光镊拉曼光谱在南极细菌低温降解石油烃中的应用
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拉曼光谱的原理和应用拉曼光谱是一种非常重要的光谱技术,它具有广泛的应用领域,包括材料科学、化学分析、生物医学等。
本文将介绍拉曼光谱的原理和应用,并探讨其在这些领域中的作用。
拉曼光谱是一种基于分子振动的光谱技术。
当光线照射到样品上时,一部分光被散射出去,而其中部分光子的能量被分子吸收并用于激发分子的振动。
被散射光的波长发生了移位,这种波长移位即为拉曼散射。
拉曼光谱通过测量这种波长移位,可以得到样品中的分子振动信息,从而揭示样品的结构和组成。
拉曼光谱有许多应用。
首先,它在材料科学领域中起着重要的作用。
通过测量拉曼光谱,我们可以分析材料的化学组成和结构特征。
例如,可以利用拉曼光谱来鉴定材料的纯度和晶体结构,监测材料中的杂质含量等。
此外,拉曼光谱还可以帮助研究材料中的微观缺陷和晶格畸变,对材料的物理性质进行探究。
其次,化学分析也是拉曼光谱的重要应用之一。
拉曼光谱可以用于快速、非破坏性的分析化学样品。
与传统的化学分析方法相比,拉曼光谱无需预处理样品,也不需要使用昂贵的试剂。
利用拉曼光谱,可以对各种化合物进行定性和定量分析,包括有机物、无机物和生物分子等。
例如,在药学领域,拉曼光谱被广泛应用于药品质量控制、药物成分分析和药效评估等方面。
此外,拉曼光谱在生物医学领域也有着广泛的应用。
通过测量生物分子的拉曼光谱,可以研究其结构和相互作用。
例如,可以利用拉曼光谱来探索蛋白质、核酸和糖类等生物分子的结构和功能。
此外,拉曼光谱还可以应用于生物医学诊断。
许多疾病的早期诊断和治疗需要准确的检测技术,而拉曼光谱由于其高分辨率和高灵敏度的特点,被认为是一种很有潜力的诊断工具。
除了上述领域,拉曼光谱还有许多其他的应用。
例如,在环境监测中,可以利用拉曼光谱来分析水和土壤中的污染物,监测环境污染的程度;在食品科学中,拉曼光谱可以用于检测食品中的添加剂和污染物,确保食品的质量和安全。
总之,拉曼光谱作为一种非常有价值的光谱技术,具有广泛的应用前景。
拉曼光谱技术及其应用进展
张曦;南瑞华;坚佳莹;李金华;龙伟;董芃凡
【期刊名称】《化学研究》
【年(卷),期】2024(35)1
【摘要】拉曼光谱作为一种无损分析方法,可以快速、精准地得到包括固体、粉末、液体、气体、胶体等不同类型样品的化学结构、相和形态、结晶度以及分子间相互作用等相关信息,因此被广泛应用于诸多领域。
本文介绍了拉曼光谱的基本工作原理;总结了近年来拉曼光谱在环境检测、材料、食品安全、医疗、刑侦司法、勘探、工业等领域的应用,以期为今后拉曼光谱检测领域更好地发展提供参考。
【总页数】15页(P1-15)
【作者】张曦;南瑞华;坚佳莹;李金华;龙伟;董芃凡
【作者单位】西安工业大学陕西省光电功能材料与器件重点实验室;西安工业大学
材料与化工学院
【正文语种】中文
【中图分类】O657.37
【相关文献】
1.原位低温拉曼光谱技术在人工合成CaCl2-H2O和MgCl2-H2O体系流体包裹体分析中的应用Ⅰ:低温拉曼光谱研究
2.拉曼光谱技术在单细胞表型检测与分选中的
应用进展3.拉曼光谱技术在早期肺癌诊断中的应用及其研究进展4.拉曼光谱技术
