CA153定量测定-检验科免疫室作业指导书

文档来源为:从网络收集整理.word版本可编辑.欢迎下载支持. 【关键字】指导免疫室作业指导书定量免疫部分(上)第B版编制：张思思肖造林审核：肖造林批准：陈建国生效日期：2016年12月01日长沙九龙医院检验科目录表西门子全自动电化学发光定量免疫室内质控程序1 目的检测控制免疫室西门子全自动电化学发光仪测定工作的精密度，并检测其准确度的改变，提高常规检测工作的批间批内检测结果的一致性。

2 适用范围肿瘤标志物：AFP、CEA、CA125、CA153、CA199、TPSA、sfPSA、CA724、CA211、βHCG。

甲状腺功能指标：TT3、TT4、FT3、FT4、TSH。

性腺激素：FSH、LH、E2、PRL、Prog、Test等3 职责质量负责人负责质量控制方案制定，临床免疫实验室组长负责具体实施，质量监督员监控。

4 室内质控管理程序室内质量控制是由实验室技术人员采用一系列统计学的方法，连续评价本实验室测定工作的可靠程度，判断检验报告是否可发出的整个过程，室内质量控制是实验室质量控制保证体系中的基本要求之一。

4.1 开展室内质量控制的准备工作。

4.1.1 培训工作人员在开展质控前，每个实验室工作人员都应对质控的重要性、基础知识、一般方法有比较充分的了解，并在质控的实际过程中不断进行培训和提高，在实际中实验室应培养一些质控工作的技术骨干。

4.1.2 建立标准操作规程实施质控需要有一套完整的标准操作规程文件做保障，如仪器的使用、维护操作规程、试剂、质控品、校准品等操作规程等。

4.1.3 仪器的检定与校准仪器的检准：对西门子全自动电化学发光仪的校准按要求每12个月进行一次，校准由西门子公司批派专门技术人员完成，并出具仪器校正报告。

曲线的校准：当定标间隔到期、定标是无效、使用新的批号试剂、质控失效或仪器更换重要的部件或光路系统经过大型保养维修时，进行曲线的校准。

使用仪器配套的标准品，能溯源到参考方法或参考物质。

♦概述：属于糖蛋白类抗原，MW约400000D。

1984年Hilkens等人从人乳脂肪球膜上糖蛋白MAM-6制成小鼠单克隆抗体（II5-DB）；1984年，Kufu等从肝转移乳癌细胞膜制成单克隆抗体（DF-3）,由这些抗体识别出CA15-3o主要用于乳腺癌的监测和筛选，以及用于评价患者预后情况的指标。

♦临床应用：乳腺癌1）乳腺癌患者30-50%增高，有转移灶者增高可达80%；2）发现癌转移的敏感性比癌胚抗原和组织多肽抗原高，且早于临床发现转移；3）CA15-3是监测病人术后复发情况，特别是癌症转移患者的术后监测的重要指标, 血清CA15-3水平增高，提示乳腺癌的局部或全身复发，且增高早于核素检查和临床检查；4）用于对治疗的随查评估及早期发现转移灶，CA15-3的增高比临床诊断出转移灶要早几个月时间；5）可与CA125联合检查，用于卵巢癌复发的早期诊断；•检测结果由机器自动从标准曲线上查出。

