补体C3测定免疫比浊法-检验科免疫室作业指导书

血清：0.50～0.90g／L（速率散射浊度法）；0.60～1.64g／L（单向免疫扩散法）临床意义
C3的增多与减少基本与总补体活性所述相似，但更为敏感。

在机体组织损伤和急性炎症时，常增高或为正常，如菌血症、肺炎、扁桃腺炎、结核、伤寒、麻疹、流脑等；肿瘤患者，尤以肝癌，血清C3含量升高更为显著，但胰腺癌晚期与隐性淋巴细胞白血病则呈降低趋势。

C3含量降低可见于以下原因：
①补体成分消耗增加；如血清病、链球菌感染后的肾小球肾炎、全身性SLE、冷球蛋白血症、自身免疫性溶血性贫血、类风湿性关节炎、器官移植后的排斥反应。

②补体大量丢失：多见于肾病综合征或大面积烧伤、外伤、手术等。

③补体合成不足：主要为肝病患者，如肝硬化、慢性活动性肝炎和急性肝炎的重症病例。

补体成分缺陷多具遗传特点，C3及C3调控因子（C3bINA）的缺损虽然少见，但是倘若发生，将可引起危及生命的感染。

补体C3测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：用于体外定量测定人血清中补体C3的浓度。

1.1包装规格a）试剂1：1×50ml，试剂2：1×10ml；b) 试剂1：2×50ml，试剂2：2×10ml；c) 试剂1：4×50ml，试剂2：4×10ml；d）试剂1：2×200ml，试剂2：2×40ml；e) 试剂1：12×20ml，试剂2：12×4ml；f) 试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；g）试剂1：2×45ml，试剂2：2×9ml。

1.2主要组成成分试剂1主要组分：Tris缓冲液(pH 6.0-9.0) 12mmol/L试剂2主要组分：抗人C3抗体适量2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。

2.1.2 试剂1应为无色透明溶液；试剂2应为无色或淡黄色透明溶液。

2.2 净含量应不低于试剂瓶标示装量。

2.3 试剂空白测定试剂空白吸光度，应≤0.3。

2.4 分析灵敏度测试200mg/dl的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.06。

2.5 准确性回收率，应在80%～120% 范围内。

2.6 重复性变异系数（CV）应不超过5％。

2.7 线性2.7.1在[20,220]mg/dl范围内，线性回归的确定系数应不低于0.990；2.7.2[25,220] mg/dl范围内，相对偏差≤15%；[20,25) mg/dl范围内，绝对偏差≤5 mg/dl。

2.8 批间差对同一份样品进行重复测定，相对偏差＜10％2.9 稳定性该产品在2℃～8℃条件下贮存有效期为18个月，取效期末的产品进行检测，应符合2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

补体C3测定免疫比浊法1.原理C3抗血清用缓冲液稀释后加到一份病人血清中，经过孵育后可以测定抗原抗体复合物产生的散射光，散射光结果和样品中的C3浓度成正比。

标本采集：标本采集前病人准备：受检者空腹标本种类：血清或血浆标本要求：取被检者静脉血2ml，室温放置不超过4小时，分离血清备用。

标本储存：待测标本在2-8℃存放不超过24小时，-20℃不超过三个月，-70℃以下长期保存。

避免反复冻融。

标本运输：室温运输标本拒收标准：细菌污染、溶血、脂血不能作测定。

试剂6.1试剂名称：补体C3检测试剂盒6.2试剂生产厂家：芬兰Orion诊断试剂公司6.3包装规格：60Test/kit6.4试剂盒组成：缓冲液30ml空白缓冲液30ml抗血清试剂0.5ml定标液0.5ml磁卡1张仪器设备：仪器名称：OrionTurboxRplus特定蛋白分析仪仪器厂家：芬兰Orion集团公司仪器型号：Turboxplus操作步骤：试剂配制：8.1.1抗血清应用液准备：吸取500ul抗血清加到反应缓冲液中，轻轻混匀，应用液2-8℃可保存12个星期。

8.1.2空白缓冲液：液体待用。

8.1.3定标液：用0.9%NaCL进行1：51稀释。

定标液根据IFCC提供的材料CRM470进行标定。

收集与处理样品：样品用0.9%Nacl进行1：51稀释。

为每一份样本测定准备一份样品空白，同样，为定标液另外准备一份定标液空白。

准备两份定标液测定（定标完成后，标准曲线数据存储在磁卡内。

下次检测如使用同批试剂，可以不必做定标而直接使用磁卡上的定标信息）。

如下准备各比色管：轻轻摇动混匀，室温18-25℃放置30±5分钟。

仪器测试步骤：参见TurboxR特定蛋白分析仪作业指导书。

结果计算：仪器直接计算并打印结果。

临床意义：见《全国临床检验操作规程》第二版366-368页。

C3既是参与古典途径又是参与路旁途径的补体蛋白，有炎症反应时，是一急性时相蛋白，其值会升高，低值见于肾小球性肾炎和免疫复合物疾病。

血清补体C3操作程序1.目的规范血清补体C3(C3)检测试验，确保检测结果准确性和重复性。

2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。

3.术语4．测定原理人血清中的补体C3与试剂中适量的特异性抗体发生反应,形成不溶性的免疫复合物,使反应液产生浊度,在抗体量一定的情况下,在600nm处浊度变化的高低与血清中补体C3的浓度成正比关系5. 标本采集与处理5.1病人准备：采血前不作剧烈运动。

