作物种子纯度及真实性检验的电泳方法

种子纯度检验是质量检验的中心，是对一批玉米种子中个体与个体之间在特征特性方面典型一致性程度的检验和种子真实性的鉴定。

一般有田间检验、室内检验和种植检验三种。

1.品种纯度田间检验田间检验是三大检验的重中之重。

种子质量的高低主要是在田间生产过程中形成的，做好制种田间检验对于确保种子质量显得格外重要。

要想做好田间检验，要做到以下几点：①掌握被检品种组合亲本各生育期的特征特性，收集有关地区主要品种组合同名异源亲本种子、植株标准样品、有关资料和图册。

②掌握最佳田检时期。

一般分苗期、花期和成熟期三期进行，花期是关键。

苗期检验性状为幼苗叶色、叶鞘颜色、叶型，花期为株高、茎秆粗细、叶片形状、叶片数及上冲程度、花药色、花丝色、雄穗护颖颜色及主轴长度、分枝多少等，成熟期为穗位高低、双穗率、穗型、穗轴颜色、粒型、粒色、果穗苞叶长度等。

③掌握安全隔离。

无论是空间隔离、时间隔离或障碍物隔离，一定要控制外来花粉干扰，防止生物学混杂。

④掌握正确的田检方法。

在对基本情况了解的前提下，要正确划分检验区和设点取样。

一个检验区的最大面积为33.3公顷；0.7公顷以下5点取样,0.7～6.7公顷为8点取样,6.7～13.3公顷为11点取样,13.3～33.3公顷为15点取样。

每点最株数不低于200株。

取样点分布方式因地块形状和大小可选择棋盘式、梅花式或方格式等，但取样点距地块边缘必须在5米以上。

2.品种纯度室内检验种子在收获、脱粒、加工等过程中都有可能造成机械混杂，因此，在田检基础上必须进行品种真实性和一致性检验。

室内检验杂交玉米种子纯度常用的方法主要有籽粒形态法、幼苗形态法和电泳法。

①种子形态鉴定法是根据粒色、粒型、粒质、顶部凹陷和饱满状况、胚的形状与大小、籽粒表面圆滑程度、棱角的有无、稃色和花丝遗迹等特征进行鉴定的。

其特点是快速、简单、经济。

但因主要依据籽粒外部形态特征，由感官鉴别，对一些外部形态差异不大的品种鉴别准确性较差，在应用上存在一定的局限性。

农作物种子检验规程---真实性和品种纯度鉴定1 主题内容与适用范围本标准规定了测定种子真实性和品种纯度的方法。

本标准适用于农作物种子质量的检测。

2 引用标准GB／T 3543. 2 农作物种子检验规程扦样GB／T 3543．4 农作物种子检验规程发芽试验3 术语3. 1 种子真实性genuineness of seed供检品种与文件记录(如标签等)是否相符。

3．2 品种纯度varietal purity品种在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数占供检本作物样品种子数的百分率表示。