在法庭科学中的应用进展5.拉曼光谱编码技术及其应用研究进展
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拉曼光镊技术在不同细胞中应用的进展吴智辉;莫华【期刊名称】《中国医学物理学杂志》【年(卷),期】2009(026)006【摘要】目的:引入并介绍拉曼光谱、光镊的物理原理及其工作特点.结合详细的医学研究工作,总结了拉曼光镊技术在不同细胞领域的具体应用情况.方法:采用光镊固定活细胞,同时应用激光拉曼技术对活细胞进行活细胞或细胞器的拉曼光谱测定,应用此技术俘获悬浮液中的样品,在接近生理状态下研究单个活体,如细胞、细胞器或生物大分子,对研究对象的生理生化过程可进行实时跟踪,进而对活细胞进行拉曼光谱测定.结果:光镊拉曼光谱技术从单细胞水平分析正常人红细胞和地中海贫血患者的红细胞的携氧能力和形变能力,实现对不同物种血红细胞和血小板鉴定;拉曼光谱技术在分子水平上揭示癌细胞组织结构与正常细胞组织结构之间的差异,为癌症诊断和机理分析提供重要的信息和数据:拉曼光谱技术实现了DNA分子的扭转和打结,并实现了对人类染色体操控和鉴别.结论:拉曼光镊技术是实时研究细胞生理、生化变化的快捷而有效的工具,有望成为在分子水平上对各种活细胞的检测、诊断的先进工具,具有非常广阔的前景.【总页数】6页(P1554-1558,1569)【作者】吴智辉;莫华【作者单位】广西医科大学物理学教研室,广西,南宁,530021;广西医科大学物理学教研室,广西,南宁,530021【正文语种】中文【中图分类】Q631【相关文献】1.拉曼镊子在生物单细胞中的应用与进展 [J], 艾敏;刘军贤;黄庶识;王桂文;陈秀丽;陈植成;姚辉璐2.激光光镊拉曼光谱技术在生物医学上的应用及进展 [J], 李志华;郑祖赐;翁存程;林多;王启文;冯尚源3.光镊技术在生物学中的应用新进展 [J], 周瑞雪;王海燕;朱德斌;胡小文;邢晓波4.拉曼光谱技术在鉴别瑞氏-姬姆萨染色的肿瘤细胞与正常细胞中的应用 [J], 李浩;于华杰;李胜;韩露;沈阳洋5.拉曼光谱技术在恶性骨肿瘤患者红细胞中的研究应用 [J], 李和仙;刘伟;赵元黎;王丽君;张彦陟因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
低温拉曼光谱法的光学机制研究低温拉曼光谱法指的是在极低温下对物质进行拉曼光谱分析的技术。
通过冷却样品至极低温,可以在拉曼散射光谱中观察到更多的谱线,有助于研究物质的结构和性质。
本文将从光学机制的角度探讨低温拉曼光谱法的研究意义。
1. 什么是低温拉曼光谱法?光谱分析是物理和化学学科中广泛应用的一种方法,用于研究物质的结构和性质。
拉曼散射光谱是其中的一种,通过观察样品被激光照射后的散射光谱,可以了解样品的分子结构和振动状态。
在高分辨率光谱仪的支持下,可以在拉曼光谱中观察到非常细微的变化,对于研究物质的微观结构和性质具有重要意义。
低温拉曼光谱法是一种在极低温下对样品进行光谱分析的技术。
通常将样品冷却至液氮温度以下,这样可以消除热振动对拉曼谱线的干扰。
在低温下,样品的分子振动状态将发生显著变化,有助于研究分子间的相互作用、离子-配体结合等现象。
2. 光学机制的意义低温拉曼光谱法的光学机制与普通拉曼光谱不同,主要体现在两方面:散射光谱的强度和谱线位置。