此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。

试齐小M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6. 5mlo含防腐剂。

R1：生物素化的抗CA153单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。

含防腐剂。

R2： Ru（bpy）32+标记的抗CA抗3单克隆抗体（黑盖）,1≡, 10ml o含防腐剂。

储存和稳定性：存放在2-8度，切莫倒置。

未开封，可稳定至标明的保质期。

开封后，2-8度，12周；放在Elecsys2010, 8周；（室温20 — 25度；开盖时间累计不超过20小时）。

标本采集和准备：血清：按标准常规方法采集。

血浆：EDTA-K3或柠檬酸钠抗凝。

（不要使用肝素抗凝血浆或草酸盐/氟化物抗凝血浆。

确保标本不被肝素污染。

）标本在2 —8度可稳定24小时，-20度可稳定12个月。

只可冻融一次。

含沉淀的标本使用前需离心。

标本和质控品禁用叠氮钠防腐。

标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。

1、为规范免疫室的工作管理，提高服务质量、服务效率，更好的满足客户的需要。

使检验工作严谨、高效、科学、有序，工作人员必须严格遵守本制度。

2、工作人员应遵守医院、科室和各专业组的各项规章制度。

组内实行组长负责制,组长、质量监督员、仪器负责人按各自岗位职责分工完成工作、分工不分家。

3、遵守医院和科室的考勤制度，严格遵守上下班时间。

4、上班期间，工作人员的言行举止应遵守《医院服务礼仪言行规范》要求。

5、上班期间不准进食、干私活，例如：娱乐、聊天、打瞌睡、高声喧哗、高谈阔论、阅读与专业无关的报纸、杂志等，应保持工作场所的严肃性。

6、应严格遵守操作规程，准确及时地发出检验报告。

7、经常检查试剂的数量、质量，试剂用后应及时放回冰箱保存。

8、每天按规定进行室内质控，并做好失控分析。

9、检查结果在填发报告之前要进行一次审查。

如发现与诊断不符，结果异常偏高或偏低，或质控血清值出现异常等，应仔细检查操作。

10、操作时严格遵守《安全管理制度》的相关要求，注意生物安全，防止标本污染、传染及其它事故的发生。

11、所有标本及接触标本的物品均视为传染性物质，应按《医疗废物管理规定》进行处理。

12、遵守HIV实验室的各项制度。

12．1登记制度：对阳性样品应按规定登记在专用登记本上。

并保留原始比色记录。

12．2 通知制度：出现阳性样品时，及时通知：a)所有实验室将病人的标本作相关处理，做好个人防护。

b)主诊医生(口头报告)。

c)报告科主任。

d)通知感染科(送标本)。

12．3保密制度: 该知的人要知，不须知的人不告知，病人由市疾控中心通知。

编写：审核：批准：批准日期：年月日1、总则为使免疫室的工作能保质保量的顺利完成，在遵守《检验科内务管理制度》的前提下，有必要对免疫室的各岗位进行分工，以明确各岗位的工作职责和工作范围。

要求做到分工不分家，发挥团结协作的精神，共同完成日常工作。

2、范围：免疫室3、岗位职责各岗位的职责包括：标本分流、编号、预处理、检测、结果审核、报告；室内质量控制；检测后标本的整理；每班工作结束后工作场地的整理；仪器的维护保养；仪器的使用维护记录、交接班记录。

CA153定量测定-检验科免疫室作业指导书CA153定量测定1.原理抗原或抗体包被的微粒子，是由多孔高分子粒子制成，具有很好的亲水性，悬浮性极佳，微粒子可与玻璃纤维不可逆结合，从而提高了反应的特异性。

标本与微粒子以一定比例混合，标本中被检物质与微粒子上包被的抗体进行一定时间的反应，以反应终了后，反应液的一部分被移到玻璃纤维上，洗去未反应的被检物质与其它的不要成份，加入基质液，基质液被碱性磷酸所分解生成Methylumbelliferone。

当该物受荧光照射后就产生荧光，测定荧光强度的分化率，从而决定被测物质的浓度。

2.标本采集：2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹。

2.2标本种类：血清或血浆。

2.3标本要求：采集血清样本，取被检者静脉血，用无菌取血针抽取病人静脉血3ml，收集干燥试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用.采集血浆样本，用无菌取血针取被检者静脉血3ml，收集于含有EDTA作抗凝剂的试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。

3.标本储存：待测样本室温不超过8小时，4-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存，避免反复冻融。

4.标本运输：室温运输。

5.标本拒收标准：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。

6.试剂：6.1试剂名称：CA153诊断试剂盒。

6.2试剂生产厂家：美国雅培制药有限公司6.3包装规格：100T est/kit6.4试剂盒组成：CA153诊断试剂。

6.5试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存2-8℃条件，有效期12个月。

7.仪器设备：7.1仪器名称：AXSYM免疫自动分析仪7.2仪器厂家：美国雅培公司7.3仪器型号：AXSYMTm型7.4仪器校准：本仪器校准由厂家工程师负责校准。