3．3 变异株off-type—个或多个性状(特征特性)与原品种育成者所描述的性状明显不同的植株。

3．4 育种家种子breeder seed育种家育成的遗传性状稳定的品种或亲本种子的最初一批种子，用于进一步繁殖原种种子。

3．5 原种basic seed用育种家种子繁殖的第一代至第三代，或按原种生产技术规程生产的达到原种质量标准的种子，用于进—步繁殖良种种子。

3．6 良种certified seed用常规种原种繁殖的第—代至第三代和杂交种达到良种质景标准的种子，用于大田生产。

4 试剂苯酚，愈创木酚、过氧化氢、氢氧化钾、氢氧化钠，氯化氢。

5 仪器和设备其仪器设备也随方法的差异而不同。

a.在实验室中测定配备适宜的仪器(如体视显微镜、扩大镜、解剖镜)与试剂，以供种子形态、生理及细胞学的检查、化学测定及种子发芽之用。

b. 在温室和培养室中测定配备能调节环境条件的设备(如生长箱)，以利诱导鉴别性状的发育。

c. 在田间小区里鉴定需具有能使鉴定性状正常发育的气候、土壤及栽培条件，并对防治病虫害有相对的保护措施。

6 测定程序6．1 送验样品的重量品种纯度测定的送验样品的最小重量应符合表1的规定。

表1 品种纯度测定的送验样品重量g种类限于实验室测定田间小区及实验室测定豌豆属、蚕豆属、玉米属、菜豆属、玉米属、大豆属及种于大小类似的其他属1000 2000水稻属、大麦属、燕麦属、小麦属、黑麦属及种子大小类似的其他属500 1000甜菜属及种子大小类似的其他属250 500所有其他属l00 2506．2 种子鉴定6．2. 1形态鉴定法随机从送验样品中数取400粒种子，鉴定时须设重复，每个重复不超过100粒种子。

水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用水稻是世界上最重要的粮食作物之一，对水稻的品质的鉴定和研究对于提高水稻产量、提高品质至关重要。

水稻清蛋白电泳鉴定方法是一种常用的鉴定水稻清蛋白组分的方法，具有灵敏度高、分辨率高、操作简便等优点。

本文将详细介绍水稻清蛋白电泳鉴定方法及其应用。

水稻的清蛋白主要由谷蛋白、珍珠蛋白和球蛋白等组成。

水稻清蛋白电泳鉴定方法主要利用电泳原理和分子量差异，通过将水稻清蛋白样品分离电泳，进而确定水稻清蛋白的组成及其分子量。

具体步骤如下：1. 样品准备：将水稻籽粒研磨成细粉后，加入适量的提取缓冲液使其成为悬浮液。

悬浮液中的水稻清蛋白将被释放到缓冲液中。

2. 样品处理：将悬浮液离心，去除杂质。

取上清液后，进行加热处理，以去除一些非特异性蛋白质。

3. 准备电泳胶：根据需要选择合适的电泳胶，如聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）或聚丙烯酰胺凝胶双隔离梯度电泳（SDS-PAGE）。

4. 样品加载：将上一步得到的样品按照一定比例和一定量加载到电泳胶中。

5. 电泳：将电泳胶放入电泳槽中，加入适量的电泳缓冲液，连接电源进行电泳。

根据需要选择合适的电泳条件，如电流、电压和电泳时间等。

6. 显色：电泳结束后，将电泳胶取出，进行染色和显色。

常用的染色方法有银染色、考马斯亮蓝染色等。

7. 分析和解读：使用分子量标记物作为参照，通过对电泳胶的显色带进行分析和解读，确定水稻清蛋白的组成及其分子量。

1. 鉴定水稻品种的谷蛋白和珍珠蛋白的组成及其分子量，有助于评估水稻品种的营养价值和加工品质。

2. 研究水稻谷蛋白和珍珠蛋白的多态性和遗传变异，为选育高蛋白水稻品种提供理论依据。

3. 分析不同品种的水稻在谷蛋白和珍珠蛋白组分上的差异，为选育不同用途的水稻品种提供参考。

4. 研究环境因素对水稻谷蛋白和珍珠蛋白的组成和含量的影响，了解环境因素对水稻品质的影响机制。

玉米种子纯度鉴定方法
提高玉米产量的关键在推广高纯度的良种。

杂交组合的优劣以及杂交种纯度极大地影响产量，而假劣种子的危害更大，甚至造成绝收。

目前国内外所应用的玉米品种及纯度鉴定方法，如形态学方法、同工酶电泳法、醇溶蛋白等电聚焦法、HPLC法等等，或者周期太长，或者价格太贵，重复性差，操作技术要求高，均不能满足实际生产快速鉴定的要求。