这些差异是由样品的温度、密度、折射率、粘度等参数的变化所导致的。
因此,低温拉曼光谱法是一种有利于研究样品的物理和化学性质的手段。
2.1 光学信号的强度在低温条件下,样品的分子振动状态会发生变化,不同的振动模式会产生不同的拉曼散射光谱。
一些振动模式在低温下会显著增强,因为它们的振动状态受到周围环境的阻碍,处于能级极低的状态。
例如氢键和范德华力引起的离子-配体配位反应,在低温下会使振动态密度降低,导致拉曼散射光强度增强,并且谱线明显变化。
实验也证实了这种现象。
比如,研究氢键和范德华相互作用对于蛋白质和DNA中的结构和相互作用具有重要意义。
低温拉曼光谱法可用于研究药物和小分子化合物与生物大分子间的相互作用等。
2.2 谱线位置的变化低温下,物质的温度降低,明显减小了分子的热振动,因此拉曼散射光谱中谱线会随之偏移。
在低温下研究样品的光学机制,有助于解决高分子和配位化合物领域的问题。
拉曼光谱仪在各领域的重要应用什么是拉曼光谱仪拉曼光谱法是一种分析化学及物理学领域常用的实验方法,它利用拉曼散射现象研究物质的结构、振动、结晶状态而具有广泛的应用价值。
拉曼光谱仪是用于实现拉曼光谱测量的仪器设备,它可以测量分子的振动能量,对物质的结构、状态、蜕变等变化进行分析。
拉曼光谱法与其他谱学分析方法相比,具有非接触、非破坏、非损伤等显著的特点,因此被广泛应用于化学、生物学、物理学、地质学等领域。
化学领域中的应用拉曼光谱法在化学领域中有着广泛的应用。
首先,它可以以非常小的样本量测量样品分子的元素成分、排列方式及分子之间的相对位置,这对化学分析十分关键。
另外,拉曼光谱分析也可以快速确定材料配方和物质结构等信息。
例如,可通过拉曼光谱分析药品、肥料、黄油等生产中的产品质量及材料等因素的影响与变化。
而且,利用拉曼光谱分析,可以对化学反应过程、催化剂、液晶、纳米材料及聚合物等进行表征,为相关领域的研究提供帮助。
生物学领域中的应用另一个重要的应用领域是生物学。
通过利用拉曼光谱法,可以测量生物分子、细胞及组织等的振动光谱,从而对它们的结构、组成及功能进行研究。
例如,利用拉曼光谱法可以了解脂质、蛋白质、核酸及其他生物大分子的结构及分子间相互作用的情况,并在体内监测和定量细胞生物发生的过程。
这种方法十分有用,可以在无需外部标记,也无需破坏性得到样品内部及表面同时的信息,这可成为疾病诊断及生命科学研究的重要手段。
物理学领域中的应用除此之外,拉曼光谱法还在物理学领域广泛应用。
例如,通过拉曼光谱分析可以检测晶体的结构,探测晶格振动、自由载流子等不同物理过程,从而研究物质的带电载流子性质,比如半导体物质的性能表征与优化,吸收跃迁、电子自旋及配位相互作用等物理过程。
拉曼光谱法也可用于辅助多相体系的高压实验分析。
地质学领域中的应用最后,地质学领域中也应用拉曼光谱法。
由于地球所包含物质的复杂性,常规地学方法往往难以处理。
然而,利用拉曼光谱法,可以测量地球物质的成分及状态信息,分析矿物、火山岩、沉积岩等的组成和结构等,对于研究地质来说尤为重要。
拉曼的用途拉曼效应是一种利用激光光谱学技术研究物质的非常重要的方法。
拉曼光谱学通过测定物质散射光的频移来获取物质的信息,这些频移是由于光与物质相互作用而产生的。
拉曼光谱学具有非常广泛的应用领域,涵盖了化学、物理、地质、生物、医学等多个学科。