8.操作步骤：8.1样本处理：取待测样本血清或血浆置于样本杯中(不能有纤维蛋白，不能有气泡)。

8.2仪器准备：检查纤维杯，反应杯数量满足实验需要，废物桶和废液桶是否连接好，仪器的光路是否正常，环境温度是否符合要求，打印机的连接。

免疫学检验室内质量控制操作程序1.目的：保证ELISA检测结果准确可靠,充分发挥其方法学的优点。

2.该SOP变动程序：本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。

3.方法3.1分析前质控3.1.1人员培训实验是人操作的，因此检验人员需经过培训，熟练掌握本专业如下几方面的技术知识：检验项目的基本原理（ELISA原理）；临床意义；熟悉检测技巧，了解易出差错的环节及难点；熟悉检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）；熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识。

某些特殊项目检测如抗HIV等需经有关部门组织的专门培训班，考试合格后持证上岗。

3.1.2.室内质控血清的制备：质控血清每年列出计划报质控组采购，一般采用CutOff值附近的阳性值；⑵质控血清-20℃冻存备用；⑶使用前室温复融。

3.1.3试剂盒选择卫生部规定乙肝试剂，丙肝试剂，艾滋病试剂，梅毒试剂及血型试剂必须使用经卫生部生物制品检定所检定合格，并贴有防伪标签的产品。

试剂盒评价：根据该试剂生物制品鉴定所的批批检定报告，了解其质量水平，按照质量计划选择灵敏度高的或特异性高的试剂；通过询问试剂包被物的组成，如原料来源（基因工程或合成多肽），片段的组合（按比例混合或化学合成），片段的长短等判断试剂的优劣；参考室间质评报告中对试剂的评价结果，了解不同试剂的质控成绩。

根据权威部门发布的试剂评价结果，了解市场上试剂的质量优劣。

3.1.4仪器质控为使仪器保持最佳工作状态应建立维护和校正仪器的标准操作程序（SOP），所要控制的仪器包括移液器（加样枪），水浴箱（温箱），洗板机和酶标仪。

⑴移液器：ELISA加样量小（5-100ｕl），其准确性直接影响实验结果，利用称重法检查：吸取刻度指示量的水，万分之一天平称重后计算吸量是否准确，一般应在±10%以内；水浴箱：经常检查水浴箱温度计所示的温度和水中（或温箱内）实测温度是否一致，允许有±1℃的误差；洗板机：每个厂家设置洗板后的残留液有各自的规定一般不超过2ul，人工扣板时，垫纸不湿，定期检查管孔是否堵塞；酶标仪：经常维护其光学部分，防止滤光片霉变，定期检测校正，使其保持良好的工作性能。

免疫室作业指导书编写者杨梦逑审核者批准者2015年10月01日目录1 目的对免疫室内部的检验程序进行质量控制，以保证检验结果的准确性。

2 适用范围临床免疫实验室3 职责检验科主任负责组织人员制定质量控制程序，免疫室组长负责组织人员具体实施。

4 室内质量控制管理程序室内质量控制是由实验室工作人员采用一系列统计学的方法，连续评价本实验室测定工作的可靠程度，判断检验结果是否可发出的整个过程。

室内质量控制是实验室质量控制保证体系中的基本要求之一。

4.1 开展室内质量控制前的准备工作4.1.1 人员实验室专业技术人员须具有相应的专业学历，并取得相应的专业技术职务任职资格。

资质、经历和能力必须能够满足相应岗位的要求。

检验人员要加强专业继续教育，适应专业发展需求。

4.1.2 项目及方法的选择和评价检验项目及方法的选择，应能满足临床工作需要，须符合在卫生行政部门核准登记的医学检验诊疗科目，并应按照卫生部规定的检验项目及方法开展工作。

目前要求选择的方法要符合卫生部《全国临床检验操作规程（第二版）》和/或经国家批准注册的厂家检验方法及程序。

进一步建立检验方法的选择和评审等程序，规范相关工作。

4.1.3 仪器设备仪器要按照仪器操作规程定期检查并经常维护和保养，使仪器设备处于最佳状态下运转。

对测定临床样本的各类仪器要按一定的要求进行校对，校准是要选择合适的标准品，如有可能，校准品应能溯源到参考方法或参考物质。

4.1.4 质控品的选择质控品是保证质控工作的重要物质基础。

根据物理性状可有冻干质控品，液体质控品，混合血清等；根据有无测定值可分为有定值质控品和非定值质控品。

实验室可根据情况选以上任何一种质控品作为室内质控品。

作为较理想的质控品至少应具备以下一些特征：①人血清基质，分布均匀；②无传染性；③添加剂和调制物数量少；④瓶间变异小；⑤冻干品其复溶后稳定，2—8℃时≧24小时，-20℃不少于20天，某些不稳定成分在复溶后前4小时的变异小于2%；⑥到实验室后应有1年以上的原载效期。