玉米品种的不同其根本原因在于遗传基因有差异，而遗传基因的差异可反映在由遗传基因控制合成的蛋白组分上，因而可以根据蛋白质的差异来进行品种鉴定。

我们发明了快速单粒样品粉碎磨，开发了从制样到蛋白质组分提取、分离、染色、获得结果的一整套全新的玉米蛋白质PAGE方法，使分辨率及特征性大大提高，不同品种的蛋白谱带不同，可以由谱带清楚地看出玉米杂交种与其父母本之间的关系。

根据谱带的特征性以及相关性来进行玉米的品种鉴定，进而进行纯度测定。

本方法成功地解决了玉米品种快速、准确鉴定的问题，具有快速，准确，分辨能力高，特征性强，稳定性好，费用低，投资省，操作简便，易于推广等优点。

可应用于玉米杂交生产、流通领域鉴定种子真伪及纯度，保证良种质量，为预防假劣种子的危害提供了一有效的检测手段。

该方法在玉米生产与种质资源、遗传、育种学等理论研究方面都具有重要意义。

收稿日期:2005209228。

基金项目:南京现代农业科技园核心区建设(2004农资101)。

作者简介:刘春(1978～),男,在读硕士,从事作物品质改良和加工利用研究。

　通讯作者:麻浩,E 2mail:Lq 2ncsi@njau .edu .cn利用S DS 2P AGE 鉴定水稻品种(组合)的真实性和纯度刘春　王红玲　崔竹梅　郝小燕　高文瑞　麻浩(南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室　南京农业大学种子检测中心　南京　210095)摘要:利用本实验室完善后的S DS 2P AGE,分析了8个水稻品种(组合)的贮藏蛋白,结果表明,品种(组合)间贮藏蛋白带谱表现出明显的多态性;并在实际检验工作中,运用水稻品种(组合)贮藏蛋白S DS 2P AGE 带谱的多态性,进行了种子的真实性或纯度鉴定。

关键词　水稻　S DS 2P AGE 品种鉴定　真实性　纯度I dentifying Trueness and purity of the Varieties of Rice(O ryza sativa L .)by S DS 2P AGE MethodL i u Chun,W ang Hongli n g,Cu i Zhu m e i ,Hao X i a oyan,Gao W enru i ,M a Hao(1.Nati onal key lab .of cr op genetics and ger mp las m innovati on,Nanjing Agr .University,Nanjing,210095;2.Seed testing center of Nanjing Agr .university,Nanjing,210095)Abstract:The st orage p r oteins of 8rice varieties were analyzed by modified S DS 2P AGE method,the resulted indicated that the st orage p r otein bands appeared t o be poly mor phic a mong the varieties .I n p ractical testing,these poly mor phic p r otein bands had been used t o identify the trueness or purity of the rice cultivars by authors .Key words R ice S DS 2P AGE Varietal identificati on Trueness Purity种子是农业生产中最基本的生产资料,是农业再生产的关键因素。

水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用【摘要】水稻是重要的粮食作物之一，水稻清蛋白在种子中起着重要的营养作用。

本文介绍了水稻清蛋白电泳鉴定方法及其应用。

首先介绍了水稻清蛋白的特点，然后详细阐述了水稻清蛋白电泳鉴定方法，包括原理和步骤。

接着展望了该技术在农业生产和食品加工中的应用前景，指出其在改良水稻品质和增加产品附加值方面具有巨大潜力。

最后探讨了水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用的意义，以及未来发展的方向。

水稻清蛋白电泳鉴定方法的研究与应用有助于提高水稻品质，推动农业生产和食品加工的发展，对于解决粮食安全和提升生产效率具有重要意义。

【关键词】水稻清蛋白、电泳鉴定方法、应用前景、农业生产、食品加工、意义、发展方向1. 引言1.1 水稻清蛋白电泳鉴定方法及应用水稻清蛋白是水稻种子中的主要蛋白质成分，对水稻的生长发育和产量具有重要影响。