下面将介绍拉曼光谱学在不同领域的应用。
首先,拉曼光谱学在化学领域有着广泛的应用。
拉曼光谱可以用于化学物质的鉴定和分析。
每个分子都有其特有的拉曼光谱,通过测量物质的拉曼光谱可以确定其化学成分和结构。
拉曼光谱还可以用于监测化学反应的过程和产物,研究反应机理。
此外,拉曼光谱还可以用于检测化学物质的微量污染和溶液中的离子浓度。
在材料科学领域,拉曼光谱学也是非常重要的研究手段。
通过拉曼光谱可以研究材料的晶格结构、晶格动力学和缺陷等性质。
拉曼光谱可以用于鉴定材料的相变和晶格畸变,可以确定材料的晶体结构和晶体取向。
此外,拉曼光谱还可以用于研究材料的光学性质,包括吸收、发射和散射等光学过程。
地质学是拉曼光谱学的另一个重要应用领域。
拉曼光谱可以用于地质样品的鉴定和分析。
通过拉曼光谱可以确定地质样品的矿物成分和结构。
拉曼光谱可以用于鉴定岩石、矿石和沉积物中的矿物种类和含量。
此外,拉曼光谱还可以用于研究地质样品的形成和演化过程,如岩石变质和矿物的晶格动力学。
在生物学和医学领域,拉曼光谱学也是一种非常有潜力的分析技术。
拉曼光谱可以用于研究生物分子的结构、构象和相互作用。
通过测量生物组织和细胞的拉曼光谱,可以确定其分子成分和状态。
拉曼光谱还可以用于检测生物分子的变性和折叠以及蛋白质、核酸和糖类等生物分子的结构和功能变化。
此外,拉曼光谱还可以用于诊断和监测疾病,如癌症、心脑血管疾病和传染病等。
此外,拉曼光谱在环境科学、食品科学、文物保护等领域也有广泛的应用。
拉曼光谱可以用于检测大气中的气体污染物和颗粒物,监测环境中的化学物质和微生物。
在食品科学中,拉曼光谱可以用于检测食品中的成分、添加剂和污染物。
拉曼光谱技术的应用及讨论进展拉曼光谱是一种散射光谱,它是1928年印度物理学家C.V.Raman发觉的。
拉曼光谱作为一种物质结构的分析测试手段而被广泛应用,尤其是60时代以后,激光光源的引入、微弱信号检测技术的提高和计算机的应用,使拉曼光谱分析在很多应用领域取得很大的进展。
目前,拉曼光谱已广泛应用于材料、化工、石油、高分子、生物、环保、地质等领域。
就分析测试而言,拉曼光谱和红外光谱相搭配使用可以更加全面地讨论分子的振动状态,供给更多的分子结构方面的信息。
1拉曼光谱的应用拉曼光谱是讨论分子振动的一种光谱方法,它的原理和机制都与红外光谱不同,但它供给的结构信息却是仿佛的,都是关于分子内部各种简正振动频率及有关振动能级的情况,从而可以用来鉴定分子中存在的官能团。
分子偶极矩变化是红外光谱产生的原因,而拉曼光谱是分子极化率变化诱导的,它的谱线强度取决于相应的简正振动过程中极化率的变化的大小。
在分子结构分析中,拉曼光谱与红外光谱是相互补充的。
例如:电荷分布中心对称的键,如C—C、N=N、S—S等,红外汲取很弱,而拉曼散射却很强,因此,一些在红外光谱仪无法检测的信息在拉曼光谱能很好地表现出来。
拉曼光谱还可测定分子的退偏比,利于弄清分子的对称性等。
这在结构分析中是特别有用的。
拉曼的缺点是检测灵敏度特别低。
在电化学讨论中该缺点尤为突出,由于典型的电化学体系是由固—液两个凝集相构成的,表面物种信号往往会被液相里的大量相同物种的信号所掩盖。
1.1用于聚合物中的讨论随着CCD探头和光纤在FT—拉曼光谱中的应用,使信噪比、光谱范围和精度大大加添。
