1.2.1 DNA标记鉴定法
SSR:它最早是用于测定DNA序列的研究 上。用RFLP探针两端重复序列合成特异性 引物,再进行PCR,扩增多态性DNA片段,将 繁琐的RELP分析转换成了简单的PCR反 应 ,操作难度较低,但由于它需要先知道 DNA序列,在实际应用中受到很大限制。
2、蛋白质电泳原理
3.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)
•原理:是根据被分离物质所带的电荷多少及其分子大小、 形状的不同,在电厂的作用下,产生不同的移动速度而 分离的方法。它具有电泳和分子筛的双重作用。 •聚丙烯酰胺凝胶,是由丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺在 催化剂的作用下,通过自由基引发聚合反应,形成不 带电荷、且具有分子筛性质的网状结构凝胶。 通常聚丙稀酰胺凝胶电泳包括: PAGE(非变性)、 SDS-PAGE(变性)
1.1 常规鉴定方法
1.1.1 田间小区种植鉴定 :田间小 区种植鉴定是鉴定品种真实性和测 定品种纯度最为可靠、准确的方法, 比较接近生产实际。但所需周期长, 成本高。而且许多性状表现常常受 栽培措施及环境因子的影响。
1.1 常规鉴定方法
1.1.2 物理化学快速鉴别法 :根据 种子在某些特殊的化学试剂或其它 特殊条件下,产生特定的反应,鉴定 品种的纯度。此方法快速、简便,但 因特异反应很有限,应用范围受到很 大限制。只能适用某些作物种子。
1两种技术,重复性好,多态性极高, 探测位点多的优点 ;技术要求高,设备昂贵,在纯度鉴 定应用上受到很大限制。
RAPD:优点:操作简单,周期短,成本较低,对 DNA的纯度显示不高,RAPD引物通用性。但 有结果不稳定,重复性差,各实验室结果没有可 比性等缺陷。
B-保持系
A-不育系 R-恢复系 F1-杂种
4个杂交稻盐溶液SDS-PAGE图谱