仪器校准：每批CA 15-3试剂盒必须用新鲜试剂和CA 15-3Cal 1,Cal 2定标一次。另外，以下情况需要再次定标：
ElecsysE170分析仪：
·一个月（同一批号试剂）
·7天（放置仪器上的同一试剂盒）
各种分析仪均适用的情况：根据要求进行定标：如质控结果超出范围时。
5.操作步骤（以E 170为例）
批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection，在Sequence No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目，点REPEAT，输入该批标本的最后一个标本号，点OK即可。
进样分析，将标本按在Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内,按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点START键，仪器自动开始推架检测标本。
1.分析原理
采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。
·第1步：20µl仪器自动使用通用稀释液预稀释1：10的标本、生物素化的抗CA 15-3特异性的单克隆抗体和钌（Ru）标记的抗
CA 15-3特异性的单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。
·第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。
·第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，通过2点定标曲线以及试剂条码提供的母定标曲线计算出结果。
2.标本要求
血清：按标准常规方法采集。
血浆：肝素钠、锂、铵和EDTA-K3抗凝。使用柠檬酸钠结果会比使用以上抗凝剂低24％。标本在2－8度可稳定5天，-20oC可
质控品：
Elecsys肿瘤标志物质控品1和2（PreciControlTumor Marker）货号11776452

糖类抗原153(CA153) 检测方法学性能验证评价报告验证内容：正确度、重复精密度、中间精密度、线性范围、临床可报告范围及参考区间的确认验证人员：一检测系统信息项目：CA153仪器名称: 雅培免疫分析仪仪器型号: I2000试剂及厂商：雅培公司检测方法：化学发光微粒子免疫检测法二厂商提供的相关参数三验证过程1 正确度1.1 目的：评价仪器测试结果与接受参考值之间的一致程度。

通过实验室检测数据的偏倚从而评价和验证实验室检测结果的准确性。

1.2 评价方法：参加卫生部临检中心的室间质评，本组参加室间质评的项目一律用回报结果作为评价标准，最近一次参加卫生部室间质评卫生部质控值。

1.3 结果判断方式：<1/2 CLIA’88正确度验证试验数据记录表2 精密度2.1 重复精密度2.1.1 目的：考察仪器检测方法的随机误差2.1.2 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度2.1.3 方法：选择新鲜混合血清标本（病人高值、低值）各20份，测量前先定标，再做质控，质控结果在控制范围内，连续重复测定20次，计算SD，CV，得到重复性精密度。

2.1.4 标本来源：高、低值标本均为混合血清。

2.1.5 结果判断方式：<1/4C LIA’ 88 6.25%重复性精密度验证试验数据记录表2.2 中间精密度：2.2.1 目的：考察目前实验室检测方法中间精密度。

2.2.2 原理：在检测系统处于优良的条件下，连续测定20天，取得20个结果，判断这20个独立结果间的一致程度。

2.2.3 方法：取一个月的室内质控值（高值、低值）计算CV、SD，得到批间精密度。

2.2.4 结果判断方式：<1/3 CLIA’ 88 8.33%中间精密度验证试验数据记录表3 线性范围（Linearity range, AMR）3.1 目的：在确定某项目检测上限的同时检测其上下限是否呈线性关系，从而保证该浓度范围检测结果的准确性。

本试剂仅供研究使用小鼠乳腺癌标志物-CA153elisa试剂盒使用说明书试剂盒组成：48孔配置/96孔配置说明书：1份封板膜：2片（48）/2片（96）密封袋：1个目的：【小鼠乳腺癌标志物-CA153elisa试剂盒说明书】本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中小乳腺癌标志物-CA153的含量。

服务承诺：供货期：款到发货。

工作时间内免费的技术咨询和指导。

请来电咨询为客户提供来样检测服务，最大限度实验结果的有效性(免费代测)。

试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。

2.批内与批见应分别小于9%和11%保存条件及有效期：1.试剂盒保存：2-8℃。

2．有效期：6个月检测范围：0.2IU/L - 6IU/L实验原理：【小鼠乳腺癌标志物-CA153elisa试剂盒说明书】本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠乳腺癌标志物-CA153水平。