广义二维FT—拉曼相关光谱和带色散仪及多道探测器的近红外FT—拉曼光谱得到快速进展,以及多变量分析法的应用使拉曼光谱可应用于过程监控和定量分析,这使拉曼技术在高分子科学中起着越来越紧要的作用。
通常用红外光谱讨论含氢键的聚合物相容性。
无氢键的聚合物共混物内的特别相互作用的振动光谱讨论很少有报道。
拉曼光谱原理及应用一、拉曼光谱原理拉曼光谱其实是一种很神奇的东西呢。
简单来说呀,当光照射到分子上的时候,会发生散射现象。
大多数的散射光和入射光的频率是一样的,这叫瑞利散射。
但是有一小部分的散射光,它的频率会发生变化,这个就是拉曼散射啦。
这是因为分子在光的作用下发生了振动,导致能量有了变化,从而让散射光的频率变了呢。
分子的不同振动模式就对应着不同的拉曼频率位移,就像每个分子都有自己独特的“指纹”一样。
二、拉曼光谱的应用1. 在化学领域的应用在有机化学里呀,拉曼光谱可以用来确定分子的结构。
比如说有一个新合成的有机化合物,科学家们就可以用拉曼光谱来看看它的化学键啊,官能团之类的。
因为不同的官能团会有不同的拉曼峰位,就像不同的人有不同的身份证号一样准确。
在无机化学中,它能帮助研究无机化合物的晶体结构。
像研究一些金属氧化物,拉曼光谱就能告诉我们这些氧化物里原子的排列方式,是不是很厉害呢?2. 在材料科学中的应用对于新材料的研发,拉曼光谱可是个得力助手。
比如说研究石墨烯这种超级厉害的材料,拉曼光谱可以检测它的层数。
层数不同,拉曼光谱的特征峰就会不一样哦。
在检测材料的应力和应变方面也很有用。
当材料受到外力作用的时候,它的分子结构会发生变化,这种变化就可以通过拉曼光谱反映出来。
就好像材料在向我们诉说它的“委屈”一样。
3. 在生物医学领域的应用在疾病诊断方面有很大的潜力。
比如说检测癌细胞,癌细胞和正常细胞的分子结构是不一样的,拉曼光谱就能捕捉到这种差异,从而帮助医生更早地发现癌症。
在药物研发中也能发挥作用。
可以用来研究药物和生物分子之间的相互作用,就像是在给药物和生物分子之间的“约会”当侦探一样。
4. 在环境科学中的应用检测环境中的污染物。
比如水中的有机污染物,拉曼光谱可以快速地识别出污染物的种类,就像一个超级灵敏的环境卫士。
研究大气中的气溶胶成分。
拉曼光谱能够分析气溶胶里都有哪些物质,这对我们了解大气污染的来源和形成机制是很有帮助的。
拉曼光谱的应用领域拉曼光谱是一种非常重要的光谱分析技术,它可以快速、准确地识别和分析复杂物质的结构以及化学成分。
在过去的几十年里,拉曼光谱已经被广泛应用于许多领域,例如材料科学、化学、生物医学、环境科学等。
本文将介绍拉曼光谱在这些领域中的应用。
材料科学拉曼光谱在材料科学中的应用已经非常广泛,因为它可以提供材料的化学成分、晶体结构、晶格振动以及表面情况等信息。
例如,可以利用拉曼光谱分析碳纳米管的直径和壁厚,检测聚合物的有序性和无序性,判断光伏材料的晶体结构和杂质含量等。
此外,拉曼光谱可以实时监测材料中的相变、晶化和形貌变化,因此被广泛应用于纳米材料、超硬材料和生物材料的研究中。
例如,可以利用拉曼光谱研究生物骨骼材料的成分和结构,探测纳米颗粒的表面性质和形貌等。
化学在化学领域中,拉曼光谱可以用于分析物质的化学键、官能团和分子基团等信息,以及分析反应速率和活化能等参数。