5.2标本类型：无溶血的血清，凝固后尽快分离血清，标本严格避免溶血。

5.3标本稳定性：血清中C3活力在室温保存可稳定3天, 2～8℃可稳定7天，-20℃可稳定30天。

6. 试剂6.1试剂：本科使用伊利康试剂盒，即用式液体试剂。

试剂内主要成分如下：规格: R1 1×60ml R2 1×20ml6．2试剂准备试剂为液体双试剂，开瓶即可使用。

6．3试剂稳定性原装试剂在2～8℃避光保存，稳定期12个月。

试剂开瓶载机2～8℃稳定30天。

7.仪器参数设定AU2700参数设定：伊利康试剂仪器参数具体参加试剂厂家提供的相应仪器的参数说明书.8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。

8.1.2仪器经过大保养后。

8.1.3挪动仪器的安装地点。

8.1.4更换试剂批号。

8.1.5室内质控失控。

8．2 AU2700伊利康试剂系统的校准：8.2.1 准备：伊利康配套校准物.8.2.2 保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存至有效期。

8.2.3保存位置：2号冰箱。

8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的相应位置放定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。

9．室内质控及失控纠正：见临床生化室内质控程序9．1质控物来源：柏乐液体质控品(批号:45612/45613)。

补体C3测定试剂盒（免疫比浊法）产品技术要求万泰德瑞补体C3测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：用于体外定量测定人血清中补体C3的含量。

1.1包装规格1）试剂1：60mL×8 、试剂2：48mL×2；2）试剂1：50mL×3 、试剂2：10mL×3；3）试剂1：50mL×4 、试剂2：20mL×2；4）试剂1：50mL×1 、试剂2：10mL×1；5）试剂1：100mL×2 、试剂2：20mL×2；6）试剂1：65mL×3 、试剂2：39mL×1；7)试剂1：20mL×1 、试剂2：4mL×1；8)600 测试/盒（试剂1：50mL×1 、试剂2：9mL×1）；9) 800 测试/盒（试剂1：70mL×2 、试剂2：18mL×2）；10) 840 测试/盒（试剂1：50mL×2 、试剂2：10mL×2）；11) 900 测试/盒（试剂1：25mL×2 、试剂2：5mL×2）；12) 960 测试/盒（试剂1：50mL×4 、试剂2：10mL×4）；13)1260 测试/盒（试剂1：50mL×3、试剂2：9mL×3）；14)1640 测试/盒（试剂1：64mL×3 、试剂2：39mL×1）；15)1680 测试/盒（试剂1：99mL×2 、试剂2：20mL×2）。

1.2组成成分试剂1：Tris缓冲液 18.16mmol/L氯化钠 123.20mmol/L聚乙二醇适量试剂2 Tris缓冲液 18.16mmol/LC3抗体适量2.1 试剂装量应不低于瓶签标示装量。

2.2 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：稻草色或淡黄色液体。

血清补体C3测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2原理样品中补体C3与试剂中相应的抗体在溶液中相结合，立即形成抗原-抗体复合物，并形成一定浊度。

该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。

通过与同样处理的校准液比较，计算未知样品中的补体C3浓度。

3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置―150C――200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1本科使用浙江伊利康生物技术限公司的试剂盒. （浙食药监械（准）字2014第2400384号 YZB/浙 2314-40-2014）4.1.1试剂盒组成如下:R1三羟甲基氨基甲烷缓冲液100mmol/L，聚乙二醇40g/L R2抗体试剂：羊抗人补体C3抗体适量，叠氮钠0.95g/L 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含有稳定剂，可能存在一定的刺激作用和毒性，请勿直接接触皮肤及眼睛。

一旦接触，即用大量清水冲洗。

请勿吞服。

4.2 校准品：使用浙江伊利康生物技术限公司提供的C3校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。

补体C3测定试剂盒（免疫比浊法）
适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中补体C3的含量。

1.1规格
具体产品规格见下表:
1.2组成成分
试剂1：
缓冲液 10mmol/L
试剂2：
C3抗血清 100ml/L
2.1 外观
2.1.1 外包装完整无破损；
2.1.2 试剂1：无色透明液体；
2.1.3 试剂2：无色或淡黄色澄清或微浊液体。