用纯化的小鼠乳腺癌标志物-CA153抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入小乳腺癌标志物-CA153，再与HRP标记的小乳腺癌标志物-CA153抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的小乳腺癌标志物-CA153呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠乳腺癌标志物-CA153浓度。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

作业指导书文件名称：化验室检验手册文件编号：拟制：日期：审核：日期：批准：日期：版号：C分发号：有限公司目录1.概况（1）质量方针及目标--------------------------------------------1 （2）执行标准--------------------------------------------------1 （3）人员构成情况----------------------------------------------2 （4）主要监视和测量装置情况------------------------------------3 （5）主要检验项目及周期----------------------------------------62.职责和权限-----------------------------------------------------83.工作要求-------------------------------------------------------94.奖金分配制度---------------------------------------------------105.考核制度（1）考核表----------------------------------------------------11 （2）工作分工表------------------------------------------------14 （3）月考核表--------------------------------------------------16 （4）奖金分配表------------------------------------------------17 （5）记录------------------------------------------------------186.安全操作规程---------------------------------------------------207.设备仪器操作规程（！）光度计操作规程--------------------------------------------23 （2）分析天平操作规程------------------------------------------25 （3）PH计操作规程----------------------------------------------26 （4）冰箱操作规程-----------------------------------------------27 （5）干燥箱操作规程-------------------------------------------- 27 （6）水浴锅操作规程---------------------------------------------29 （7）色度仪操作规程---------------------------------------------30 （8）蒸馏水器操作规程-------------------------------------------30 （9）红外水分仪操作规程-----------------------------------------31 （10）显微镜操作规程--------------------------------------------31（11）x计操作规程--------------------------------------------32 （12）电子天平操作规程------------------------------------------33 （13）x计操作规程--------------------------------------------35（14）净化工作台操作规程----------------------------------------37 （15）x操作规程--------------------------------------------38-1（16）x操作规程--------------------------------------------38-1（17）空调扇操作规程--------------------------------------------38-2 （18）手提式蒸气消毒器操作规程----------------------------------38-3 （19）自动分析仪操作规程----------------------------------------38-7 （20）x作规程--------------------------------------------38-9（21）x操作规程----------------------------------------38-10（22）x器操作规程----------------------------------------38-12（23）x器操作规程----------------------------------------38-14（24）x器操作规程----------------------------------------38-158.设备仪器管理制度--------------------------------------------------399.溶液配制及标定（1）氢氧化钠溶液配制及标定---------------------------------------39 （2）盐酸溶液配制及标定-------------------------------------------41 （3）硫酸溶液配制及标定-------------------------------------------44 （4）硫代硫酸钠溶液配制及标定-------------------------------------46 （5）碘溶液配制及标定---------------------------------------------48 （6）x溶液配制及标定-------------------------------50（7）x溶液配制及标定-------------------------------------------52 （8）一般溶液配制-------------------------------------------------54 （9）配置溶液的一般要求-------------------------------------------5410.样品试验方法-----------------------------------------------------5511.附表：化验室记录清单一、概况：（一）公司质量方针、目标：1.方针：质量方针理解要点：2. 质量目标：（二）执行标准：（三）人员构成情况：人员构成表（四）主要监视和测量装置情况：主要监视和测量装置统计表主要监视和测量装置检定/校准、保养计划表主要检验项目及周期二、职责与权限（一）主任职责与权限a) 制订检验项目及周期b) 组织实施对原辅料、半成品、成品的监视和测量、分类、标识；c) 对产品的监视和测量进行控制、管理检验印章；d) 组织对检验人员进行培训和资格考核；e) 有权对化验人员工作进行调整、有奖金的分配权、有对本部门100元以内的处罚权，有三天以内的停工权（停工按旷工计）。