它可以直接检测稳定和不稳定分子的振动信息,并提供有关分子电子结构的重要信息。
拉曼光谱可用于快速、准确地分析气体、液体和固体样品。
例如,可以利用拉曼光谱分析空气中的氧气、氮气和水蒸气的含量,分析酸碱度、酸化度等化学指标,同时可检测化合物的稳定性和热稳定性等。
生物医学拉曼光谱在生物医学领域的应用也是非常广泛的。
它可以用于分析细胞、组织、体液以及生物分子如蛋白质、核酸等的化学成分和结构信息。
在药物研发和药效评价中,拉曼光谱可以用于研究药物与受体分子的相互作用以及药物的吸收、分布、代谢和排泄等生物药理学过程。
此外,拉曼光谱还可用于血液、头发等生物硬质组织的检测,从而实现生物标本的快速分析和病理诊断。
利用拉曼光谱技术检测癌细胞的组成和代谢状态,进一步可以实现快速、准确地癌症筛查和诊断。
环境科学在环境科学领域,拉曼光谱广泛应用于土壤、水和大气等介质的污染检测和监测。
它可以用于检测水体中的有机物、无机物和重金属等污染物的类型和含量,还可以分析土壤和大气中的化学物质和污染物等。
拉曼光谱在生物科学中的应用拉曼光谱是一种非常有用的分析技术,它在生物科学领域中的应用日益广泛。
本文将探讨拉曼光谱在生物科学中的几个重要应用领域,包括蛋白质结构研究、药物开发和细菌检测。
在蛋白质结构研究方面,拉曼光谱提供了一种非常有力的工具,用于研究蛋白质的二级结构和三级结构。
由于拉曼光谱可以提供关于分子振动和化学键的信息,因此可以在没有添加任何标记物的情况下对蛋白质进行直接分析。
通过测量蛋白质的拉曼光谱,我们可以了解到其结构、构象和折叠状态等关键信息。
这种非侵入性技术使得我们可以在活体系统中进行研究,为了更好地理解蛋白质的功能和相互作用。
拉曼光谱还在药物开发领域发挥着重要作用。
在药物研究中,拉曼光谱可以用于研究药物与其靶标之间的相互作用。
通过对两者之间的拉曼光谱进行对比分析,研究人员可以了解到药物的结合位置、结合强度以及药物对靶标结构的影响等信息。
这有助于我们更好地理解药物的作用机制,并为药物设计和优化提供指导。
另一个重要的应用领域是细菌检测。
拉曼光谱可以用来对细菌进行快速且准确的鉴定。
每种细菌的细胞壁和细胞内物质都具有独特的拉曼光谱特征,这使得我们可以通过检测细菌样品的拉曼光谱来进行鉴定。
与传统的细菌鉴定方法相比,拉曼光谱具有快速、无需培养、无需特殊标记等优势。
这使得拉曼光谱成为一种有潜力的用于快速细菌检测的技术。
除了以上几个应用领域,拉曼光谱还在其他生物科学研究中发挥着重要作用。
例如,在肿瘤诊断和治疗监控中,拉曼光谱可以用来检测肿瘤细胞中的代谢产物和蛋白质表达情况,从而为临床医生提供有关肿瘤类型、进展和治疗效果的信息。
在植物科学研究中,拉曼光谱可以用来研究植物的生理状态、代谢通路以及对环境胁迫的响应。
总之,拉曼光谱在生物科学领域中有着广泛的应用。
它为我们提供了非侵入性、快速且准确的分析手段,有助于我们更好地理解生物体系的结构和功能。
随着技术的不断发展,相信拉曼光谱在生物科学中的应用前景将更加广阔。
光镊拉曼光谱在南极细菌低温降解石油烃中的应用
摘要光镊拉曼光谱技术(LTRS)是将光学囚禁技术与显微拉曼光谱技术相结合,用同一束光来实现囚禁单个悬浮细胞并激发细胞分子的拉曼光谱。
利用LTRS系统,可以实现对单个南极石油烃降解嗜冷菌细胞内的生化代谢过程的实时监测,了解其参与石油烃分解代谢的过程,获知单个细胞内部生化分子变化与环境变化的相互关系,更好的了解其降解机制。