水稻清蛋白电泳鉴定方法是一种用来分析水稻种子中清蛋白的技术手段，可以帮助科研人员了解水稻品种的蛋白质组成及其差异。

通过对水稻清蛋白的电泳鉴定，可以揭示水稻种子中蛋白质的种类和含量，为选择优质水稻品种和提高水稻产量提供科学依据。

水稻清蛋白电泳鉴定方法主要包括蛋白样品的制备、电泳条件的优化和蛋白质条带的分析。

在制备水稻清蛋白样品时，需要先将水稻种子磨粉并提取蛋白质，然后进行电泳分离。

优化电泳条件是确保清晰分离水稻清蛋白的关键步骤，这包括电泳缓冲液的配制、电泳槽的选取等。

利用电泳图谱分析水稻清蛋白条带的数量、大小和浓度，从而对水稻蛋白质进行定量和定性研究。

水稻清蛋白电泳鉴定方法在农业生产和食品加工中具有广阔的应用前景。

在农业生产方面，该方法可以用于评价水稻品种的蛋白质质量，筛选出高蛋白水稻品种，提高水稻的产量和质量。

在食品加工方面，水稻清蛋白可以被应用于制作各种高蛋白食品，如蛋白棒、蛋白粉等，为人们提供更多选择。

水稻清蛋白电泳鉴定方法为水稻科研和生产提供了重要的技术支持，具有重要的应用意义。

种子蛋白电泳技术【摘要】：种子蛋白电泳是指通过特定的电泳方法对种子蛋白进行分离和鉴别的一种技术，最常用的是酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（A-PAGE）和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。

聚丙烯酰胺凝胶电泳作为一种高分辨率的分析鉴定技术，在蛋白质、多肽、核酸等生物大分子的分析中一直广泛使用，通过种子蛋白电泳获得的指纹图谱在测定良种质量（真伪、纯度）防止伪劣种子流入，保护我国名、优、特种质资源及育成的知识产权和育种家们的权益等方面，均具有重要意义。

【关键词】：种子蛋白；凝胶电泳1种子蛋白质的分类种子蛋白质分为两大类：贮藏蛋白质和“家政”蛋白质。

贮藏蛋白质是种子蛋白质的主要成份，它在种子形成发育时期大量合成和积累；在种子萌发时，它又很快被水解并为幼苗早期生长提供还原性的氮源。

“家政”蛋白质在种子中的含量较少，但对于维持种子的正常代谢活动却是必不可少的。

通常根据蛋白质的溶解性，将种子贮藏蛋白质分为4类：溶于水的清蛋白、溶于盐溶液的球蛋白、溶于醇溶液的醇溶蛋白和溶于酸或碱的谷蛋白。

2电泳技术简介电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。

许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。

电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术。

电泳按其分离的原理不同可分为：早期的自由界面电泳、应用最广泛的区带电泳、等速电泳、等电聚焦电泳等。

作为品种鉴定的一种快速有效的方法，在20世纪70年代初期，许多科学家和种子分析人员就开始通过能够鉴别生物个体之间差异的电泳图谱测定品种间的遗传差异。

最初采用同工酶电泳技术，80年代以后电泳方法不断改进才逐渐采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，特别是蛋白质电泳因其具有的良好稳定性和重复性显示出巨大的使用价值。