免疫室作业指导文件免疫室作业指导书编号：第一版编制：审核：批准：生效日期：xx市第一医院检验科门诊室工作守则 (4)门诊室消毒隔离措施 (5)门诊室实验室安全与防护 (6)门诊室内质控制度 (7)门诊室的医院感染管理 (8)门诊室工作流程 (9)门诊室仪器维护保养及质控措施 (10)门诊室复检规则 (11)实验室各种传染病职业暴露后应急预案 (12)标本采集及保存要求 (13)爱德康全自动酶免疫仪标准操作规程 (14)欧蒙全自动印迹仪操作规程 (16)LICA500标准操作规程 (17)荧光显微镜标准操作规程 (18)特定蛋白分析仪标准操作规程 (19)抗核抗体标准操作规程 (24)抗双链DNA抗体标准操作规程 (28)抗核抗体谱标准操作规程 (30)抗中性粒细胞胞浆抗体标准操作规程 (32)抗MPO,PR3，GBM抗体标准操作规程 (35)自身抗体标准操作规程 (38)乙肝病毒表面抗原标准操作规程 (42)乙肝病毒表面抗体标准操作规程 (46)乙肝病毒e抗原标准操作规程 (49)乙肝病毒e抗体标准操作规程 (52)乙肝病毒c抗体标准操作规程 (55)TP抗体标准操作规程 (57)HCV抗体标准操作规程 (60)HIV抗体标准操作规程 (64)ASO标准操作规 (68)RF标准操作规程 (73)CRP标准操作规程 (78)免疫球蛋白的标准操作规程 (83)补体C3的标准操作规程 (98)补体C4的标准操作规程 (103)过敏原标准操作规程 (108)甲型肝炎病毒IgM抗体 (112)丁型肝炎病毒抗体 (113)戊型肝炎病毒IgM抗体 (117)庚型肝炎病毒抗体 (120)梅毒螺旋体诊断试验（凝集法）TPPA标准操作规程 (123)甲苯胺红不加热血清反应实验TRUST标准操作规程 (128)抗环瓜氨酸肽抗体检测（胶体金法）标准操作规程 (129)梅毒螺旋体抗体标准操作规程（胶体金法） (131)人免疫缺陷病毒HIV1+2抗体标准操作规程（胶体金法）标准操作规程 (133)呼吸道病原体谱IgM抗体检测标准操作规程（间接免疫荧光法） (135)过敏原检测 (140)门诊室工作守则1. 入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。

FPSA定量测定1.原理抗原或抗体包被的微粒子，是由多孔高分子粒子制成，具有很好的亲水性，悬浮性极佳，微粒子可与玻璃纤维不可逆结合，从而提高了反应的特异性。

标本与微粒子以一定比例混合，标本中被检物质与微粒子上包被的抗体进行一定时间的反应，以反应终了后，反应液的一部分被移到玻璃纤维上，洗去未反应的被检物质与其它的不要成份，加入基质液，基质液被碱性磷酸所分解生成Methylumbelliferone。

当该物受荧光照射后就产生荧光，测定荧光强度的分化率，从而决定被测物质的浓度。

2.标本采集：2.1标本采集前病人准备：受检者应空腹。

2.2标本种类：血清或血浆。

2.3标本要求：采集血清样本，取被检者静脉血，用无菌取血针抽取病人静脉血3ml，收集干燥试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用.采集血浆样本，用无菌取血针取被检者静脉血3ml，收集于含有EDTA作抗凝剂的试管中，室温放置不超过8小时，2000转/分离心20分钟备用。

3.标本储存：待测样本室温不超过8小时，4-8℃不超过72小时，-20℃可长期保存，避免反复冻融。

4.标本运输：室温运输。

5.标本拒收标准：细菌污染，严重溶血或脂血标本不能作测定。

6.试剂：6.1试剂名称：F-PSA诊断试剂盒。

6.2试剂生产厂家：美国雅培制药有限公司6.3包装规格：100Test/kit6.4试剂盒组成：F-PSA诊断试剂.6.5试剂储存条件及有效期：试剂盒贮存2-8℃条件，有效期12个月.7.仪器设备：7.1仪器名称：AXSYM免疫自动分析仪7.2仪器厂家：美国雅培公司7.3仪器型号：AXSYMTm型7.4仪器校准：本仪器校准由厂家工程师负责校准。

