and protein expressions in spinal cord tissues,and NGF protein in serum were significant among the 3 groups(F=336.819,321.762 and122.707,P<0.001);sham group had the lowest level,and MT group had the highest level(P<0.01).Conclusion:MT could be used for SCI treatment based on its enhancement of NGF expression.【总页数】5页(P326-330)【作者】徐玉生;马玉斐;李星晨;曾冠楠【作者单位】郑州大学第一附属医院骨科,郑州,450052;郑州大学第一附属医院骨科,郑州,450052;郑州大学第一附属医院骨科,郑州,450052;郑州大学第一附属医院骨科,郑州,450052【正文语种】中文【中图分类】R683.2【相关文献】1.褪黑素对大鼠脊髓损伤早期MDA、SOD水平的影响 [J], 马玉斐;徐玉生;曹珺;陈香红2.褪黑素对急性脊髓损伤大鼠脊髓组织中 MPO 及 CINC-1表达的影响 [J], 苗金红;朱海洋;钟斌;崔浩;汪鑫;理阳;徐玉生3.褪黑素对大鼠脊髓损伤后肿瘤坏死因子-α表达的影响 [J], 徐玉生;张松;金伟林;李星晨;崔浩;王培松;文建国4.褪黑素对大鼠急性脊髓损伤后HO-1因子表达的影响 [J], 徐玉生;理阳;汪鑫;朱海洋;钟斌;李鹏辉;苏一帆5.褪黑素对急性脊髓损伤大鼠血清及脊髓内神经生长因子表达的影响 [J], 亓英国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

褪黑素对大鼠急性脊髓损伤后不同时期IL-10表达的影响徐玉生;李星晨;金伟林;马玉斐;曾冠楠;王培松【摘要】目的:探讨褪黑素对大鼠急性脊髓损伤后白细胞介素-10(IL-10)表达的影响,以及对损伤后炎症反应、神经修复的作用.方法:108只成年SD大鼠随机分为模型组、治疗组和对照组3组.前2组用改良的WD法建立T12脊髓损伤模型,对照组仅切除T12椎板不损伤脊髓.治疗组在脊髓损伤后10 min注射褪黑素(100mg/kg),模型组注射等量的体积分数5%乙醇.术后第1、2、3、5、7天对3组大鼠进行神经功能评分,检测血清中IL-10含量和脊髓中IL-10 mRNA的水平.3 d时各组选6只行主动脉灌流,后取脊髓进行HE染色,免疫组化SP法染色观察IL-10的表达特点.结果:模型组和治疗组大鼠术后均出现了严重的下肢神经功能障碍,BBB运动功能评分早期差异无统计学意义(P>0.05),术后3天、5天、7天两组运动功能评分差异有统计学意义(P<0.01).术后同时间点治疗组脊髓内IL-10 mRNA水平均高于模型组和对照组,这与血清中IL-10含量及表达IL-10阳性细胞数结果一致,均有治疗组最高、模型组次之、对照组最低,各组之间差异具有统计学意义(P<0.01);免疫组化见IL-10在中央管室管膜细胞、神经细胞、神经胶质细胞胞浆中分布较多.结论:褪黑素可能通过提高中央管周围内皮细胞、神经细胞、胶质细胞对IL-10的分泌来抑制脂质过氧化反应和炎症反应.%Aim:To explore the effects of melatonin ( MT ) on expression of interleukin-10( IL-10 )in acute spinal cord injury ( SCI) in rats, and to investigate the function of MT in the inflammatory response and nerve repair after acute SCI. Methods:A total of 108 Sprague-Dawley ( SD ) rats were randomly divided into 3groups:model group, treatment group and control group. The first two groups acute SCI model were established by using the modified Allen'sweight drop ( WD ) method at T12 level, and the control group was removed lamina only. At 10 min after the model establishment, 5% ethanol was given to the model group and 100 mg/kg of MT to treatment group. At 1d,2d,3d,5d,7d, the function of the spinal cord was assessed by Basso Beattie Bresnahan locomotor rating scale ( BBB scale ), the blood samples and spinal cord were obtained to measure the levels of IL-10 and IL-10 mRNA. At 3 d, 6 samples of spinal cord from aorta perfusion model were taken in each group for histological examination using HE and Immunohistochemical SP staining methods. Results:Rats of model group and treatment group showed severe lower limb neurological dysfunction after surgery. At 3 d,5 d and 7rnd, the difference between them in BBB scale had statistical difference ( P <0. 01 ). IL-10 mRNA levels of treatment group was highest at each time point, and it was consistent with the IL-10 levels at serum and the IL-10 positive cells. The difference between each two groups had statistical significant ( P < 0. 01 ), immunohistochemistry showed that more of IL-10 distributed at the cytoplasm of endothelial cell, nerve cells and glial cell. Conclusion:This study indicates that MT suppress lipid oxidation reactions and inflammatory response by increasing the secretion of IL-10 in central canal surrounding endothelial cell, nerve cells and glial cell.【期刊名称】《郑州大学学报（医学版）》【年(卷),期】2013(048)002【总页数】5页(P193-197)【关键词】脊髓损伤;褪黑素;白细胞介素-10;大鼠【作者】徐玉生;李星晨;金伟林;马玉斐;曾冠楠;王培松【作者单位】郑州大学第一附属医院骨科,郑州,450052【正文语种】中文【中图分类】R681.5+4脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)后大量的炎性细胞浸润和大量炎症细胞因子的产生是导致脊髓渐进性溃变的主要因素[1]。