作物种子纯度鉴定技术研究摘要：本文对常规鉴定法、生化鉴定法及分子标记技术在纯度鉴定方面的研究概况作了介绍，并分别讨论了各种方法的优缺点及应用前景。

关键词：种子纯度，品种鉴定，鉴定方法农业生产实践证明，优良品种的增产潜力在很大程度上取决于种子纯度的高低。

因此农业增产增收离不开高纯度的优良种子。

但是目前在全国各地却存在着严重的以劣充优以假冒种子经营现象。

致使广大农民和国家蒙受巨大的经济损失，同时也严重阻碍了农业生产的发展。

导致这种现象的原因，一是我国种子经营管理法制不健全，二是缺乏准确可靠简便快速的种子纯度鉴定方法。

由此可见，研究可靠实用的种子纯度鉴定方法是摆在我们科技工作者面前的一项亟待解决的重大农业课题。

种子纯度鉴定方面，相当的工作者做了大量研究工作。

总的发展趋势是，种子纯度鉴定指标逐渐从宏观走向微观；鉴定过程中从费工费时转向快速简便；鉴定精度从粗放到精确。

本文将就种子纯度鉴定技术研究的发展概况及发展前景作一介绍，以期为我国的农业生产服务。

1常规鉴定法常规鉴定法主要包括田间种植鉴定法，籽粒形态鉴定法、物理化学鉴定法等。

1.1田间种植鉴定田间种植鉴定是目前普遍使用的检验方法[1]“。

种植鉴定是以田间种植期间形态特征和生物学特性为依据进行鉴定。

鉴定最佳时期是作物典型性状表现明显期，不同的作物鉴定的最佳时期不同。

张春庆[2]通过对39个玉米材料苗期性状鉴定认为，五叶一心期是玉米苗期去杂去劣和田间纯度鉴定的最佳时期，并进一步明确了叶色、叶缘色、叶鞘色及光泽是纯度鉴定所依据的典型性状。

但是，田间种植鉴定所需周期长，且许多形状的表现常受栽培措施及环境因子的影响[3]。

另外，鉴定者的观测经验亦制约鉴定的的准确性。

1.2籽粒形态鉴定籽粒形态方法简单、快速经济，弥补了田间种植鉴定周期长的不足。

作为一种常用鉴定方法，被广泛采用。

Nair报道，通过种皮表面特征可以鉴别不同的Erioeanlon种。

Vanangnmudi和Agrawal[4]，运用籽粒形态鉴定法分别对水稻和大豆品种进行了鉴定并划分了不同的类型。

006第六章品种真实性及品种纯度测定第六章品种真实性及品种纯度测定本章讲4节：§1、品种纯度检验的意义§2、种子纯度的形态测定§3、种子纯度的快速测定§4、种子纯度的电泳测定品种真实性(cultivar genuineness)和品种纯度(varietal purity)是构成种子质量的两个重要指标，是种子质量评价的重要依据。

这两个指标都与品种的遗传基础有关，因此都属于品种的遗传品质。

品种纯度检验可分为田间检验、室内检验和小区种植检验3部分。

本章主要介绍品种真实性及品种纯度的室内常用测定方法。

第一节品种纯度检验的意义一、品种纯度的含义品种纯度检验应包括两方面内容：种子的真实性和品种纯度。

在品种纯度检验之前，应先进行种子真实性鉴定，如果种子真实性有问题，品种纯度检验就毫无意义了。

1、种子的真实性：是指一批种子所属品种、种或属与文件描述(description)是否相符。

这是鉴定种子样品的真假问题。

2、品种纯度：是指品种个体与个体之间在特征特性方面典型一致的程度，用本品种的种子数(或株、穗数)占供检验本作物样品数的百分率表示。

在纯度检验时主要鉴别与本品种不同的异型株(off-type plant)。

异型株:是指1个或多个性状(特征、特性)与原品种的性状明显不同的植株。

品种纯度检验的对象:可以是种子、幼苗(seedling)或植株。

因此，品种纯度检验可分为:田间检验、室内检验、田间种植鉴定。

三者关系：以田间检验为主，田间检验与室内检验相结合，辅之田间种植鉴定。

二、品种纯度检验的意义（了解）1、是保证品种优良遗传特性得以充分发挥的前提研究表明，玉米种子纯度每降低1％，造成的减产幅度就会接近1％。

在杂交稻种子生产中，亲本纯度每降低1％，制种田纯度就会下降6～7％，粮食生产就会减产l0％左右。

2、是正确评定种子等级、贯彻优种优价政策的主要依据玉米大田生产一般每穴播2粒；优质种子可单粒播种，如先玉335、郑单958等。