8.操作步骤：8.1样本处理：取待测样本血清或血浆置于样本杯中(不能有纤维蛋白，不能有气泡)。

8.2仪器准备：检查纤维杯，反应杯数量满足实验需要，废物桶和废液桶是否连接好，仪器的光路是否正常，环境温度是否符合要求，打印机的连接。

检验科作业指导书
检验科 作业指导书
免疫组试剂管理程序
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1 目的
规范免疫试剂合格供应商的选择，免疫试剂的请购、保存、验收、报废和退货程序，使所购试剂 符合质量手册和程序文件的有关要求，及时、准确地为临床提供可靠的检验报告。
2 范围
罗氏 E170 电化学发光分析仪试剂、乙型肝炎病毒五项试剂，甲型肝炎病毒抗体、丙型肝炎病毒抗 体，HIV 抗体、梅毒抗体、结核抗体、优生优育抗体等免疫组其他试剂。
3 职责
3.1 免疫组组长负责本组试剂合格供应商的评价和试剂请购。 3.2 科主任负责试剂合格供应商的选择和请购单的审批。 3.3 药学部负责试剂的统一采购。 3.4 免疫组试剂管理员负责试剂的验收和保存。
4 程序
4.1 合格供应商的选择 4.1.1 选用合格的诊断试剂是保证检验质量的重要环节。因此，各专业组应对试剂选购中的关键环节实 施控制。 4.1.2 为了评价供应商的质量保证能力，事前要调查被评价单位的生产能力、售后服务和信誉，评价其 满足质量要求的能力，审查供应商的证件是否齐全，特别是有无 FDA 或 SFDA 批准文号。无批准文号的 检验试剂原则上不能使用。 4.1.3 走访被评定供应商的用户，了解被评定供应商的产品质量是否符合要求，售后服务是否满意，成 交价格是否合理，要货比三家，选择质量高、价格低、服务好的产品。 4.1.4 在调研的基础上，实验室应对供货单位进行比较分析，并编制相应名录。 4.1.5 将调研的全部资料上报给科主任，由科主任组织有关人员进行论证，将本科论证意见提交药剂科， 然后按医院有关规定选择合格的供应商。 4.1.6 试剂及消耗品管理员根据选择的合格供应商，编制《合格供应商名录》，交文档管理员保存，以 便请购试剂时参考，组长负责跟踪对试剂供应商的评价，如有变化及时反馈给科主任并修改。 4.2 试剂的请购 4.2.1 免疫组组长根据本室检验项目所用试剂消耗情况及到货情况每月填写《消耗品请购单》。如属特 殊情况允许电话急购。 4.2.2 填好的《消耗品请购单》经科主任审核签字后，上报药剂科，由药剂科同意采购。请购单底联由 试剂和消耗品管理员负责保存。 4.3 试剂的验收和保存

免疫室作业指导书文件编号：ABCD-3-MY-01~52第A版编制：审核：批准：生效日期：2006年8月8日ABCD人民医院检验科目录修订页血清乙型肝炎病毒表面抗原检测（ELISA）1.原理在微孔条上预包被被纯化乙肝表面抗体，配以酶标记抗体（HBsAb-HRP）及TMB等其它试剂，采用夹心法原理检测人血清（或血浆）中乙肝表面抗（HBsAg）。

2.标本采集2.1 采集前病人准备：受检者应空腹2.2 标本种类：血清或血浆2.3 标本要求：采集病人静脉血3ml（可用EDTA抗凝），室温放置不超过4小时，分离血清备用。

3.标本储存：2-8℃保存不应超过1周，-20℃不应超过3个月，-70℃长期保存，应避免反复冻融。

4.标本运输：密封，室温运输。

5.标本拒收标准：污染、标本量不足、严重溶血或脂血标本不宜作此项检测。

6.试剂6.1试剂名称：乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒6.2试剂生产厂家：英科新创（厦门）科技有限公司。

6.3包装规格：96Test/Kit6.4试剂盒组成：HBsAg微孔板，HBsAg酶标记抗体，HBsAg阳性对照血清，HBsAg阴性对照血清，浓缩洗涤液，底物A，底物B，终止液，封口膜，自封袋。

6.5试剂储存条件及有效期：2-8℃避光保存，有效期9个月。

7.仪器设备7.1仪器名称：自动酶标仪7.2仪器厂家：Rayto7.3仪器型号：RT-21008.操作步骤8.1平衡：将试剂盒各组分取出，平衡至室温（18-25℃），微孔板开封后，余者及时以自封袋封存。