2.2 净含量
净含量不低于标示值。

2.3 试剂空白吸光度
在主波长340nm、副波长700nm、37℃条件下，试剂空白吸光度不大于0.3。

2.4 线性
2.4.1 线性范围
[6.0，220.0]mg/dl，相关系数r＞0.990。

2.4.2 线性偏差
[60.0，220.0] mg/dl线性范围内，相对偏差不超过±15%；
[6.0，60.0)mg/dl线性范围内，绝对偏差不超过±9.0mg/dl。

2.5 分析灵敏度
检测浓度为175.0mg/dl的样本时，空白吸光度变化不小于0.15。

2.6 重复性
测试高、中、低浓度的新鲜人血清样本或质控品，重复测试10次，CV≤10%。

2.7 批间差
用三个不同批号的试剂测试同一样本，重复测试3次，相对极差R≤10%。

2.8 准确度
测定ERM-DA470K/IFCC标准物质，测定结果应不超过标示值的±15%。

2.9 稳定性
原包装试剂2～8℃避光储存，有效期12个月。

效期后1个月内产品，检测结果应符合2.3、2.4和2.8的要求。

超敏-C反应蛋白检测（免疫比浊法）一、用途本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中超敏-C反应蛋白（HS-CRP）的含量。

二、临床意义（一）概述C-反应蛋白（CRP）是急性时相反应蛋白，由5个完全相同的非糖基化的亚单位构成，分子量为115000-140000D。

在细胞因子IL-6家族诱导下，CRP在肝中合成迅速。

在急性时相反应高峰时肝合成蛋白质能力的20%是CRP的合成。

C-反应蛋白能激活补体，引发调理作用，增强细胞的吞噬功能，对血小板凝集和血块收缩有抑制作用。

（二）临床意义1. hs-CRP与心血管疾病（1）hs-CRP可作为ACS的预后指标重度不稳定心绞痛（UAP）患者入院时，若CRP浓度≥3mg/L，其心绞痛的复发、冠状动脉血管置换术、心肌梗死和心血管疾病致死等心血管事件发生率比CRP<3mg/L的患者高.CRP≥3mg/L的UAP患者出院时有较高的再住院及发生心肌梗死的危险。

出院时测定hs-CRP比入院时测定能更好地预测90天的不良后果.此外，hs-CRP有助于鉴别出心肌肌钙蛋白（cTn）阴性而死亡率增高的患者。

因此Morrow等认为，应当考虑联合使用cTn和hs-CRP来评估 ACS危险程度。

（2）hs-CRP是未来发生冠脉事件的预测指标前瞻性研究显示，hs-CRP是已知冠心病患者未来心血管病发病和死亡的预测指标。

高水平的hs-CRP患者未来发生卒中危险增加2倍，未来发生心肌梗死危险增加3倍，未来发生周围血管疾病的危险增加4倍。

（3）hs-CRP与其他生化指标对冠心病危险的预测价值hs-CRP对冠心病的预测价值明显高于的传统的冠心病危险因素如血脂、脂蛋白和载脂蛋白.如总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白AI和B（apoAI、apoB）。

诸多冠心病危险因素，如肥胖、高血压、糖尿病、冠心病家族史及各种生化指标，仅仅只有hs-CRP和TC/HDL-C有单独的预测价值 .另有研究发现，hs-CRP能鉴别那些血脂水平在合适范围的个体冠心病发生的危险性。

补体因子（C3）测定标准操作程序1.摘要补体因子（C3）检测用于体外定量测定血清中补体因子C3的含量，作辅助诊断用。

2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清C3的浓度。

3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定C3浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的补体因子(C3)试剂盒采用的是免疫透射浊法。

5.原理本品采用免疫透射比浊法定量测定人血清样本中C3含量。

样本中的C3与试剂中相应的抗体相遇，立即形成抗原抗体免疫复合物，在特定的缓冲环境中形成浊度，其浊度在合适的抗体浓度存在时与抗原含量成正比，与相同条件下操作的校准品比较，即可求出样品中C3的含量。

6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：R1缓冲液：Tris-Hcl缓冲液、Tween20、PEG、NaN3 R2抗体：Tris-Hcl缓冲液、抗羊人C3抗体、PEG、NaN3 校准品：人血清或血浆（HBsAg.抗HIV.抗HCV.TP抗体均为阴性）含NaN3,由a,b,c,d,e五支组成。

7. 3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。

试剂不可冰冻。

试剂开启后在2～8℃避光保存，R1、R2可稳定60天，校准品2～8℃可保存2天。

7. 4试剂准备：补体因子（C3）定量测定试剂盒为即开即用的液体试剂，无需特殊准备。

试验用试管的直径在12～16mm。

8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。