关键词光镊拉曼光谱技术;南极细菌;石油烃;低温降解
1光镊拉曼光谱技术特点
激光拉曼光谱法被公认为是研究生物大分子结构、动力学和功能的有效方法,是生命科学研究领域很有应用潜力的工具。
从拉曼光谱特征峰的位置、强度和线宽可以获得样品的分子组成及结构信息,拉曼光谱已成为研究物质分子结构的有效手段。
共焦显微拉曼光谱技术可以研究单个细胞甚至细胞器,但由于人为的用物理或化学手段固定研究对象,细胞周围的环境发生改变,甚至细胞死亡,对细胞的生理带来了未知的影响。
最近,光镊拉曼光谱技术(laser-tweezers-Raman-spectroscopy,LTRS)的出现,使人们可以在接近自然的生理状态下研究单个悬浮细胞或细胞器[1,2]。
LTRS是将光学囚禁技术与显微拉曼光谱技术相结合,用同一束光来实现囚禁单个悬浮细胞并激发细胞分子的拉曼光谱,其原理是利用高度汇聚的激光束产生的梯度力囚禁溶液中的活细胞,使之固定在激光微束中,再通过瞬时增强的光束来激发细胞内分子的拉曼光谱,从而实时获得该细胞的拉曼光谱及其生化性质。
由于细胞被囚禁在光束焦点位置,共焦光路优化了散射光的收集,从而可获得高灵敏度。
选用适当的激光波长、功率和激发时间,激光束不会伤害细胞,被囚禁的细胞依然悬浮在不受干扰的环境中,得到的是接近自然生理状态的单个活细胞的拉曼光谱。
2LTRS在单细胞中的应用情况
光镊拉曼光谱技术可以在接近自然的生理状态下研究单个细胞或细胞器,探索接近生理状态下的单细胞生命活动,可以无损地提供丰富的分子结构和物质成分的信息,是一种很有应用潜力的工具,正在生命科学研究领域广泛应用。
目前,光镊拉曼光谱技术已用于研究溶液中单个活体的红细胞、细菌和酵母等,得到不同细胞的高质量的拉曼光谱,使得研究溶液中的单个活细胞的生化性质成为可
能。
Tang等[2]利用光镊拉曼光谱技术研究了火炬松转基因细胞系的单细胞拉曼光谱特征。
LTRS系统可以成为区别癌细胞与正常细胞的有效手段。
杨文沛等[3]利用LTRS系统测量了单个肝癌细胞的拉曼光谱,并利用多元统计分析方法对光谱进行分析,从而建立一个识别正常细胞和癌细胞的数学模型,表征了单个肝癌细胞与正常细胞的差异。
岳粮跃等[4]利用LTRS系统对红细胞冻存前后的变化,以及对红细胞被解冻后在不同溶液中的变化情况进行了拉曼光谱研究。
王桂文等[5]研究表明,LTRS 系统可以研究单个血小板细胞的拉曼光谱,并可以区分不同物种的血小板,是研究溶液中接近自然生理状态下小生物体、细胞的有力工具,为进一步研究血小板的生理生化反应提供了良好的实验基础。
王桂文等[6]采用LTRS系统,在水溶液中直接俘获单个伴孢晶体,并收集其拉曼光谱信号,得到群体伴孢晶体的分子结构和群体内各晶体蛋白之间的信息。
该方法免去了复杂的纯化过程,为Bt伴孢晶体蛋白的研究提供了一种快速简便、可以洞悉群体内单个晶体蛋白结构差异的手段。
王桂文等[7]利用LTRS系统观察活性干酵母单细胞活化过程,记录了干酵母单细胞的生长现象,既可实时观察单个细胞活化过程的光谱变化,又可获知细胞间的差异。
3LTRS在南极细菌低温降解石油烃中的应用
极地石油污染已成为一个普遍而严重的问题。