8.2配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。

8.3编号：将微孔条固定于支架，按序编号。

8.4加样：分别用加样器在对照孔中加入阴、阳性对照血清各50μl于相应孔中。

8.5加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50μl，轻拍混匀。

8.6温育：置37℃温育60分钟，室温平衡5分钟。

8.7洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。

程序文件目录
39
全血C-反应蛋白定量
39
血、尿液肌酐（Cr）测定
6
实验室危险品管理规定
附件6
关键岗位人员任命书
40
尿乳糜定性检查
40
血清天门冬氨酸测定
7
实验室内务管理规定
附件7
检测能力表
41
前列腺液常规检查（玻片法）
41
动脉血气电极法测定
8
实验室安全管理规定
附件8
人员一览表
42
血浆硫酸鱼精蛋白副凝固时间
4.6
外部服务和供给
14
Xt2000i血红蛋白检测
14
血清甘油三酯酶试剂法测定
14
PCR实验室记录管理制度
4.7
咨询服务
15
全血血细胞沉降率测定
15
血清镁二甲苯胺蓝法测定
15
PCR应急处理程序
4.8
投诉的解决
16
Xt2000i红细胞比积的测定
16
血清无机磷磷钼酸法测定
16
PCR试剂的质检标准操作程序
4.12
持续改进
20
红细胞平均血红蛋白浓度测定
20
血清高密度脂蛋白胆固醇测定
20
PCR温度校准标准操作程序
4.13
质量和技术记录
21
尿液酸碱度测定（干法学法）
21
血清低密度脂蛋白胆固醇测定
21
核酸扩增荧光仪操作维护规程
4.14
内部审核
22
尿葡萄糖定性实验（干化学法）
22
血清肌酸激酶(CK) 法测定
22
12
试剂管理制度
附件12
仪器设备一览表

癌抗原CA153测定操作规程1检验申请单独检验项目申请：测定；组合项目申请：肿瘤标志物检查。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

也可采集血浆标本，用肝或EDTA抗凝。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。

2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2标本保存2.2.1接收标本后在60min内将标本离心分离出血浆, 避免溶血。

离心必须达到4000rpm×15min，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。

2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定2d，在-20℃最多可保存4周。

避免反复冻融。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7d。

2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。

3 方法原理测定采用双位点加心化学发光免疫分析法，其检测原理来如下：第一步：将标本与包被着CA153单克隆抗体的超顺磁性磁珠以及CA153单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，经过孵化，样本内CA153和包被在磁珠上的CA153单克隆抗体结合，同时CA153单克隆抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中CA153抗原上的另一位点结合。

反应完成后，磁场吸附磁珠，洗去未结合的物质。

第二步：将化学发光物添加到反应管内，发光底物（AMPPD）被碱性磷酸酶所分解，脱去一个磷酸基，生成一个不稳定的中间产物，该中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态返回基态时，产生化学发光，再通过光电倍增管对反应中所产生的光子数进行测量。

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免疫组岗位职责
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3.4.2 做好 HIV，梅毒的室内质控及登记工作。 3.4.3HIV 抗体检测阳性时，应按 HIV 阳性送检要求做好与临床的沟通工作，并应做好我科的各项书面 登记工作，材料准备齐全后方可通知司机送中山市疾病控制中心检测。 3.5 岗位 E：主要负责罗氏 E170 仪器检测项目的检测及 EB 病毒抗体检测。 3.5.1 负责肿瘤、内分泌等项目的定量检测及报告，EB 滴度阳性的耳鼻喉科病人应同时报 OD 值。 3.5.2 AFP、CEA、CA199、HCG、甲功五项每天做室内质控，性激素六项、CA125、CA153 每周至少做 2 次质控，PCT、T-MPO、anti-TG 每两周至少做一次质控。如遇定标则应在通过定标后同时做室内质控。 如遇失控，对于失控项目应认真填写失控报告，应立即向免疫室组长反映，以便及时排除并做好书面 记录。 3.5.3 当仪器故障时，应设法及时排除故障，如自已无法解决，应电话通知工程师来我科维修，并作好 详细书面记录。包括故障原因，排除方法，所更换的配件等，并向免疫室组长或科主任汇报。 3.5.4 按期完成省临检中心的室间质评。对于不理想的项目，应注意总结，并保存资料且作好书面总结 记录。 3.5.5 每日工作结束后必须在维修保养记录本和仪器运行记录本上书面记录仪器运行状况。 3.5.6 如遇仪器重大故障,当天不能出报告时,应及时免疫室组长至科主任汇报,以便通知临床，门诊病 人应向门诊服务台出具安民告示,耐心做好解释工作。
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免疫组岗位职责
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