在最近十几年里,人类在极地的活动日益频繁,大量的柴油、润滑油和原油进入海水中,人为给极地海洋造成了烃污染,石油烃已经成为极地海洋生态系统中的主要污染物。
由于极地海洋常年处于低温状态,短链石油烃蒸发缓慢,长链烃凝为固体,使有机污染物持久存在,对当地生物资源及生态环境的危害很大。
因此,对低温环境下石油烃降解的研究十分重要,而生物降解以其高效、安全日益受到人们的重视。
微生物群落对石油烃的生物降解是清除污染物的一个主要机制。
南极嗜冷菌在低温海洋环境中可以高效降解石油,当南极生态系统被石油烃污染后,能降解石油烃的土著微生物便开始迅速生长,以适应被污染的环境[8]。
环境因素和生物因素决定了石油烃生物降解的速率和程度。
在极地海洋生态系统中,石油烃的降解涉及到的主要环境因素是温度。
温度影响石油烃的物理性质和化学组分、微生物的代谢速率和微生物群落组成,间接对烃的降解速率产生影响,研究表明南极细菌在20℃对石油烃的降解率高于4℃。
然而,低温时细菌对石油烃的降解虽然缓慢,但是经过一段时间后,降解率与常温下并无区别,这表明低温仅仅延迟了降解时间,并不影响最终的降解率[9]。
迄今,已发现的南极烷烃低温降解菌较少,对其研究也均以菌株的鉴定、催化反应和降解组分分析为主[10]。
对烷烃低温降解过程中南极菌单个细胞的内部生化分子变化及其参与烷烃代谢的机制还不清楚,这些基本问题都亟需研究。
拉曼光谱为获知单个细胞内部生化分子变化与环境变化的相互关系提供了有力的工具,从拉曼光谱的特征峰的位置、强度和线宽可以获得样品的分子组成
及结构信息。
近年来,已有学者用拉曼光谱技术对南极微生物细胞的实地生命活命活动进行研究,鉴定了一些化合物,并探明其在微生物适应南极极端环境中的作用和机制[11],这些对南极微生物细胞生命活动的认识通常都是通过研究其群体样品而得到的统计平均信息,不能探索接近生理状态下的单细胞生命活动。
而LTRS技术可以在接近其自然的生理状态下研究单个细胞或细胞器,可以实时观察单个细胞或细胞器的生物化学过程,或判别不同类型、不同状态的细胞,获知很多掩盖在群体平均信息下的个体生命信息。
细胞处于溶液中,其生理活性不受影响,可以实现长时间对同一个细胞进行监测。
将LTRS技术应用于石油烃微生物低温降解的研究,可以了解石油烃低温降解过程中单个南极细菌细胞如何协调能量、细胞生长与烷烃降解三者的关系,从单个细胞水平获得对南极细菌低温降解石油烃的新认识,获知单个细胞内部生化分子变化与环境变化的相互关系;可以实时监测单个南极细菌细胞低温降解石油烃的动态过程,并可以结合光镊进行细胞分选;还可以同时记录石油烃低温降解过程胞内、胞外的实时石油烃浓度,这是其他方法无法实现的。
因此,应用单细胞激光镊子拉曼光谱技术研究石油烃微生物的低温降解,可以更好的了解其降解机制,这对低温海洋环境中石油污染物的消除和环境修复具有重要意义。
4参考文献
[1] XIE CA,Li Y Q,TANG W,et al. Study of dynamical process of heat denaturation in optically trapped single microorganisms by near-infrared Raman spectroscopy[J].Journal of Applied Physics,2003(94):6138-6142.。